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1.
目的 研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞凋亡和活性氧生成的影响.方法 体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,H2DCFH-DA探针流式细胞仪检测细胞中ROS生成量,并测定细胞SOD活性、MDA含量及LDH释放量的变化.结果 雷公藤甲素诱导L-02细胞中ROS生成,且随时间的延长而增多,至12h时达峰值(P<0.01);同时,雷公藤甲素也能诱导细胞中MDA含量及LDH释放量的增加,诱导SOD活性的降低.结论 雷公藤甲素体外诱导人正常肝细胞L-02细胞凋亡可能与其促进活性氧生成有关. 相似文献
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目的:探讨雷公藤甲素对人正常肝细胞L-02细胞的凋亡诱导作用及细胞线粒体呼吸链复合体抑制剂对细胞凋亡的影响。方法:采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测雷公藤甲素对L-02细胞的凋亡作用,JC-1染色观察细胞线粒体膜电位的变化,线粒体呼吸链复合体抑制剂对细胞活性氧释放及细胞凋亡的影响。结果:流式细胞仪检测结果显示,雷公藤甲素对细胞增殖的抑制作用与浓度、时间呈正相关;JC-1染色可见经雷公藤甲素作用的细胞线粒体膜电位降低;加入细胞线粒体呼吸链抑制剂后,与单用雷公藤甲素组比较,雷公藤甲素+rotenone组细胞活性氧释放水平显著降低(P<0.05),同时抑制剂合用组细胞凋亡百分率显著降低(P<0.05)。结论:雷公藤甲素体外可诱导L-02细胞凋亡,机制可能是与公藤甲素上调经线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ产生的活性氧有关。 相似文献
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目的:研究雷公藤甲素诱导正常人肝细胞株L-02细胞凋亡的机制。方法:体外培养L-02细胞。MTT法检测雷公藤甲素的细胞毒性作用;Annexin V-FITC/PI双染法检测雷公藤甲素对L-02细胞的凋亡诱导作用;测定细胞基质中半胱天冬氨酸酶(Caspase)8、Caspase9与Caspase3活性的变化及加入Caspase抑制剂Z-DEVD-FMK后对细胞凋亡的影响。结果:雷公藤甲素能显著诱导L-02细胞的凋亡,其作用呈明显的量效关系与时间依赖性;120nmol·L-1雷公藤甲素作用L-02细胞24h使Caspase3的活性显著增强;加入Z-DEVD-FMK后,能有效抑制雷公藤甲素诱导的细胞凋亡。结论:雷公藤甲素体外诱导正常人肝细胞株L-02细胞凋亡可能与上调Caspase3、9的活性有关。 相似文献
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目的 探讨雷公藤甲素诱导人肝细胞L-02凋亡的机制.方法 将L-02细胞分为对照组和雷公藤甲素50 nM实验组,处理48 h后,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)的荧光强度,试剂盒检测细胞色素C的浓度以及半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)和Caspase-3的活性,Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)的表达.结果 与对照组相比,实验组细胞存活率下降,细胞凋亡率上升,Bcl-2表达下调,Bax表达、细胞色素C浓度、ROS荧光强度、Caspase-9和Caspase-3活性均明显上调(P<0.05或P<0.01).结论 雷公藤甲素可以抑制L-02细胞的存活,通过激活线粒体凋亡途径促进L-02细胞凋亡,下调Bcl-2与Bax比率,促进细胞色素C释放,诱导ROS生成,进一步破坏线粒体膜,增加细胞色素C的释放,激活Caspase-9和Caspase-3介导的细胞凋亡通路,最终诱导细胞凋亡. 相似文献
5.
《中国药房》2018,(1):65-68
目的:考察甘草提取物(GE)对雷公藤甲素(TP)损伤后人肝L-02细胞中尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A(UGT1A)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)表达的影响,研究甘草对TP的减毒机制。方法:采用MTT法测定0(空白对照)、40、80、160 nmol/L TP分别培养L-02细胞12、18、24 h后的细胞存活率。将L-02细胞分为空白对照组(空白培养基)、模型对照组(80 nmol/L TP)和GE预处理组(分别以30、60、90 mg/L GE预处理24 h后再加入80 nmol/L TP),继续培养18 h后,采用MTT法检测各组的细胞存活率。在上述分组(GE预处理组的GE浓度为60 mg/L)基础上增设利福平(RIF)组(阳性对照,10μmol/L RIF预处理24 h后再加入80nmol/L TP),培养24 h后,检测各组细胞中UGT1A、MRP2蛋白表达。结果:TP对细胞活性的抑制作用与浓度和时间呈正相关。与空白对照组比较,模型对照组的细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞中MRP2蛋白表达明显减弱(P<0.01)。与模型对照组比较,30、60、90 mg/L GE预处理组的细胞存活率均明显升高(P<0.01);60 mg/L GE预处理组细胞中UGT1A和MRP2蛋白表达均明显增强(P<0.01)。结论:GE预处理可减轻TP对人肝L-02细胞的损伤,其减毒机制可能与提高细胞中UGT1A、MRP2的表达有关。 相似文献
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目的研究硒(Se)对六价铬Cr(Ⅵ)诱导肝细胞DNA损伤的影响,探讨Se对Cr(Ⅵ)中毒预防的可能性。方法分别用8和32μmol/L重铬酸钾(K2Cr2O7)溶液处理在含有0.1和10μmol/L亚硒酸钠(Na2SeO3)中培养的L-O2细胞,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测L-02肝细胞DNA损伤程度。结果8和32μmol/L K2Cr2O7单独作用时,可引起L-02肝细胞DNA损伤。当Na2SeO3与K2Cr2O7联合作用时,0.1μmol/L NaSeO3对8、32μmol/L K2Cr2O7诱导的DNA损伤存在明显的拮抗作用,而10μmol/L Na2SeO3单独存在与K2Cr2O7相互作用均具有诱导DNA损伤的作用。结论Se对L-02肝细胞DNA损伤的影响具有剂量依赖性,即Se在较低处理组水平具有降低Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞DNA损伤的作用,在高处理组水平能诱导细胞DNA损伤。 相似文献
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目的:研究雷公藤甲素对大鼠肝药酶活性的影响。方法:对SD大鼠以雷公藤甲素(150、300、450μg·kg-1)灌胃给药,每天1次,给药1d或14d,分别测定细胞色素P450、细胞色素b5含量及红霉素N-去甲基酶(ERD)、二甲基亚硝胺脱甲基酶(NDMA)、甲氧基异唑脱甲基酶(MROD)、乙氧基异唑脱乙基酶(EROD)和戊氧基异唑脱烷基酶(PROD)活性;CYP3A和CYP2E1蛋白含量采用Westernblotting法分析。结果:单次灌胃雷公藤甲素对肝药酶活性及CYP2E1、CYP3A蛋白表达基本无影响;多次给予雷公藤甲素(450μg·kg-1,14d)能诱导NDMA活性,抑制ERD活性,轻度升高CYP2E1蛋白表达,显著降低CYP3A蛋白表达。结论:长期较高剂量给予雷公藤甲素能抑制CYP3A活性,轻度诱导CYP2E1活性。 相似文献
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目的基于Nrf2-ARE信号通路探讨异甘草酸镁对雷公藤甲素损伤L-02细胞的保护作用及相关机制。方法体外培养正常人肝L-02细胞,通过免疫荧光技术检测异甘草酸镁(60μmol·L^-1)对雷公藤甲素(80nmol·L^-1)损伤L-02细胞中Nrf2核转移的影响;采用Western blotting测定细胞核中Nrf2及细胞中细胞色素P450 3A4(CYP3A4)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance associated protein 2,MRP2)和胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)的蛋白表达。结果雷公藤甲素对L-02细胞核中Nrf2具有诱导作用(P<0.01),并促进Nrf2核内转移;异甘草酸镁预处理组较雷公藤甲素组降低L-02细胞核中Nrf2的表达(P<0.01);异甘草酸镁预处理后对雷公藤甲素损伤L-02细胞中CYP3A4、MRP2和BSEP蛋白表达具有诱导作用(P<0.01)。结论异甘草酸镁可减轻雷公藤甲素对L-02细胞造成的损伤作用,其机制可能与诱导细胞核中Nrf2以及细胞中CYP3A4、MRP2和BSEP受体有关。 相似文献
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人类蛋白质组学的研究是揭示人类生命活动和疾病机制的最终阶段,运用蛋白质组学技术寻找各种疾病的关键蛋白和标志蛋白,可实现更加及时、准确的诊断[1]。双向电泳技术一个主要的应用领域是“蛋白质组分析”,包括对来自一个样品的大量蛋白质同时进行系统地分离、识别和定量。本实验通过比较几种不同的蛋白处理方法,优化双向电泳条件,找出较佳的样本处理方式,为成功进行双向电泳及质谱鉴定提供基础。1材料与方法1·1细胞株L-02肝细胞购自中国科学院上海细胞生物研究所。1·2试剂与仪器二羟乙基呱嗪乙烷磺酸(HEPES)、噻唑蓝均为美国Sigma产… 相似文献
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目的 研究雷公藤醇提物对人L02肝细胞增殖和凋亡的作用.方法 以0、4、8、16 mg/L的雷公藤醇提物(分别为对照组、4 mg/L组、8 mg/L组、16 mg/L组)干预体外培养的人L02肝细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组肝细胞的生长抑制率,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化吡啶双染流式细胞术检测人L02肝细胞的凋亡率.结果 与对照组比较,4mg/L组的吸光度值降低[(0.90±0.04)比(0.94±0.06),P<0.05];当雷公藤醇提物浓度为8 mg/L和16 mg/L时,细胞液吸光度值降低均更加明显[(0.76±0.05)、(0.53 ±0.04)比(0.94±0.06),均P<0.01].与对照组比较,4 mg/L组的细胞凋亡率升高,差异有统计学意义[(9.68±0.45)%比(5.42±0.27)%,P<0.05];当雷公藤醇提物浓度为8mg/L和16 mg/L时,人L02肝细胞凋亡率升高均更加明显[(30.19±0.31)%、(57.26±0.54)%比(5.42±0.27.)%,均P<0.01].结论 雷公藤醇提物对人L02肝细胞的增殖有抑制作用,并可诱导其凋亡. 相似文献
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New chemical entities are routinely screened in vitro and in vivo for their ability to induce cytochrome P450s (CYP), other drug-metabolizing enzymes and possibly transporters in an attempt to more accurately predict clinical parameters such as drug-drug interactions and clearance in humans. Some of these potential therapeutic agents can cause induction of the metabolism of another molecule or auto-induction thereby increasing their own metabolism and elimination, as well as potentially any molecules metabolized by the same enzyme(s). Key CYPs in the 1A, 2B, 2C, and 3A families have all been shown to be inducible. It would be clearly advantageous to know the potential for a compound to induce drug metabolizing enzymes or transporters prior to clinical development, and many in vitro systems have been developed for this purpose. Newer computational technologies are also being applied in order to attempt to predict induction from the molecular structure alone before a molecule is even synthesized or tested. This review will cover the various in vitro and in silico methods developed for prediction of key inducers of CYPs and other proteins, as well as the limitations of such technologies and applications in the future. 相似文献
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目的 检测三氯乙烯(TCE)主要代谢产物三氯乙酸(TCA)对人肝L-02细胞染毒24 h后的增殖作用,以及对DNA总体甲基化水平的影响,探索TCE对肝L-02细胞的表型遗传毒性.方法 选择0.1-0.9 mmol/L浓度TCA作为合适的染毒剂量对肝L-02细胞染毒24 h后分别进行下列试验:以CCK-8试剂盒观测细胞的生长曲线;以抗5-mC抗体进行免疫荧光检测细胞核中胞嘧啶甲基化总体水平(代A 0.9 mmol/L染毒24 h);以流式细胞仪(FCM)检测其对细胞周期的影响及凋亡情况;提取细胞DNA进行琼脂糖电泳分析其对DNA的损伤作用.以上试验必要时设置5-氮杂胞苷(5-aza-dC5 μmol/L)处理的L-02细胞为基因组DNA低甲基化的对照以及肝癌细胞作为细胞周期分析的对照.结果 TCE在0.1~0.9 mmol/L浓度下染毒24 h后可以促进肝L-02细胞生长,并在0.9 mmol/L浓度作用下24 h可致肝L-02细胞DNA总体甲基化水平降低,荧光强度和正常细胞比较明显减弱;细胞周期分析发现TCA处理24 h后再用正常培养基继续培养24 h后可使细胞S G2期中细胞比例增加(与肝癌细胞接近);DNA梯状电泳分析未发现DNA损伤性改变.结论 TCA染毒24 h可促进细胞生长,可诱导基因组DNA低甲基化,并造成细胞周期的改变.提示TCA对肝细胞的早期细胞毒性作用与表型遗传机制有关. 相似文献
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H. Remmer 《European journal of clinical pharmacology》1972,5(2):116-136
Summary 1. Accelerated drug metabolism in liver cells was discovered during studies of the cause of barbiturate tolerance and of the way in which polycyclic hydrocarbons protect against the actions of several carcinogenic compounds. — 2. It is elicited by many lipid soluble drugs and is accompanied by increased synthesis of haem and enzyme proteins. It is due to increased activity of the drug metabolizing microsomal enzyme-complexes in the liver which consist of non specific mixed function oxidases and various transferases. — 3. Acceleration of drug metabolism is accompanied by hypertrophy of smooth intracellular membranes and enlargement of the liver. It is dependent on the concentration of the inducer in the endoplasmic reticulum and seems to be influenced by the stability of a complex formed between the drug and cytochrome P-450, as well as by certain, as yet unidentified properties possessed by certain types of inducing agents. — 4. In man it has been observed in patients during and after treatment with a few drugs which have a high inducing capacity and are prescribed in large doses. — 5. Accelerated drug metabolism might be highly advantageous and beneficial in protecting an organism against an overload of endogenous or exogenous toxic compounds, but it can also be harmful if it results in increased production of toxic metabolites. — 6. It can be regarded as a hitherto unknown pharmacological effect on the regulation of the synthesis-rate of enzymes involved in drug metabolism.Presented as Feldberg Foundation Lecture 1972 in St. Mary's Hospital Medical School on March 8th, 1972 相似文献
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生脉注射液对小鼠肝药酶的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 :观察生脉注射液 (SMI)对小鼠肝药酶的影响。方法 :给予小鼠腹腔注射 (ip) 7.5和 1 5mL·kg-1 的SMI ,给药0 .5h后 ,观察戊巴比妥钠和巴比妥钠对小鼠的催眠作用 ;连续给药 6d后 ,观察戊巴比妥钠的催眠作用 ,并检测小鼠肝脏系数和肝微粒体细胞色素P4 5 0 (CYP)的含量变化。结果 :单次给药 0 .5h后 ,高剂量SMI能显著延长戊巴比妥钠对小鼠的催眠时间 (P <0 .0 1 ) ,但对巴比妥钠的催眠时间无显著影响。连续给药 6d后 ,两个剂量的SMI均显著缩短戊巴比妥钠催眠时间 ,并提高小鼠肝脏系数和肝CYP含量 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 )。结论 :SMI对肝药酶表现为诱导或抑制作用 ,并与用药时间和观察时间有关。 相似文献
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神经毒性是药物常见的毒性反应之一。神经系统对药物引起的损害尤其敏感,药物引起神经系统结构和功能的微小改变即可表现出严重的精神或行为异常,因此药物引起的神经毒性越来越得到人们的关注。药物引起的神经毒性存在个体差异,其中遗传因素对这种差异的产生发挥重要作用。药物代谢酶影响药物体内的生物转化过程,因此代谢酶的遗传多态性在一定程度上决定了不同个体对药物神经毒性的易感性。本篇综述将着重探讨药物代谢酶中的细胞色素P450酶、谷胱甘肽转移酶和N-乙酰转移酶遗传多态性对药物神经毒性易感性的影响。 相似文献
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瘦素对L-02肝细胞甘油三酯沉积及乙酰辅酶A羧化酶表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察瘦素对人L-02脂肪变肝细胞甘油三酯合成的影响,探讨瘦素在非酒精性脂肪性肝病发生、发展中的作用。方法人肝L-02细胞在50%胎牛血清1640培养基中造模24 h。设立正常组、模型组、处理组,处理组分为3个亚组,分别应用瘦素10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L处理24 h。均行油红"O"染色,观察脂肪化情况,RT-PCR测CA羧化酶mRNA表达。结果油红"O"染色显示,50%胎牛血清的1640培养基24 h能成功制造肝细胞脂肪变性模型;加入瘦素处理后,脂肪化程度减轻,且与瘦素呈剂量依赖性关系;RT-PCR显示,肝细胞脂肪变性后,乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达增强,加入瘦素处理后,乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达明显减弱,与瘦素呈剂量依赖性关系。结论肝细胞脂肪变性时,瘦素能使肝细胞脂肪化程度减轻,能减少肝细胞甘油三酯的合成,对脂肪肝防治有一定的作用。 相似文献
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To examine the effect of levamisole on the hepatic drug metabolizing enzyme system of mice, levamisole at a dose of 20 mg kg-1 day-1 was administered i.p. for 5 days. Compared with the control values, the levamisole treatment significantly increased the amount of cytochrome P450 and cytochrome b5 and the in-vitro activities of aminopyrine N-demethylase, benzphetamine N-demethylase and aniline hydroxylase. In contrast, there was no change in microsomal NADPH-cytochrome c reductase activity in-vitro or in the relative liver weight and microsomal protein content compared with the corresponding values for control mice. Furthermore, in-vivo induction of drug metabolism was demonstrated by decreased pentobarbitone sleeping times after levamisole pretreatment. These results indicate that certain hepatic microsomal mixed function oxidases of mice are induced by levamisole, the drug that is frequently used as an anthelmintic in veterinary medicine and as an immunostimulant drug in human medicine. 相似文献
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Effect of radio-detoxified endotoxin on the liver microsomal drug metabolizing enzyme system in rats
E. coli endotoxin (LPS) depresses the hepatic microsomal mono-oxygenase activity. Radio-detoxified LPS (TOLERIN: 60 Co irradiated endotoxin preparation) decreases this biotransforming activity to a smaller extent. Phenobarbital, an inducer of this mono-oxygenase system, failed to induce in LPS-treated animals. In radio-detoxified LPS-treated rats, phenobarbital induced the mono-oxygenase and almost fully restored the biotransformation. 相似文献
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雷公藤内酯醇对肺腺癌细胞系A549的体外抑制作用的研究 总被引:7,自引:2,他引:7
目的观察雷公藤内酯醇对肺腺癌细胞系A549体外生长特性的影响。方法分别采用MTT法、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳以及荧光染色观察雷公藤内酯醇肺腺癌细胞系A549增殖、细胞周期以及凋亡的影响。结果14nmol.L-1~896nmol.L-1的雷公藤内酯醇均能抑制A549细胞的生长且生长抑制作用呈剂量以及时间依赖性。雷公藤内酯醇在低浓度(14nmol.L-1)条件下,能诱导A549细胞发生细胞周期阻滞,阻滞部位在S期;高浓度(55,112mol.L-1)的雷公藤内酯醇使A549阻滞在G2/M期,并诱导其发生凋亡。结论雷公藤内酯醇能抑制A549细胞的生长,使其阻滞在S期和G2/M期,并诱导其发生凋亡。 相似文献