益肺活血颗粒对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞内低氧诱导因子-1α和活性氧的影响

目的观察益肺活血颗粒对低氧培养大鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonaryarterysmoothmusclecells,PASMCs）内低氧诱导因子-1αhypoxiainduciblefactor一1alpha,HIF-1α和活性氧（Feacriveoxygenspecies,ROS）的影响。方法采用血清药理学方法制备不同浓度的益肺活血颗粒（yifeihuoxuegranule,YFHXG）含药血清,采用组织块贴壁法原代培养大鼠PASMCs,取对数生长期PASMCs随机分为常氧组、缺氧组、缺氧＋YFHXG组（16．5、3．3、0．66g／kg）。用噻唑蓝比色法测定各组PASMCs的增殖效应,免疫组化法测定细胞内HIF-1α蛋白的表达,激光共聚焦显微镜测定细胞内ROS的含量。结果与常氧组相比,缺氧组PASMCs增殖明显活跃,HIF-1α蛋白表达及ROS含量增加;与缺氧组相比,缺氧＋YFHXG高、中浓度组大鼠PASMCs的生长明显受抑制,而且HIF-1α蛋白表达及ROS含量降低。结论缺氧可以直接刺激PASMCs的增殖。YFHXG可以显著抑制低氧对大鼠PASMCs的促增殖作用,其机制可能是通过降低细胞内HIF-1α蛋白表达及ROS的水平来实现的。     

益肺活血复方对模拟潜艇环境下家兔NO和ET-1的影响

目的模拟潜艇环境,观察益肺活血复方对家兔血清和肺组织匀浆中一氧化氮（NO）及血管内皮素-1（ET-1）含量的影响。方法选用HOPE-MED 8050系列动式染毒系统模拟潜艇环境。家兔随机分为空白组、模型组、益肺活血复方低、高剂量（0．2、0．7g·kg-1·d-1）组、地塞米松（0．2ml·kg-1·d-1）组,每组15只,按照潜艇气体环境造模染毒,每天染毒4h,同时每天肌肉注射给药1次,连续14d后取家兔静脉血清及肺组织匀浆观察NO及ET一1水平变化。结果模型组较空白组血清及肺组织匀浆中NO含量显著升高（P〈0．05）,ET-1水平显著降低（P〈0．05）。益肺活血复方高剂量组及地塞米松组与模型组相比较,血清、肺组织匀浆中NO含量均提高,ET-1水平降低,且均有统计学意义（P〈0．05）。益肺活血复方高剂量较地塞米松提高NO含量效果更加明显（P〈0．05）。益肺活血复方高剂量效果明显优于低剂量（P〈0．05）。结论潜艇环境中部分有害气体长期作用会降低家兔肺组织及血液NO的含量,同时提高ET一1水平,益肺活血复方可以改善这两项指标,对家兔肺组织及血管起到一定的保护作用。     

益肺活血颗粒对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞内低氧诱导因子 1α和活性氧的影响

目的观察益肺活血颗粒对低氧培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth musclecells,PASMCs)内低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的影响。方法采用血清药理学方法制备不同浓度的益肺活血颗粒(yifeihuoxue granule,YFHXG)含药血清,采用组织块贴壁法原代培养大鼠PASMCs,取对数生长期PASMCs随机分为常氧组、缺氧组、缺氧+YFHXG组(16.5、3.3、0.66 g/kg)。用噻唑蓝比色法测定各组PASMCs的增殖效应,免疫组化法测定细胞内HIF-1α蛋白的表达,激光共聚焦显微镜测定细胞内ROS的含量。结果与常氧组相比,缺氧组PASMCs增殖明显活跃,HIF-1α蛋白表达及ROS含量增加;与缺氧组相比,缺氧+YFHXG高、中浓度组大鼠PASMCs的生长明显受抑制,而且HIF-1α蛋白表达及ROS含量降低。结论缺氧可以直接刺激PASMCs的增殖。YFHXG可以显著抑制低氧对大鼠PASMCs的促增殖作用,其机制可能是通过降低细胞内HIF-1α蛋白表达及ROS的水平来实现的。     

糖尿病大鼠视网膜组织中缺氧诱导因子-1α、内皮素-1的表达研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与内皮素-1（ET-1）在糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变（DR）发生、发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组（CON）和糖尿病（DM）组。其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后分别于2、4、8、12周处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化和放免法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α、ET-1的表达变化。结果免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜不表达HIF-1α,DM组2周时有少量表达,4周时阳性细胞数量增多,8周达到高峰,12周时表达已降低,各组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。经放免法测定,对照组大鼠视网膜组织中仅有少量ET-1,而DM组大鼠随病程延长,视网膜组织中的ET-1含量呈进行性增加。各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1α与其下游基因ET-1在DM病程中的表达变化提示二者可能与视网膜组织的损伤有关,并在DR的发生、发展中发挥重要作用。     

低氧训练对AMPKα2三种基因状态鼠骨骼肌HIF-1α mRNA表达的影响

目的:探讨低氧耐力训练对AMPKα2基因敲除(KO)、高表达转基因(OE)及野生型(WT)小鼠骨骼肌HIF-1α mRNA表达的影响。方法:WT、KO及OE鼠各30只,分别随机分为常氧对照组、低氧暴露组和低氧训练组。常氧对照组在常氧状态下饲养14天;低氧暴露组在低氧环境(模拟海拔4000米高度,氧浓度约12.3%)下饲养14天;低氧训练组在与低氧暴露组相同的低氧环境下饲养并连续14天进行跑台训练(12 m/min,1 h/day)。14天后断食12 h取材,测定小鼠骨骼肌AMPKα2蛋白和HIF-1α mRNA表达。结果:(1)OE和WT鼠低氧暴露组、低氧训练组骨骼肌AMPKα2蛋白表达与常氧对照组相比均无显著性差异,KO鼠骨骼肌无AMPKα2蛋白表达。(2)OE鼠、KO鼠和WT鼠低氧训练组骨骼肌HIF-1α mRNA表达量与低氧暴露组相比显著增加。(3)低氧训练下,OE鼠骨骼肌HIF-1α mRNA表达量与WT鼠相比有显著性差异。结论:低氧训练中AMPKα2对骨骼肌HIF-1α mRNA表达起重要作用,但并非HIF-1α表达的必要条件。     

高原红细胞增多症患者血清低氧诱导因子-1α的检测及意义

目的：探讨高原红细胞增多症（HAPC）患者血清低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的变化。方法：采集高原红细胞增多症患者（53例）以及健康个体（90例）的外周静脉血样,酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测血清HIF-1α含量,Sysmex XE2100全自动血细胞分析仪测定红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）。结果：HAPC患者血清HIF-1α含量明显增高,与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;HAPC患者血清HIF-1α与HGB及RBC显著正相关（P〈0.01）。结论：HAPC的发生可能与血清HIF-1α水平的升高有关。     

低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α蛋白和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响.方法:选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为9组.采用递增负荷跑台训练及低氧、超低氧两种不同程度的递增低氧刺激,在运动中和运动后给予低氧处理.应用免疫组织化学、原位杂交、计算机显微图像分析等方法,检测HIF-1α、VEGF mRNA在骨骼肌组织中的定位及含量.采用相关分析方法,分析低氧训练骨骼肌HIF-1α蛋白表达对骨骼肌VEGF转录的促进作用.结果与结论:低氧和运动训练可增加骨骼肌组织HIF-1α蛋白和VEGF mRNA含量,低氧训练骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的增加对VEGF基因转录具有促进作用.     

低氧诱导肾细胞癌786-O细胞HIF-1α的表达变化及意义

目的探讨缺氧条件下肾透明细胞癌786-O细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）的表达变化及意义。方法786-O细胞在缺氧条件下培养不同时间（0、8、16、24h）后,RT-PCR法检测HIF-1α mRNA的转录情况;Western blot法检测HIF-1α蛋白表达变化。结果常氧状态下HIF-1α mRNA和蛋白均有一定表达。缺氧处理一定时间（8、16、24h）后786-O细胞HIF-1α mRNA表达没有明显改变（P〉0．05）,而HIF-1α蛋白表达水平显著升高（P〈0．01）。结论缺氧条件下786-O细胞HIF-1α表达变化主要在翻译水平而非转录水平。在蛋白水平对HIF-1α表达进行调控可作为肾透明细胞癌治疗的新靶点。     

低氧对雄性大鼠睾酮分泌及其合成相关蛋白和酶表达的影响

目的研究低氧对雄性大鼠睾酮分泌及其合成相关蛋白和酶表达的影响。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为常氧、低氧5d、低氧15d和低氧30d组。运用放射免疫测定法和反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）方法，研究了模拟海拔5000m高度低氧5d、15d、30d对雄性Wistar大鼠血中睾酮浓度的影响，以及对睾丸组织中睾酮合成相关的类固醇急性调节蛋白（StAR）、胆固醇侧链裂解酶（P450scc）以及313-羟甾脱氢酶（3β-HSD）mRNA表达的影响。结果模拟海拔5000m高度低氧15d，大鼠血中睾酮浓度显著高于常氧组（P〈0．05），低氧30d，大鼠血中睾酮浓度显著低于对照组（P〈0．05）；低氧不引起雄性大鼠睾丸组织StARmRNA表达改变；低氧15d、30d，大鼠睾丸组织P450scc mRNA和3β-HSDmRNA表达分别显著低于常氧组（P〈0．05）。结论慢性低氧抑制了睾酮的分泌，并抑制了睾丸组织睾酮合成相关酶P450scc mRNA和3β-HSD mRNA的表达。低氧15d大鼠血中睾酮浓度升高的机制需进一步研究。     

常压模拟高住低练对大鼠心肌低氧诱导因子1α基因表达的影响

目的:探讨常压下不同低氧(14.5%、12.6%氧含量)模拟高住低练对低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA表达的影响,为运动与低氧适应提供理论依据.方法:采用RT-PCR技术检测大鼠心肌HIF-1α mRNA水平.结果:与低住安静组和低住低练组比较,模拟海拔3000m急性模拟高住低练组和模拟高住低练组HIF-1α mRNA表达均显著上调;模拟海拔4000m急性模拟高住低练组HIF-1α mRNA表达显著上调,模拟高住低练组则无显著性差异,而显著性低于急性模拟运动组.提示不同海拔低氧刺激与运动对HIF-1α mRNA表达的影响不同,3000m海拔比4000m更为适宜.     

高原肺水肿患者肺血管活性因子变化及其与肺动脉高压的关系

目的:探讨高原肺水肿(HAPE)患者血管内皮功能变化及其与肺动脉高压的关系。方法:检测22例HAPE患者治疗前及治愈后血浆ET-1、血清NO、TNF-α、mPAP和PaO2,并与30例健康人比较。结果:治疗前,HAPE患者ET-1、ET-1/NO、TNF-α、mPAP较对照组显著升高,NO、PaO2较对照组显著降低(均P<0.01)。HAPE患者ET-1、ET-1/NO、TNF-α与mPAP呈显著正相关,NO、PaO2与mPAP呈显著负相关(均P<0.01)。治愈后血ET-1、ET-1/NO、TNF-α、mPAP显著降低,NO、PaO2显著升高(均P<0.01),并与对照组比较差异无显著性(均P>0.05)。结论:HAPE患者存在明显的血管内皮损伤和功能失调,这种变化可能在HAPE患者PAH的发生发展中起重要的作用。     

HIF-1α与E-cadherin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）及上皮钙依赖黏附蛋白（E-cadherin,E-cad）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测42例肺癌,23例癌旁组织中HIF-1α与E-cad的表达,并分析与NSCLC的预后关系。结果NSCLC中HIF-1α在肺癌组织内的表达显著高于癌旁组织（P〈0.01）,有淋巴结转移组的表达高于无淋巴结转移组（P〈0.05）,并且在T3、T4期组中的表达高于T1、T2期组中的表达（P〈0.05）;E-cad在癌旁组织内表达显著高于癌组织（P〈0.01）,且与NSCLC淋巴结转移和TNM分期有关（P〈0.05）。结论HIF-1α与E-cad的表达与NSCLC的侵袭和转移相关。     

HIF-1α与LOX在人喉鳞癌中表达的相关性研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、赖氨酰氧化酶（1ysyl oxidase,LOX）在人喉鳞癌中的表达,探讨其对喉鳞癌转移及预后的影响及意义。方法采用免疫组织化学方法检测喉鳞癌患者鳞癌组织及癌旁正常组织中HIF-1α及LOX的表达情况,并分析其表达的相关性。结果（1）HIF一1d、LOX在人喉鳞癌组织中表达阳性率分别为78．9％、84．2％,在癌旁正常组织中表达阳性率分别为10．0％、10．0％,差异显著（P〈0．01）;（2）HIF-1α在淋巴结转移组与无转移组表达阳性率为100．0％、66．7％,差异显著（P〈0．05）;LOX在有无淋巴结转移的表达,无显著差异（P〉0．05）;（3）HIF-1α表达随病理分级逐渐增强（P〈0．05）,LOX表达随病理分级逐渐减弱（P〈0．05）;（4）HIF-1α、LOX的表达与患者的年龄、性别、临床分型及临床分期等临床病理因素无关;（5）HIF-1α与LOX在人喉鳞癌组织中表达呈正相关。结论在人喉鳞癌中HIF-1α与LOX的表达正相关。HIF-1α的高表达可能是造成LOX表达变化的重要影响因素之一。     

生脉注射液在高龄感染性休克患者中的应用价值及对ET-1、NO表达的影响

目的探讨生脉注射液在高龄感染性休克患者中的应用价值及对ET-1、NO表达的影响。方法高龄感染性休克患者46例,分为对照组(22例)和试验组(24例),对照组给予常规综合性治疗,试验组在对照组治疗基础上,加用生脉注射液,观察患者血压、心率、休克改善状况及血清C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)的水平。结果试验组总有效率87.5%,明显高于对照组的59.1%(P<0.05)。治疗1周后,试验组CRP、PCT、ET-1、NO水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),ET-1/NO比值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生脉注射液治疗高龄感染性休克患者疗效显著,能降低患者CRP、PCT水平,其机制可能与抑制ET-1和NO过度生成,纠正ET-1/NO紊乱有关。     

多种无创性检测指标的变化与老年冠心病患者相关性研究

目的：探讨多种无创检测指标与老年冠心病（CHD）的相关性。方法：64例冠心病患者随机分为单支组及多支组,32名健康体检者作对照组,检测并分析血液各生物化学指标及动脉硬度指标。结果：CHD患者NO水平显著低于对照组（P〈0.05）,而内皮素-1（ET-1）水平显著高于对照组（P〈0.05）,其中多支组ET-1水平显著高于单支组（P〈0.05）。各组间超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平差异无统计学意义（P〉0.05）。CHD患者肱-踝脉搏波传导速度（baPWV）显著高于对照组（P〈0.05）,其中多支组baPWV显著高于单支组（P〈0.05）。CHD发病风险与ET-1、baPWV呈显著相关性（P〈0.05）,而与血NO水平、hs-CRP无明显相关（P〉0.05）。结论：老年人冠状动脉内皮功能受损和动脉弹性降低与CHD发生密切相关,ET-1和baPWV可作为预测老年冠状动脉病变程度的重要指标。     

缺氧诱导因子与血管内皮生长因子在肾透明细胞癌中的表达

目的：研究肾透明细胞癌（CCRCC）中HIF-1α、HIF-2α的表达与VEGF、MVD的相关性及其对肿瘤病理分期的影响。方法：在40例CCRCC组织标本中,应用免疫组化方法检测HIF-1α、HIF-2α和VEGF的表达,用CD34单克隆抗体标记肿瘤微血管密度（MVD）。结果：HIF-1α染色阳性28例,HIF-2α染色阳性25例,VEGF染色阳性24例。Spearman等级相关分析发现HIF-1α、HIF-2α分别与VEGF表达程度呈正相关。HIF-1α、HIF-2α或VEGF阳性肿瘤组织的MVD值显著高于正常肾组织（P〈0.05）。未发现HIF-1α、HIF-2α和VEGF表达与肿瘤病理分期有关（P〉0.05）。结论：在CCRCC中HIF-1α、HIF-2α与VEGF表达相关,并可能诱导VEGF的过度表达,促进肿瘤血管生成,而且与CCRCC的侵袭性生物学行为密切相关,但其表达与肿瘤病理分期无相关性。     

重组人脑利钠肽治疗高原肺水肿对患者内皮功能相关因子的影响

目的观察重组人脑利钠肽（rhBNP）治疗高原肺水肿（HAPE）对患者内皮功能的影响。方法收集我院2011年2月-2012年10月收治的HAPE患者98例,按人院时间顺序分为普通治疗组和重组人脑利钠肽组。两组人院后都给予吸氧、利尿、镇静、扩张支气管、减轻心脏负荷等处理,在此基础上rhBNP组给予rhBNP治疗,然后对两组患者治疗前及治疗24h后血浆一氧化氮（NO）、血浆内皮素-1（ET-1）进行测定,比较其变化情况。结果治疗24h后,rhBNP组患者血浆NO、ET-1水平较常规治疗组变化明显,差异有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）结论rhBNP可改善HAPE患者的血管内皮功能,有效调节患者血浆ET和NO水平,从而取得较好疗效。     

磷酸肌醇3-激酶在大鼠缺氧性肺动脉高压中的作用

目的：通过观察缺氧性肺动脉高压（HPH）大鼠肺组织中蛋白激酶B（AKT））和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,研究磷酸肌醇3-激酶（PI3K）通路与VEGF的关系及其在HPH发病中的可能机制。方法：40只成年雄性Wistar大鼠随机分成对照组、低氧3、7、14、21d组,每组8只,测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、右室肥大指数（RVHI）、血管形态学指标;免疫组化检测P-AKT和VEGF。结果：低氧7d后,mPAP开始上升[（23.53±1.78）mmHg],与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）,低氧14d后达高水平并维持于此水平。肺血管重塑,RVIH改变在缺氧14d后出现。磷酸化AKT蛋白在对照组表达不明显,在低氧3d后表达上升,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）,且在低氧3、7、14、21d组肺血管内膜、中膜中,磷酸化AKT蛋白表达均为阳性。VEGF在低氧7d增高（0.188±0.018,P〈0.05）,14d达高峰（0.238±0.017,P〈0.05）。相关分析表明磷酸化AKT、VEGF蛋白、mPAP与血管重塑均正相关（P〈0.01）。磷酸化AKT与VEGF（内膜）成正相关（P〈0.01）。结论：磷酸化AKT与VEGF均在大鼠HPH的发病机制中发挥作用。     

高原健康人缺氧诱导因子-1α、诱导性一氧化氮合酶和一氧化氮的海拔性变化与红细胞变形能力的关系研究

目的：观察缺氧诱导因子-1α、诱导性一氧化氮合酶、一氧化氮和红细胞滤过指数在不同海拔的变化,探讨缺氧诱导因子-1α、诱导性一氧化氮合酶和一氧化氮的海拔性变化对红细胞变形能力的影响。方法：对不同海拔高度（西宁2 260m A组、刚察县3 300m B组、甘德县4 800m C组）320例健康人检测了缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、诱导性一氧化氮合酶（i NOS）、一氧化氮（NO）和红细胞滤过指数（EFI）。结果：随着海拔的升高,健康人HIF-1α水平和EFI上升,而i NOS和NO随之降低;甘德组HIF-1α水平（7.65±1.36）μg/L明显高于刚察组（5.39±1.02）μg/L和西宁组（4.18±1.14）μg/L（均P〈0.01）,刚察组HIF-1α水平明显高于西宁组;甘德组血清i NOS和NO（5.86±1.43）μmol/L、（38.53±4.23）μmol/L明显低于刚察组（9.44±2.13）μmol/L、（47.85±3.77）μmol/L和西宁组（12.23±2.07）μmol/L、（59.23±4.01）μmol/L（均P〈0.01）,同时刚察组i NOS和NO水平明显低于西宁组（P〈0.01）;EFI随着海拔升高而增加[西宁组：（4.67±0.49）μmol/L、刚察组：（7.05±1.51）μmol/L、甘德组：（11.45±1.78）μmol/L],各组比较有明显差异（P〈0.01）;相关分析表明：EFI与HIF-1α水平呈正相关（P〈0.01）;而与i NOS和NO呈负相关。结论：HIF-1α、i NOS和NO海拔差异性的形成在红细胞变形能力异常的病理生理机制中发挥着重要作用,而随海拔高度升高机体i NOS和NO水平的生物学特性进一步降低是导致海拔差异健康人红细胞流变形异常加重的中心环节。