幼鼠慢性内脏高敏感模型的建立及评价

目的探讨新生期母婴分离（NMS）建立幼年慢性大鼠内脏高敏感模型的可能性及意义。方法 30只新生大鼠随机分成3组,A组出生后第2-14天每天与母鼠分离3 h（8∶00-11∶00）,连续13 d;B组为出生后第2-21天每天与母鼠分离3 h（8∶00-11∶00）,连续20 d;C组不予任何处理,与母鼠同笼。随后,3组大鼠常规饲养。6周龄时采用腹壁撤退反射（AWR）,肌电痛阈测定评估其内脏敏感性。结果与C组比较,A组、B组幼鼠AWR评分、腹外斜肌放电波幅值明显升高,痛阈明显降低;A组和B组组间幼鼠AWR评分、腹外斜肌放电波幅值及痛阈差异无显著性意义;3组幼鼠间玻璃小球排出时间及粪点数差异无统计学意义。结论持续的新生期母婴分离可建立一种没有明显肠道动力学改变的幼鼠慢性内脏痛模型。     

烙闭上巩膜静脉建立大鼠慢性高眼压模型

目的烙闭大鼠不同数量上巩膜静脉,探索建立理想的慢性高眼压模型。方法采用完全随机设计方法将45只健康SD雄性大鼠分为3组,分别烙闭大鼠右眼2支、3支、4支上巩膜静脉,建立大鼠慢性高眼压模型,左眼作为对照眼。测量术前及术后、术后1d、1周、2周、1月、2月眼压。结果各组术后眼压与对照眼比较均有升高,差别具有显著性意义(P<0.01),提示烙闭2、3、4支上巩膜静脉均可以建立慢性高眼压模型;进一步进行组间比较,3组间的右眼眼压在术后、术后1d、1周、2周、1月存在显著性差异,具有统计学意义(P<0.05);术后2月,3组右眼眼压差别无统计学意义(P>0.05)。结合线图和术后并发症的统计结果,烙闭3支上巩膜静脉组的眼压更加稳定,术后并发症少。结论烙闭3支上巩膜静脉可以建立一个更加稳定、持久、眼压相对高、并发症少的慢性高眼压模型     

大鼠慢性萎缩性胃炎模型的建立

目的建立大鼠慢性萎缩性胃炎（CAG）模型。方法饮用及灌胃给予20 mmol/L去氧胆酸钠和30%、60%乙醇13周。检测大鼠胃粘膜组织病理变化及生化指标。结果模型组大鼠胃窦粘膜的炎症指数明显增加,胃窦固有腺厚度和面积明显缩小;游离酸和总酸浓度明显降低,游离粘液量和胃蛋白酶活性明显升高,血清胃泌素及丙二醛含量明显升高,白细胞介素-2及超氧化物歧化酶活性明显降低。结论成功建立了CAG动物模型,为慢性萎缩胃炎疾病的研究提供了一种理想的动物模型。     

反流性食管炎大鼠模型的建立

目的 :探讨建立反流性食管炎大鼠模型的最佳方案。方法 :将 60只 SD大鼠分为 3组 ,用不同的手术方式建立胃十二指肠混合反流模型 ,A组 :全层间断缝合组 ,B组 :全层间断 +浆肌层包埋缝合组 ,C组 :全层间断密集缝合组 ,并对 3组模型术后不同时期的食管标本进行大体和组织学改变的观察。结果 :术后 A、B、C组的死亡率分别为 75 %、70 %和1 0 % ,主要死亡原因为吻合口瘘、梗阻、肺部及腹腔感染 ,C组与 A、B两组相比有显著性差异 ( P<0 .0 0 1 ) ;3组间反流性食管炎的发生率及组织学改变均无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :全层间断密集缝合是此模型最佳的吻合方式 ,成功模型的建立需要注重多方面的综合因素。     

酒精直接灌胃法建立大鼠酒精性肝病模型

目的 建立大鼠酒精性肝病模型.方法 应用逐渐增加酒精浓度(30%～60%)和剂量(5～9 g/kg·d-1)的方法,每日给予大鼠灌胃2次,分别于0、4、8、12、16周末留取血清和肝组织标本,检测血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶、氧化应激指标和肝组织病理变化.结果 随着病程进展,出现肝功能受损、氧化应激指标变化,肝组织病理呈现肝细胞脂肪变、小叶内坏死灶和纤维化改变.结论 逐渐增加浓度和剂量的酒精直接灌胃法可建立大鼠慢性酒精性肝病模型.     

新生大鼠脑缺氧缺血损伤模型的建立

目的按Rice方法建立新生大鼠脑缺氧缺血损伤(HIBD)模型.方法 7 d龄SD新生大鼠62只,随机分为正常对照组(n=14)、假手术组(n=14)及HIBD模型组(n=34).HIBD模型组大鼠行左侧颈总动脉永久性结扎,2 h后置于37℃恒温水浴的1L有机玻璃缺氧舱中,输入氧浓度为8%±0.1%的氮氧混合气体持续缺氧2 h,观察缺氧缺血后24 h内神经行为变化及24、48、72 h脑组织病理改变,并用干湿法测定24 h脑含水量. 结果 HIBD模型组大鼠神经行为异常发生率为94.12%,正常对照组和假手术组未发生神经行为异常.HIBD模型组左侧脑组织出现明显的病理改变,HE染色可见神经元损伤和神经胶质细胞增生;正常对照组和假手术组脑组织未见异常.HIBD模型组左脑含水量较右脑、正常对照组和假手术组显著增加(P<0.001).结论应用Rice方法建立的新生大鼠HIBD模型稳定性良好,其病理变化有一定的规律性,该模型的建立对于研究新生儿HIBD具有重要意义.     

大鼠肾移植慢性排斥反应模型的建立

目的 建立稳定而可靠的大鼠肾移植慢性排斥反应模型.方法 选用30只Wistar大鼠为供体,30只SD大鼠为受体.取供体左肾,采用HC-A离体肾保存液原位灌注,将供肾动、静脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合,以输尿管膀胱植入法行尿路重建,建立大鼠同种异体肾移植模型.分别于术后3、6、9周取移植肾观察大体和组织形态学变化,观察术后并发症及排斥反应情况.结果 移植肾脏大体和组织形态学呈渐进性变化,至术后9周可出现明显的慢性排斥反应病理改变.移植肾脏可顺利存活,部分出现肾积水并发症,但不影响排斥反应病理变化.结论 本方法可建立稳定、可靠的肾移植慢性排斥反应模型,是研究慢性排斥反应的理想模型.     

大鼠肾移植慢性排斥反应模型的建立

目的 建立一种稳定的大鼠原位肾移植慢性排斥反应模型.方法 供体为近交系F344大鼠,受体为Lewis大鼠,供肾采用左肾,在体修整,原位灌注.肾静脉用硬膜外导管做为临时内支架管端-端、六针法吻合,腹主动脉端-侧连续缝合,输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合.受体术前3d开始环抱素A灌胃至术后30 d(5 mg/kg·d),以预防急性排斥反应.结果 手术时间120～180 min;手术成功率90.9% (40P44) ;受体均存活60 d.并发症有吻合口出血、静脉血栓形成、急性排斥反应等.结论 供肾原位灌注,在体修整是简单可靠的方法.静脉内支架管端端吻合,腹主动脉端侧吻合能够达到稳定的成功率,值得推广.熟练的外科操作技能和血管吻合技术是手术成功的关键.     

体外大鼠肝细胞坏死性损伤模型的建立

目的　建立体外肝细胞坏死性损伤模型,为进一步研究药物对体外肝细胞损伤的保护作用奠定基础。方法　采用Ⅳ型胶原酶灌流法分离大鼠肝实质细胞并进行体外培养,利用四氯化碳(CCl4)和过氧化氢(H2O2)体外诱导肝细胞坏死性损伤,检测ALT、AST、MDA、GSHpx等指标和采用MTT比色法。结果　CCl4体外诱导肝细胞损伤的最适损伤浓度和损伤时间为:8mmol·L-1,6h;H2O2体外诱导肝细胞坏死性损伤的最适损伤浓度和损伤时间为06mmol·L-1,1h。结论　利用最适损伤浓度的CCl4和H2O2分别与大鼠肝细胞共培养最适损伤时间,可建立两种理想的体外肝细胞坏死性损伤模型。     

大鼠三叉神经痛模型的建立

目的建立大鼠三叉神经痛模型。方法SD大鼠36只,随机分为对照组(A)、给药组(B),2组按给药位置(闩上部、闩左下方约2 mm处、闩左下方约4~5 mm处)又各分为3个亚组(各6只);埋管后B组注射青霉素G-K(300×103I U/mL,每次10μL),A组注射等量生理盐水,记录三叉神经痛的发作潜伏期与发作次数。结果B组在闩左下方约2 mm蛛网膜下腔处给药,给药后(80.17±9.37)s发生尖叫、甩头、左后肢抓同侧面部等反应,30 min内累计平均发作次数达(111.67±10.25)次,A组及B组其他给药位置未见上述反应。结论成功建立大鼠三叉神经痛动物模型,为探索三叉神经痛中枢发病机制及针对病因治疗提供理想的动物模型。     

大鼠慢性间歇性缺氧后c-fos的表达与神经细胞凋亡的关系

目的观察凋亡相关基因c-fos在慢性间歇性缺氧（CIH）大鼠大脑皮质及海马区中的表达,探讨其与睡眠呼吸暂停综合征（SAS）脑部病变的关系。方法取健康雄性SD大鼠30只,随机分为3组,即对照组、CIH4周组和CIH8周组,每组10只。分别用原位末端标记法（TUNEL）和免疫组织化学方法 （MaxVision^TM一步法）检测大鼠脑组织中的凋亡细胞和c-fos蛋白,比较3组的神经细胞的凋亡及c-fos蛋白的表达变化情况。结果 c-fos表达阳性细胞及凋亡细胞主要分布在大脑皮质深层和海马区。CIH4周组的c-fos阳性细胞数（19.25±3.61）及凋亡细胞数（4.57±0.76）均比对照组明显增高（P〈0.01）;与其余两组比较,CIH8周组的c-fos阳性细胞数（28.65±5.26）及凋亡细胞数（7.29±0.79）也均比其余2组明显增高（P〈0.01）。结论 CIH引起了c-fos蛋白的表达增强,并可诱导神经细胞凋亡;c-fos蛋白的表达可能与CIH后神经细胞凋亡有关。     

慢性低氧左移5-HT诱发大鼠肺内动脉环收缩反应的浓度-依赖性曲线

目的探讨慢性低氧对大鼠肺内动脉血管重构以及5-HT诱发肺内动脉血管环收缩效应的影响。方法常压慢性低氧诱导慢性肺动脉高压大鼠模型。比较正常组（NOR组）和慢性低氧组（CH组）大鼠血流动力学参数平均右心室收缩压（mRVSP）,平均右心室压（mRVP）及右心室压最大上升速率（dp／dtmax）及右心室肥厚指数以鉴定模型;光学显微镜下观察肺血管的病理改变;记录肺内动脉血管张力,观察5-羟色胺（5-HT）收缩效应;比较不同Ca^2＋通道阻断剂对5-HT引起的收缩效应的阻断作用。结果与NOR组比较,低氧3～4周后CH组的mRVSP、mRVP、dp／dtmax和右心室肥厚指数均明显增高（P〈0．01）;CH组大鼠肺内动脉中膜显著增生;CH组的5-HT引起的肺内动脉环收缩的浓度-依赖性反应曲线左移;30μmol／L氯化镧对30μmol／L 5-HT预收缩肺内动脉血管环效应的阻断作用在CH组显著增高（P〈0．01）,但30μmol／L SKF96365的阻断作用无显著性意义。结论慢性低氧3～4周可稳定引起大鼠肺动脉高压,并左移5-HT诱发的肺内动脉环收缩的浓度-依赖性反应曲线;Ca^2＋池操纵性Ca^2＋通道功能的上调可能是CH组5-HT高反应性的一种机制。     

大鼠左肺原位移植模型的改进

目的采用改良三袖套管吻合法建立大鼠左肺原位移植模型。方法36只雄性SD大鼠随机分为供、受体。供体术前、受体再灌注2h测血气;受体术前、再灌注后2h分别记录肺动态顺应性、气道阻力和吸气峰压值。再灌注2h后取移植肺组织作病理学检查。结果再灌注2h各项气体交换指标较基础值有统计学意义（P〈0．05）。再灌注后受体的各项呼吸力学指标呈下降趋势,但较基础值无统计学意义（P〉0．05）。光镜下见移植肺肺泡壁增厚、肺泡腔和肺间质内有炎症细胞及红细胞渗出。结论改良三袖套管吻合法简化了手术操作,可用于肺移植模型的建立。     

一种兔紫绀型心脏病动物模型的建立

目的　探讨建立兔紫绀型心脏病动物模型的方法。方法　将新西兰大白兔主肺动脉与左心耳侧侧吻合 ,形成右向左分流的紫绀型心脏病动物模型 ,紫绀组、对照组均于术后第 1周、第 4周抽取外周动脉血进行血气分析和血常规检查。结果　紫绀组与对照组比较 ,术后第 1周pH值、二氧化碳分压 (PCO2 )、血红蛋白 (Hb)、血细胞比容 (Hct)无显著差异 (P >0 .0 5) ,而氧分压 (PO2 )及氧饱合度 (SaO2 )明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;术后第 4周紫绀组Hb、Hct、PO2 及SaO2 与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ,pH值与PCO2 2组比较无显著差异 (P >0 .0 5)。结论　将新西兰大白兔的主肺动脉与左心耳吻合 ,能产生持久而稳定的低氧状态 ,与临床上紫绀型心脏病的病理生理相接近 ,是一种稳定、可靠且经济的动物模型     

心康片对阿霉素诱导的心衰大鼠心肌细胞凋亡率、胶原容积分数、肌浆网Ca~(2+)-ATP酶活性的影响

【目的】探讨心康片对阿霉素诱导的慢性心力衰竭(简称心衰)大鼠心肌细胞凋亡率、胶原容积分数、肌浆网Ca2+-ATP酶活性的影响。【方法】采用SD大鼠腹腔内注射阿霉素法复制心衰大鼠模型。于造模成功后,随机分为5组:模型组,西药组,中药低、中、高剂量组,每组10只,分别给予蒸馏水,地高辛混悬液(22.5μg/kg),心康片水溶液(9、18、36 g/kg),将以上各药物应用蒸馏水稀释成等体积10 m L/kg灌胃,每日1次,连续给药5周。另随机选取同批次大鼠10只进入假手术组,腹腔内注射等量生理盐水,蒸馏水灌胃。通过TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡率、Masson三色染色后计算大鼠心肌胶原容积分数(CVF)、定磷法测定肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)活性。【结果】与假手术组比较,模型组心肌细胞凋亡率、CVF均显著升高(P0.01),提示心衰大鼠发生了病理性心肌重构;与模型组比较,西药组与中药低、中、高剂量组心肌细胞凋亡率显著下降(P0.01),提示地高辛与心康片均能一定程度上减少细胞凋亡。西药组与中剂量、高剂量中药组的心肌胶原容积分数均低于模型组(P0.05或P0.01),可见地高辛与心康片均可显著延缓心肌细胞的纤维化。同时,中药中、高剂量组心肌细胞SERCA2a活性均显著高于模型组(P0.05或P0.01),提示心康片可能通过调节SERCA2a活性的途径,从而减轻心肌重构,改善心脏功能。【结论】心康片可能通过调节SERCA2a活性降低心肌细胞凋亡率和心肌细胞容积分数,具有抗心肌细胞凋亡、抗心肌纤维化的作用,从而延缓心肌间质重构。     

益气化痰方对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡灌洗液中AQP5、TNF-α和MUC5AC的影响

【目的】观察益气化痰方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺泡灌洗液(BALF)水通道蛋白5(AQP5)及其上游信号通道调节因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和下游信号通道调节因子黏蛋白5AC(MUC5AC)的调节作用。【方法】选用SD大鼠,随机分为空白组,模型组,益气化痰方低、中、高剂量组(剂量分别为7.398、36.99、73.98 g·kg-1·g-1)。除空白组外,其他组均采用香烟熏结合脂多糖气管滴入法复制COPD大鼠模型。采用益气化痰中药煎剂治疗COPD大鼠30 d后取材,观察肺组织苏木精—伊红(HE)染色,采用免疫组织化学法观察AQP5、TNF-α、MUC5AC的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肺泡灌洗液(BALF)中AQP5、TNF-α和MUC5AC的含量。【结果】益气化痰汤各剂量组均可改善COPD大鼠的肺组织病理损害,减弱肺组织MUC5AC、TNF-α表达,增强AQP5表达。与空白组比较,模型组肺组织BALF中AQP5浓度显著下降(P0.01),TNF-α和MUC5AC浓度显著升高(P0.01)。与模型组比较,益气化痰方低、中、高剂量组肺组织BALF中AQP5浓度显著升高(P0.01),TNF-α和MUC5AC浓度显著下降(P0.01)。与低、中剂量组比较,益气化痰汤高剂量组作用显著(P0.01)。【结论】益气化痰方对COPD的疗效可能与水通道转运密切相关。     

改良大鼠腹腔异位心脏移植模型的建立

目的:探讨大鼠腹部异位心脏移植模型的外科技巧并改良此模型的制作方法,使其更加简便且成功率高.方法:对传统Ono术式的受体准备、供心切取和吻合方法等环节进行改进,采用此改良方法建立SD大鼠的腹部异位心脏移植模型.结果:共实施100例大鼠腹部异位心脏移植术,89例成功.供心缺血时间(32±5)min,整个手术耗时(60±10)min.结论:经典的Ono术式经改进后,术中缩短了供心缺血时间,降低了吻合难度,手术成功率高.整个过程均可单人操作,无需显微镜,使其易于掌握与开展.     

六味安消对功能性消化不良模型大鼠胃运动的影响

目的:探讨六味安消对功能性消化不良(FD)大鼠胃运动的影响。方法:实验共分对照组,FD组、吗丁啉组及六味安消高、中、低剂量组,通过建立FD动物模型及灌胃给予不同剂量六味安消,观察大鼠进食量的变化及胃收缩的频率和幅度。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现食量减少(P<0.05),胃平滑肌收缩频率、幅度均下降(P<0.05);六味安消中剂量、高剂量及吗丁啉组与模型组进食量相比有显著性差异(P<0.05),胃收缩频率、幅度均上升(P<0.05);六味安消低剂量组与模型组相比无显著性差异。结论:六味安消中剂量和高剂量可恢复功能性消化不良大鼠的食量减少及胃收缩频率、幅度降低等症状,此作用与吗丁啉相似。     

Bilateral bidirectional superior cavopulmonary shunt is more beneficial in medium and long term clinical outcomes than unilateral shunt

Background The present study was aimed to compare the effects of bilateral and unilateral bidirectional superior cavopulmonary shunt （b-BDG and u-BDG） on pulmonary artery growth and clinical outcomes. Methods The 51 subjects enrolled in this study were divided into two groups： those receiving b-BDG （n=21） and those receiving u-BDG （n=30）. Clinical records were reviewed retrospectively at a mean of 43.3 months after BDG procedures. Chi square and t-tests were performed to analyze the data. Results Left and right pulmonary artery diameters increased 27%-37% in both groups. The pulmonary artery index increased 37.2% after b-BDG and 27.0% after u-BDG, b-BDG patients experienced a significant decrease in mean hemoglobin concentration and hematocrit value, and a correlated change in postoperative diameter of left pulmonary artery （LPA） and pulmonary artery index （y=0.2719, x=-1.8278; R=0.564, P=-0.008）. The change ratio of hemoglobin and postoperative LPA were also correlated in b-BDG patients （y= -0.0522x ＋ 0.3539; R=-0.479, P=-0.028）. Only one b-BDG patient versus twelve u-BDG patients needed total cavopulmonary connections 31.8 months after BDG surgery （P=-0.0074）. Moreover, only one （4.8%） b-BDG patient but eight u-BDG patients （26.7%） developed pulmonary arteriovenous malformations. Conclusions b-BDG increases bilateral pulmonary blood flow and promotes growth of bilateral pulmonary arteries, with preferable physiological outcomes to u-BDG. Results may imply that subsequent Fontan repair may not always be needed. Chin Med J 2009; 122（2）： 129-135