微阵列技术筛选肺鳞癌分子标志物的研究

目的 研究肺鳞癌基冈表达谱,筛选肺鳞癌的差异表达基因。方法 利用cDNA微阵列技术研究6个分期为Ⅰ期的手术切除鳞癌标本的基因表达谱,找出在6个基因表达谱中均呈上调或下调的基因,并选择其中表达上调的nm23与表达下调的BRCA2基因,利用免疫组化方法进行验证。结果 共有107个基因在全部6个肺鳞癌标本中出现差异表达,其中26个表达上调,81个表达下调。nm23蛋白在加个肺鳞癌标本中表达增强,而BRCA2则呈低表达,与cDNA微阵列技术检测结果相符。结论 cDNA微阵列技术可用于肺鳞癌差异表达基因的研究,利用多张微阵列芯片重复筛选出的差异表达基因可初步作为肺鳞癌的候选分子标志物。     

苦参碱对K562细胞UCHT基因表达的影响

[目的]利用凋亡相关基因芯片研究苦参碱对K562细胞基因表达谱的影响，以揭示苦参碱抗肿瘤作用的分子机制。[方法]苦参碱0．4mg/ml作用K562细胞48h后，分别提取对照组和处理组细胞总RNA，采用Superarray公司GEArray Q Series Human Apoptosis Gene Array（HS-002）芯片（含96个凋亡相关基因）筛选出苦参碱作用细胞后的差异表达基因．并用RT-PCR验证其中的LIGHT基因表达的变化。[结果]0．4mg／ml苦参碱作用K562细胞48h后，芯片结果显示37个基因的差异表达在2倍以上，其中表达下调为32个，表达上调为5个。RT-PCR验证了苦参碱对LIGHT基因表达上调的影响。[结论]苦参碱作用K562细胞可上调LIGHT基因的表达。     

凋亡相关基因在喉鳞癌中的表达概况

目的了解凋亡相关基因在喉鳞状细胞癌中的表达概况，探寻其在喉鳞癌及正常喉组织中的表达差异及意义。方法提取喉鳞癌及癌旁正常喉组织的总RNA，采用Ampolablaleing—LRP方法，分别将上述提取的RNA合成生物素标记的cDNA探针。将合成的探针与细胞凋亡GEArray Q芯片膜（96个凋亡相关基因）进行杂交。采用化学发光方法，并用X感光片记录喉鳞癌标本和对照标本的基因信号表达强弱。将X光片感光点转化成TIFF图形文件，使用ScanAlyze和GEArray Analyzer软件进行资料分析。结果利用基因芯片杂交筛选的方法，在所分析的与凋亡相关的96个基因中，survivin、bcl-2、TNF-β／Lta、TNF-α等23个基因在喉鳞癌组织中表达上调；hak、hax、hik、p53等22个基因表达下调。结论通过细胞凋亡GEArray Q芯片膜杂交筛查的方法发现，在喉鳞癌中抑制凋亡的基因表达上调，促进凋亡的基因表达下调，这些基因改变组成了喉鳞癌特异的与凋亡相关的基因表达谱，为全面系统地研究喉鳞癌中与凋亡相关基因表达情况，及探讨喉鳞癌的发病机制提供了有益的线索。     

利用微阵列技术初步分析肺鳞癌组织中的基因表达谱

目的：初步了解肺鳞癌及癌旁组织的基因表达谱的改变并探讨cDNA微阵列表达分析滤膜在肿瘤研究中的应用价值。方法：提取鳞癌及癌旁组织总 RNA，逆转录成α-^32 P-dATP标记的cDNA探针，与含有588个肿瘤要关基因的Atlas^TM Human Cancer cDNA Expression Array杂交。放射自显影后利用扫描杂交信号灰度的强弱在专用的AtlasImage^TM软件分析后得出结果。结果：肺鳞癌组织中，肿瘤坏死因子受体（ TNFR）等16个基因表达上调，白介素－13前体等8个基因表达下调。结果：肺鳞癌组织中，肿瘤坏死因子受体（TNFR）等16个基因表达上调，白介素－13前体等8个基因表达下调。结论：肺鳞癌恶性表型是由其发生过程中多个基因表达的复杂变化决定的。Atasa微陈列表达分析滤膜是研究基因表达谱的较好方法。     

基因表达谱芯片在人直肠腺癌相关基因筛选中的应用研究

[目的]用基因表达谱芯片研究直肠腺癌和正常直肠黏膜基因表达差异，筛选直肠腺癌相关基因。[方法]分别抽提直肠腺癌和正常直肠黏膜的总RNA；通过逆转录方法将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两组cDNA上，制成探针；利用这种cDNA探针与含有4096条人类基因PCR产物的表达谱芯片进行杂交。扫描芯片荧光信号图像。计算机分析后比较两种组织中差异表达的基因。[结果]通过基因芯片筛选，在4096条基因中，直肠腺癌和正常直肠黏膜差异表达显著的基因共有121条(2．95％)，其中上调的85条（2．075％)，下调的36条（0．879％)，上调和下调的基因中各有2条为新基因。[结论]直肠腺癌基因差异表达谱的分析可为直肠癌的诊断、治疗和预防提供新的思路和线索。     

CXCR4基因在食管鳞癌患者术后早期复发转移中表达的研究

[目的]评价CXCR4基因在食管鳞癌术后早期复发转移患者中的表达。[方法]选择43例术后早期复发转移食管鳞癌标本、46例术后1年内未发生复发转移食管鳞癌标本和17例正常食管组织标本,应用RT-PCR和Western Blot方法检测标本中CXCR4基因mRNA和蛋白的表达情况。[结果]与术后1年内未发生复发转移食管鳞癌组织和正常食管组织相比,术后早期复发转移食管鳞癌标本CXCR4基因的mRNA和蛋白的表达存在明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]在食管鳞癌组织中CXCR4基因表达的改变可能与肿瘤复发转移有关。     

基因芯片筛选食管鳞癌患者癌及切缘组织差异表达基因

[目的]探讨食管鳞癌（ESCC）患者癌组织的基因表达谱,进一步寻找在ESCC及切缘组织中差异表达的基因。[方法]取3例无ESCC家族史患者癌及切缘组织等量混合．抽提RNA,将RNA逆转录合成相应cDNA,以Cy5和Cy3标记cDNA作为探针,在含有14000点人类基因组芯片（BiostarH-140s）上进行杂交。用scanarray4000扫描仪扫描芯片荧光信号图象．用GenePix Pro3．0软件对扫描图象进行数字化处理和分析．[结果]依Ratio（cy5／cy3）〉2．0或〈0．5的数据项为差异表达的基因分别为1855个。含表达序列标签fESn844个,下调基因378个,上调基因466个。在1011个已知功能的基冈巾,下调基因560个．上调基因451个。包含各类功能基因．同时与6例具家族史ESCC组织差异基因进行了初步分析．结果初步表明有和无家族史患者基因表达谱不完全相同．经与NCBI基因库比对．有8个基因相同,且异常表达与报道相符,[结论]基因芯片是一高效筛选食管癌相关基因的方法。在ESCC的发生、发展中,存在着大量异常表达基因．     

食管鳞癌形成中基因表达谱的研究

[目的]初步了解食管鳞癌形成中5个不同时期（正常、食管上皮不典型增生Ⅰ级、食管上皮不典型增生Ⅱ级、食管原位鳞癌和食管鳞癌）的基因表达谱,并探讨cDNA微点阵技术在肿瘤研究中的应用价值。[方法]收集上述5种不同病理类型的组织标本,提取总RNA,逆转录合成cDNA探针,分别与cDNA微点阵膜杂交,随机挑选8个EST片段,分别以杂交样品和配对组织标本总教育界模板完成RT-PCR以验证杂交结果的准确性,用专用软件分析得到各位点光密度值,将此数值标准化后进一步比较分析。[结果]对于杂交样品和配对组织标本,都是6个EST片段的RT-PCR结果与其杂交结果一致,数据分析显示,正常时期和其他各期相比分别有492,481,473和501个基因的表达改变了2倍及2倍以上,其中386个基因在4个异常时期均表达下调,而其他各期之间相比,大多数基因的表达无明显改变,还观察了一些已知的肿瘤相关基因在5个不同时期的表达状况。[结论]本实验再一次证实食管上皮不典型增生Ⅰ级是食管鳞癌形成的一个早期阶段。利用cDNA微点阵技术将有望发现导致食管鳞癌形成的关键基因,为临床早期诊断、治疗和预防提供新的线索。     

具有转移能力鼻咽癌细胞株候选抗药与多药耐药相关基因的筛选

目的 筛选具有转移能力的鼻咽癌细胞株中候选抗药与多药耐药相关基因.方法 利用8000点的基因芯片比较5-8F和6-10B细胞株之间的差异表达基因,并利用在线MILANO程序分析,筛选抗药与多药耐药相关基因.半定量RT-PCR验证差异表达基因.结果 分析5-8F和6-10B细胞株之间基因表达谱后,共找到283个差异表达基因,其中表达上调基因185个,下调基因98个.MILANO程序分析后,在5-8F细胞株中找到4个可能与抗药和多药耐药相关的高表达基因:UGT1A9(15.85倍)、MVP(6.77倍)、CAV1(2.49倍)和HIF1A(2.67倍).半定量RT-PCR验证4个基因筛选结果的可靠性.结论 经在线MILANO程序分析鉴定的鼻咽癌5-8F和6-10B细胞株之间的差异表达基因可能与具有转移能力鼻咽癌细胞株的抗药和多药耐药有关.     

胃癌患者外周血与癌组织基因差异表达比较

[目的]利用基因芯片技术筛选与早期胃癌癌变相关的基因.[方法]用U133A基因芯片分别检测胃癌组(T)、癌旁上皮组(P)和切缘正常胃黏膜上皮组(C)及胃癌患者外周血(WB)和正常对照组外周血(NB)的基因表达谱,对荧光强度进行扫描并数字化,用专业软件对检测结果进行分析.[结果]胃癌、癌旁和正常胃黏膜上皮相比,有327个基因共同表达上调,211个基因共同表达下调.胃癌和癌旁上皮同时有差异表达的基因中,在外周血也有差异表达,其中同时表达上调有39个,同时表达下调有4个.[结论]虽然在癌旁上皮病理组织图像上尚未见异常,但在基因表达水平上已经显示有多个与胃癌相关基因表达.尤其在患者外周血有核细胞的基因表达中,也发现某些基因与胃癌及癌旁基因差异表达正相关.提示这些基因可能与早期胃癌的启动和演化有关,通过外周血有核细胞基因芯片检查可能早期发现胃癌患者,提高患者的治愈率.     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。