Aurora A激酶及其抑制剂研究进展

Aurora A是Aurora激酶家族中的重要成员之一,在细胞有丝分裂过程中发挥着重要功能,Aurora A的过度表达与人类多种恶性肿瘤紧密相关。鉴于Aurora A的重要作用,其被作为一个设计抗肿瘤药物的新靶点。目前已有几种选择性Aurora A激酶抑制剂进入到临床研究中,并且表现出良好的治疗效果。本文从Aurora A激酶的生物学、与肿瘤的密切关系及其抑制剂的研发状况进行综述。     

新型喹啉类蛋白酪氨酸激酶抑制剂的合成

目的 设计合成一系列新型喹啉双芳基脲类化合物作为潜在的蛋白酪氨酸激酶抑制剂.方法 以2-甲基-2苯基丙酸为原料经过9步反应,合成了12个喹啉衍生物,结构经过1H-NMR鉴定.结果 合成的12个目标化合物,均未见文献报道.结论 该合成方法简单易行,可作为一系列喹啉类蛋白酪氨酸激酶抑制剂的合成通法.     

苯甲酰胺组蛋白去乙酰化酶抑制剂的合成及抗肿瘤活性

目的 设计合成苯甲酰胺嘧啶衍生物,并初步评价其抗肿瘤活性.方法 以4-氨甲基苯甲酸为原料经过4步反应,合成了12个苯甲酰胺衍生物,结构经过,HNMR和MS鉴定,采用MTT法筛选了目标化合物的抗肿瘤活性并进行初步评价.结果 合成了12个目标化合物,均未见文献报道.5个化合物显示较好的肿瘤细胞增殖抑制活性.结论 化合物5a...     

酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤活性评价方法研究进展

目的酪氨酸激酶的突变和过表达在肿瘤无限制生长、抗凋亡、侵袭和转移中具有重要作用。筛选和评估酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤活性已经成为靶向抗肿瘤药物研究的热点和关键点,多种评价酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤活性的方法在抗肿瘤药物研究中各有优势,自动化、规模化的高通量靶向酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤活性评价方法将可为恶性肿瘤的治疗筛选出大量候选化合物,而分子影像学的应用将有助于尽早提供大量更有效、经济和安全的肿瘤靶向治疗武器。     

咖啡因对LY294002诱导的小脑颗粒神经元凋亡的拮抗作用

研究了咖啡因对磷酸肌醇-3-激酶抑制剂诱导的小脑颗粒神经元凋亡的作用及机制。应用神经元体外培养,凝胶电泳,ＳＡＰＫ/ＪＮＫ分析盒测定ＪＮＫ活性。结果:ＬＹ294002浓度依赖性地触发小脑颗粒神经元凋亡,但咖啡因具有浓度依赖性的保护作用。此作用不受ｒｙａｎｏｄｉｎｅ-敏感性钙释放阻断剂、Ｌ-型钙通道阻断剂和ＮＭＤＡ受体阻断剂的影响。而且,ＲＰ-ｃＡＭＰ,Ｈ89和ＫＮ62均不能抑制咖啡因的保护作用。ｃ-Ｊｕｎ的磷酸化是ＬＹ294002诱导神经原凋亡所必需,咖啡因可直接抑制ＪＮＫ的活性,降低神经元内磷酸化ｃ-Ｊｕｎ的含量。咖啡因通过…     

CXCR4 HIV-1抑制剂的设计合成及活性研究

目的设计、合成一系列新型四氢喹啉-苄基或苯并咪唑多胺类化合物,作为潜在的靶向CXCR4辅助受体的新型抑制剂,并测定其抗HIV-1活性。方法组合HIV-1辅助受体CXCR4抑制剂三氮构效团与CCR5部分药效团,设计并合成一系列新化合物并经1H-NMR、MS表征,用HIV-1ⅢB病毒测定化合物抑制活性。结果与结论设计合成的10个目标化合物未见文献报道。活性测试结果显示,四氢喹啉-苯并咪唑多胺类化合物具有较好的抗HIV活性（IC50〈1μmol/L）,四氢喹啉-苄基多胺类化合物活性较差（IC50〉8μmol/L）。     

B型肉毒毒素轻链荧光表达细胞模型的构建及应用

目的 构建B型肉毒毒素轻链（BoNT/B,BLC）荧光表达细胞模型,并用于小分子化合物效应评价。方法 将BLC基因导入荧光表达载体pEGFP-N1中,构建重组质粒,并将其转染至神经细胞系Neuro-2a细胞中进行表达,通过荧光显微镜观察细胞内BLC-EGFP蛋白荧光表达水平,利用Western印迹法检测细胞中BLC-EGFP的酶切活性和稳定性,进一步利用该模型评价SRC激酶抑制剂KX2-391对BLC-EGFP蛋白胞内稳定性的影响。结果 成功构建重组表达质粒pEGFP-N1-BLC。质粒转染后,BCL-EGFP蛋白在Neuro-2a细胞中的表达水平随时间逐渐增加并具有酶切胞内底物囊泡相关蛋白-2(VAMP-2)的活性;质粒转染12 h后加入CHX终止蛋白合成,BLC-EGFP的胞内水平在72 h内无显著变化;加入KX2-391作用24 h后,可显著促进BLC-EGFP蛋白的胞内降解。结论 成功建立B型肉毒毒素轻链荧光表达细胞模型,为后续B型肉毒毒素轻链胞内持留机制研究和胞内解毒剂筛选提供了技术储备。     

毛叶假鹰爪素C衍生物的合成与抗肿瘤活性评价

目的设计并合成出一系列Desmosdumotin C衍生物并考察其抗肿瘤活性。方法以2,4,6-三羟基苯乙酮为 原料合成一系列Desmosdumotin C衍生物,目标化合物经过1H-NMR、MS鉴定。采用SRB法对其抗肿瘤活性进行初步评价。结 果与结论设计并合成了 19个新化合物,初步的细胞活性实验表明,该系列衍生物大多具有肿瘤增殖抑制活性,且与先导物相 当,其中3个化合物显示出良好的抗肿瘤活性,为进一步对先导化合物Desmosdumotin C衍生物的结构优化奠定了一定的基础。     

精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸肽类血小板聚集抑制剂的研究

活化的血小板糖蛋白(GP)Ⅱ_b/Ⅲ_a复合物作为受体能识别并结合纤维蛋白原(Fg)等粘附蛋白所共有的精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)肽序,导致血小板聚集和血栓形成。人工合成的RGD肽段能抑制Fg与GP Ⅱb/Ⅲa结合,从而抑制血小板聚集和血栓形成。为寻找活性更高,半衰期更长的RGD肽类血小板聚集抑制剂,笔者合成了Ac-Arg-GLy-Asp-NHCH_2CH_2PR(AC-RGDPe),进行了体外抑制血小板聚集活性的评价。     

SU11274衍生物的合成及受体酪氨酸激酶抑制活性评价

目的 合成SU11274衍生物并对其进行受体PTK抑制活性评价.方法 合成了用乙二胺、1,3-丙二胺、1,2-丙二胺、1,6-己二胺替代SU11274哌嗪基团的4个SU11274新衍生物,结构经1H-NMR和ESI-MS验证.采用ELISA方法对这4个化合物进行了受体PTK抑制活性评价.结果 合成的4个SU11274衍...     

2-羟基-3-甲基蒽醌联合紫杉醇对卵巢癌细胞Caspase-8、Caspase-9及Caspase-3表达影响

目的研究中药白花蛇舌草的有效成分2-羟基-3-甲基蒽醌联合紫杉醇对人卵巢癌细胞A2780生长的抑制作用和细胞凋亡的影响,以探讨两药联合对A2780细胞的作用机制。方法将对数生长期的A2780细胞随机分为空白对照组(A组)、B组(紫杉醇3μg/ml)、C组(2-羟基-3-甲基蒽醌50μM)和D组(2-羟基-3-甲基蒽醌50μM+紫杉醇3μg/ml)。采用MTT法检测各组细胞的活性,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;采用荧光比色法测定Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3蛋白酶的活性。结果与A组比较,B、C、D组对A2780细胞均有明显的抑制生长及诱导凋亡作用;D组对A2780细胞的抑制及诱导凋亡作用显著高于C组或B组(P<0.05);各组抑制率及凋亡率均呈时间依赖性(P<0.05)。Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3蛋白酶的表达从A~D组呈逐渐升高的趋势。结论 2-羟基-3-甲基蒽醌可协同紫杉醇促进A2780细胞凋亡,其机制可能是通过增加Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的表达。     

7-羟基双苄基丁内酯类木脂素的合成及抗炎活性研究简

目的合成7-羟基-α,β-二苄基-γ-丁内酯类木脂素并观察其抗炎活性。方法设计合成了15个目标化合物（7a-70）,结构经MS、1H-NMR确认。通过巴豆油致小鼠耳肿胀试验观察合成产物的局部用药抗炎活性。结果大部分目标化合物具有抑制小鼠耳肿胀活性,其中化合物7e活性最强,抑制率达60．5％,略好于阳性药吲哚美辛。结论目标化合物具有明显的抗炎活性,苯环上甲氧基和羟基的位置和数量对抗炎活性有影响,值得进一步研究。     

A型肉毒毒素轻链抑制剂苯并硒唑衍生物的合成及活性评价

目的 合成一系列含芳香基、直链取代基苯并硒唑,抑制A型肉毒毒素(BoNT/A)轻链活性,获得A型肉毒毒素(BoNT/A)的解毒剂.方法 以邻氨基苯甲酸甲酯为起始原料,经重氮化、酰氯化合成中间产物2?硒化苯甲酰氯,再与含不同取代基的芳香胺、直链胺反应合成一系列依布硒啉(ebselen)类及其他苯并硒唑衍生物.采用荧光共振...     

5-Fu对A549细胞NKG2D配体MICA/B启动子活性的作用

目的：克隆A549细胞NKG2D配体MICA/B的启动子,分析其活性,并研究5-Fu对MICA/B启动子活性的调节作用。方法：PCR方法扩增人MICA/B的启动子及其5个截短体基因,用双荧光报告基因系统进行启动子活性分析,并测定不同浓度5-Fu处理对启动子活性的影响。结果与结论：克隆了人MICA启动子（-455/＋4）、MICB启动子（-470/＋40）及其5个截短体基因,MICA的相对活性分别为：3.61,2.26,1.63,0.313,0.711,0.663;MICB的相对活性分别为：17.49,10.11,7.398,0.822,0.997,0.49。用20,40,80,160,320μg/ml的5-Fu处理A549细胞8h后,MICA启动子活性分别是未处理的1.69,1.48,1.62,1.55,1.78倍,MICB启动子活性分别是未处理的1.44,1.87,1.38,1.19,1.25倍。表明不同浓度5-Fu处理A549细胞后MICA/B启动子相对活性上升。     

纤维连接蛋白模拟肽P19的实验研究

目的　研究无机骨修复材料的生物化,设计合成了纤维连接蛋白模拟肽P19,以便通过此途径改善羟基磷灰石(HA)类骨修复材料的生物活性。方法　运用固相多肽合成技术合成了P19,用Sephadex G 15对其进行初步纯化和空气氧化法修饰,并行质谱(TOF MS)鉴定,对其生物活性及与HA结合的特性进行了研究。结果　P19和HA具有较高的亲和力,能够影响凝胶系统体外矿化作用;对于HA的解离常数(Kd)为14 3±0 8μmol/L,100μg HA最大吸附多肽量为2 57±0 51nmol。吸附的多肽在生理条件下不能被洗脱。生理浓度的钙离子能够明显增加HA吸附的多肽量,磷酸根能够抑制多肽和HA的结合。P19能够明显增加培养板表面成骨细胞附着量。竞争性抑制实验结果表明,用P19处理的成骨细胞无法吸附到纤维连接蛋白包被的培养板表面,并表现为剂量效应,其作用强于GRGDSP六肽。结论　所合成的多肽分子具有纤维蛋白样活性,且能稳定的结合于HA,可作为HA类骨损伤修复材料以及种植体HA涂层的生物活性添加成分,有一定的临床应用前景。     

聚乙二醇修饰的多肽-阿霉素偶联物的合成及其性能

目的 合成聚乙二醇(PEG)修饰的多肽-阿霉素(DOX)偶联物,并评价其性能.方法 以异官能团双取代的PEG衍生物为交联剂,将转铁蛋白受体(TfR)特异性结合多肽类似物与DOX偶联,合成一种PEG修饰的多肽-阿霉素偶联物,MALDI-TOFMS予以表征.通过考察该偶联物的体外血清稳定性、体外HepG2肝癌细胞增殖抑制活...     

新型二氢吡啶类化合物的合成及其抗乙型肝炎病毒活性研究

目的合成全新的二氢吡啶类化合物,并对其抗乙型肝炎病毒（HBV）复制活性进行研究,以获得新型的抗病毒药物先导物。方法以芳杂环取代的二氢嘧啶类化合物为模板,通过比较分子场分析,设计全新的二氢吡啶类化合物。以乙酰乙酸乙酯,芳香酸为起始原料,分别经胺化、烷基化反应,再与芳香醛缩合关环得到最终目标化合物,并对其体外抑制HBV的活性进行试验。结果合成了未见文献报道的全新二氢吡啶类化合物13个,经1HNMR和MS确定了结构,部分化合物显示了对HBV DNA复制的抑制作用。化合物6f表现出较强的抑制病毒复制活性,体外活性优于阳性对照药拉米夫定。结论二氢吡啶类化合物做为一类全新结构的抗HBV化合物,值得进行深入研究。     

01 omoucine对小脑颗粒神经元的保护作用

目的 :研究化学合成的蛋白激酶抑制剂Olomoucine对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的作用及机制。方法 :体外神经元培养、凝胶电泳和SAPK/JNK分析盒测定JNK(c -Jun氨基末端激酶 )活性。结果 :低钾 (KC15mmol/L)诱导小脑颗粒神经元的具有典型形态学和生化特征的凋亡。但是 ,特异性的细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDKs)抑制剂Olomoucine通过抑制凋亡 ,而促进低钾环境中培养的小脑颗粒神经元的存活 ,且此保护作用具有浓度依赖性。因激活了JNK的活性而升高了c -Jun的磷酸化水平 ,导致培养于低钾环境中的神经元凋亡。但是 ,当小脑颗粒神经元生长在含Olomoucine 5 0 μmmol/L的低钾培养基中 ,c -Jun的磷酸化水平和JNK活性都明显降低。结论 :Olomoucine可能通过抑制JNK的活性 ,降低c -Jun的磷酸化水平而对低钾培养的小脑颗粒神经元具有保护作用     

含砜类结构的新型蛋白酪氨酸激酶抑制剂的合成与活性评价

目的以Ex-Rad为先导化合物,设计合成含有砜类结构的新型小分子蛋白酪氨酸激酶（PTK）抑制剂,并对其抑酶活性进行初步评价。方法以（对氯）氯苄为起始原料,通过亲核取代、氧化以及缩合反应合成目标化合物;采用酶联免疫法对目标化合物进行PTK抑制活性的测定。结果合成了3个含砜结构的目标化合物,结构经¹H-NMR确证。活性筛选结果表明,在浓度为100μmol·L^-1和1 mmol·L^-1时,目标化合物WT001的PTK抑制率分别为（3.5±1.7）%和（5.7±1.1）%,WT002抑制率分别为（50.6±2.7）%和（40.3±0.7）%,WT003抑制率分别为（33.7±3.1）%和（44.3±5.9）%,阳性药Ex-Rad的抑制率分别为（7.0±2.1）%和（35.4±4.1）%。结论在目标化合物中WT002和WT003显示出较强的PTK抑制活性,且活性高于同浓度的Ex-Rad。     

苯丙烯酰胺类化合物的合成及抗肿瘤活性研究

目的设计并合成一系列苯丙烯酰胺衍生物并考察其抗肿瘤活性。方法以4-氨甲基苯甲酸为原料合成一系列苯甲酰胺类组蛋白去乙酰化酶抑制剂。目标化合物经过1H-NMR、MS鉴定,且采用MTT法对其抗肿瘤活性进行了初步评价。结果与结论设计并合成了8个新化合物,其中3个化合物显示出良好的抗肿瘤活性,为进一步对抗肿瘤药物的结构优化奠定了一定的基础。