含芳香酰基的磷脂酰胆碱的酶促水解

3种含芳香酰基的磷脂酰胆碱（PC）被磷脂酶A2（PLA2）和磷脂酶D（PLD）水解以制备相应的溶血磷脂和磷脂酸。两个酰基均为芳香酰基的PC能被Naja mossambica massamibicaPLA2水解，但不能被猪胰PLA2水解；花生PLD、Streptomyces chromafuscus PLD能水解仅含一个芳香酰基（sn-1或sn-2位）的PC，但不能水解含两个芳香酰基的PC。这些 结果表明酶的来源和酰基的结构对甘油磷脂的酶促水解反应有很大的影响。     

基于UHPLC/Q-TOF-MS技术的人血浆磷脂类成分快速分析及质谱裂解规律初探

采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC/Q-TOF-MS)对人血浆磷脂类成分进行快速分析并推测其质谱裂解规律。本文采用Acquity UHPLC^TMBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm),以含10 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)与含10 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸的乙腈-异丙醇(体积比为1∶1)有机溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温50℃, ESI源正、负离子模式下采集质谱数据。根据Masslynx 4.1软件计算的精确相对分子质量和元素组成,并通过与对照品、二级质谱碎片离子以及脂质数据库的比对,共鉴定出82个血浆脂质成分,其中包括14个溶血磷脂酰胆碱(LysoPCs)、39个磷脂酰胆碱(PCs)、17个鞘磷脂(SMs)、7个神经酰胺(Cers)、4个磷脂酰乙醇胺(PEs)、1个磷脂酰肌醇(PI)。本实验建立了一种简便高效、快捷、稳定的分析方法,可对人血浆磷脂类成分进行较为全面地定性分析,同时...     

夏佛塔苷的电喷雾电离裂解规律解析

目的研究夏佛塔苷的质谱多级裂解过程,探讨质谱技术在黄酮碳酐中的应用规律。方法应用电喷雾电离(ESI)结合串联质谱(MS~n)技术,对黄酮碳酐化合物夏佛塔苷在ESI-MS/MS质谱中的裂解规律进行研究。结果夏佛塔苷在负离子模式下,其准分子离子m/z563多级质谱图中主要出现[M-H-120]~-、[M-H-90]~-、[M-H-120-90]~-、[M-H-120-60]~-和[M-H-120-90-CO]~-等离子碎片-。结论夏佛塔苷在ESI-MS/MS质谱中的裂解行为符合黄酮碳酐的裂解规律,有利于利用质谱技术对各种黄酮碳苷类化合物所含糖基种类进行分析和研究。     

高效液相色谱法测定多烯磷脂酰胆碱软胶囊中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱的含量

目的建立HPLC法测定多烯磷脂酰胆碱软胶囊中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱的含量以及有关物质方法。方法采用蒸发光散射检测器SEDEX55,MERCK的Li Chrospher 100 Diol-5色谱柱(125mm×4.0 mm,5μm);流动相A为正己烷-异丙醇-冰醋酸-三乙胺(814∶170∶15∶0.8),流动相B为异丙醇-超纯水-冰醋酸-三乙胺(844∶140∶15∶0.8),梯度洗脱。结果磷脂酰胆碱在0.912~2.736mg·mL~(-1),溶血磷脂酰胆碱在0.072~0.216 mg·mL~(-1)内与峰面积线性关系良好(R~2均为0.999)。磷脂酰胆碱的平均回收率为101.2%,RSD为1.3%;溶血磷脂酰胆碱的平均回收率为100.5%,RSD为1.9%。溶血磷脂酰胆碱的检测限为0.57μg。结论本检测方法专属性强,结果可靠,专属性强,重复性良好,可用于多烯磷脂酰胆碱软胶囊的质量评价。     

蟛蜞菊内酯的电喷雾离子阱质谱分析

目的：应用电喷雾离子阱质谱（ESI-MSn）技术对蟛蜞菊内酯进行质谱裂解分析,通过主要特征碎片离子研究其裂解规律。方法：样品溶液进样后,采用ESI-MS1～3碰撞裂解方式,解析蟛蜞菊内酯的特征碎片离子。结果：蟛蜞菊内酯在正离子模式下,采用ESI-MS1获得准分子离子峰[M＋H]＋m/z 315;采用ESI-MS2获得了离子碎片m/z 297、m/z 287;采用ESI-MS3获得m/z259、m/z231等离子碎片。负离子模式下采用ESI-MS1获得[M-H]-m/z313,采用ESI-MS2获得了离子碎片m/z298;采用ESI-MS3获得m/z270、m/z254等离子碎片。结论：蟛蜞菊内酯在软电离模式下,正负离子模式对质谱裂解方式产生差异,其中主要产生的正负离子碎片分别为m/z287和m/z298。本研究为进一步研究蟛蜞菊内酯化合物的体内代谢过程与结构修饰提供实验依据。     

HPLC测定多烯磷脂酰胆碱胶囊中的溶血磷脂酰胆碱

目的 采用HPLC-ELSD测定多烯磷脂酰胆碱胶囊中溶血磷脂酰胆碱的含量.方法 色谱柱为硅胶(250 mm×4.6mm,5 μm),流动相A为正己烷-异丙醇(3:4),流动相B为正己烷-异丙醇-水(3:4:0.75),梯度洗脱,流速为1.5 mL·min~(-1),空气流速为3.0 L·min~(-1),蒸发管温度为100 ℃.结果 溶血磷脂酰胆碱0.1～1.5 mg·mL~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.90%.结论 所用方法简便、专属性好,可用于多烯磷脂酰胆碱胶囊中溶血磷脂酰胆碱的含量检测.     

HPLC-ELSD/HPLC-TOF/MS法分析大豆磷脂酰胆碱的分子种

目的运用HPLC-ELSD/HPLC-TOF/MS法对大豆磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)的分子种进行定性及定量研究。方法色谱分离采用Phenomenex Luna C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水(体积比为90∶5∶5),柱温:40℃,流速:1.0 L·min-1,ELSD参数:载气流速为2.0 L·min~(-1),漂移管温度:72℃。质谱定性采用飞行时间质谱,ESI源,正离子模式,质量扫描范围为50~1 500。结果该方法能很好的分离大豆磷脂酰胆碱的分子种,并通过飞行时间质谱鉴定,自制磷脂酰胆碱所含的主要分子类型有18∶3/18∶3-PC、18∶2/18∶3-PC、18∶2/18∶2-PC、16∶0/18∶2-PC、18∶1/18∶2-PC和18∶0/18∶2-PC,经归一化法测得18∶2/18∶2-PC含量为73.9%。结论该方法具有高分辨率、高灵敏度的特点,为大豆磷脂酰胆碱质量控制的深入研究奠定了良好的基础。     

FAB-MS/MS法研究4(20)-双键5/7/6型紫杉烷类二萜化合物的质谱裂解特征

目的　研究4(20)-双键5/7/6型紫杉烷类二萜化合物的质谱裂解特征,以及取代基种类及位置对质谱裂解的影响,探讨该类化合物的质谱裂解规律。方法　利用FAB技术测定该类型3种化合物的［M+H］⁺和［M+Na］⁺等不同加合离子,以及由其产生的特征碎片离子的CID-MS/MS谱,并对有关特征离子进行了高分辨测定。结果　C-10位为BzO取代的化合物1和2主要以［M+Na］⁺离子形式存在,该离子主要进行失去HOBz的裂解反应,而C-10位为OH基的化合物3主要以［M+H］⁺离子形式存在,该离子以失去1个和2个H₂O的裂解反应为主导。另外,化合物1和3最终裂解产生m/z 237离子,而化合物2产生m/z 253离子。结论　MS/MS技术可以有效地进行结构差异甚微的相关化合物的结构解析。     

复方甘草酸苷和多烯磷脂酰胆碱治疗慢性丙型肝炎

目的探讨复方甘草酸苷联合多烯磷脂酰胆碱治疗慢性丙型肝炎合并非酒精性脂肪肝的临床疗效。方法应用复方甘草酸苷联合多烯磷脂酰胆碱治疗慢性丙型肝炎30倒,并和30例常规治疗组对比。结果治疗组显效率63．33％（19／30）;总有效率为90．0％（27／30）;对照组显效率36．7％（11／30）;总有效率为66．7％（20/30）,2组总有效率相比差异有统计学意义。结论复方甘草酸苷联合多烯磷脂酰胆碱治疗慢性丙型肝炎合并非酒精性脂肪肝,治疗前后患者的症状、体征、肝功能、血脂等指标较治疗前明显改善。     

丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定

目的建立HPLC法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:Lichrospher 100 DIOL(250 mm×4 mm,5μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)为流动相A,正己烷-异丙醇(18∶30)溶液为流动相B;梯度洗脱;柱温:35℃。结果溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为0.03~0.25(r1=0.9997)和0.01~0.10(r2=0.9962)mg·mL^-1,定量限分别为0.72和0.31μg。结论该方法准确、可行,精密度高,可用于溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定。     

Characterization of human urinary metabolites of the antimalarial piperaquine.

Five metabolites of the antimalarial piperaquine (PQ) (1,3-bis-[4-(7-chloroquinolyl-4)-piperazinyl-1]-propane) have been identified and their molecular structures characterized. After a p.o. dose of dihydroartemisinin-piperaquine, urine collected over 16 h from two healthy subjects was analyzed using liquid chromatography (LC)/UV, LC/tandem mass spectrometry (MS/MS), Fourier transform ion cyclotron resonance (FTICR)/MS, and H NMR. Five different peaks were recognized as possible metabolites [M1, 320 m/z; M2, M3, and M4, 551 m/z (PQ + 16 m/z); and M5, 567 m/z (PQ + 32 m/z)] using LC/MS/MS with gradient elution. The proposed carboxylic M1 has a theoretical monoisotopic molecular mass of 320.1166 m/z, which is in accordance with the FTICR/MS (320.1168 m/z) findings. The LC/MS/MS results also showed a 551 m/z metabolite (M2) with a distinct difference both in polarity and fragmentation pattern compared with PQ, 7-hydroxypiperaquine, and the other 551 m/z metabolites. We suggest that this is caused by N-oxidation of PQ. The results showed two metabolites (M3 and M4) with a molecular ion at 551 m/z and similar fragmentation pattern as both PQ and 7-hydroxypiperaquine; therefore, they are likely to be hydroxylated PQ metabolites. The molecular structures of M1 and M2 were also confirmed using H NMR. Urinary excretion rate in one subject suggested a terminal elimination half-life of about 53 days for M1. Assuming formation rate-limiting kinetics, this would support recent findings that the terminal elimination half-life of PQ has been underestimated previously.     

8种氨基糖苷类抗生素的电喷雾离子阱质谱

目的探讨8种结构相似的氨基糖苷类抗生素的质谱裂解规律。方法在正离子检测方式下，用电喷雾离子阱质谱法对庆大霉素、小诺霉素、西索霉素、依替米星、奈替米星、威替米星、卡那霉素A和妥布霉素进行多级质谱分析。结果各化合物在二级质谱分析时，均可发生B环与C环之间的糖苷键断裂，生成脱去C环（氨基葡萄糖）的碎片离子m/z 322（庆大霉素、小诺霉素和西索霉素）、m/z 350（依替米星、奈替米星和威替米星）和m/z 324（卡那霉素和妥布霉素）；在三级质谱分析时，则进一步发生A环（氨基葡萄糖）与B环（脱氧链霉胺）之间的糖苷键断裂，生成A环或B环的碎片离子m/z 163和 m/z 191或m/z 160和m/z 162。 结论通过多级质谱分析可获得氨基糖苷类抗生素分子丰富的结构信息，并可用于该类化合物的快速结构解析和定量分析。     

Strategy for structure elucidation of drug metabolites derived from protonated molecules and (MS)n fragmentation of zotepine, tiaramide and their metabolites

TSQ ESI MS/MS and ion trap ESI MS(2) cleave protonated molecules. MS(2) at m/z 332 of zotepine cleaved m/z 245 (10%), m/z 287 (5%) and m/z 315 (100%) fragment ions at protonated positions. MS(2) at m/z 356 of tiaramide cleaved m/z 338 (18%), 313 (10%), 226 (100%), 198 (78%) and 131 (60%) fragment ions at protonated positions. The ESI ion trap MS produced new internal protonated molecules in an ion trap, such as m/z 113 and m/z 88 from m/z 131 protonated piperazinonium, and m/z 245 protonated 8-chloro dibenzo[b,f]thiepin. ESI ion trap (MS)(n) (n>or=3) cleaved new internal protonated molecules. It also causes carbocation cleavage, alpha cleavage, onium cleavage and McLafferty cleavage. We can easily elucidate the structure of metabolites from the difference in m/z of corresponding fragments between unchanged compound and its metabolite. Reactive oxygen diradicals involved in cytochrome P-450 cycles react with electron rich groups and reactive C-H bonds of zotepine and tiaramide to produce metabolites of 2-hydroxyzotepine, 3-hydroxyzotepine, norzotepine, zotepine-N-oxide, zotepine-S-oxide, Tiaramide carboxylic acid, dehydroxyethyltiaramide and tiaramide-N-oxide. The strategy for structure elucidation of drug metabolites was established on the basis of the reactivity of unchanged drug with reactive oxygen diradicals involved in cytochrome P-450 cycles and theory associated with protonated molecules and (MS)(n) fragmentation of drug metabolites.     

阿苯哒唑硫氧化代谢产物的合成及电喷雾质谱分析

目的合成阿苯哒唑硫氧化物 ,研究阿苯哒唑及其硫氧化物的质谱断裂途径。方法在室温条件下 ,使用过氧化氢将阿苯哒唑氧化成相应的亚砜和砜 ,用硅胶柱层析方法进行分离纯化。采用电喷雾质谱法检测阿苯哒唑及合成产物。结果一次反应同时制得 2种产物 ,[5 (丙基亚砜基 ) 1H 苯并咪唑 2 基 ]氨基甲酸甲酯 (Ⅱ )和 [5 (丙砜基 ) 1H 苯并咪唑 2 基 ]氨基甲酸甲酯 (Ⅲ )经质谱检测其准分子离子峰分别为m/z 2 82和m/z 2 98。结论阿苯哒唑及其 2种氧化产物质谱断裂方式存在共性 ,易生成 [M +H - 32 ]+ 或 [M +H - 4 2 ]+ 的特征碎片离子 ,构成二级或三级质谱的基峰     

Rapid and simultaneous measurement of midazolam, 1'-hydroxymidazolam and digoxin by liquid chromatography/tandem mass spectrometry: application to an in vivo study to simultaneously measure P-glycoprotein and cytochrome P450 3A activity

In order to simultaneously determine in vivo P-glycoprotein (P-gp) and Cytochrome P450 3A (CYP3A) activity, a new, rapid and sensitive liquid chromatography/tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method has been developed and fully validated to simultaneously determine midazolam (MDZ, as CYP3A substrate), 1'-hydroxymidazolam (1'-OHMDZ) and digoxin (DG, as P-gp substrate) in rat plasma using digitoxin as the internal standard (IS). After a single step liquid-liquid extraction with tert-butyl methyl ether/dichloromethane (75:25, v/v), analytes were subjected to LC-MS/MS analysis using positive electro-spray ionization (ESI(+)) under selected reaction monitoring mode (SRM). Chromatographic separation was performed on an XTerra MS C18 column (50mm×2.1mm, i.d. 3.5μm). The MS/MS detection was conducted by monitoring the fragmentation of 326.05 → 244.00 (m/z) for MDZ, 342.02 →168.01 (m/z) for 1'-OHMDZ, 798.33 → 651.36(m/z) for DG and 782.67 → 635.24 (m/z) for IS. The method had a chromatographic running time of 3min and linear calibration curves over the concentrations of 2-400ng/mL for MDZ and 1'-OHMDZ and 0.5-100ng/mL for DG. The recoveries of the method were 86.8-96.3% for MDZ, 84.6-86.4% for 1'-OH MDZ, and 81.7-85.1% for DG. The lower limit of quantification (LLOQ) of the method was 2ng/mL for MDZ and 1'-OHMDZ and 0.5ng/mL for DG. The intra- and inter-batch precision were less than 15% for all quality control samples at concentrations of 5, 50 and 320ng/mL for MDZ and 1'-OHMDZ and 1, 10 and 80ng/mL for DG. The validated LC-MS/MS method has been successfully used to analyze the concentrations of MDZ, 1'-OH MDZ and DG in rat plasma for simultaneous measurement of in vivo P-gp and CYP 3A activity.     

盐酸苯达莫司汀的电喷雾串联质谱分析

目的:应用电喷雾串联质谱(ESI-MSn)技术对盐酸苯达莫司汀进行质谱裂解分析,通过主要特征碎片离子研究其裂解规律。方法:样品溶液进样后,采用ESI-MS1～4碰撞裂解方式,解析盐酸苯达莫司汀的特征碎片离子。结果:盐酸苯达莫司汀在正离子模式下,采用ESI-MS1获得了分子离子峰[M+H]+m/z 358;采用ESI-MS2获得了离子碎片m/z340;采用ESI-MS3获得m/z304、m/z276等离子碎片;采用ESI-MS4得到的主要离子碎片分别为m/z240、m/z268、m/z276等。负离子模式下采用ESI-MS1获得了[M-H]-m/z356,而采用ESI-MS2～4碰撞裂解,基本无响应。结论:盐酸苯达莫司汀在正离子模式下,主要通过脱去羧基中的H2O、CO碎片和5位N上的HCl、CH3Cl以及CH2=CHCl碎片的方式进行裂解。负离子模式下,只有一级电离产生的分子离子峰[M-H]-m/z356有一定响应。说明盐酸苯达莫司汀在负离子模式下比较稳定,而在正离子模式下容易裂解产生一系列碎片。本研究为盐酸苯达莫司汀的结构修饰及其代谢产物结构判断提供参考依据。     

电喷雾串联质谱法研究阿莫西林的裂解方式

目的:应用电喷雾离子阱串联技术探讨阿莫西林的裂解方式,为阿莫西林的定性定量分析等提供依据。方法:先采用液相色谱对样品进行纯化,再应用电喷雾串联质谱仪研究阿莫西林裂解方式和碎片结构。结果:阿莫西林同时具有3种不同的β-内酰胺环开环方式;m/z:114碎片可通过其中2种不同开环方式获得碎片;易失去中性碎片NH3,形成的m/z:349碎片可以作为阿莫西林分析的特征碎片用于定性和定量分析。结论:所采用的技术方法灵敏、准确,可用于进一步探讨阿莫西林的体内代谢转化情况和定性定量分析。     

电喷雾离子阱质谱检测亮菌甲素琥珀酸单酯的负离子裂解途径

目的采用电喷雾离子阱（ESI-MS）质谱技术研究亮菌甲素琥珀酸单酯（ArAAE）的结构和裂解途径。方法采用蠕动注射泵直接进样,ESI-MS负离子模式检查,流速为0.3 mL/h,毛细管电压为4 500 V,雾化器压力、干燥器流速和干燥器温度分别为10 psi、5 L/min和350℃,质量扫描范围m/z 100～500。结果采用ESI-MS获得了m/z 333[M-H]-,采用ESI-MS2获得了m/z 233碎片离子,而采用ESI-MS3主要获得了m/z 215,203,189,177,171,163,147和135等碎片离子。ESI-MS和ESI-MS2主要有一种裂解途径,而ESI-MS3主要有3种裂解途径,主要是酯键的裂解,并对m/z 203,189和163特征碎片离子进行ESI-MS4质谱研究,归属了其主要特征碎片离子,分析和讨论了该化合物的结构和质谱特征。结论ESI-MS负离子模式下适用于检测亮菌甲素琥珀酸单酯各级碎片裂解,归属了主要的碎片裂解途径,其方法快速、简便,为进一步研究ArAAE的体内代谢过程与结构修饰提供试验依据。