人脐带间充质干细胞移植对酒精性肝损伤大鼠的保护作用*

目的 探讨人脐带间充质干细胞（UCMSCs）移植对酒精性肝损伤大鼠的保护作用。方法 将40只SD大鼠随机分为4组,采用白酒灌胃法建立慢性酒精性肝损伤模型,给予UCMSCs移植或UCMSCs联合甘草酸经门静脉移植,在对照组和模型组给予生理盐水处理。检测血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）水平。采用RT-PCR法检测肝组织细胞色素P450亚酶（CYP2B1） mRNA水平。结果 模型组动物血清AST、ALT和MDA水平分别为（210.6±26.0） U/L、（111.2±13.7） U/L和（1.6±0.1）μmo/L,显著高于对照组的【（85.5±12.7） U/L、（30.8±4.5） U/L和（0.6±0.1） μmo/L,P<0.05】,而血清SOD和GPx水平分别为（141.3±6.9）U/L和（336.5±26.1） U/L,显著低于对照组的【（225.7±16.4） U/L和（912.3±29.5） U/L,P<0.05】;细胞移植或细胞移植联合甘氨酸处理组动物血清酶学变化得到很大的改善;与对照组比,模型组肝组织CYP2B1 mRNA水平显著降低;与模型组和细胞移植组比,细胞移植联合甘氨酸处理组肝组织CYP2B1 mRNA水平显著增强,差异有显著性统计学意义（P<0.05）。结论 脐带间充质干细胞移植对大鼠酒精性肝损伤有一定的保护作用,与甘草酸联合应用后,保护效果更加明显。     

骨髓间充质干细胞肝包膜下移植治疗大鼠急性肝损伤

目的了解大鼠骨髓干细胞对大鼠急性肝功能损伤的治疗作用。方法用四氯化碳腹腔注射法建立大鼠急性肝损伤模型,将大鼠骨髓间充质干细胞注射移植于模型鼠肝包膜下,比较移植前和移植3周后,血清Alb、ALT、AST水平变化。以0.9%氯化钠溶液肝包膜下注射作对照组。结果干细胞移植3周后,移植组血清Alb水平为(19.2±2.6)g/L,明显高于对照组相应水平(12.6±3.5)g/L,(P<0.05);移植组血清ALT和AST水平分别为(20.9±5.1)和(19.4±3.7)U/L,明显低于对照组相应水平(40.7±11.6)和(37.9±12.7)U/L,(P<0.05)。结论大鼠骨髓干细胞肝包膜下移植可使急性肝损伤大鼠的肝功能得到改善。     

卡托普利对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪变性的影响

目的 研究卡托普利对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞脂肪变性的影响。方法 随机将64只大鼠分为对照组16只(普通饲料喂养和生理盐水灌胃)、模型组16只(高脂饲料和生理盐水灌胃)、卡托普利处理组16只和罗格列酮处理组16只。给药6 w后取血清和肝组织,检测肝组织细胞色素氧化酶P4502E1(CYP2E1)mRNA水平及血清丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平。结果 模型组肝细胞体积增大,见广泛性脂肪变性和细胞水肿,而卡托普利处理组大部分肝细胞排列正常,可见少量的脂肪变性,部分细胞水肿;卡托普利处理组血清AST、ALT、TC和TG水平分别为(94.1±15.6)U/L、(27.3±6.2)U/L、(1.4±0.2)mmol/L和(1.0±0.2)mmol/L,显著低于模型组【分别为(134.4±35.1)U/L、(35.2±7.1)U/L、(1.8±0.4)mmol/L和(1.4±0.2)mmol/L,P＜0.05】;卡托普利处理组肝湿重、肝指数和肝组织CYP2E1 mRNA水平分别为(11.7±2.1)g、(2.3±0.3)%和(1.8±0.2),显著低于模型组【分别为(14.3±2.0)g、(2.6±0.2)%和(2.3±0.1),P＜0.05】;卡托普利处理组血清MDA水平为(7.6±2.5)nmol/L,显著低于模型组【(12.1±2.6)nmol/L,P＜0.05】,而血清GSH水平为(41.0±17.5)mg/L,显著高于模型组【(22.2±10.2)mg/L,P＜0.05】。结论 卡托普利可有效减轻非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪变性程度,可能与纠正脂代谢紊乱、恢复肝功能、增强抗氧化应激能力有关。     

己酮可可碱对小鼠酒精性肝病酒精代谢酶和核受体PPAR-α的影响

目的：研究己酮可可碱（PTX）对酒精性肝病小鼠酒精代谢酶和过氧化物酶增殖物激活受体（PPAR-α）的影响。方法将64只 C57BL/6小鼠随机分为模型组、治疗组和对照组,用50%酒精灌胃建立急性肝损伤模型,以20%酒精连续灌胃6周建立慢性酒精性肝病模型;采用比色法检测各组小鼠血清乙醇脱氢酶（ADH）和细胞色素 P4502E1（CYP2E1）活性;采用 RT-PCR 法检测肝组织 ADH、CYP2E1和 PPAR-α mRNA 水平;采用免疫组化法检测肝组织 CYP2E1和 PPAR-α蛋白表达。结果急性和慢性酒精性肝损伤模型小鼠血清 ADH 活性分别为（11.2±1.6）U/ml 和（5.8±1.4）U/ml,与相应对照组比无显著性差异[分别为（12.5±1.2）U/ml 和（4.3±0.6）U/ml];急性和慢性酒精性肝损伤小鼠 CYP2E1活性分别为（12.2±1.8）U/ml 和（11.8±1.7）U/ml,均显著高于对照组[（7.9±1.4）U/ml 和（6.5±1.2）U/ml,P〈0.01）]和治疗组[（8.1±1.5）U/ml 和（7.8±1.5）U/ml,P〈0.01];急性和慢性酒精性肝损伤小鼠肝组织 CYP2E1阳性细胞相对表达强度为（765±21）和（682±25）,均显著高于对照组[分别为（308±12）和（305±18）,P〈0.01）]和大剂量 PTX 治疗组[分别为（521±18）和（418±12）,P〈0.01];急性和慢性酒精性肝损伤小鼠肝组织 ADH mRNA 水平与对照组比无显著性差异,但肝组织 CYP2E1 mRNA 相对水平分别为（1.47±0.32）和（1.13±0.52）,显著高于对照组[（0.89±0.23）和（0.45±0.28）,P〈0.01）]及大剂量 PTX 治疗组[分别为（0.92±0.27）和（0.48±0.32）,P〈0.01）];急性酒精性肝病动物肝组织 PPAR-α mRNA 水平与对照组或 PTX 治疗组比无统计学差异,但慢性酒精性肝损伤小鼠肝组织 PPAR-α mRNA 相对水平[（0.45±0.31）]显著低于对照组[（0.85±0.21）,（P〈0.05）];急性和慢性酒精性肝损伤小鼠肝组织 PPAR-α阳性相对表达强度为（322±15）和（262±23）,均显著低于对照组[分别为（721±18）和（689±14）,（P〈0.01）]和大剂量 PTX 治疗组[分别为（548±20）和（725±19）,P〈0.01）]。结论 PTX 能够减轻急慢性酒精性肝损伤,可能与其上调酒精代谢酶 CYP2E1和下调 PPAR-α表达有关,而与ADH 无关。     

蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠细胞色素P4502E1表达的影响

目的 观察蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化的预防作用及其对细胞色素P4502E1 (CYP2E1)表达的影响.方法 将50只健康清洁级Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、肝纤维化模型组(B组)、蓝莓原浆预防组(C组)、复方鳖甲软肝片预防组(D组)、蓝莓原浆加复方鳖甲软肝片预防组(E组)共5组,每组10只.除正常对照组外,其余各组均腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,各预防组在造模同时分别给予蓝莓原浆或(和)复方鳖甲软肝片灌胃,1次/d,共12周.12周末处死大鼠,行肝脏病理组织学检查,测定各组大鼠血清ALT水平、肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)及羟脯氨酸(Hyp)含量,采用实时荧光定量聚合酶联反应、Western blot和免疫组织化学法检测大鼠肝组织CYP2E1的mRNA及蛋白质表达. 结果 12周末处死大鼠,A、B、C、D、E各组大鼠血清ALT水平分别为(37.9±4.5) U/L、(49.2±9.8) U/L、(39.9±6.3) U/L、(40.5±5.7) U/L及(38.2±8.4)U/L,各组间差异无统计学意义;各预防组大鼠肝纤维化程度较B组明显减轻(F=95.097,P＜0.05); C、D、E各组大鼠肝组织匀浆Hyp分别为(472.7±44.1)μg/g、(416.1±39.4)μg/g和(429.5±55.1)μg/g,低于B组的(603.2±68.9) μg/g,F=39.315,P＜0.05,差异有统计学意义; SOD水平分别为(2.5±0.4) U/mg、(2.0±0.5)U/mg、(2.2±0.2) U/mg,高于B组的(1.6±0.4) U/mg,F=25.557,P＜0.05,差异有统计学意义;MDA分别为(0.83±0.06) mol/mg、(0.96±0.08) nmol/mg、(0.85±0.06)nmol/mg,低于B组的(1.24±0.15)nmol/mg,F=46.376,P＜0.05,差异有统计学意义;B、C、D、E组大鼠肝组织CYP2E1的mRNA及蛋白质表达高于A组,C、D、E组大鼠肝组织CYP2E1的mRNA及蛋白质表达低于B组,但差异均无统计学意义.结论 蓝莓对猪血清所致大鼠肝纤维化有一定的预防作用;免疫性肝纤维化时,大鼠肝组织CYP2E1的表达无明显改变;蓝莓对CYP2E1的表达无明显影响.     

草质素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脂肪变和肝内氧化应激的影响

目的 探讨草质素对高脂饮食诱导的脂肪性肝病大鼠肝组织脂堆积和氧化应激的影响。方法 用高脂饮食诱导SD大鼠12周建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,同时给予药物处理组动物草质素20 mg·kg^-1.d^-1和40 mg·kg^-1.d^-1灌胃。检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)含量,检测肝匀浆TG、TC、FFA、丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和血红素氧化酶(HO-1)活性,采用Western blotting法检测肝组织Nrf2、细胞色素P450酶2E1(CYP2E1)和细胞色素P450酶4A(CYP4A)蛋白表达量。结果 模型组大鼠体质量、肝质量和肝指数分别为(499.2±14.1)g、(15.9±0.6)g和(3.2±0.1)%,显著高于对照组;小剂量和大剂量草质素处理组大鼠体质量、肝质量和肝指数均显著低于模型组(P<0.05); 模型组大鼠血清FFA水平为(521.5±52.3) mmol/L],显著高于对照组;大剂量药物处理组大鼠血清FFA水平为(361.5±62.3)mmol/L,显著低于模型组(P<0.05);模型组大鼠肝匀浆SOD、CAT、GSH-Px和HO-1水平分别为(294.2±35.4)U/mg、(19.5±6.4)U/mg、(362.4±104.2)U/mg和(4.1±0.4)ng/mg,均显著低于对照组[分别为(402.3±58.4)U/mg、(42.3±5.2)U/mg、(732.3±134.3)U/mg和(13.2±1.0)ng/mg,P<0.05];小剂量和大剂量组大鼠肝匀浆SOD、GSH-Px和HO-1水平均显著高于模型组(P<0.05);模型组大鼠肝组织Nrf2蛋白相对表达量显著低于对照组,而CYP2E1和CYP4A蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.01);与模型组比,小剂量和大剂量药物处理组肝组织Nrf2蛋白相对表达量显著升高(P<0.01),而CYP2E1和CYP4A蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。结论 草质素可以改善NASH大鼠肝组织脂堆积和氧化应激紊乱,其抗氧化的机制可能与调节Nrf2表达有关。     

维生素E、硒对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1及脂质过氧化的干预作用

目的:研究维生素E、硒对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1及脂质过氧化的干预作用.方法:♂SD大鼠,随机均分为5组:对照组(普通饲料)、模型组(高脂饲料)、VE干预组、Se干预组、VE Se干预组,建模5wk处死全部大鼠.生化方法检测血清及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝细胞色素P4501A1mRNA表达的变化,免疫组化方法测定肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)表达的变化.结果:与对照组比较,模型组血清及肝组织中SOD显著降低(312.72±49.51kU/Lvs583.23±63.37kU/L;8.13±0.63U/mgprot.vs13.99±2.33U/mgprot.,P<0.01),MDA增高(13.40±4.24mmol/Lvs6.43±1.76mmol/L;9.79±0.94nmol/mgprot.vs6.80±0.97nmol/mgprot.P<0.01),细胞色素P4501A1mRNA表达水平,肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达明显增强(0.628±0.116vs0,0.230±0.013vs0.03±0.006,0.069±0.01vs0.003±0.001;P<0.05).与模型组比较VE组、Se组的血清及肝组织中SOD增高,MDA降低,细胞色素P4501A1mRNA表达水平略下降;肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达下降(P<0.05).VE Se组与模型组比较,血清SOD明显增高,其值接近对照组水平;细胞色素P4501A1mRNA表达水平显著下降(0.324±0.070vs0.628±0.116,P<0.05).结论:非酒精性脂肪肝的脂质过氧化损伤及相关因子的表达可能与肝细胞色素P4501A1表达上调有关.VitE和硒能提高机体的抗氧化能力,对非酒精性脂肪肝有保护作用,二者联合作用更明显.     

人脐带间充质干细胞对急性肝损伤免疫反应的影响

目的采用人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)干预CCl_4药物诱导的急性肝损伤大鼠,了解其对急性肝损伤免疫反应的影响。方法 30只SD大鼠分3组:空白对照组(n=10)、模型组(n=10)及UCMSCs干预组(n=10),通过腹腔注射40%CCl_4橄榄油溶液制备急性肝损伤模型。24 h后腹腔注射UCMSCs进行干预,48 h后采心尖血,ELISA法检测AST、ALT、IL-10、IL-17等指标,流式细胞检测技术检测Th17细胞及Treg细胞等指标,比较其变化并对比肝脏病理改变。结果 UCMSCs干预组AST、ALT水平较模型组低下(P0.05);模型组IL-17水平较空白对照组升高(P0.05),UCMSCs干预组IL-17水平较模型组低下(P0.05);模型组IL-10水平较空白对照组升高(P0.05),UCMSCs干预组IL-10水平较模型组升高(P0.05);模型组Th17细胞水平高于空白对照组(P0.05)。模型组Treg细胞水平高于空白对照组(P0.05),UCMSCs组Treg细胞水平高于模型组(P0.05)。结论 UCMSCs能够改善CCl_4药物性肝损伤大鼠生化指标,并能够减轻肝脏病理炎性改变,其中UCMSCs促使急性肝损伤大鼠血清IL-17降低,IL-10升高,Th17/Treg比率降低,从而抑制了过度的免疫反应,减轻了肝细胞的进一步损伤,改善局部微环境促进其再生及修复。     

脐带间充质干细胞联合移植对胰岛活性与功能的影响

目的:探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)与胰岛细胞联合移植对胰岛活性与功能促进作用.方法:50只链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的SD大鼠随机分为4组移植于肾包膜下,(1)500个胰岛移植组;(2)1×106个UCMSCs与500个胰岛细胞联合移植组;(3)1×106个UCMSCs组;(4)假手术(空白)对照组,仅于肾包膜下注入0.3mL生理盐水;术后测血糖水平、葡萄糖耐量试验(glucose tolerance test,GTT)、血清胰岛素水平以及达正常血糖水平率(以血糖浓度≤11.1mmol/L标准为正常)至28d.结果:联合移植组术后血糖水平最低,血清胰岛素水平更高,达正常血糖浓度率优于其他3组,在术后14d GTT较其他3组好,血清胰岛素水平较其他3组好,血糖水平、血清胰岛素水平、GTT水平UCMSCs组与对照组间均无统计学差异,单纯UCMSCs组无1例动物血糖水平达正常.结论:间充质干细胞与胰岛联合移植能有效提高胰岛细胞活性与功能.     

海南鲜椰子水对酒精性肝损伤大鼠的保护作用研究

目的探究海南鲜椰子水对酒精性肝损伤大鼠的保护作用。方法采用56°白酒灌胃,建立大鼠酒精性肝损伤模型。取大鼠26只,随机分为椰子水处理组9只,模型组9只和正常组8只。给予椰子组和模型组动物白酒灌胃,同时给予椰子组椰子水自由饮用,给予正常组动物0.9%生理盐水灌胃,给予模型组和正常组蒸馏水自由饮用,均连续29 d。采用硫代巴比妥酸法检测肝组织匀浆丙二醛(MDA)含量,采用羟胺法检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果在实验结束时,模型组动物血清AST水平为(123.0±36.2)U/L,显著高于正常组和椰子组【(86.5±21.0)U/L和(96.9±26.0)U/L,P0.05】,但不同组间血清ALT和TG水平差异无统计学意义(P0.05);模型组肝组织匀浆MDA含量为(0.479±0.069)nmol/mg,显著高于椰子组【(0.258±0.078)nmol/mg,P0.01】和正常组【(0.311±0.139)nmol/mg,P0.01】;椰子组和模型组SOD含量分别为(0.068±0.008)U/mg和(0.071±0.010)U/mg,显著高于正常组【(0.044±0.022)U/mg,P0.05】,但椰子组与模型组SOD含量差异无统计学意义(P0.05);模型组大鼠肝细胞脂肪变性较轻,肝小叶中心带肝细胞中出现大小不等的脂肪滴,个别有肝淤血;椰子组大鼠肝小叶结构正常,肝细胞结构完整、清晰。结论椰子水对酒精性肝损伤具有一定的保护作用,机理可能与其抗氧化作用有关。     

E型前列腺素受体4对CCL4诱导的肝损伤小鼠肝组织肝纤维化相关蛋白表达的影响*

目的 探讨E型前列腺素受体4(EP4)在CCL₄诱导的肝损伤小鼠肝纤维化发生过程中的作用。方法 取30只C57BL/6N小鼠,随机分为对照组、模型组和CCL₄联合E7046处理组(n=10),采用CCL₄注射法建立肝损伤模型,分别给予甲基纤维素或EP4特异性拮抗剂E7046溶液灌胃干预。采用Western blot和qPCR检测小鼠肝组织EP4、α-SMA蛋白及其mRNA水平。常规行HE染色、Masson染色和天狼星红染色,鉴定小鼠肝组织病理学变化。结果 模型组小鼠肝组织EP4蛋白表达比对照组显著增高,经E7046干预后,肝组织EP4蛋白表达降低,同样地,模型组小鼠肝组织EP4编码基因Ptger 4 mRNA水平为(3.5±0.1),显著高于对照组【(1.0±0.1),P<0.05】,而CCL₄联合E7046处理组为(2.4±0.2),较模型组显著降低(P<0.05);模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为(1753.5±328.6)U/L和(1586.2±204.1)U/L,显著高于对照组(P<0.05),而在CCL₄联合E7046处理组,两种酶水平较模型组显著降低【分别为(885.9±269.6)U/L和(892.4±208.6)U/L,P<0.05】;模型组小鼠肝组织α-SMA表达较对照组增高,而在CCL₄联合E7046组α-SMA水平较模型组降低,模型组小鼠肝组织Acta2和Col1a1 mRNA 水平较对照组显著上调,而CCL₄联合E7046组则较模型组显著降低(P<0.05)。结论 EP4在CCL₄诱导的小鼠肝纤维化发生过程中发挥重要作用,阻断EP4与其配体结合有助于改善肝纤维化。     

IκB激酶β在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用

目的:探讨IκB激酶β(inhibit kappa B kinase beta,IKKβ)在非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝组织中的表达及意义.方法:健康♂Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组(n=20)和高脂模型组(n=20),分别给予标准饲料喂养和高脂饲料喂养.16 wk末空腹处死全部大鼠,收集血清和肝组织标本.检测血清中ALT、AST及ELISA法检测血清TNF-α水平;光镜下观察肝组织病理变化;RT-PCR和EMSA法分别检测肝组织IKKβmRNA表达和核因子-κB(NF-κB)活性改变.结果:模型组大鼠血清ALT、AST、TNF-α水平、肝组织IKKβmRNA表达及NF-κB活性均较正常对照组明显增强(96.63±14.2 U/L vs 39.50±12.2 U/L,156.13±14.7 U/L vs 71.25±14.4 U/L.48.23±3.4 U/L vs 6.74±1.3 U/L,0.85±0.03 vs 0.22±0.02.10.12±1.34 vs 1.58±1.23,P<0.01);病理则表现不同程度的脂肪变性、炎症、坏死及窦周纤维化与对照组相比有显著差异(25.63±7.21 vs 1.24±3.24,3.21±0.52 vs 0.49±0_36.6.26±1.86 vs 3.02±1.17,P<0.01).相关分析显示:肝组织IKKβmRNA的表达与NF-κB活性(r=0.930)、脂肪变性(r=0.681)和炎症坏死程度(r=0.864)以及血清TNF-α水平(r=0.762)正相关(P<0.05).结论:IKKβmRNA表达增加在NASH发病机制中发挥重要作用,其通过介导NF-κB活化,引起TNF-α的大量生成、释放,诱导加重NASH的发生发展.     

BET选择性抑制剂38号化合物对急性肝损伤小鼠保护作用研究*

目的 探讨溴域和末端外结构域(BET)选择性抑制剂38号化合物对CCl₄诱导的小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用及其机制。方法 使用脂多糖(LPS)刺激Raw264.7巨噬细胞,诱导急性细胞炎症模型,设对照组、LPS处理组和LPS与38号化合物共培养组,提取细胞RNA,采用RT-qPCR法检测炎症相关细胞因子mRNA水平。构建CCl₄诱导的ALI模型,将24只小鼠随机分为对照组、模型组和药物干预组。采用免疫组化法检测肝组织抗F4/80 和抗Ly-6G阳性细胞。结果 LPS刺激细胞模型组IL-1βmRNA水平为(23246.0±1185.0),显著高于对照组【(1.1±0.1),P＜0.05】,细胞IL-6 mRNA水平为(7740.0±322.2),显著高于对照组【(1.1±0.4),P＜0.05】,TNF-αmRNA水平为(132.2±2.7),显著高于对照组【(1.0±0),P＜0.05】,而38号化合物干预处理后细胞IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA水平均显著降低,在80 nM处理组分别为(2409.0±147.6)、(66.0±2.1)和(36.7±1),在40 nM处理组分别为(4790.0±206.4)、(314.1±10.7)和(47.0±1.5),在20 nM处理组分别为(10079.0±500.3)、(1112.0±22.0)和(73.0±1.8),在10 nM处理组分别为[(13794.0±1025.0)、(2576.0±46.3)和(96.8±7.2),P＜0.05],呈现浓度依赖性;ALI小鼠血清ALT和AST水平分别为(8281.0±2710.0)U/L和(5330.0±2435.0)U/L,显著高于对照组[分别为(51.5±7.0)U/L和(215.3±12.4)U/L,P＜0.05],而干预组分别为(3634.0±713.9.0) U/L和(2876.0±667.1)U/L,较模型组显著降低(P＜0.05);ALI小鼠模型肝组织结构紊乱,炎症反应明显,肝细胞大片坏死,大量的炎症细胞聚集,而药物干预组上述病理学变化均较模型组减轻。结论 BET选择性抑制剂38号化合物能减轻由CCl₄诱导的小鼠急性肝损伤,改善肝功能和肝组织结构的破坏,对小鼠肝损伤具有保护作用,其机制可能与抑制了炎症相关的细胞因子表达,从而减少了炎症细胞的聚集有关。     

姜黄素防止慢性酒精中毒导致的肝损伤

目的观察酒精性肝病大鼠肝中核因子κB(nuclear factorκB,NFκB),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractan tpro-tein-1,MCP-1),巨噬细胞炎症蛋白-2(macrophage inflammation protein-2,MIP-2)的表达,探讨姜黄素(curcumin)是否能降低酒精性肝病大鼠肝组织中NFκB依赖的基因表达,抑制脂质过氧化(lipid peroxidation)从而防止或减轻酒精性肝损伤(alcoholic liver disease,ALD).方法随机将32只Sprague Dawley大鼠分成四组(8只/组),乙醇喂养组(E组),乙醇加姜黄素喂养组(EC组),姜黄素加蔗糖喂养组(DC组),蔗糖喂养组(D组),分别在饮水中加入乙醇(50%,vol/vol)和等热量的蔗糖,姜黄素(75 mg·kg-1·d-1)加工进食物中.四组大鼠于12周时测定其血清中ALT,AST浓度及其肝组织中MDA含量,同时用RT-PCR测定肝组织中MCP-1,MIP-2mRNA的表达,用免疫组化方法测定肝组织中NFκB,MCP-1的表达,并在光学显微镜下观察肝脏的形态学改变.结果乙醇喂养组中大鼠血清ALT,AST分别为73.7±14.3U/L和154 34±24.6U/L明显高于乙醇加姜黄素组的32.1±11.8U/L和60.3±10.8U/L(P＜0.01);乙醇喂养组大鼠肝组织中MDA水平为1.04±0.08nmol/mg也高于乙醇加姜黄素组中的0.51±0.03nmol/mg(P＜0.01).免疫组化结果显示乙醇组大鼠肝组织中有NFκB,MCP-1表达,而其它三组大鼠肝组织中无或有弱表达;乙醇组大鼠肝组织有MCP-1,MIP2mRNA表达,其肝组织发生显著的病理变化,主要表现为脂肪变性,炎性细胞浸润及少数肝细胞坏死,其余三组大鼠肝组织无表达,病理改变不明显.结论姜黄素能抑制慢性酒精中毒大鼠肝组织中NFκB依赖的基因表达,抑制脂质过氧化,从而防止酒精诱导的肝损伤.     

异甘草酸镁联合乙酰半胱氨酸治疗药物性肝损伤患者血清氧化应激指标的改变*

目的 观察应用异甘草酸镁联合乙酰半胱氨酸治疗药物性肝损伤(DILI)患者血清氧化应激指标的变化。方法 采用随机数字表法将100例DILI患者分为观察组50例和对照组50例。给予对照组异甘草酸镁治疗,给予观察组异甘草酸镁联合乙酰半胱氨酸治疗,两组患者均连续治疗4周。检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白介素-6(IL-6)和降钙素原(PCT)。结果 治疗后,观察组血清总胆红素、天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶和谷氨酰转肽酶水平分别为(14.2±4.6)μmol/L、(62.9±6.8)U/L、(67.5±6.9)、(54.9±8.9)U/L,显著低于对照组【分别为(21.4±7.3)μmol/L、(90.3±8.4)U/L、(86.4±7.5)U/L、(63.6±6.4),P<0.05】;治疗后,观察组血清MDA水平为(4.8±0.7)μmol/L ,显著低于对照组【(6.2±1.1)μmol/L,P<0.05】,血清SOD和GSH-Px水平分别为(81.5±7.9)U/L和(124.7±9.9)U/L,显著高于对照组【分别为(75.5±8.3)U/L和(92.6±8.7)U/L,P<0.05】,血清IL-6和PCT水平分别为(4.2±0.7)pg/L 和(0.3±0.1)ng/L,显著低于对照组【分别为(6.6±1.2)pg/L和(0.5±0.1)ng/L, P<0.05】。结论 联合应用异甘草酸镁和乙酰半胱氨酸治疗DILI患者,近期效果较好,可有效抑制机体炎症反应和氧化应激反应,改善肝功能,值得临床进一步验证。     

虎眼万年青对四氯化碳致大鼠急性肝损伤防治作用的实验研究

目的研究虎眼万年青对大鼠急性肝损伤的防治作用。方法将实验大鼠随机分为正常对照组、四氯化碳（CCl4）急性肝损伤组、甘草酸二胺防治组和虎眼万年青防治组。观察各组大鼠肝功能和肝组织的变化。结果造模2周后，急性肝损伤组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、前白蛋白（PA）分别为1012．5±443．74U／L、955．10±436．89U／L、14．7±2．58mg／L，虎眼万年青防治组分别为359．70±385．04U／L、451．50±297．84U／L、26．2±4．21mg／L，说明虎眼万年青能显著降低急性肝损伤大鼠血清ALT、AST的活性（P〈0．05），提高大鼠血清PA水平（P〈0．05），并改善肝组织炎性反应，作用与甘草酸二胺防治组无显著性差异（P〉0．05）。结论虎眼万年青对四氯化碳致大鼠急性肝损伤有明显的防治作用。     

B型超声引导下肝包膜下骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠肝损伤

目的探讨在B型超声引导下经皮向肝包膜下注射移植骨髓间充质干细胞（MSC）对大鼠肝损伤的治疗作用。方法四氯化碳（CCl4）皮下注射建立肝损伤大鼠模型。首次移植：手术开腹,在肝损伤大鼠肝包膜下注入1 mL含MSC胶原培养液（MSC移植组）;在肝损伤大鼠和正常大鼠肝包膜下分别注入1 mL不含MSC胶原培养液（分别为肝损伤对照组和正常对照组）。各组注入物均可在肝包膜下形成胶原凝胶。第2次和第3次移植：分别在首次移植后第3周和第4周在B超引导下经皮向上一次移植留在肝包膜下形成的凝胶囊腔内注射含MSC培养液（MSC移植组）或不含MSC培养液（肝损伤对照组和正常对照组）。在第3次移植后1周,检测各组大鼠Alb、ALT、TBil;称大鼠体重和肝重,计算肝指数。结果 MSC移植组血浆Alb水平（32.5±6.7）g/L明显高于肝损伤对照组（24.5±7.4）g/L（P〈0.05）;而ALT（97.7±19.6）U/L、TBil（6.5±1.4）μmol/L和肝指数（4.4±0.5）均明显低于肝损伤对照组的（321.8±27.4）U/L、（38.2±14.3）μmol/L和（5.5±0.7）（均P〈0.05）。结论将胶原溶液注入大鼠肝包膜下可形成胶原凝胶囊腔;可在B型超声引导下多次经皮将MSC注入肝包膜下凝胶囊腔（移植到肝实质表面）;5周内3次移植MSC到肝包膜下可使肝损伤大鼠的肝功能得到明显改善。     

解耦联蛋白2在急性肝功能衰竭大鼠肝脏中的动态表达和意义

目的 探讨急性肝功能衰竭(ALF)大鼠肝脏线粒体解耦联蛋白(UCP)2的表达趋势及意义.方法 健康雄性SD大鼠36只,分为对照组和模型组,模型组冉分为6、12、24、36和48 h 5个亚组,每组6只.模型组腹腔内注射D-氨基半乳糖(D-Gal)和脂多糖(LPS)诱导大鼠ALF模型.采用HE染色,光学显微镜下观察肝组织损伤情况,采用RT-PCR和免疫组织化学检测不同时间点肝脏UCP2 mRNA转录及其蛋白表达,同时测定各时间点血清ALT、AST和肝组织丙二醛(MDA)的变化.各实验组问数值比较采用SNK检验.结果 模型组肝组织呈炎性细胞浸润和明显坏死的ALF特征;模型组ALT、AST、MDA值均明显高于对照组[(24.0±2.0)U/L,(82.3士16.9)U/L,(2.55±0.22)μmol/g],且造模24 h达高峰[(8346.7±1363.1)U/L,(9766.7±1274.1)U/L,(8.34±1.13)μmol/g;均P<0.05];UCP2蛋白和UCP2 mRNA在正常肝组织中几乎不表达,D-Gal和LPS处理后6 h表达均硅著增加(P<0.05),24 h表达最强,且模型组相邻时间点之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建大鼠ALF模型,大鼠ALF时UCP2蛋白和UCP2mRNA的表达水平与肝损伤程度及氧化应激水平有关.     

姜黄素对大鼠肝缺血再灌注早期肝组织一氧化氮表达的影响

目的:探讨姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤微循环的影响.方法:将大鼠随机分为假手术组、对照组和实验组(姜黄素40 mg/kg,2次给药).通过检测再灌注早期1、3 h血清转氨酶水平、肝组织中一氧化氮(nitricoxide,NO)、一氧化氮合酶(nitricoxide synthase,NOS),诱导型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase,iNOS)mRNA及内皮型一氧化氮合酶(endothelium nitricoxide synthase,eNOS)mRNA水平,以及肝组织病理学检查来评价姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤微循环的影响.结果:相对于对照组,姜黄素可降低大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤1、3 h血清谷丙转氨酶(ALT)的水平(603.8 U/L±64.5 U/L vs 758.1 U/L±114.7U/L,837.1 U/L±33.3 U/L vs 1012.7 U/L±119.8 U/L,均P<0.01)和谷草转氨酶(AST)的水平(605.7 U/L±65.7 U/L vs 779.5 U/L±124.3 U/L,849.6 U/L±36.0 U/L vs 1027.8 U/L±139.8 U/L,均P<0.01);改善肝组织病理学损害;减少肝脏缺血再灌注早期损伤1、3 h肝组织由iNOS产生的NO蛋白水平(0.455±0.056 vs 0.594±0.087.0.492±0.040 vs 0.671±0.079,均P<0.01);降低肝脏缺血再灌注早期损伤1、3 h肝组织iNOS mRNA的表达强度(0.426±0.075 vs 0.569±0.073,0.527±0.066vs 0.702±0.089,均P<0.01).结论:姜黄素可通过减轻肝组织中由iNOS产生的NO生成,来改善肝缺血再灌注早期损伤中微循环的紊乱,从而减少对肝缺血再灌注肝实质细胞的损伤.     

骨髓间充质干细胞对大鼠急性肝损伤修复的影响

目的: 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植通过抑制RhoA-ROCK信号转导通路对大鼠急性肝损伤修复过程的影响.方法: 贴壁筛选法培养、纯化♂ S D大鼠BMSCs.将健康♀SD大鼠随机分为3组: 正常对照组(N组,n = 10)、CCl4组(C组,n = 10)及CCl4+BMSCs组(T组,n = 10).N组不予任何处理;T组和C组腹腔注射0.1 mL/100 g 600 mL/LCCl4花生油溶液制造急性肝损伤模型后24 h,分别经鼠尾静脉移植的间充质干细胞和等量PBS.各组于不同时间点留取标本,采用HE染色和血清肝功能酶学指标观察受损肝脏恢复过程;RT-PCR方法检测RhoA mRNA的表达;Western blot检测RhoA蛋白的表达.结果: 与C组相比,T组移植BMSCs后能显著改善CCl4急性损伤大鼠肝功能(1 d,ALT: 89.70±3.09 U/L vs 147.59±6.83 U/L,AST: 263.67±17.05 U/L vs 472.68±19.04 U/L,P＜0.01或0.05;7 d,ALT: 42.38±14.31 U/L vs 92.75±6.70U/L,AST 173.85±16.80 U/L vs 260.41±25.35U/L,均P＜0.05),并迅速修复肝脏结构.N组大鼠肝脏RhoA mRNA和蛋白表达量极低,C组经CCl4损伤后RhoA mRNA和蛋白表达量迅速增加(1.39±0.046 vs 0.57±0.010,1.23±0.020vs 0.35±0.036,均P＜0.01),此后表达量缓慢降低.T组经BMSCs移植后,与C组比较,RhoAmRNA和蛋白表达水平迅速下降.结论: Rho-ROCK信号转导通路参与CCl4导致的急性肝损伤发生、发展和修复全过程.BMSCs可能通过抑制RhoA-ROCK信号转导通路加速受损肝脏修复.