戊肝IgG抗体ELISA试剂盒诊断价值的评价

目的:评价戊肝IgG抗体ELISA诊断试剂盒的诊断价值.方法:用自行研制的戊肝.IgG抗体ELISA试剂盒作为诊断方法,检测了不同来源的人血清标本,考核其敏感性、特异性、重复性和稳定性,并与国内外同类试剂盒检测结果进行了比较和评价.结果:自行研制的戊肝IgG抗体ELISA试剂盒敏感性和特异性均为100%,并且重复性好,在4℃C可至少稳定6m,与同类试剂盒的符合率为91.3%.结论:自行研制的戊肝IgG抗体ELISA试剂盒具有良好的诊断价值,适用于临床戊型肝炎的诊断和流行病学调查.     

肠出血性大肠埃希菌O157：H7引起的溶血性尿毒综合征患者血清抗体调查

目的 对1999年某地出现的一批先有腹泻病症状后继发急性肾功能衰竭（肾衰）的患者进行血清学调查和诊断。方法 使用基因克隆表达纯化的肠出血性大肠埃希菌（EHEC）-溶血素（Hly)和EHECO157脂多糖（LPS）为抗原，对采集自42例肾衰患者的血清标本进行蛋白印记试验。结果 EHEC-Hly的检测发现，IgG抗体阳性21份，阳性率50.0%；IgM抗体阳性16份，阳性率38.1%；在11份标本中同时检测到IgG和IgM抗体，阳性率26.2%；检测到IgG或IgM抗体阳性的标本26份，阳性率61.9%，EHECO157LPS的检测发现，24份标本分别检测到IgG和IgM抗体，阳性率各为57.1%；在29份标本中检测到IgG或IgM抗体，阳性率69.0%;在20份标本中检测到IgG和IgM抗体，阳性率47.6%，在42份血清标本中同时检测到EHEC-Hly和O157LPS的特异性抗体的标本22份，阳性率52.4%；检测到EHEC-Hly或O157LPS的特异性抗体的标本34份，阳性率81.0%。结论 结合细菌学和血清学诊断结果，临床症状和流行病学分析。可以认为这些患者感染了EHECO157：H7，在分离不到病原菌的情况下，检测患者血清标本的EHEC-Hly和/或EHECO157LPS的特异性抗体，不失为一种可以考虑的诊断方法。     

一起麻疹暴发的调查研究

目的:了解IgG与IgM抗体检测以及病毒分离培养的结果对麻疹病例诊断的作用。方法:应用商品ELISA试剂盒检测可疑病人血清中的麻疹特异性IgG与IgM抗体;应用细胞培养法分离培养可疑病人早期咽拭子中的麻疹病毒。结果:应用双份血清检测麻疹特异性IgG抗体的方法,一个暴发点的22名发热患者中11人确诊为麻疹,其中5人IgM抗体阳性、2人分离出麻疹病毒(其中1人IgM抗体阴性)。结论:IgM抗体检测对麻疹病例诊断漏诊率相当高,病毒分离培养法漏诊率更高,可靠的方法是检测双份血清中的IgG抗体。     

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7引起的溶血性尿毒综合征患者血清抗体调查

目的　对 1999年某地出现的一批先有腹泻病症状后继发急性肾功能衰竭 (肾衰 )的患者进行血清学调查和诊断。方法　使用基因克隆表达纯化的肠出血性大肠埃希菌 (EHEC) -溶血素(Hly)和EHECO15 7脂多糖 (LPS)为抗原 ,对采集自 4 2例肾衰患者的血清标本进行蛋白印记试验。结果　EHEC Hly的检测发现 ,IgG抗体阳性 2 1份 ,阳性率5 0 .0 % ;IgM抗体阳性 16份 ,阳性率38.1% ;在 11份标本中同时检测到IgG和IgM抗体 ,阳性率2 6 .2 % ;检测到IgG或IgM抗体阳性的标本 2 6份 ,阳性率 6 1.9%。EHECO15 7LPS的检测发现 ,2 4份标本分别检测到IgG和IgM抗体 ,阳性率各为 5 7.1% ;在 2 9份标本中检测到IgG或IgM抗体 ,阳性率6 9.0 % ;在 2 0份标本中检测到IgG和IgM抗体 ,阳性率4 7.6 %。在 4 2份血清标本中同时检测到EHEC Hly和O15 7LPS的特异性抗体的标本 2 2份 ,阳性率 5 2 .4 % ;检测到EHEC Hly或O15 7LPS的特异性抗体的标本 34份 ,阳性率81.0 %。结论　结合细菌学和血清学诊断结果、临床症状和流行病学分析 ,可以认为这些患者感染了EHECO15 7∶H7。在分离不到病原菌的情况下 ,检测患者血清标本的EHEC Hly和 /或EHECO15 7LPS的特异性抗体 ,不失为一种可以考虑的诊断方法     

江苏省传染性非典型肺炎病原学检测研究

目的:建立传染性非典型肺炎(SARS)实验室检测方法,为SARS病例诊断和现场防治提供依据。方法:用逆转录套式PCR、实时荧光定量PCR检测SARS病毒核酸;酶联免疫法检测血清标本SARS病毒IgM抗体;部分PCR检测阳性或SARS病毒IgM抗体阳性病例的标本进行直接电镜观察;简并引物PCR检测冠状病毒属病毒核酸;鉴别诊断IFA检测血清中肺炎支原体等9种常见呼吸道感染病原IgM抗体,PCR检测军团菌以及甲、乙型流感病毒核酸。结果:检测各类临床标本506份。2003年全省报告临床诊断病例7例,5例检测结果阳性;逆转录套式PCR检测各类标本132份,阳性8份;对其中4份PCR扩增产物(108bp)进行了序列分析,与SARS病毒序列100%同源;实时荧光定量PCR检测各类标本30份,阳性3份;酶联免疫法检测血清标本101份,SARS病毒IgM抗体阳性4份;3个诊断病例的各类标本电镜检查发现冠状病毒样颗粒;IFA检测血清标本75份,嗜肺军团菌IgM抗体阳性9份,乙型流感IgM抗体阳性11份,两者同时阳性3份,其他病原体IgM抗体均为阴性。不明发热病例的标本21份简并引物PCR检测冠状病毒,2份咽拭子标本阳性;漱口液、尿液标本各15份PCR检测军团菌、漱口液25份PCR检测甲、乙型流感病毒结果均为阴性。结论:本研究建立的检测方法与临床诊断有比较好的符合性,对于临床诊断和防治工作具有重要的参考价值。PCR检测SARS-CoV特异性较好,而敏感性有待提高。     

使用EIA方法检测梅毒特异性抗体IgM,IgG

目的 检测梅毒特异抗体IgM,IgG,以了解梅毒感染的阶段,亦能观测抗梅毒治疗的效果.材料方法使用DiaSorinELA试剂盒对69份梅毒RPHA阳性标本(2000/01-2000/06)进行梅毒特异性抗体IgG,IgM检测.结果 IgG抗体阳性68例;其中IgM,IgG抗体均阳性9例;IgM抗体不确定1例;IgM,IgG抗体为阴性1例;IgM阳性IgG不确定1例.结论 使用ELA方法可以直接检测抗梅毒特异抗体IgM,IgG,较传统RPR,TRUSI,TPHA方法而言,能对抗体分型,能提示梅毒感染的各阶段,具有高特异性和高敏感性,对诊断、治疗更有益.     

酶联免疫法检测风疹病毒急性感染结果分析

目的探讨酶联免疫法在诊断风疹病毒急性感染中的应用。方法对2100例无偿献血者血浆样本分别检测风疹病毒IgM抗体、IgG抗体,对IgM抗体阳性和IgM抗体阴性且IgG抗体阳性的样本检测其IgG抗体亲合力。结果 2100例样本中,风疹病毒IgM抗体阳性率为0.76%,IgG抗体阳性率为78.67%,447例样本个体风疹病毒IgM抗体和IgG抗体均为阴性。在对IgM抗体阴性且IgG抗体阳性的样本进行IgG抗体亲合力检测时,有19例样本为低亲合力,可判定为原发性感染。在对IgM抗体阳性的样本进行IgG亲合力检测时,样本SZ0259和SZ1490IgM抗体为可疑值,IgG抗体阳性,IgG抗体高亲合力,可能由于IgM抗体常年保持低水平,并非正处于风疹病毒急性感染期。最终确定风疹病毒急性感染的样本为33例,感染率1.57%。结论可同时检测风疹病毒IgM抗体和风疹病毒IgG抗体亲合力来诊断风疹病毒感染,IgM抗体阳性或IgG抗体低亲合力的样本均可判定为风疹病毒急性感染。     

IgG与IgM抗体测定在麻疹病例确诊中的作用

目的了解IgG与IgM抗体检测以及病毒分离培养的结果对麻疹病例诊断的作用。方法应用商品ELISA试剂盒检测可疑病人血清中的麻疹特异性IgG与IgM抗体;应用细胞培养法分离培养可疑病人早期咽拭子中的麻疹病毒。结果应用双份血清检测麻疹特异性IgG抗体的方法,一个暴发点的22名发热患者中11人确诊为麻疹,其中5人IgM抗体阳性、2人分离出麻疹病毒(其中1人IgM抗体阴性)。结论 IgM抗体检测对麻疹病例诊断漏诊率相当高,病毒分离培养法漏诊率更高,可靠的方法是检测双份血清中的IgG抗体。     

登革热抗体快速免疫色谱测试卡同步检测登革病毒IgM和IgG抗体的试验

用登革热抗体快速兔疫色谱测试卡检测35份已确诊的登革热急性期患者血清,其中34份IgM抗体阳性,检出率97.14％;而用间接免疫荧光试验(IFA)检测同样的标本,32份IgM抗体阳性,检出率为91.29％,二者检出率无显著性差异(x~2=1.06,P>0.05)。应用登革热抗体快速免疫色谱测试卡检测32份确诊登革热恢复期患者血清,其中32份IgG抗体阳性,检出率为100％;同时用IFA检测,29份IgG抗体阳性,检出率为90.62％,二者检出率无显著性差异(x~2=1.39,P>0.05)。用登革热抗体快速免疫色谱测试卡检测非登革血清94份,其中IgM抗体阳性1份,IgG抗体阳性 3份,检出率分别为 1.06％和 3.19％。此法检测登革病毒 IgM和IgG抗体,操作简便、快速、敏感,可作为登革热筛选试验。     

陕西省2005～2006年流行性乙型脑炎报告病例实验室复核检测

目的 对陕西省2005～2006年流行性乙型脑炎(乙脑)报告病例标本进行复核检测,并对乙脑阴性标本检测其它病毒性脑炎病毒IgM抗体.方法 对陕西省两年乙脑报告病例的血清及脑脊液标本,用两种国产乙脑病毒IgM抗体捕获酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒,澳大利亚Panbio公司生产的乙脑/登革病毒IgM抗体ELISA试剂盒,以及间接免疫荧光方法进行复核检测,并用10种引起病毒性脑炎病毒的IgM抗体ELISA检测试剂盒检测乙脑阴性标本.结果 陕西省2005～2006年送检的9I份标本中,乙脑病毒IgM抗体阳性54份,乙脑病毒IgM抗体检测复核一致率分别为92.68%和100%.24份乙脑病毒IgM抗体阴性血清标本中,13份对7种其它病毒性脑炎病毒的IgM抗体阳性,总检出率为21.67%.结论 陕西省乙脑报告病例的实验室检测复核一致率较高,乙脑检测阴性病例中可能有其它脑炎病毒感染,提高乙脑报告病例的实验室检测率非常重要.     

酶联免疫法检测弓形体感染初探

目的酶联免疫法正确有效诊断弓形体急性感染。方法对4 500例无偿献血者血浆样本分别检测弓形体IgM抗体、IgG抗体,对IgM抗体阳性和IgM抗体阴性且IgG抗体阳性的样本检测其IgG抗体亲合力。结果 4 500例样本中,弓形体IgM抗体阳性率为0.51%,IgG抗体阳性率为1.53%。其中22例为IgM（＋）IgG（＋）,1例为IgM（＋）IgG（-）,47例为IgM（-）IgG（＋）,4 430例为IgM（-）IgG（-）。在对69例弓形体IgG（＋）的样本进行IgG亲合力检测时,IgM（＋）IgG（＋）的22例样本中2例为IgG中等亲合力抗体,3例为IgG高亲合力抗体,但这5例样本的IgM抗体均为可疑,可能由于IgM抗体常年保持低水平,并非正处于弓形体急性感染期;IgG（＋）IgM（-）的47例样本中,3例为IgG低亲合力抗体,可能由于其中的弓形体IgM抗体在急性感染期后期,IgM抗体滴度太低无法检测到,仍可判定为处于急性感染期。最终确定弓形体急性感染的样本为20例,感染率0.44%。结论可同时检测弓形体IgM抗体和弓形体IgG抗体亲合力来诊断弓形体感染,IgM抗体阳性或IgG抗体低亲合力的样本均可判定为弓形体急性感染。     

乳胶凝集法检测麻疹IgM抗体的应用

为了筛选敏感、特异、快速和经济的麻疹IgM抗体检测方法 ,比较了IgM抗体捕捉乳胶凝集法 (IgM PA)、IgM抗体捕捉酶联免疫吸附试验 (ELISA)法和IgM抗体间接ELISA法检测麻疹血清IgM抗体的优越性。用IgM PA法和两种ELISA法共检测 12 5份麻疹可疑病例和 30份正常儿童血清。结果表明 :三种方法检测 30名健康儿童血清均为阴性。检测 12 5份麻疹可疑病例血清 ,IgM PA检出阳性 80份 ,阳性检出率 6 4%;两种ELISA法检出阳性 75份 ,阳性检出率 6 0 %;两者差异无显著的统计学意义。IgM PA法检测可疑麻疹病人的敏感性为 10 0 %,特异性为 90 %。此方法操作简便 ,成本较低 ,适宜于地区和县级疾病预防控制机构应用。     

63例麻疹病例血清学检测结果分析

[目的]探讨莆田市麻疹流行规律,为控制麻疹流行提供依据。[方法]63份疑似麻疹血清标本,用ELISA法检测麻疹IgM、IgG抗体。[结果]麻疹IgM、IgG抗体阳性23例,阳性率为36．5％。[结论]对疑似麻疹病例进行血清学鉴别诊断,可提高麻疹监测质量。     

SARS-CoV特异性抗体产生规律的初步研究

目的 研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者感染后体内病毒特异性抗体产生规律。方法 收集临床确诊为SARS患者的血清和非SARS人群血清标本,用IgM捕获法、间接法和抗原夹心法三种不同方法检测抗SARS病毒特异性IgM、IgG和总抗体。结果 检测146份临床诊断为SARS的患者不同发病时间血清标本,三种抗体阳性率分别为61.64％、53.43％和69.86％;SARS病毒特异性IgM、IgG抗体的最早检出时间分别在发病第7天和第12天,特异性IgM抗体最短在发病后42天消失。三种方法检测70份甲型肝炎患者血清时,均有2份非特异阳性反应,检测127份其他病种血清均阴性,1例密切接触SARS患者的医务人员SARS特异性IgG抗体和总抗体均阳性,三种检测方法均不受类风湿因子影响。结论 与其他病毒感染相比,SARS病毒感染者的特异性IgM抗体检出时间较晚,且持续时间较短;三种检测方法均有较好的特异性和敏感性,可用于SARS的流行病学调查和临床诊断的确认和补充,但不适用于SARS的早期诊断。     

间接免疫荧光法在检测SARS冠状病毒特异性抗体中的应用

目的 利用间接免疫荧光技术(IFA)建立SARS冠状病毒(SARS—CoV)特异性抗体血清学诊断方法。方法 采用组织培养技术，用SARS病人的咽漱液样本，在Vero—E6细胞中培养，分离SARS冠状病毒；用已制备的SARS病毒抗原片与临床确诊为SARS的病人双相血清和正常人对照血清作用，再用荧光标记羊抗人IgM/IgG抗体与之结合，在荧光显微镜下观察荧光图像。结果 通过建立检测SARS冠状病毒特异性抗体的间接免疫荧光方法，在44份SARS临床病例标本中，检出IgG抗体阳性3l份，与临床诊断符合率为70．45％。31份IgG阳性者的急性期血清中IgM检出率为38．70％，IgM最早产生于发病第3天，发病7d以上的6例的IgM抗体均为阳性，滴度在发病12～15d达到高峰(1：80)；恢复期血清中IgG抗体最早产生于发病第8天，滴度在发病15～20d达到高峰(1：320～1：640)。97份正常人的血清标本中IgG抗体阳性率为3．09％，IgM抗体为阴性。结论 利用此方法，证实被SARS冠状病毒感染后，在机体中产生有特异性的IgM／IgG抗体；本方法检测结果与临床诊断符合率较高，可以用于早期临床诊断SARS病毒感染和辅助临床做出鉴别诊断。     

肺炎嗜衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白的表达与临床应用

目的探讨肺炎嗜衣原体(CPN)蛋白酶样活性因子(CPAF)重组蛋白在CPN感染实验室诊断中的应用价值。方法构建CPAF免疫优势区基因重组质粒,诱导表达并纯化重组蛋白,分析其抗原特异性;间接ELISA法检测CPN参考血清、临床血清标本中的特异性IgM和IgG抗体,以及沙眼衣原体(Ct)阳性血清。结果高效表达和有效纯化出一相对分子质量(Mr)约为5.13×103的特异性重组蛋白;间接ELISA法测定用其免疫兔血清中的特异性IgG和IgM抗体效价,分别高达1∶16 000和1∶8 000;检测Cpn IgM和IgG参考血清,阴性和阳性结果符合率均为100.0%;与"金标准"方法MIF比较,检测300份呼吸道感染患者抗血清,IgMI、gG符合率分别为98.3%、99.0%;检测Ct阳性参考血清和阳性临床血清标本,无阳性结果。结论表达的CPN CPAF免疫优势区重组蛋白具有良好的抗原性,在CPN感染的实验室诊断中具有较高的应用价值。     

新型冠状病毒感染核酸和抗体检测方法比较

目的比较实时荧光RT-PCR法和胶体金法在新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染中的诊断价值。方法本研究采用回顾性研究,收集无锡市各医疗机构及集中隔离点2020年1月25日—2020年2月12日送至无锡市疾病预防控制中心实验室的新型冠状病毒冠肺炎(COVID-19)相关的实验室检测血清标本和鼻咽拭子标本各192份。33份为核酸检测阳性样本,159份为核酸检测阴性样本,包括68例确诊患者的密切接触者和91例门诊发热病例样本。采用胶体金法对所有研究对象的血清进行IgM、IgG抗体检测,比较抗体检测和核酸检测结果,进行统计学差异分析。结果病毒核酸阳性率17.19%(33/192),IgM抗体阳性率7.29%(14/192),IgG抗体阳性率11.46%(22/192),IgM和IgG联合检测阳性率11.46%(22/192)。病毒核酸和IgM、IgG、联合IgM和IgG抗体检测结果分别进行Kappa一致性检验,一致性较好,Kappa值分别为0.502、0.726、0.726,P值均0.001。两种检测方法总符合率93.23%(179/192)。以实时荧光RT-PCR法为金标准,联合IgM和IgG抗体检测灵敏度63.64%,特异度99.37%,阳性预测值95.45%,阴性预测值92.94%,准确度63.01%。结论胶体金法具有方便、快捷、灵敏度和特异度高等优点,实现SARS-CoV-2的快速筛查,可用作实时荧光RT-PCR检测阴性病例的补充检测。两种检测方法联合应用,发挥各自优势,对SARS-CoV-2感染的诊断和防控具有重要的意义。     

双抗原夹心免疫层析法在新型冠状病毒感染诊断中的应用

目的:探讨双抗原夹心免疫层析法抗体检测在新型冠状病毒(2019-nCoV)感染中的诊断价值。方法:选取在医院就诊的179例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者为临床诊断阳性病例,另选同期就诊的85例确诊未感染2019-nCoV患者为临床诊断阴性病例。采用基于双抗原夹心法的胶体金免疫层析法和上转发光免疫层析法进行血清总抗体(IgG、IgM和IgA)检测,分析两种方法2019-nCoV总抗体(IgG、IgM和IgA)检测结果与临床诊断的灵敏度、特异度和总符合率。结果:建立针对2019-nCoV抗体检测的双抗原夹心免疫层析方法,胶体金免疫层析法检测血清2019-nCoV总抗体(IgG、IgM和IgA)与临床诊断的灵敏度、特异度和总符合率分别为97.77%、100%和98.48%;上转发光免疫层析法分别为98.88%、100%和99.24%。两种检测方法检测血清2019-nCoV总抗体(IgG、IgM和IgA)的总符合率与临床诊断结果比较,差异有统计学意义(χ²=246.5,χ²=225.0;P<0.05)。结论:双抗原夹心法对于2019-nCoV抗体检测具有重要应用价值。     

一起布鲁氏菌病家庭聚集性病例调查分析

目的通过对新罗区西城2014年一起布鲁氏菌病家庭聚集性病例疫情的调查分析,为布鲁氏菌病防控提供科学依据。方法采用现场流行病学调查方法,对病例发病情况及感染来源进行分析,应用ELISA法对采集的血液标本进行布鲁氏菌抗体IgG、IgM检测。结果本次疫情共发现3例家庭聚集性布鲁氏菌病例,应用ELISA法做布鲁氏菌抗体IgG、IgM检测,检测结果为:IgG阴性、IgM阳性。结论本次布鲁氏菌病疫情是因接触小羊羔的含有布鲁氏杆菌的阴道分泌物及可能是喝了感染布鲁氏杆菌母羊的奶而感染发病。加强动物检疫,加大布鲁氏病防控知识宣传教育,提高高危职业人群防护意识,同时加强医务人员对布鲁氏病诊断治疗知识的培训,使可疑病例能够得到及时诊断和治疗。     

新疆人群感染莱姆病螺旋体分子流行病学调查

目的 探讨新疆部分自然疫源地自然人群感染莱姆病螺旋体的自然进程及感染莱姆病螺旋体的基因型情况.方法 在2002年夏季完成的1406人莱姆病螺旋体感染血清流行病学调查的基础上,2006年在上述1406人中的1390人阴性人群中,随机抽取119人,与2002年16例阳性(共计135人)为研究对象,在这两个时点收集的血清标本均应用蛋白印迹(Western blot,WB)方法检测抗Borrelia burgdorferi抗体IgM和IgG,并完成莱姆病表现频率调查问卷.同时留取135份尿液标本,应用巢式PCR扩增尿液标本中莱姆病螺旋体5S～23S rRNA间隔区片段,对部分阳性产物测序分析,确定莱姆病螺旋体的基因型,并将PCR检测结果与血清学的检测结果相比较.结果 2002年1406份血清标本中,抗体阳性16份,阴性1390份,阳性率为1.14％(16/1406)(16例中IgM阳性12例,IgG阳性2例,IgM、IgG均阳性者2例).2006年上述16例抗体阳性的感染者中,有7例抗体转为阴性,阴转率为43.75％(7/16),4例由IgM阳性转为IgG阳性,IgM持续阳性5例,2002年抗体阴性的119人中,2006年有58例抗体转为阳性(IgM阳性14例,IgG阳性25例,IgM和IgG均阳性的19例),阳转率为48.74％(58/119),确诊为莱姆病2例.2006年抗B.burgdorferi抗体总阳性率为49.63％(67/135)(2006年阳性58例+2002年阳性9例).无症状IgG血清转换率为34.07％ (46/135)(2002年IgM阳性转换为IgG阳性的4例+2006年IgG阳性的25例、IgM和IgG均阳性的19例,其中确诊莱姆病2例);3例发展为莱姆病(2.22％).135份尿液PCR检测,阳性22份,阳性率为16.30％ (22/135).8份PCR阳性结果测序分析显示7份为B.garinii,1份为B.afzelii基因型.结论 新疆自然疫源地人群莱姆病螺旋体感染大多为隐性感染,自然进程较为良性,临床莱姆病少有发生.新疆人群莱姆病螺旋体感染基因型主要为B.garinii,其次是B.afzelii.