儿童急性髓系白血病干细胞的测定及其临床意义

本研究检测儿童急性白血病患儿急性髓系白血病干细胞（AMLLSC）的水平,分析AML患儿缓解后白血病干细胞（leukemia stem cells,LSC）含量与微小残留病（MRD）水平之间的关联。采用流式细胞术（FCM）和直接免疫荧光法标记细胞,分别测定初诊AML、ALL和缓解AML、ALL及对照组患儿骨髓单个核细胞（mononuclear cell,MNC）中AMLLSC（CD34^＋ CD38-CD123^＋）表型阳性细胞的含量及AML患儿缓解后MRD水平。结果表明：初诊AML、ALL及对照组患儿骨髓MNC中AML LSC或AML LSC相同表型细胞的中位含量分别为166（14-1459）细肜10万细胞、7（0—560）细肜10万细胞和0（0—6）细胞10万细胞,未缓解AML患儿骨髓MNC中AML LSC的中住含量为36（5—224）细胞／10万细胞,缓解AML、ALL患儿骨髓MNC中AML LSC或AML LSC相同表型细胞的中位含量分别为6（0—41）细肜10万细胞和10（0～105）细胞／10万细胞,缓解期AML患儿AML LSC含量与同期MRD水平呈负相关（r=-0．466,P=0．006）。结论：初诊AML患儿骨髓细胞中存在AMLLSC,缓解后AMLLSC含量明显减少,维持一个较低水平;在初诊ALL患儿骨髓细胞中也存在AMLLSC（CD34^＋ CD38-CD123^＋）相同表型细胞,缓解后AML LSC相同表型细胞含量没有明显变化;AML患儿缓解后AML LSC含量与MRD水平呈负相关。     

微小RNA-128b与-181a和-223在急性白血病患者中的表达

背景：微小RNA是一类内源性非编码RNA。新近研究认为微小RNA可用作肿瘤标记物,对肿瘤进行分类。目的：分析微小RNA-181a、微小RNA-128b和微小RNA-223在急性白血病患者中的表达差异。方法：提取初治急性白血病患者及对照受试者骨髓单个核细胞总RNA,经微小RNA特异性引物反转录后,采用实时定量PCR分析各微小RNA的表达。结果与结论：与对照受试者相比,无论是急性非淋巴细胞白血病还是急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的微小RNA-128b,微小RNA-181a和微小RNA-223表达均降低;统计学分析显示,急性非淋巴细胞白血病和急性白血病患者微小RNA-128b和微小RNA-181a表达与对照受试者比较差异有显著性意义（P〈0.05）,但急性淋巴细胞白血病患者与对照受试者比较差异无显著性意义（P〉0.05）;微小RNA-128b,-181a和-223的表达在急性非淋巴细胞白血病与急性淋巴细胞白血病患者之间差异无显著性意义（P〉0.05）。结果显示微小RNA-128b,-181a和-223有可能是急性白血病诊断与分型的生物标记物。     

异常免疫表型模式在急性髓系白血病微小残留检测中的应用

目的用多参数流式细胞术区分急性髓性白血病细胞与正常骨髓原始细胞免疫表型,建立急性髓系白血病细胞异常免疫表型模式和流式细胞术检测急性白血病微小残留病的方法。方法选择正常骨髓标本和急性髓性白血病患者骨髓标本,用流式细胞术分析髓系原始细胞免疫表型特征。并将标记抗原用于分析初发白血病细胞免疫表型,以寻找急性髓系白血病细胞异常免疫表型模式和确定用于微小残留病检测的抗体组合,更好地提示患者复发情况。并将流式细胞术结果、骨髓细胞形态学结果和PCR融合基因检测结果进行比较。结果分析20例非恶性血液系统恶性疾病患者的骨髓标本中髓系原始细胞的免疫表型,CD117阳性髓系原始细胞占2.51%±0.84%,CD34阳性髓系原始细胞占1.21%±0.83%,均有特定免疫表型特征。检测346例非早幼粒细胞白血病的急性髓性白血病患者免疫表型特征,异常免疫表型有314例,占90.80%,其中跨系表达抗原主要包括CD7(31.21%)、CD56(23.70%)、CD19(13.87%),跨阶段共表达的抗原包括CD34/CD64(2.89%)、CD14/CD117(1.16%),抗原表达强度变化或抗原缺失主要包括原始粒细胞不表达HLA-DR(4.62%)、CD13(7.51%)或CD33(12.14%),以及单核细胞不表达CD14(5.20%)。早幼粒细胞白血病患者31例,有异常免疫表型的仅占16.7%,低于非早幼粒细胞白血病的急性髓性白血病。根据白血病异常免疫表型模式,与PCR结果符合度高,能很好地提示白血病进展。结论急性髓性白血病细胞具有明显不同于正常来源原始细胞的异常免疫表型特征,适合采用流式细胞术进行微小残留病检测,并能反映体内白血病细胞负荷和病情变化。     

微小RNA-128b与-181a和-223在急性白血病患者中的表达☆

背景:微小RNA是一类内源性非编码RNA.新近研究认为微小RNA可用作肿瘤标记物,对肿瘤进行分类.目的:分析微小RNA-181a、微小RNA-128b和微小RNA-223在急性白血病患者中的表达差异. 方法:提取初治急性白血病患者及对照受试者骨髓单个核细胞总RNA,经微小RNA特异性引物反转录后,采用实时定量PCR分析各微小RNA的表达. 结果与结论:与对照受试者相比,无论是急性非淋巴细胞白血病还是急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的微小RNA-128b,微小 RNA-181a和微小RNA-223表达均降低;统计学分析显示,急性非淋巴细胞白血病和急性白血病患者微小RNA-128b和微小RNA-181a表达与对照受试者比较差异有显著性意义(P<0.05),但急性淋巴细胞白血病患者与对照受试者比较差异无显著性意义(P>0.05);微小RNA-128b,-181a和-223的表达在急性非淋巴细胞白血病与急性淋巴细胞白血病患者之间差异无显著性意义(P>0.05).结果显示微小RNA-128b,-181a和-223有可能是急性白血病诊断与分型的生物标记物.     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。方法：50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2～4mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。结果与结论：50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组（P〈0.05）,急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病（P〈0.05）。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

背景：大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。目的：观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达。方法：急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达。结果与结论：急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群（P〈0.05）;急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群（P〈0.05）,完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。     

急性髓细胞白血病患者DC-CIK治疗后T细胞亚群动态变化的临床观察

目的观察急性髓细胞白血病患者经自体外周血移植联合自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK输注治疗后体内的T细胞亚群动态变化。方法选择50名初发急性髓细胞白血病患者,抽取其未缓解的骨髓制备自身白血病细胞冻融抗原,在自体外周血干细胞采集时分离部分单个核细胞培养DC-CIK,以自身白血病冻融抗原共培养激活扩增DC-CIK。患者自体外周血造血干细胞移植30～60 d输注自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK,每例每疗程回输细胞总数>7×109,同时给予IL-2(20 WU皮下注射,1次/d,连续10 d)皮下注射。动态观察患者接受DC-CIK细胞输注治疗后不同时间点体内T细胞亚群动态变化,并与既往接受自体外周血移植但未输注DC-CIK细胞治疗的52名急性髓细胞白血病患者进行比较分析。结果 50名患者DC-CIK输注后患者体内CD8+、CD16+、CD56+淋巴细胞均显著高于输注治疗前水平(P<0.01),治疗组同一随访时间段CD3+、CD4+、CD8+、CD16+、CD56+淋巴细胞均显著高于未采用DC-CIK治疗组(P<0.01)。结论对急性髓细胞白血病患者采用自体外周血移植联合自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK输注治疗,能显著提高患者肿瘤杀伤性T细胞水平,有助于清除移植后微小残留病,改善患者无病生存率(PFS)。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景:据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见.目的:观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义.方法:50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病.同期选择27例非恶性血液病患者作为对照.取肝素抗凝的骨髓液2~4 mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达.结果与结论:50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P < 0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P < 0.05).动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达.结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达.     

多发性骨髓瘤急性白血病变一例报告

多发性骨髓瘤(Mm)终末期病症主要表现为：浆细胞系占整个骨髓和急性变成各型白血病。急性变为急性单核细胞性白血病、急性粒细胞性白血病较多见，急性变为淋巴细胞白血病、浆细胞性白血病、干细胞白血病者罕见。我们发现一例Mm急性变为急性淋巴细胞性白血病现报告如下。     

G-CSF动员供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的临床研究

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后,白血病复发的有效性及安全性。方法对2009年7月至2011年2月该科20例异基因造血干细胞移植后复发的白血病患者,予以输注G-CSF动员后供者外周血单个核细胞。其中5例急性淋巴细胞白血病-CR2,8例急性髓系白血病-CR2,2例急性髓系白血病-CR3,3例急性混合细胞白血病,2例加速期慢性髓系白血病。在异基因造血干细胞移植后,半年内,20例患者均复发,予G-CSF动员后,供者外周血单个核细胞输注,每次输注细胞量按1×105/kg、2×105/kg、4×105/kg逐级增加,每次输注间隔4周。结果 12例患者再次完全缓解,8例患者未缓解。输注后,3例患者发生了Ⅰ~Ⅱ度急性移植物抗宿主病,12例患者发生了慢性移植物抗宿主病,5例未发生并发症,未观察到输注相关的全血细胞减少。结论 G-CSF动员供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后,白血病复发有较好的疗效,不良反应小,值得临床进一步推广。     

亲缘异基因造血干细胞移植联合甲磺酸伊马替尼治疗Ph阳性白血病

背景：造血干细胞移植是可以治愈Ph＋白血病有效方法,甲磺酸伊马替尼是一种高度特异的酪氨酸激酶抑制剂,能抑制BCR/ABL酪氨酸激酶活性,在Ph＋白血病中的应用越来越多。目的：探讨甲磺酸伊马替尼联合亲缘异基因造血干细胞移植治疗Ph＋白血病的临床疗效。方法：回顾性分析2011年1月至2012年10月采用亲缘异基因造血干细胞移植联合甲磺酸伊马替尼治疗12例Ph＋白血病的疗效并文献复习。结果与结论：12例患者移植后均获得造血重建,移植后中性粒细胞和血小板植活的中位时间分别为15 d和18 d;发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病7例,Ⅲ度急性移植物抗宿主病1例,局限型慢性移植物抗宿主病7例,广泛型慢性移植物抗宿主病3例;无白血病存活率为67%,移植相关死亡率为25%。行HLA匹配亲缘造血干细胞移植者的总体存活率为75.0%。平均无病生存8.5个月（7-17个月）,BCR/ABL转阴时间2-5个月。亲缘异基因造血干细胞移植前、后联合甲磺酸伊马替尼治疗Ph＋白血病,具有降低移植前白血病细胞负荷,抑制残留白血病细胞增殖,促进供者完全嵌合状态的转变,是一种安全有效的治疗方法。     

亲缘外周造血干细胞移植治疗急性髓系白血病64例疗效及预后分析

本研究分析亲缘外周造血干细胞移植 （related peripheral blood hematopoietic stem cell transplantation）治疗急性髓系白血病（AML）的疗效及影响疗效的相关因素。对2008年4月-2011年12月在本院进行亲缘PBHSCT的AML患者64例进行回顾性分析,计算其总生存率（OS）、无白血病生存率（1eukemia—freesurvival,LFS）和累积复发率（relapserate,RR）,并对影响疗效的因素进行统计学分析。结果表明,3年OS及LFS分别为61．9％％及52％,累积复发率为39．1％。急性移植物抗宿主病（aGVHD）的总发生率为37．5％,其中Ⅱ-Ⅳ度aGVHD发生率为29．7％。单因素分析显示,移植前疾病疗效（P=0．001）、移植供体类型（P=0．002）、初诊时白细胞数量（P=0．018）与OS相关。重度aGVHD（Ⅱ度以上aGVHD）对于OS有一定影响（P=0．070）。多因素分析显示,移植前疗效、移植供体类型、重度aGVHD是影响亲缘PBHSCT治疗AML疗效的独立预后因素。结论：亲缘PBHSCT是治疗AML的有效方法,复发是移植治疗后失败的主要原因,移植前疾病的治疗疗效、移植供体类型、重度aGVHD是独立预后因素。     

髓系抗原表达对急性淋巴细胞白血病患者异基因造血干细胞移植后造血重建及疾病预后的影响

本研究旨在观察髓系抗原表达对急性淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后造血重建及疾病预后的影响.回顾性分析西安交通大学医学院第一附属医院血液科2008年1月至2014年4月期间20例行allo-HSCT的急性淋巴细胞白血病患者的临床资料,其中5例伴有髓系抗原表达（My＋ ALL）,15例不伴髓系抗原表达（My-ALL）.观察My＋ ALL与My-ALL患者allo-HSCT后造血重建及疾病预后的差异.结果表明,My＋ALL患者allo-HSCT后血小板植入不良较My-ALL患者多见.My＋ ALL患者中3例出现皮肤慢性移植物抗宿主病（cGVHD）（其中2例局限型,1例皮肤广泛型）;My-ALL患者中3例出现急性移植物抗宿主病（aGVHD）,其中2例为Ⅰ度,1例为Ⅱ度;5例出现cGVHD,其中3例局限型,2例广泛型.两组患者1年及2年总生存率分别为80％和85.7％,53％和69.8％,1年及2年疾病无进展生存率分别为53.3％和54.7％,26％和27.4％,两组间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论髓系抗原表达可能对ALL患者异基因造血干细胞移植后血小板植入有不良影响.My＋ ALL与My-ALL患者移植后1年及2年总生存率及无病生存率间差异无统计学意义.     

自体外周造血干细胞移植治疗13例AML1/ETO(+)急性髓系白血病的疗效观察

本研究分析自体外周造血干细胞移植治疗AML1／ETO（＋）急性髓系白血病（AML）的疗效及定量监测融合基因AML1／ETO在治疗中的应用。对2007年8月-2012年11月在本院进行自体移植的AML1／ETO（＋）AML患者13例进行回顾性分析,中位随访26（7．8—75．8）个月,计算总生存率（OS）、无白血病生存率（1eukemia—freesurvival,LFS）和累积复发率（relapserate,RR）,并对生存情况进行单因素分析。结果表明,3年的总体存活率为（70．5±15．3）％,3年的无白血病存活率为（51．3±16．7）％,3年的累积复发率为48．7％。在5例复发患者中对4例进行了A舭J／ETO定量监测,发现形态学复发前AML1／ETO表达量均明显升高。在单因素分析中,患者年龄、性别、初诊时白细胞数量、自确诊白血病到进行移植的时间间隔、回输MNC数量等对总体存活率的影响均差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论：自体造血干细胞移植对AML1／ETO（＋）AML患者具有良好疗效,定期定量监测AML1／ETO表达量可预知早期复发,中高危患者复发后采用异基因移植可再次获得长期生存机会。     

CAG方案治疗成人急性髓系白血病的临床研究

目的观察CAG(阿糖胞苷+阿克拉霉素+粒细胞集落刺激因子)方案诱导治疗急性髓系白血病(AML)的临床疗效。方法以CAG方案作为诱导缓解方案治疗18例AML,18例AML中包括初治12例(其中>70岁7例,<70岁5例),难治4例,复发2例。结果 18例AML患者中8例(44.4%)获完全缓解,3例(16.6%)部分缓解,总有效率61.0%,中位生存期9个月。结论 CAG方案对初发老年AML和原发耐药AML有较高缓解率,并可为部分患者赢得实施异基因造血干细胞移植机会。     

急性白血病患儿不同化疗时期的心电图检测结果及价值

目的分析急性白血病患儿不同化疗时期的心电图检测结果及价值。方法选择在本院接受治疗的49例急性白血病患儿,其中24例急性髓系白血病患儿,25例急性淋巴细胞性白血病患儿。依据疾病具体类型为患儿选择化疗治疗方案,患儿接受化疗治疗的过程中开展心电图检测。分析不同疾病类型白血病患儿不同化疗时期的心电图检测结果。结果急性白血病患儿化疗前的心电图异常表现以窦性心动过速为主,诱导缓解期以及强化巩固期心电图异常表现以窦性心律不齐、窦性心动过速为主。急性淋巴细胞性白血病患儿和急性髓系白血病患儿的强化巩固期心电图异常率均明显高于化疗前(P<0.05)。结论急性白血病患儿接受化疗治疗极易发生心电图异常情况,在治疗的过程中开展心电图检测工作,在预防心肌受损情况方面具有重要价值。     

HLA相合同胞异基因外周血造血干细胞移植治疗急性白血病

背景：HLA相合同胞间异基因外周血造血干细胞移植是治疗急性白血病的一种有效方法。目的：评价HLA相合异基因外周血造血干细胞移植治疗急性白血病的临床疗效及并发症。方法：25例急性白血病患者接受HLA相合同胞的异基因外周血造血干细胞移植,其中急性髓系白血病20例,急性淋巴细胞白血病5例。预处理方案为BU＋CY方案或CY＋TBI方案,移植物抗宿主病预防采用环孢素A＋吗替麦考酚酯＋短程甲氨蝶呤。结果：最短随访2个月,最长随访80个月。患者均获造血重建,中性粒细胞≥0.5×109L-1的时间为10～18d,血小板≥20×109L-1的时间为10～37d。主要并发症：感染败血症12例,巨细胞病毒感染9例,带状疱疹病毒感染3例,发生急性移植物抗宿主病10例,慢性移植物抗宿主病11例,出血性膀胱炎4例。至随访结束,17例无病生存,8例死亡。提示HLA相合同胞异基因外周血造血干细胞移植是治疗急性白血病安全有效的方法。     

c-MPL在急性髓系白血病患者白血病干细胞中的表达

本研究通过检测c-MPL在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达,探讨c-MPL表达与CD34、CD38的相关性,以确定c-MPL在白血病干细胞的表达。通过流式细胞术检测29例初诊AML患者的c-MPL和CD34、CD38阳性细胞比例;比较患者c-MPL表达水平与正常对照的差别及与临床指标的关系;分析患者的c-MPL表达水平与CD34、CD38各部分细胞分群的关系及它们之间的相关性。结果表明:AML患者骨髓细胞中c-MPL表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);c-MPL的表达与患者的年龄、性别、白细胞计数、AML1-ETO融合基因、化疗后缓解情况无关;c-MPL在M2和M5分型中的表达显著高于正常对照组(P<0.05)。CD34阳性AML患者组的c-MPL表达水平显著高于CD34阴性AML患者组(P<0.01)。AML患者c-MPL在CD34+细胞中的表达显著高于CD34-细胞(P<0.001);AML患者中c-MPL在CD34+CD38+和CD34+CD38-两群细胞中的表达无显著性差异(P>0.05);c-MPL和CD34的表达呈正相关(r=0.380,P=0.042)。结论:c-MPL在AML患者中高表达,且与CD34的表达水平具有一定的正相关性,c-MPL表达于白血病干细胞。     

改良CAG方案治疗成人复发性急性髓系白血病的临床研究

本研究观察改良的阿糖胞苷、阿柔比星及粒细胞集落刺激因子联合化疗（CAG）方案治疗复发性急性髓系白血病（AML）的临床疗效及其不良反应。应用改良的CAG方案治疗复发性急性髓系白血病17例。本组病例中阿柔比星静脉应用时间为7天,完成1疗程后评估疗效及副作用,不缓解者退出观察,有效者则继续接受1个疗程化疗。结果表明：17例AML患者中8例获得完全缓解（CR）,5例获得部分缓解（PR）,CR率为47．06％,PR率为29．41％,总有效率为76．47％。大部分患者有骨髓抑制等可耐受的不良反应。结论：CAG方案治疗复发难治性AML的疗效较好,为部分患者行异基因骨髓移植赢得了机会,但其长期维持治疗的疗效有待进一步研究。