柯萨奇病毒B3型VP1基因在酿酒酵母中的表达

目的在酿酒酵母AH109中表达柯萨奇病毒B3型VP1基因，并检测VP1蛋白对报告基因的转录自激活作用。方法用乙酸锂法将重组柯萨奇B3病毒VP1基因的细菌一酵母菌穿梭载体pGBKT7一VP1转化酵母菌。通过表型鉴定、PCR法验证质粒导入宿主菌后，Western blotting验证VP1蛋白的表达，最后经营养缺陷培养基和酶底物x—a-Gal反应检测VP1基因对报告基因的转录自激活作用。结果表型鉴定和PCR法均证实pGBKT7-VP1质粒转入酵母菌成功，Western blotting证实AH109能表达VP1蛋白，营养缺陷型培养基和酶底物X-a—Gal反应结果显示VP1蛋白对3种报告基因均无转录自激活作用。结论柯萨奇病毒B3型VP1蛋白可作为酵母双杂交系统的诱饵蛋白，为筛选与其相互作用的宿主细胞蛋白提供了基础。     

抗KDRscFv复制缺陷型腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建抗KDRscFv复制缺陷型腺病毒载体，为抗KDRscFv抗肿瘤血管生成的体内应用打下实验基础。方法采用重叠延伸PCR方法构建IL-2信号肽及抗KDRscFv融合基因，克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV，转染含pAdEasy-1的BJ5183细菌，经细菌内同源重组产生携带抗KDRscFv基因（含信号肽）的重组腺病毒载体pad-抗 KDRscFv，经脂质体法转染293细胞，包装产生携带抗KDRscFv基因的重组腺病毒Ad-抗 KDRscFv。结果构建了表达抗KDRscFv基因的复制缺陷型腺病毒，且该重组腺病毒能在肝癌细胞株HepG2中高效表达。结论成功构建表达抗KDRscFv基因的复制缺陷型腺病毒载体，为进一步研究抗KDR-scFv在肿瘤治疗中的作用研究提供实验基础。     

细菌L型败血症50例临床分析

细菌Ｌ型败血症５０例临床分析雷振之王衍富细菌Ｌ型是细菌细胞壁缺陷的变异菌，不仅临床表现有其特殊性，在治疗上与细菌型败血症亦有所不同，现分析如下。临床资料一、一般资料１９９１年１月至１９９４年１２月间我院诊断为Ｌ型细菌败血症５０例。男２１例，女２９例，...     

不同空气细菌采样方法的比较

空气菌落总数测定是对医院、幼托机构、公共场所等监测的主要项目之一。目前大部分都采用自然沉降法,为比较不同方法对空气细菌采样的结果,我们在乌铁局辖区某宾馆招待所,对室内空气同时用LWC-1型离心式空气微生物采样器和普通营养琼脂平板沉降法进行采样,现将两种方法的检测结     

生态免疫肠内营养

研究发现,重症患者的免疫功能紊乱和因细菌移位导致肠源性感染增加是导致其发生感染甚至死亡的两大重要原因.因此,免疫营养、生态营养以及生态免疫营养应运而生,并开始在临床营养支持中得到应用.     

系统性红斑狼疮并发细菌及真菌感染的临床研究

目的　研究近年系统性红斑狼疮 (SLE)患者发生细菌与真菌感染的临床特点。方法　选择 1990年 1月至 1998年 5月确诊为SLE并发细菌和真菌感染的病例 96例 ,统计分析有关资料。结果　 96例SLE患者共发生 15 1例次感染 ,其中医院感染占 48 3% ;革兰氏阴性 (G-)杆菌和革兰氏阳性 (G+ )球菌感染分别占 40 4%和 30 5 % ,真菌占 18 5 % ,其他细菌占 10 6 % ;2 7例次(17 9% )感染由细胞壁缺陷型 (L型 )细菌引起。感染发生后 5 0 %以上的患者无明显感染中毒表现。结论　SLE患者感染的临床表现与一般感染有所不同 ;医院感染发生率较高 ;G-杆菌是其最常见病原菌。及时采集有关标本作L型细菌培养可减少对感染的误诊、漏诊     

结核分枝杆菌L型研究现状与兽医临床

细菌L型（bacterial L-forms）是细菌在体内外受到各种直接或间接损伤细胞壁的理化和生物因素的影响,其细胞壁受到破坏或细胞壁的合成受阻而转化成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌（cell Wall-de-ficeint bacteria,CWDB）。结核分枝杆菌（Myco-bacterium Tuberculosis）也同其它细菌一样,在干扰细胞壁合成或破坏细胞壁结构的因素作用下以及在自然生长繁殖的过程中,发生细胞壁缺陷形成L型（MTB—L）。     

金黄色葡萄球菌L型变及其与抗生素的关系

L型是细菌的细胞壁部分或全部缺陷型。自1935年首次从念珠状链球菌培养物中发现其自发形成，迄今在几乎所有的细菌以及多种螺旋体和真菌中都发现L型的存在。现对L型的诱变因素、L型的致病机理和L型的临床治疗等作一综述。一、L型的诱变与生化改变黄谷良等总结L型的诱变因素主要     

整蛋白型肠内营养对老年肝硬化患者营养指标、NRS2002评分、肝功能及并发症的影响

目的 探讨整蛋白型肠内营养对老年肝硬化患者营养指标、NRS2002评分、肝功能及并发症的影响.方法 选取2015年3月至2019年3月文昌市人民医院收治的148例老年肝硬化患者为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组74例.对照组进行常规饮食,观察组在常规饮食的基础上加用整蛋白型肠内营养剂,两组连续干预6个...     

cagA(+)Hp圆球体实验动物模型的建立

目的　建立Hp圆球体动物模型。 方法　通过去营养法来培养cagA(+)Hp圆球体 ,定期用MTT和SCC方法来检测细菌的代谢活性 ,用吉姆萨染色和电镜负染色来观察细菌在不同时期的形态和变化。在圆球体培养的第 7周 ,进行幽门螺杆菌及其圆球体经口感染裸鼠的实验。结果　通过细菌学、尿素酶实验、16SRNA、cagA(+)PCR检测和电镜负染色等方法确定从已喂服幽门螺杆菌及其圆球体的裸鼠胃里分离到的细菌克隆 ,经证实为cagA(+)Hp。 结论　首次在裸鼠上证实了Hp圆球体是Hp“粪—口”传播链上不可缺少的一环。     

应用随机扩增多态DNA技术鉴定淋球菌L型的临床意义

淋球菌在感染过程中 ,受体内外多种因素的影响易转变成 L型。稳定的 L型在体内不易回复成细菌型 ,且 L型缺壁后其许多生物学特性与原菌存在一定差异 ,因此用常规细菌鉴定方法对其菌种难以鉴定 ,从而影响了其临床针对性治疗。随机扩增多态 DNA(RAPD)技术是以多聚酶链反应 (PCR)为基础 ,利用随机引物和基因组 DNA模板 ,在较低温度下配对 ,延伸而获得产物。我们运用 RAPD-PCR技术将已知的淋球菌及其 L型进行同源性对比研究 ,旨在建立一种快速、特异、简便的细菌 L型鉴定方法。现报告如下。资料与方法 :1菌种 :淋球菌 L型为本院临床…     

营养免疫

营养免疫(i mmunonutrition)是研究机体摄入的营养物质种类、数量、质量、配伍对机体营养状态的影响,特别研究对机体免疫功能影响的一门学科。营养免疫是一个生理学问题,和营养学一样它同时又是一个临床问题。患病个体的营养状态会影响免疫状态是一个公认的观点,包括:脏器衰竭的营养支持与免疫,严重感染的营养与免疫,创伤后的营养与免疫,恶性肿瘤的营养与免疫,恶液质的营养与免疫,免疫缺陷病的营养与免疫等。这些也是多年临床所重视的治疗要点,但真正建立营养免疫学是从1967年美国的Dudrick和Wibmore开始。1967年以前的研究主要是饮食的营…     

分枝杆菌Ⅶ型分泌系统的结构、底物与功能

细菌分泌系统对于细菌的发育、种内和种间竞争、营养获取、毒力、生理、遗传、生态都非常重要。细菌利用分泌系统将蛋白质分泌到细胞外,也是细菌适应生境所必需的。分枝杆菌Ⅶ型分泌系统及其底物与结核分枝杆菌致病密切相关,笔者将对Ⅶ型分泌系统的组成、结构、底物和功能进行介绍,尤其是与宿主相互作用中的功能,以期为研发结核病新的控制措施提供基础。     

我国结核分支杆菌L型实验研究现状与亟待解决的问题

结核分支杆菌同其他细菌一样 ,在不利的环境中 (如受理化因素、药物及机体免疫力的影响 )可形成细胞壁缺损型 ,即Ｌ型。由于细胞壁的部分或完全缺陷 ,致使细菌的染色性、致病性、对药物的敏感性等诸多生物学性状发生改变 ,给结核病的诊断、治疗和预防造成困难。近年来 ,随着人们对结核分支杆菌Ｌ型 (ＭＴＢ Ｌ型 )认识程度的加深 ,研究报道日益增多。文中谈谈我国ＭＴＢ Ｌ型实验研究现状与亟待解决的问题。一、研究现状1 .致病性研究 :目前认为ＭＴＢ Ｌ型的致病机制与以下因素有关[1 ,2 ] 。 (1 )粘附作用 :研究表明细菌Ｌ型极易粘附到红…     

危重型新型冠状病毒合并细菌/真菌感染风险预测模型的建立及验证

目的?建立危重型新型冠状病毒感染（corona virus disease 2019, COVID-19）合并细菌/真菌感染风险预测模型并验证。 方法?回顾性选取2022年12月1日—2023年1月11日间在我院确诊为危重型COVID-19的186例患者作为研究对象，其中在2022年12月1—28日间收治的127例患者作为建模组，2022年12月29日—2023年1月11日收治的59例作为验证组。根据是否合并细菌/真菌感染，将研究对象分为感染组和非感染组。记录研究对象获得标本培养阳性结果前的一般资料及临床资料，Logistic回归分析筛选独立危险因素，构建列线图，并验证模型准确性。结果?Logistic回归分析显示，年龄、APACHEⅡ评分、基础疾病种数、意识障碍情况、是否使用呼吸机是危重型COVID-19患者发生细菌/真菌感染的独立危险因素。据此建立列线图模型，Hosmer-Lemeshouw检验结果显示建模组P=0.459，验证组P=0.982，拟合度较好。ROC曲线显示此列线图模型具有较好的区分度，建模组和验证组列线图模型预测危重型COVID-19患者发生细菌/真菌感染的AUC分别为0.941（95%CI：0.899～0.983）、0.843（95%CI：0.728～0.959），决策曲线结果显示此列线图预测模型价值较高。结论?基于危重型COVID-19患者危险因素构建的预测合并细菌/真菌感染发生风险的列线图模型具有一定的临床实用价值，能为医护人员早期识别管理危重型COVID-19发生细菌/真菌感染高风险患者提供参考。     

喉癌合并2型糖尿病患者术后营养护理分析

目的重点探索2型糖尿病合并喉癌患者手术的营养护理方法及效果。方法选取的研究对象是2011年1月—2013年12月在该院接受治疗的68例喉癌合并2型糖尿病患者,将患者随机分成两组,采用常规护理照顾34例对照组,采用营养护理照顾34例观察组,对比两种护理方法的效果。结果对照组中,营养差的总共有4例,营养欠佳的总共有10例,营养正常的总共有20例。观察组中,营养差的总共有1例,营养欠佳的总共有2例,营养正常的总共有31例。观察组的营养状况显著优于对照组。结论喉癌合并2型糖尿病患者术后给予营养护理,有利于改善患者的营养状况。     

细菌粘附机理

<正> 微生物和宿主间的相互作用在医学上是一个古老的课题。近年来,随着分子生物学的发展,微生物学工作者对这一课题在分子水平进行了研究,并把焦点放在“细菌粘附”这一细菌和宿主间作用的关键步骤。细菌粘附不仅在病原菌中表现出致病的重要性,而且对于宿主体内正常菌群的建立和调整也是十分重要的。 对细菌粘附的研究,首先是从菌毛开始的[1～3]。随着对细菌粘附机理的深入,提出了粘附素(Adhes-     

细胞壁缺陷结核分枝杆菌对动物及细胞致病作用的研究

目的了解细胞壁缺陷结核分枝杆菌对动物及细胞的致病作用,初步探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌的致病机制。方法将结核分枝杆菌稳定L型(TBL)接种Vero细胞和PPD试验阴性的豚鼠腹股沟皮下,观察细胞病变和动物的发病情况、PPD反应、组织病理学改变以及分离培养结核分枝杆菌及其L型。结果结核分枝杆菌L型感染72h后,细胞形成空泡、变圆、脱落和裂解,L型粘附于细胞表面或侵入细胞内生长。高剂量L型感染豚鼠,可见局部皮肤红肿及腹股沟淋巴结肿大,但PPD试验阴性。病理学检查可见结核的典型和非典型增生现象,抗酸染色可发现抗酸阳性圆球体。L型感染的动物中,80%病变淋巴结组织可分离到结核分枝杆菌L型,20%可同时检出细菌型。结论细胞壁缺陷结核分枝杆菌仍然具有致病性,但毒力较亲代细菌型明显减弱,不能引起动物形成PPD阳性反应。     

结核分支杆菌L型

结核分支杆菌属于容易发生细胞壁缺陷变异的细菌 ,其不但能够被多种因素诱导发生细胞壁缺陷变异 ,而且在其生长繁殖的过程常常可自发形成细胞壁缺陷细菌。细胞壁缺陷结核分支杆菌 (ｃｅｌｌｗａｌｌｄｅｆｉｃｉｅｎｔＭ .ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ)存在的现象早已在临床标本或人工培养基内发现 ,曾将其称为“Ｍｕｃｈ颗粒”或认为是结核分支杆菌生长繁殖周期的一个环节[1 ] 。近年来的研究证实结核分支杆菌丧失细胞壁成为Ｌ型后仍然能够生长繁殖 ,其生物学特性、致病性、药物敏感性或染色体ＤＮＡ结构等特性可发生改变。一、结核分支杆菌Ｌ…     

L型细菌所致心脏损害的诊断分析与治疗研究

目的 研究L型细菌所致心脏损害的临床诊断与治疗。方法 系统回顾1334例确诊为L型细菌感染患者的临床症状、诊断及治疗。从中筛选出心脏损害病例。结果 1334例中,确诊为L型细菌所致心脏损害者68例,占5.1％。结论 L型细菌所致心脏损害的诊断既要有L型细菌感染的证据,又要有心脏损害的证据,同时还要排除结核、风湿、病毒及其他感染因素对心脏的损害。及时做血液、骨髓、心包液的L型细菌培养对早期诊断有着十分重要的临床价值。肉膏汤瓶法和试管增菌法同时进行可明显提高阳性率。治疗上抗生素要联合应用,疗程要长。支持疗法对疾病的恢复十分有利。