丹参注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护

目的探讨丹参注射液对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。24只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组和丹参组。术后第10天取术侧肾组织做HE,Masson染色及转化生长因子(TGF)β-1,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学检测。结果丹参组显著改善梗阻侧肾组织病理变化,下调TGFβ-1和α-SMA蛋白表达。结论丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化有保护作用。     

塞来昔布对梗阻性肾病大鼠肾脏作用的实验观察

目的观察塞来昔布对单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用。方法建立单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠模型,分为塞来昔布治疗组和模型组,设假手术组为对照组。第4周末检测各组大鼠血清肌酐及尿素氮水平,测定大鼠尿液血栓烷素B2浓度,并观察肾组织病理改变。结果塞来昔布治疗组的肌酐、尿素氮水平及尿液血栓烷素B2浓度与模型组比较,有显著性差异(P<0．01),肾间质纤维化程度明显减轻。结论塞来昔布对单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠肾脏具有保护作用。     

伊贝沙坦对肾间质纤维的保护及治疗作用实验研究

目的观察伊贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质中PDGF-BB介导的肾间质纤维化的影响。方法制作大鼠肾间质纤维化模型,随机分为假手术组、模型组和伊贝沙坦治疗组,术后第7、14天分别处死各组中6只大鼠,检测大鼠肾功能、尿β2-微球蛋白,用免疫组化方法测定肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和血小板衍生生长因子(PDGF-BB)蛋白表达,动态观察肾脏病理变化。结果与输尿管梗阻核型(UUO)组比较,治疗组肾间质纤维化明显减轻(P<0.05),肾间质中α-SMA、PDGF-BB表达明显减少(P<0.05)。结论伊贝沙坦可通过下调肾间质PDGF-BB表达减轻肾组织间质纤维化。     

真武壮肾汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化防治的实验研究

目的：探讨中药真武壮肾汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化防治的效果及机制。方法：将36只大鼠随机分为：假手术组、模型组、中药组,采用单侧输尿管梗阻（UUO）制作动物模型,术后7、14d检测肾组织TGFβ1及FN的表达。结果：中药组较模型组大鼠肾组织TGFβ1表达减弱,而FN生成减少。结论：真武壮肾汤可抑制TGFβ1表达。对抗肾间质纤维化。     

大黄蟅虫丸对肾间质纤维化大鼠血液流变学及微循环的影响

目的观察大黄虫丸对单侧输尿管梗阻(UUO)致大鼠肾间质纤维化血液流变学及微循环变化的影响,从"络病学说"探讨其抗肾间质纤维化的中医病机。方法采用单侧输尿管结扎法复制单侧输尿管梗阻致大鼠肾间质纤维化模型,将其随机均分为模型组和大黄虫丸组,并设假手术组;观察大黄虫丸对该模型动物全血黏度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、红细胞压积、舌下及耳廓脉络变化的影响。结果 大黄虫丸能显著降低肾间质纤维化大鼠的全血黏度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、红细胞压积、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)升高的指数,改善纤维化大鼠舌下、耳廓脉络的循环形态。结论大黄虫丸对肾间质纤维化大鼠血液流变学和微循环变化的改善,提示"活血通络"可能是其抗肾间质纤维化的主要病机之一。     

大黄虫丸对肾间质纤维化大鼠血液流变学及微循环的影响

目的 观察大黄虫丸对单侧输尿管梗阻(UUO)致大鼠肾间质纤维化血液流变学及微循环变化的影响,从"络病学说"探讨其抗肾间质纤维化的中医病机.方法 采用单侧输尿管结扎法复制单侧输尿管梗阻致大鼠肾间质纤维化模型,将其随机均分为模型组和大黄虫丸组,并设假手术组;观察大黄虫丸对该模型动物全血黏度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、红细胞压积、舌下及耳廓脉络变化的影响.结果 大黄虫丸能显著降低肾间质纤维化大鼠的全血黏度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、红细胞压积、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)升高的指数,改善纤维化大鼠舌下、耳廓脉络的循环形态.结论 大黄虫丸对肾间质纤维化大鼠血液流变学和微循环变化的改善,提示"活血通络"可能是其抗肾间质纤维化的主要病机之一.     

黄芪与雷米普利联合应用对UUO大鼠肾脏VEGF表达的影响

目的:探讨黄芪与雷米普利联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠(UUO)肾脏血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:45只雄性Wistar大鼠随机分为5组:单侧输尿管梗阻(UUO)组;对照组,除不结扎离断输尿管外,其余处理同UUO组;黄芪组,给予UUO模型大鼠黄芪注射液5mL/kg/d(相当于黄芪生药10g/kg·d)灌胃,(黄芪注射液由珍宝岛药业提供,批号A20120920,每支10mL,含生药20g);雷米普利组,给予雷米普利灌胃(10mg/kg·d);黄芪、雷米普利联合组,给予黄芪注射液(5mL/kg·d)、雷米普利(10mg/kg·d)灌胃.观察第14天肾间质纤维化程度、VEGF的表达.结果:①与假手术组相比,UUO组大鼠肾间质蓝染面积显著增加(P＜0.05).②与对照组相比,UUO组VEGF阳性面积百分比显著降低(P＜0.05),黄芪、雷米普利和黄芪、雷米普利联合组的VEGF阳性面积百分比则显著增加(P均＜0.05).黄芪、雷米普利联合组与黄芪组、雷米普利组的差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:与单用黄芪、雷米普利相比,两药联合应用能更大程度的减轻UUO大鼠肾间质纤维化,增加VEGF表达可能是其机制之一.     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的保护作用

目的观察阿托伐他汀对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的调节作用。方法采用单侧输尿管结扎术致肾间质纤维化大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、治疗组。术后第3、7、14天处死,采取空腹静脉血监测总胆固醇,经HE、Masson染色及免疫组化观察肾间质损伤及肝细胞生长因子（HGF）的表达。结果 3组胆固醇浓度差异无统计学意义（P〉0.05）,模型组肾间质损伤明显高于假手术组（P〈0.05）,而治疗组HGF表达高于模型组（P〈0.05）,肾间质损伤低于模型组（P〈0.05）。结论阿托伐他汀通过非降脂途径延缓单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）所致大鼠肾间质纤维化程度,部分依赖于增强HGF表达。     

特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用

目的探讨特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其可能机制。方法应用特异性NF-κB抑制剂PDTC治疗单侧输尿管梗阻大鼠模型,常规HE、PASM染色观察肾间质病理变化,电泳迁移率变动分析法检测肾组织中NF-κB的活性,免疫组化法检测TGF-β1、MCP-1的表达,并采用图像分析系统进行半定量分析。结果治疗组较模型组大鼠梗阻侧肾脏病理变化明显减轻,肾皮质NF-κB活性及小管间质TGF-β1、MCP-1表达明显降低(P<0·01)。结论特异性NF-κB抑制剂通过抑制NF-κB激活并进一步减少下游炎症和致纤维化细胞因子的表达以达到治疗肾间质纤维化的作用。     

特异性NF-kB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用

目的探讨特异性NF-kB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其可能机制。方法应用特异性NF-kB抑制剂PDTC治疗单侧输尿管梗阻大鼠模型，常规HE、PASM染色观察肾间质病理变化，电泳迁移率变动分析法检测肾组织中NF-kB的活性，免疫组化法检测TGF-β、MCP-1的表达，并采用图像分析系统进行半定量分析。结果治疗组较模型组大鼠梗阻侧肾脏病理变化明显减轻，肾皮质NF-kB活性及小管间质TGF-β1、MCP-1表达明显降低（P〈0．01）。结论特异性NF-kB抑制剂通过抑制NF-kB激活并进一步减少下游炎症和致纤维化细胞因子的表达以达到治疗肾间质纤维化的作用。     

阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的研究阿魏酸钠（SF）对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用,探讨其抗纤维化作用的可能机制。方法采用单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）作为阳性对照,将大鼠随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（UUO组）、阿魏酸钠组（SF组）、洛汀新组（ACEI组）。术后第9天处死大鼠,肾组织用Masson染色后进行图像分析以评定各组肾小管间质损害程度,免疫组化半定量法检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、肝细胞生长因子（HGF）的表达。结果在肾小管间质损伤指数、α—SMA及HGF的表达方面,UUO组明显高于SHAM组,SF组、ACEI组均明显低于UUO组,且两治疗组间差异无显著性;肾小管间质损伤指数与肾间质的α—SMA、HGF的表达均呈正相关。HGF的表达在SF组和ACEI组较高,与UUO组比较有显著差异。结论在单侧输尿管梗阻诱导的肾间质纤维化大鼠模型中,SF的防治作用与ACEI相似,可能是通过减少肾间质肌成纤维细胞（MyoF）的数量、上调HGF的表达,进而减少细胞外基质合成,从而减轻肾间质纤维化。     

血小板衍生生长因子与CD68在单侧输尿管结扎大鼠肾间质中的表达及意义

目的研究血小板衍生生长因子（PDGF-BB）及CD68（巨噬细胞标志物）阳性细胞在单侧输尿管结扎（UUO）大鼠肾间质中的表达。方法制作大鼠肾间质纤维化模型,于术后第7、14天用免疫组化方法检测肾间质中PDGF-BB、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达及CD68阳性细胞（巨噬细胞）浸润,并进行相关性分析。结果与假手术组比较,模型组肾间质中PDGF-BB、和α-SMA的表达水平明显升高（P〈0.05）,CD68阳性细胞浸润明显增多（P〈0.05）,模型组CD68阳性细胞在第14天时较第7天时减少。α-SMA与PDGF-BBT CD68的表达呈正相关（r1=0.92,P〈0.01,r2=0.98,P〈0.01）。结论PDGF-BB和巨噬细胞参与肾间质纤维化早期改变。     

黄芪当归合剂对肾间质纤维化的多靶点抑制作用

目的动态观察复方中药黄芪当归合剂(A&A)对肾间质纤维化大鼠的抗纤维化治疗作用,了解A&A在疾病过程中的起效时间及不同阶段的主要作用环节。方法♂W istar大鼠随机分为对照(Control)、假手术(Sham)、单侧输尿管结扎(UUO)和UUO+A&A治疗组(UAA)。在给药(A&A 12 g.kg-1.d-1)后d 0、3、7、10处死动物,观察肾功能变化,对肾间质细胞浸润、肾小管萎缩和肾间质纤维化情况进行半定量评分。采用免疫组化、ELISA和W estern B lot分别分析肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA),转化生长因子β1(TGF-β1),纤粘连蛋白(FN)表达。结果与假手术组相比,各时间点的UUO大鼠肾功能受损、病理损害进行性加重,肾小管间质中TGF-β1、α-SMA、FN表达均增高(P<0.01)。A&A治疗后d 3,可观察到其明显减轻UUO大鼠的肾间质炎性细胞浸润、肾小管萎缩及肾间质纤维化(P<0.05),同时可使肾组织中的TGF-β1表达减少(P<0.05),但此时并不影响α-SMA和FN表达。治疗后d 7,A&A的上述治疗作用持续存在,同时进一步使UUO大鼠肾间质的α-SMA表达减少(P<0.05)、FN表达下降(P<0.05)。治疗10 d后,UAA组肾小管萎缩和肾间质纤维化程度、TGF-β1、α-SMA、FN的表达仍较UUO组分别减轻18.95%,28.7%,39.6%,26%。结论在UUO模型中,A&A的肾保护作用从病变早期开始,主要表现为减少炎症细胞反应和TGF-β1表达分泌,随后可减少肾脏固有细胞转化、分化及细胞外基质成分沉积,其作用的高峰时间是在造模后d 3~7,并持续存在至d10,特征是通过减轻肾间质纤维化而改善肾功能。     

波形蛋白在肾间质纤维化大鼠肾组织中表达趋势及螺内酯干预的研究

目的探讨幼年大鼠单侧输尿管结扎所致肾间质纤维化模型中,波形蛋白和α-SMA的表达趋势及其与肾间质纤维化的相关性,同时观察螺内酯干预治疗后的效果。方法采用单侧输尿管结扎的方法制备肾间质纤维化大鼠模型(UUO模型),将96只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、螺内酯治疗组。造模成功后分别在7、14、21、28d每组各取8只大鼠处死,左肾组织行Masson染色,动态观察各组肾间质损伤程度,并用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测各组Vimentin和α-SMA的表达水平。结果 随着时间的推移,模型组和治疗组肾间质损伤程度逐渐增强,但治疗组损伤较模型组轻微,二者的差异有统计学意义(P<0.01);在模型组中,波形蛋白和α-SMA的表达水平随肾间质损伤程度的加重而逐渐增强,波形蛋白各时间点之间差异有统计学意义(P<0.01),肾间质纤维化程度与波形蛋白和α-SMA的表达水平呈正相关(r=0.647,P<0.01);模型组中波形蛋白和α-SMA的表达水平高于治疗组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论波形蛋白和α-SMA的异常表达可能参与了肾间质纤维化过程;螺内酯在改善肾间质纤维化的过程中起着一定作用,其机制中可能有波形蛋白和α-SMA的参与。     

转化生长因子β1和α-平滑肌肌动蛋白在肾间质纤维化小鼠肾组织的表达

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化模型中肾组织的表达。方法 36只小鼠平均分为假手术组与模型组,术后3、7、14d处死小鼠,取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色、免疫组化与RT-PCR检测。结果与假手术组比,模型组TGF-β1及α-SMA表达呈进行性升高,肾间质纤维化程度明显增高(P<0.O1)。结论 TGF-β1及α-SMA在肾间质纤维化过程中发挥重要作用。     

沙利度胺对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化的影响

目的研究沙利度胺(Thd)对单侧输尿管梗阻(UUO)后大鼠肾间质纤维化的作用。方法 48只SD大鼠随机均分为四组,每组12只:假手术组(Sham组)、UUO模型组(UUO组)、Thd200mg.kg-1.d-1治疗组(Thd组)和洛丁新10mg.kg-1.d-1治疗组(Lot组)。术后7、14d取血检测肾功能,Masson染色观察肾间质病变,免疫组织化学和RT-PCR检测肾组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果与Sham组比较,UUO组血尿素氮和肌酐水平、肾间质纤维化程度以及HIF-1α、α-SMA、ColⅠ蛋白及mRNA表达均明显增加(P<0.01);Thd组上述各观察指标均较UUO组减少(P<0.01);除HIF-1α表达外,Lot组其余指标均较UUO组下降(P<0.01),且与Thd组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Thd可改善肾功能,并可能通过下调HIF-1α表达而抑制肾小管上皮细胞转分化和肾间质细胞外基质积聚,进而发挥肾保护作用。     

血小板源性生长因子-B在肾间质纤维化模型大鼠肾组织中的表达及意义

目的探讨血小板源性生长因子-B（PDGF-B）在肾闰质纤维化中的表达及意义,比较黄芪当归合剂（A8LA）、霉酚酸酯（MMF）的肾脏保护作用并探讨其可能的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、黄芪当归合剂组、霉酚酸酯组。手术后第9天处死各组大鼠,经免疫组化方法观察各组PDGF-B的表达部位、表迭水平及α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果模型组PDGF-B、α-SMA、PCNA的表达及肾小管阃质损伤指数明显高于假手术组（P〈0．05）,而黄芪当归合剂组、霉酚酸酯组均明显低于模型组（P〈0．05）。黄芪当归合剂组与霉酚酸酯组相比两组差异无显著意义（P〉0．05）。各项指标作相关分析．PDGF-B与肾小管间质损伤指数（r=0．870,P〈0．01）、α—SMA（r=0．956,P〈0．01）,PCNA（r=0．881,P〈0．01）呈显著正相关。结论PDGF-B在肾间质纤维化的病程进展中起重要促进作用,黄芪当归合剂、霉酚酸酯则可能通过下调PDGF-B的表达减轻肾间质纤维化。     

复方红景天制剂对弥漫性肾间质损伤保护作用的实验研究

目的：探讨复方红景天制剂对肾间质损伤的保护作用。方法：制作由大鼠单侧输尿管梗阻（UU0）所致的肾间质纤维化动物模型。以α－平滑肌肌动蛋白（α-SMA）作为肌纤维母细胞（MFB）的特异性标志物，观察肾小管上皮细胞及间质内MFB的表达情况。26只SD大鼠随机分成假手术组、对照组和口服复方红景天制剂组，10天后全部处死，取肾组织采用HE，PAS及免疫组织化学α－SMA染色、，行病理学及组织化学观察。结果：在实验结束时对照组间肾间质病变显，肾小管上皮细胞及间质α－SMA表达明显增加，而口服复方红景天制剂组则明显轻于对照组（P＜0．01）。结论：α-SMA是MFB较好的标志物，MFB在UUO导致的肾间质纤维化中扮演了重要角色。复方红景天制剂具有抗肾间质纤维化的作用，对肾间质损伤有较好的保护作用。     

CTGF siRNA质粒对UUO小鼠肾脏间质纤维化的影响

目的利用单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化模型,采用尾静脉注射的方法整体转染CTGF-siRNA质粒抑制肾脏结缔组织生长因子(CTGF)的表达,观察敲低CTGF表达对肾脏间质纤维化的影响。方法制备UUO模型及活体CTGF基因转染;应用免疫组织化学染色法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;Western blot检测CTGF及α-SMA蛋白的表达;半定量RT-PCR检测α-SMA mRNA的表达。结果转染CTGF-siRNA质粒的UUO小鼠CTGF及α-SMA的基因表达明显下降(P<0.05)。结论经小鼠尾静脉注射CTGF siRNA质粒能显著抑制小鼠肾CTGF和α-SMA基因表达并能有效抑制小鼠肾脏间质纤维化,提示CTGF siRNA有潜力成为防治肾脏间质纤维化的一种新策略。