低氧训练与低氧大鼠心肌细胞凋亡及凋亡因子的表达

背景：低氧训练时,机体既要承受运动负荷,同时处于外界的低氧环境,此时,心组织将如何适应其变化？其机制研究国内外较少。目的：观察低氧与低氧训练对大鼠心肌细胞凋亡及Bax及Bcl-2表达的影响。方法：SD大鼠共60只随机分为6组,常氧组、低氧8h组、低氧12h组、常氧训练组、低氧8h训练组和低氧12h训练组,每组10只。后3组大鼠每天在坡度为0的动物跑台上以25m／min的速度训练1h。训练完后,将低氧8h组、低氧8h训练组和低氧12h组、低氧12h训练组放入氧体积分数为12．5％（相当于海拔4000m）的低氧舱内8h和12h。实验期为4周,5d／周。最后1次实验结束后24h,大鼠均实施速眠新II腹腔麻醉后取材,采用苏木精-伊红染色、原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法及蛋白免疫组织化学法检测各组大鼠心肌细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与结论：①与常氧组相比,低氧12h组、常氧训练组、低氧训练组心肌细胞凋亡指数均显著增加（P〈0．05）;低氧12h训练组心肌细胞凋亡指数显著多于常氧训练组和低氧8h训练组（P〈0．05）。②与常氧组比较,其他各组Bcl-2、Bax、Bcl-2／Bax均显著性增高（P〈0．05）：常氧训练组Bcl-2、Bax、Bcl-2／Bax表达显著高于低氧8h组,显著低于低氧12h训练组（P〈0．05）;低氧12h训练组Bcl-2、Bax、Bcl-2／Bax表达比低氧12h组、低氧8h训练组显著增加（P〈0．05）。提示低氧、低氧训练可诱导大鼠心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达,运动时低氧刺激与细胞凋亡率、凋亡指数及病理损伤有关,其中以低氧12h后运动训练组最明显,心肌细胞的凋亡调控与Bcl-2和Bax相关。     

聚乙二醇干扰素α-2a结合恩替卡韦对慢性乙肝患者肝纤维化的影响

目的探讨聚乙二醇干扰素α-2a结合恩替卡韦对慢性乙肝患者肝纤维化的影响。方法选取2018年3月～2019年3月我院收治的75例慢性乙肝患者。据治疗方式的不同分为对照组36例和试验组39例。对照组患者采用恩替卡韦治疗,试验组患者加用聚乙二醇干扰素α-2a皮下注射治疗。对比两组患者治疗前后肝功能、肝纤维化情况,观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,试验组患者AST、ALT、TBil水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,试验组患者HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组均未出现全身或局部不良反应。结论慢性乙肝应用聚乙二醇干扰素α-2a结合恩替卡韦治疗可改善肝功能,延缓肝纤维化进程,且安全性较高,值得临床推广应用。     

大鼠骨髓间质干细胞体内诱导肝星状细胞的凋亡

背景:骨髓间质干细胞治疗肝纤维化的疗效己得到很多实验的证实,但其机制仍不明确.目的:实验观察骨髓间质干细胞移植后肝星状细胞的凋亡情况,初步探讨骨髓间质干细胞治疗肝纤维化的机制.方法:连续8周皮下注射CCl_4诱导大鼠肝纤维化.造模成功后,20只大鼠随机分为实验组及对照组,每组10只.实验组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞,对照组经尾静脉注射DMEM培养液.于移植前,移植后第3,7天分别处死大鼠,取其肝脏行羟脯氨酸的检测,苏木精-伊红染色及masson染色,免疫组织化学检测α-SMA及α-SMA+TUNEL双染反映肝星状细胞活化及其凋亡情况.结果与结论:造模8周后,大鼠肝脏羟脯氨酸含最明显升高,病理呈进展性肝纤维化表现.移植7 d后,实验组大鼠肝脏羟脯氨酸含量明显降低,肝纤维化有所缓解,而对照组的肝纤维化程度继续加重.免疫组织化学显示,CCl_4注射8周后,α-SMA阳性细胞大量增生,移植后第7天,实验组α-SMA阳件细胞明显少于对照组(P＜0.05).移植后第3天,实验组肝星状细胞凋亡明显较对照组增加(P＜0.05).结果提示,骨髓间质干细胞移植有治疗肝纤维化的作用.骨髓间质干细胞诱导肝星状细胞凋亡可能是其治疗肝纤维化的主要机制之一.     

肝星状细胞与肝纤维化

慢性肝脏疾患是一类世界性的严重危害人们健康的主要疾病,其中肝纤维化（HF）是这个过程的中间及关键环节。肝景状细胞（HSC）是启动整个事件的开端,在HF过程中扮演着重要的角色。在进展期的HF中,活化HSC在肝损伤部位移行、增殖,表达各种细胞外信号转导通路蛋白,产生大量以胶原为主的细胞外基质（ECM）成分和细胞因子（CK）,是HF形成的中心环节;但在HF的恢复期,     

干扰素α-2b对HL-60细胞抑增殖与促凋亡的影响

为了研究干扰素α-2b （IFNα-2b）对HL-60细胞增殖与凋亡的影响，采用瑞氏染色观察HL-60细胞的形态变化．吖啶橙／溴化乙锭双染色观察细胞凋亡，通过CDl3测定观察细胞膜抗原表达及成熟分化，MTT实验观察增殖活性。结果显示：加入IFNα-2b 48小时后，HL-60细胞凋亡率升高，增殖活性下降，而且随着IFNα-2b浓度的升高，抑制作用更加明显。CD13表达逐渐下降，细胞形态逐渐向成熟转化。结论：IFNα-2b能促进HL-60细胞凋亡、抑制HL-60细胞增殖和促进分化成熟。     

γ-干扰素对肝星状细胞增殖影响研究

目的观察γ-干扰素（IFN-1）对体外培养的肝星状细胞（HSC）增殖的影响。方法采用体外培养大鼠肝星状细胞（rHSC-99）,加入不同剂量的IFN-1,并用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖。结果IFN-1对HSC细胞株（rHSC-99）有促增殖作用,其促增殖作用随着剂量的增加和培养时间的延长而增强（P〈0．05）。结论IFN-1对rHSC-99细胞的促增殖作用具有浓度-效应依赖关系和时间-效应依赖关系。     

聚乙二醇干扰素α-2a和重组人干扰素α-2b治疗慢性丙肝临床疗效观察

慢性丙型肝炎（CHC）是肝硬化及肝癌的高危因素。目前认为干扰素是治疗丙型肝炎有效的药物。本文通过对湖南省株洲市一医院75例丙型肝炎患者临床治疗观察分析，对比不同类型干扰素对慢性丙型肝炎的临床疗效，报告如下。     

聚乙二醇干扰素α-2a和重组人干扰素α-2b治疗慢性丙肝临床疗效观察

慢性丙型肝炎(CHC)是肝硬化及肝癌的高危因素.目前认为干扰素是治疗丙型肝炎有效的药物.本文通过对湖南省株洲市一医院75例丙型肝炎患者临床治疗观察分析,对比不同类型干扰素对慢性丙型肝炎的临床疗效,报告如下.     

干扰素α-2a治疗麻疹的临床对照研究

目的观察干扰素α -2a治疗麻疹的疗效。方法选择 2 0 0 2年 1月 2 0 0 3年 12月收治的麻疹 81例 ,随机分为 2组 ,均依据病情予对症、抗感染治疗 ,在此基础上 ,治疗组肌内注射干扰素α 2a ,对照组予静脉滴注利巴韦林 (病毒唑 )治疗。观察治疗后对体温变化、皮疹出齐、皮疹消退时间的影响。结果治疗组在体温恢复正常、皮疹出齐、皮疹消退及减少并发症方面均优于对照组 ,两者比较有统计学意义 (P <0 0 1)。结论干扰素α 2a用于治疗麻疹 ,病程短、临床治疗效果满意 ,无 1例出现不良反应 ,值得临床推广应用。     

大鼠肝星状细胞分离纯化方法的改进

目的 研究肝损伤后细胞基质的沉积及纤维化形成机制,建立一种经济、简便、可靠的分离大鼠肝星状细胞(HSC)的方法.方法 用链霉蛋白酶和胶原酶灌流大鼠肝脏,Optiprep密度梯度离心分离HSC,并进行体外培养.结果 细胞得率为5.0×107/鼠,活率和纯度分别为98%、96%.结论 该方法简便、实用、稳定、可靠,为进一步研究HSC与肝纤维化的关系,尤其是细胞水平及分子生物学水平的研究奠定了基础.     

The m6A methyltransferase Mettl3 deficiency attenuates hepatic stellate cell activation and liver fibrosis

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sEVs from tonsil-derived mesenchymal stromal cells alleviate activation of hepatic stellate cells and liver fibrosis through miR-486-5p

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小鼠肝星状细胞的分离纯化新方法的建立与应用

目的 介绍一种简便、经济、高产的小鼠肝星状细胞(HSC)分离方法,为肝纤维化的研究提供细胞模型.方法 参照国内外方法并加以改良,采用酶灌注预消化及随后的震荡充分消化,合并Medimachine系统制成单细胞悬液.用人淋巴细胞分离液直接铺梯度,采用单层梯度离心法一步分离HSC.结果 两只小鼠HSC得率可达1×106个,台盼蓝染色显示细胞活率达92%.初分离的HSC在328 nm激发光下自发蓝绿色荧光,油红染色及结蛋白免疫细胞化学染色鉴定纯度达90%.结论 建立了一种实用的小鼠HSC分离方法,可用于肝纤维化和原代HSC的生物学行为研究.该方法简便、实用、高产,不需特殊设备,便于推广应用.     

大鼠髁突软骨细胞凋亡与胰岛素样生长因子1的影响

背景：胰岛素样生长因子 1 参与了髁突软骨生长与改建,是软骨发育关键因子。目的：探索胰岛素样生长因子 1 对体外培养大鼠髁突软骨细胞凋亡的作用,以及对凋亡相关因子 Bcl-2 和 BaxmRNA 及蛋白表达变化的影响。方法：体外培养并鉴定出生后 1,28 d 大鼠髁突软骨细胞后,将每个年龄组的髁突软骨细胞分别分为实验组和对照组。饥饿培养 24 h 后,实验组加入 100 μg/L 重组大鼠胰岛素样生长因子 1 细胞因子孵育 48 h,对照组正常培养。结果与结论：与对照组相比,实验组加入重组胰岛素样生长因子 1 后,髁突软骨细胞数量增多,增殖速度显著增加（P 〈 0.05）。实时 PCR 和 Western blot 检测显示,加入重组胰岛素样生长因子 1 培养 48 h 后,各组髁突软骨细胞中 bcl-2 mRNA 和蛋白表达增加,bax mRNA 和蛋白表达减少（P 〈 0.05）。提示胰岛素样生长因子 1 可以促进新出生及青春期大鼠髁突软骨细胞增殖,抑制其凋亡,并可能通过 Bcl-2 和 Bax 介导抑制凋亡。     

Pathophysiological mechanisms of hepatic stellate cells activation in liver fibrosis

Liver fibrosis is a complex pathological process controlled by a variety of cells, mediators and signaling pathways. Hepatic stellate cells play a central role in the development of liver fibrosis. In chronic liver disease, hepatic stellate cells undergo dramatic phenotypic activation and acquire fibrogenic properties. This review focuses on the pathophysiological mechanisms of hepatic stellate cells activation in liver fibrosis. They enter the cell cycle under the influence of various triggers. The “Initiation” phase of hepatic stellate cells activation overlaps and continues with the “Perpetuation” phase, which is characterized by a pronounced inflammatory and fibrogenic reaction. This is followed by a resolution phase if the injury subsides. Knowledge of these pathophysiological mechanisms paved the way for drugs aimed at preventing the development and progression of liver fibrosis. In this respect, impairments in intracellular signaling, epigenetic changes and cellular stress response can be the targets of therapy where the goal is to deactivate hepatic stellate cells. Potential antifibrotic therapy may focus on inducing hepatic stellate cells to return to an inactive state through cellular aging, apoptosis, and/or clearance by immune cells, and serve as potential antifibrotic therapy. It is especially important to prevent the formation of liver cirrhosis since the only radical approach to its treatment is liver transplantation which can be performed in only a limited number of countries.     

骨髓间充质干细胞对四氯化碳诱发大鼠肝纤维化的治疗作用的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对四氯化碳诱发大鼠肝纤维化的治疗作用及其对大鼠肝星状细胞凋亡的影响。方法将清洁级Sprague-Dawley大鼠分4组,A组(正常对照组)、B组(模型组)、C组(骨髓间充质干细胞移植组)、D组(水飞蓟素对照组)。另取sprague-Dawley大鼠制备骨髓间充质干细胞。除A组外,均皮下注射四氯化碳8周,完成后C组给予移植诱导后的骨髓间充质干细胞,D组给予水飞蓟素干预后化学发光法检测4组大鼠血清肝纤维化和肝功能指标,大鼠肝脏作组织病理学检查,分离各组大鼠肝星状细胞,流式细胞仪检测活化的肝星状细胞凋亡的变化。结果各组大鼠纤维化及肝功能结果:A、C、D组数据与B组对应数据比较,A组P<0.01,其余2组P<0.05。结论骨髓间充质干细胞能够显著改善四氯化碳所诱发的大鼠肝纤维化并能使肝星状细胞凋亡增加。     

慢性乙型肝炎肝组织中星状细胞与肝纤维化关系的研究

目的研究肝星状细胞(HSC)与肝纤维化和肝硬化的关系.方法检测60例慢性乙型肝炎患者肝功能及乙型肝炎e抗原(HBeAg),所有患者均进行了肝组织活检,其中S1 10例, S2 24例, S3 12例,S4 14例;采用免疫组织化学法,通过应用特殊的单克隆抗体(McAb)检测慢性乙型肝炎患者肝组织石蜡切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞(即HSC).结果苦味酸天狼猩红染色法胶原面积的百分比与肝纤维化分期有关(r=0.885,P＜0.01);HSC与慢性乙型肝炎患者肝组织的纤维化分期呈正相关(r=0.761,P＜0.01);HSC与慢性乙型肝炎患者肝组织中苦味酸天狼猩红染色法胶原面积的百分比正相关(r=0.854,P＜0.01).结论 HSC与慢性乙型肝炎肝纤维化和肝硬化呈正相关.     

肝纤维化中肝星状细胞和肌纤维母细胞的形态学观察

目的：观察肌纤维母细胞和肝星状细胞在人慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化过程中的作用。方法：对69例肝穿刺活检组织标本行HE、Masson三色及Sweet网织纤维的染色，按照2000年新的病毒性肝炎病理分级分期标准，进行炎症活动度和纤维化程度评定，应用免疫组织化学方法，观察平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、vimentin、结蛋白（desmin)在肝星状细胞、肌纤维母细胞的表达。结果：在慢性肝炎肝纤维化过程中α－SMA阳性细胞不仅仅是肝星状细胞的活化。结论：在人的慢性肝炎肝纤维化过程中，并不排除肝星状细胞所起的作用，但随着肝组织炎症损伤的修复，以肌纤维母细胞为代表的间叶细胞在纤维化过程中可能起主要作用。