碘伏的细胞毒性研究

碘伏于50年代开始应用于临床以后,逐渐受到重视.特别是在1984年第三届国际抗感染会议上对碘伏的药理及临床应用进行了广泛的讨论,进一步推动该药在临床上的使用.作为一种新型、广谱、高效的消毒剂,以其确实的优点取代了一些临床上常用的消毒剂.本实验旨在研究碘伏对L929细胞的毒性作用,探索碘伏的浓度与作用时间对杀灭细胞的影响,为临床用药浓度提供理论依据.     

几种根管冲洗液对L929细胞毒性的实验研究

目的:采用MTT法比较臭氧水溶液与临床常用根管冲洗液对L929细胞的细胞毒性。方法:应用碘量法测定一种臭氧发生器产生臭氧水溶液的最高浓度。体外培养L929细胞,分别以2.15mg/L臭氧水溶液(实验测得最高浓度臭氧水溶液)、3%过氧化氢液、1%次氯酸钠和17%EDTA液作用于细胞6h、12h和24h,生理盐水作为空白对照组,采用MTT法检测不同时间不同组细胞增殖度,测定各组细胞活性。结果:试验用臭氧发生器所产生最高浓度臭氧水溶液浓度约2.15mg/L;MTT实验结果显示,2.15mg/L臭氧水溶液对L929细胞无明显细胞毒性,与阴性对照生理盐水组相比不具有统计学差异。而3%过氧化氢、1%次氯酸钠和17%EDTA液均具有显著的细胞毒性,且随时间延长表现出更强的细胞毒性。细胞毒性按1%次氯酸钠、3%过氧化氢、17%EDTA顺序递减。结论:2.15mg/L臭氧水溶液具有优良的生物相容性,细胞毒性显著低于临床常用的其他根管冲洗剂。     

3种义齿粘附剂的体外细胞毒性研究

目的:体外研究3种商品化义齿粘附剂的细胞毒性。方法:采用MTT法检测不同浓度义齿粘附剂浸提液对人原代口腔黏膜角质细胞、成纤维细胞和小鼠成纤维细胞系L929的细胞毒性。结果:3种义齿粘附剂对人原代口腔黏膜角质细胞有1~2级细胞毒性,对人原代口腔黏膜成纤维细胞有1级细胞毒性,对L929细胞却无毒性。高浓度义齿粘附剂浸提液一般比低浓度浸提液具有更强的细胞生长抑制作用。结论:义齿粘附剂对人原代口腔黏膜角质细胞和成纤维细胞有细胞毒性,对L929细胞却无细胞毒性,提示在义齿粘附剂的细胞毒性测试方面,人原代口腔黏膜细胞可能会提供更有价值的信息。     

氟化氨银添加谷胱甘肽后的细胞毒性及对牙齿着色的影响

目的 研究氟化氨银（silver diamine fluoride,SDF）添加谷胱甘肽（Glutathione,GSH）涂于牙齿后的细胞毒性及对牙本质着色的影响。方法 45个离体牙分成SDF组、SDF+20% GSH和空白组3组。每组15个样本,将暴露牙本质面涂药后,用电脑比色仪采集涂药后1 h、1 d、1周和1个月4个不同时间点的牙本质颜色值; CCK-8试剂盒评定SDF加20% GSH后对L929细胞毒性影响;将3组不同药物配制成适宜浓度培养L929细胞,最后用酶标仪检测吸光度值;倒置相差显微镜观察细胞生长形态。结果 电脑比色仪结果显示SDF组颜色改变最明显,且随时间延长着色明显加深,SDF+GSH组在各时间段可以明显降低牙釉质的着色程度,空白组各时间均未见牙齿颜色的改变;细胞毒性实验显示： 3组均没有细胞毒性作用。结论 SDF添加GSH涂于牙齿后可以降低牙本质着色,同时对L929细胞生长没有影响。     

根管冲洗剂次氯酸钠和氯亚明的细胞毒性

目的:评价次氯酸钠(NaOCl)和氯亚明溶液在相同有效氯浓度下的细胞毒性.方法: 按有效氯浓度为0.500 0%、0.250 0%、0.200 0%、0.150 0%、0.125 0%、0.062 5%分别配制NaOCl溶液和氯亚明溶液,使其与L929细胞接触2 h、30 min、10 min,用MTT法检测各组的细胞存活率.结果: 在所设定的浓度范围内,除高低两端组(0.500 0%-2 h及0.062 5%-30 min)外,细胞在其余各组NaOCl溶液中的存活率均大于氯亚明,差异有统计学意义(P<0.05).结论: 在0.250 0%以下的有效氯浓度范围,NaOCl溶液的细胞毒性小于氯亚明溶液.     

壳核型n-HA／ZrO2支架材料对L929细胞增殖活性的影响

目的研究核壳型纳米羟基磷灰石包覆二氧化锆（壳核型n-HA／ZrO2）复合生物陶瓷支架材料对L929细胞增殖活性的影响及细胞毒性反应。方法将L929细胞接种于96孔板,随机分为3组进行培养,实验组用壳核型n-HA／ZrO2支架材料浸提液处理,阳性对照组用苯酚溶液,阴性对照组用聚乙烯浸提液,于24、48、72h后观察细胞生长形态,通过MTT比色法检测各组细胞的相对增殖率（relative growth rate,RGR）,按GB／T16175-1996标准评价材料的细胞毒性。结果实验组L929细胞24、48、72h后的RGR随时间延长而升高,分别为95.86％、98.29％和102.73％,与阴性对照组L929细胞在增殖活性方面的差异无统计学意义,两组受试材料细胞毒性评级为0-I级。结论核壳型n-HA／ZrO2支架材料不影响L929细胞的增殖活性,无细胞毒性。     

六种纳米载银无机抗菌剂的体外细胞毒性比较

目的通过分析6种纳米载银无机抗菌剂不同浓度稀释液的体外细胞毒性，初步评价纳米载银无机抗菌剂的生物安全性。方法将载银磷酸锆（FUMAT T200-4）、载银磷酸复盐（HN300）、载银氢氧化钠锆（Novaron）、载银磷酸锆（康旺）、载银二氧化硅（MOD）、载银磷酸锆（SR1000）配置成100、50、25、12．5g/L 4种不同质量浓度的稀释液，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测各浓度稀释液对小鼠成纤维细胞L-929的体外细胞毒性并进行比较。结果6种纳米载银无机抗菌剂的高浓度稀释液对小鼠成纤维细胞L-929均有毒性，随着浓度下降，细胞毒性亦下降，当浓度≤25g／L时已无毒性。对6种纳米载银无机抗菌剂的体外细胞毒性进行比较，结果显示其安全性为FUMAT T200-4、康旺、SR1000〉HN300〉Novaron、MOD。结论纳米载银无机抗菌剂FUMAT T200-4、康旺及SR1000的生物安全性较好，具有作为口腔材料应用的可行性。在应用时，其浓度应≤25g／L，以确保对人体的安全性。     

控释性可注射牙槽骨修复材料中小分子单体的体外细胞毒性研究

目的：研究控释性可注射牙槽骨修复材料中小分子单体的体外细胞毒性。方法：用细胞培养液分别浸提4种小分子单体NVP、NMP、BPO、DMT 30 min和24h,配置成不同浓度的浸提液（0.1～100mg/ml）,将小鼠成纤维细胞（L-929）在浸提液中分别培养24h,通过Alamar Blue比色法,检测4种小分子单体对L-929细胞相对增值率的影响,评价其细胞毒性。结果：种小分子单体的细胞毒性均与时间及浓度有密切关系,浸提时间越长、浸提液浓度越高,其细4胞毒性越强。结论：控释性可注射牙槽骨修复材料中小分子单体的细胞毒性需受到重视,研制时应采取措施提高其生物相容性。     

5种牙本质粘结剂的细胞毒性研究

目的比较Clearfil S3 Bond和Single Bond,Clearfil SE Bond,XenoⅢBond,G Bond对L929细胞活力的影响。方法小鼠成纤维细胞L929在Clearfil S3 Bond,Single Bond,Clearfil SE Bond,XenoⅢBond,G-Bond五种牙本质粘结剂的不同体积分数浸渍液(100%、50%、25%、12.5%)作用不同时间(24 h、72 h、120 h)后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定细胞相对增值率(RGR);用5级毒性分类法评级,并进行统计分析。结果 5种牙本质粘结剂在不同体积分数浸渍液的作用下,L929细胞形态均发生不同程度的变化。在72 h、120 h后,12.5%Clearfil S3 bond组和Clearfil SE Bond组的RGR值显著高于其它各组的RGR值(P<0.05)。结论 5种牙本质粘结剂的体外细胞毒性均较弱,其中第7代牙本质粘结剂Clearfil S3Bond和第5代牙本质粘结剂Clearfil SE Bond的细胞毒性显著低于其他几种粘结剂,可以安全地应用于临床。     

钴铬钼合金对L929细胞生物学行为的影响

目的：研究牙科用钴铬钼合金对L929细胞生物学行为的影响。方法：制备医用纯钛、钴铬钼合金、钴铬合金、镍铬合金的浸提液,在浸提液与L929细胞作用24 、48 、72 h后,用倒置相差显微镜观察细胞的生长情况,并通过CCK-8实验评定4种材料的细胞毒性;采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI 双染法评价材料对细胞凋亡的影响;应用吖啶橙染色法检测L929细胞在材料表面的黏附情况;采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：倒置相差显微镜下观察,各时间点除镍铬合金组可见少量细胞核固缩,呈现轻微中毒状态外,其余3组细胞生长情况良好;钴铬钼合金组在各时间点的OD值、细胞凋亡率、细胞黏附数量均显著低于医用纯钛组(P<0.05),而高于钴铬合金组 (P<0.05)和镍铬合金组(P<0.05);观察期内,医用纯钛组、钴铬钼合金组、钴铬合金组细胞毒性均为1级,镍铬合金组为2级,表现为轻微毒性。结论：钴铬钼合金对L929细胞的生物学行为无明显不良影响,符合口腔生物材料的临床应用要求,具有良好的生物相容性。     

纳米Ag—SiO2颗粒对小鼠成纤维细胞（L-929）的毒性研究

目的：探讨纳米Ag—SiO2颗粒对小鼠成纤维细胞（L-929）的体外毒性作用。方法：使用透射电镜（TEM）对纳米颗粒进行表征;CCK一8法观察在24h、48h、72h不同浓度纳米颗粒对L-929细胞活性的影响;倒置显微镜观察染毒24h后细胞形态的改变,并检测细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）漏出率。结果：L-929细胞的生长活性随着纳米Ag—SiO2颗粒浓度的升高和染毒时间的延长而下降,低浓度组（6．25,12．5μg／mL）与对照组无明显差异,倒置显微镜下细胞形态正常,生长良好。而高浓度组（50,100μg／mL）与对照组有明显差异,透射电镜下观察细胞有明显的空泡变性,培养液上清中LDH活性明显升高。结论：纳米Ag—SiO2颗粒的体外细胞毒性呈剂量一时间依赖关系,低浓度组具有良好的生物相容性,高浓度组具有一定的细胞毒性,其毒性可能与细胞膜的完整性遭到破坏有关．     

新型碳纤维增强复合材料的细胞毒性评价

目的体外评价新型碳纤维增强复合材料的细胞毒性.方法选用建系的L929成纤维细胞进行体外细胞毒性实验,评价新型碳纤维增强复合材料对细胞增殖的影响.结果材料浸提液与L929成纤维细胞作用后的细胞增殖度为第2d 104%,第4d 104%,第7d 77%,毒性判定为1级,有良好的细胞相容性.结论新型碳纤维增强复合材料未见明显的细胞毒性作用.     

三种树脂粘接剂体外细胞毒性研究

目的：对三种不同树脂粘接剂的体外细胞毒性进行比较，以期为临床应用提供依据。方法：采用体外细胞培养技术和四唑盐显色(MTT)方法，将三种粘接剂浸提液与L929细胞接触2、4、7d后，用酶联免疫仪测定光吸收值，计算细胞相对增殖率，用五级毒性分类法评级，并统计分析。结果：4d及7d时Durafill Bond、Prime＆Bond NT毒性级1-2级，Clearfil SE Bond毒性级1级，三者之间有显著性差异，且有浓度、时间依赖性。结论：三种粘接剂有轻微细胞毒性，其中Clearfil SE Bond毒性最低。     

五种口腔粘接剂体外细胞毒性和可浸提物检测的实验研究

目的 检测并分析五种口腔粘接剂的细胞毒性和可浸提物.方法 小鼠成纤维细胞L929在五种样品的4种浓度浸提液(100％、50％、25％、12.5％)中作用24 h后,在光学显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测定细胞相对生存率(RGR);用气相色谱质谱联用法检测固化样品细胞培养基浸提液及固化样品中可浸提物及樟脑醌含量.结果...     

AlCoCrCuFeTix高熵合金细胞毒性评价及对L929细胞凋亡与Ⅰ型胶原合成的影响

目的　评价AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性。方法　对AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金进行MTT毒性实验评价其细胞毒性;流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法评价其对L929细胞凋亡影响;免疫荧光染色检测各组L929细胞Ⅰ型胶原的合成水平来评价该系列材料对细胞增殖的影响。结果　随着Ti元素的递增,AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性增大,凋亡率呈上升趋势,而L929细胞的Ⅰ型胶原蛋白表达水平下降。实验表明AlCoCrCuFe此种金属具有良好的细胞相容性,细胞毒性各时间点评级均为1级,且凋亡率与Ⅰ型胶原蛋白表达水平与空白对照组无明显差异。结论　AlCoCrCuFeTix系列高熵合金中的AlCoCrCuFe具有良好的细胞相容性,可初步满足医疗器械使用的基本要求。     

HPC和L929细胞在修复粘结剂体外毒性评价中灵敏度的比较研究

目的：通过原代培养的人牙髓细胞（HPC）和L929细胞系,对两种树脂改良型玻璃离子粘结剂的体外细胞毒性评价,比较两种细胞的灵敏度,为口腔材料的体外评价建立更接近临床的评价体系。方法：制取Fujiplus和RelyX Luting两种材料浸渍液,实验组为材料的浸出原液、50%原液、25%原液,对照组为DMEM培养基,分别利用原代培养的牙髓细胞和L929细胞系对实验组和对照组进行细胞形态观察、MTT测定细胞相对增值率。结果：树脂改良型玻璃离子粘结剂的体外细胞毒性评价中,和选择的细胞有关,原代培养的牙髓细胞较L929细胞系敏感。结论：原代培养的人牙髓细胞可能较L929细胞系更适用于口腔粘材料的体外毒性评价。     

过氧化脲漂白剂的体外细胞毒性研究

目的:评价不同增稠载体过氧化脲漂白剂的细胞毒性,并与同类商品漂白剂进行比较.方法:采用琼脂覆盖法通过直径5咖的滤膜圆片,分别评价以Carbopol或PVP为增稠载体的100 g/L、200 g/L过氧化脲漂白剂及同种浓度Opalescence漂白凝胶对L929小鼠成纤维细胞的毒性作用.结果:以Carbopol或PVP为增稠载体的100g/L、200 g/L CP漂白剂和Opalescence 100 g/L、200 g/LCP漂白凝胶的细胞毒性均为2级,中度毒性.结论:不同增稠载体的过氧化脲漂白剂和Opalescence漂白凝胶的细胞毒性没有显著差别.     

钴离子对人肾小管上皮细胞毒性及Bax、Bcl-2基因表达变化的实验研究

目的:研究Co²⁺对人肾小管上皮细胞的毒性及对凋亡基因Bax、Bcl-2表达变化的影响。方法:体外培养肾小管上皮细胞,以5种浓度(0~10 μmol/L)的Co²⁺培养液培养细胞12 h、24 h、48 h。倒置显微镜下观察和记录细胞生长状态,采用MTT法检测各培养组在不同时间点的细胞增殖率,RT-PCR 法检测各培养组在不同时间点Bax、Bcl-2的表达变化,以评价Co²⁺的细胞毒性。结果:当Co²⁺作用浓度在7.5 μmol/L以下,观察时间内对细胞无毒性;在7.5 μmol/L以上时,刺激24 h以后对细胞有轻度毒性。随着Co²⁺作用浓度和时间的增加,各实验各组Bax mRNA表达量逐渐上调,Bcl-2 mRNA表达量逐渐下调,Bax/Bcl-2的比值升高。结论:Co²⁺抑制肾小管上皮细胞的增殖,低浓度Co²⁺对肾小管上皮细胞不存在毒性作用,高浓度时(≥7.5 μmol/L对细胞有轻度毒性,诱导细胞发生凋亡。     

多孔磷酸三钙的细胞毒性研究

目的 体外研究多孔磷酸三钙的细胞毒性。方法 选用建系的L929成纤维细胞和原代培养的人类成骨细胞进行实验；采用MTT测试法研究多孔磷酸三钙对细胞增殖的影响。结果 不同浓度的材料浸提液与成骨细胞作用后的细胞增殖率均高于100％，有良好的细胞相容性。结论 多孔磷酸三钙无细胞毒性作用。     

增塑淀粉的细胞毒性实验

目的：测试增塑淀粉的生物安全性。方法：采用一种能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法-MTT比色法,检测该材料对小鼠成纤维细胞L929细胞相对增殖率的影响,评价其细胞毒性。结果：按照GB／T16175—1996标准,增塑淀粉在3个观察点的细胞相对增值率：2d为85．63％,4d为82．22％,7d为113.05％,相对增值率随时间延长而升高,该材料的细胞毒性为0—1级。结论：增塑淀粉无明显细胞毒性。