不同细胞因子诱导树突状细胞体外抗肿瘤效应研究

目的研究不同细胞因子诱导的树突状细胞(DC)体外抗肿瘤效应。方法常规分离健康人外周血单核细胞,分别采用粒巨噬集落刺激因子(GM-CSF),白细胞介素(IL)-4,肿瘤坏死因子(TNF),GM-CSF、IL-4、α干扰素(IFN-α)细胞因子组合将其诱导为DC,并分别负载SMMC7721细胞冻融抗原;用流式细胞仪检测第9天时细胞表面HLA-DR、CD1α、CD80、CD83的表达;采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测各组刺激自体淋巴细胞增殖能力,并检测各组DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对SMMC7721细胞株的杀伤率。结果第9天显微镜下观察各组细胞,其细胞形态无明显差异,但流式细胞仪显示IFN-α组DC其膜表面标志CD80、CD83、CD1a表达上调,在刺激同种T细胞增殖能力方面,较TNF-α组DC效果明显。且IL-12分泌明显增加。在肝癌细胞株SMMC7221杀伤实验中,培养液中加入IFN-α后杀伤效应明显。结论与TNF-α相比,IFN-α诱导DC一定程度上能增强其特异性杀伤能力。     

IFN-γ、IL-12对B7-1转染肝癌细胞诱导T淋巴细胞活化的影响

目的探讨B7—1基因转染肝癌细胞与IFN-γ、IL-12联合在体外诱导T细胞活化的能力。方法酶联免疫吸附反应(ELISA)检测联合诱导瘤苗刺激淋巴细胞IFN-γ、IL-12蛋白合成及细胞表面CD4、CD8、CD25的表达。MTT法检测瘤苗对淋巴细胞增殖作用的影响。结果HepG2／B7—1细胞诱导淋巴细胞表达IL-2、IFN-γ,其蛋白质含分别为875pg／ml和1246pg／ml;而联合IL-12、IFN-γ后能进一步诱导IL-2、IFN-γ的蛋白质合成,较各自无细胞因子组明显提高(P＜0．05)。细胞表面CD4、CD8、CD25的表达显著增加。两者联合促进了淋巴细胞的增殖,在E／T=10：1时,较HepG2组明显增大。结论IL-12、IFN-γ增强经B7—1基因转染的肝癌细胞(HepG2／B7—1)诱导淋巴细胞产生IL-2、IFN-γ的能力;IL-12、IFN-γ可能通过调节B7—1分子的生物学活性影响其对T细胞的活化。     

树突状细胞疫苗对人肺腺癌GLC-82细胞体外杀伤作用的实验观察

目的 通过建立负载人肺腺癌细胞株GLC-82可溶性抗原的树突状细胞(DC)疫苗,探讨应用DC疫苗的致敏特异性杀伤性T细胞(CTL)体外杀瘤细胞的可行性和实验条件,为后期l临床应用提供实验依据.方法 通过用定量摩尔氯化钾提取法获得人肺腺癌细胞GLC-82的可溶性抗原多肽(TSA),从人外周血单核细胞(PBMC)中用GM-CSF、白细胞介素-4和肿瘤坏死因子-α体外诱导扩增并鉴定获取DC,构建DC疫苗;利用DC疫苗刺激同种异体外周血T淋巴细胞活化增殖,诱导产生具有识别肺癌细胞抗原的特异性CTL的可行性及MTT法检测该CTL对GLC-82、肺癌CALU-6和人红白血病K 562细胞的体外杀伤效应.结果 人PBMC体外经7d诱导出的DC,经形态学、免疫组化证实具有典型的树突状细胞特性;负载GLC-82抗原的DC疫苗能有效诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CTL,最适浓度为1:10;诱导活化的CTL对靶细胞的杀伤活性明显高于未经肿瘤抗原致敏的组.结论 诱导培养人外周血PBMC中的Mo可获取大量DC,诱导出的DC功能较强,适宜临床应用;DC疫苗能强烈刺激初始型同种异体T淋巴细胞增殖产生CD 8+表达增加的CTL;激活的CTL对肺癌靶细胞发挥高效而特异的细胞毒效应,对非肺组织瘤靶细胞也具有非特异性杀伤效应.     

负载冻融抗原的DC诱导特异性CTL杀伤胃癌细胞的实验研究

目的 研究负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对胃癌细胞的体外杀伤作用.方法 冻融法获取胃癌细胞抗原,联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导培养外周血BC并负载肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,制备特异性CTLs,MTT法检测对胃癌细胞的体外杀伤作用.ELISA法检测γ干扰素(IFNγ)分泌情况.结果 负载胃癌抗原的DC激活的CTLs表现出对胃癌细胞的特异性杀伤作用,产生高水平的IFNY(P<0.01);而对B16黑色素瘤细胞没有杀伤作用不产生高水平的IFNγ.未负载胃癌抗原DC刺激的CTLs对胃癌细胞无杀伤作用.结论 应用细胞因子从人外周血中诱导的DC负载胃癌抗原后,激活的CTLs在体外对胃癌细胞能产生高效而特异性的杀伤作用.     

MAGE-1相关肽抗原致敏DC活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用

目的观察MAGE-1九肽致敏树突状细胞(DC)活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用,确定MAGE-1九肽负载DC作为HCC疫苗的可能性。方法用MAGE-1九肽负载DC并活化T淋巴细胞,以不同效靶细胞的比例对正常肝细胞、黑色素瘤细胞、HCC细胞进行杀伤实验,3H掺入法测定杀伤率。结果用MAGE-1九肽负载DC并活化T淋巴细胞对黑色素瘤细胞及HCC细胞均有明显杀伤作用,而对正常肝细胞无杀伤作用;无关抗原负载的DC所活化的淋巴细胞对三种细胞均无杀伤作用;无抗原负载的DC其活化淋巴细胞对靶细胞亦无杀伤作用。结论MAGE-1九肽致敏DC活化淋巴细胞对HCC细胞有明显杀伤作用,MAGE-1基因可作为免疫治疗HCC的攻击靶点,MAGE-1九肽与DC联合可成为免疫治疗HCC的疫苗。     

MAGE—1相关肽抗原致敏DC活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用

目的 观察MAGE—1九肽致敏树突状细胞(DC)活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用，确定MAGE—1九肽负载DC作为HCC疫苗的可能性。方法 用MAGE—1九肽负载DC并活化T淋巴细胞，以不同效靶细胞的比例对正常肝细胞、黑色素瘤细胞、HCC细胞进行杀伤实验，^3H掺入法测定杀伤率。结果 用MAGE—1九肽负载DC并活化T淋巴细胞对黑色素瘤细胞及HCC细胞均有明显杀伤作用，而对正常肝细胞无杀伤作用；无关抗原负载的DC所活化的淋巴细胞对三种细胞均无杀伤作用；无抗原负载的DC其活化淋巴细胞对靶细胞亦无杀伤作用。结论 MAGE—1九肽致敏DC活化淋巴细胞对HCC细胞有明显杀伤作用，MAGE—1基因可作为免疫治疗HCC的攻击靶点，MAGE—1九肽与DC联合可成为免疫治疗HCC的疫苗。     

自体胃癌细胞致敏的DC疫苗对胃癌术后免疫功能的影响

目的 探讨热休克凋亡的人胃癌细胞致敏的树突状细胞(DC)疫苗对胃癌术后免疫功能的影响.方法 从胃癌患者外周血单个核细胞中诱导DC,并用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和白细胞介素4(rhIL-4)刺激活化,经热休克凋亡自体胃癌细胞致敏制备DC疫苗.将36例胃癌术后患者随机分为化疗加用DC瘤苗治疗(A)组18例,单纯化疗对照(B)组18例.对两组病例治疗前后T细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞及血清IL-2、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)水平进行比较.结果 A组治疗后外周血CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞比率较治疗前明显升高(P<0.05),且明显高于B组(P<0.05);A组治疗后血清IL-2、IL-12、IFN-γ水平较治疗前明显升高(P<0.05).结论 胃癌术后行热休克凋亡自体胃癌细胞致敏的DC疫苗治疗可改善患者的免疫功能.     

痤疮丙酸杆菌促树突状细胞前体细胞动员及其对胃癌的治疗效应

目的利用痤疮丙酸杆菌（P．aches）引起的炎症反应,促进小鼠外周血中树突状细胞（DC）的动员并研究P．aches动员的DC在体外对胃癌细胞的作用。方法C578BL／6J（B6）小鼠注射P．aches后外周血分离单个核细胞,用流式细胞仪分选F4／8013220-CD11c^＋细胞,在体外加入细胞因子GM-CSF、IL4和TNFα共培养,通过形态学观察、表型分析和混合淋巴细胞反应鉴定它们是否能分化为成熟DC。将P．aches动员的DC负载胃癌抗原后致敏T细胞,观察活化的T细胞在体外对胃癌细胞的杀伤效应。结果注射P．aches1h后外周血F4／80B220-CD11c^＋细胞数量即开始升高,24h后逐渐达到高峰。新鲜分离的细胞不具有成熟DC的特征。与细胞因子共培养后即具有典型的DC形态和表型,在混合淋巴细胞反应中具有极强的刺激T细胞增殖的能力。P．aches动员的DC负载胃癌抗原后致敏T细胞对胃癌细胞的杀伤率明显高于未致敏T细胞。结论P．aches可迅速动员F4／80-B220-CD11c^＋细胞进入小鼠外周血,经细胞因子的诱导后可分化为成熟DC,并可在体外诱导出针对胃癌细胞的特异性杀伤T淋巴细胞,对胃癌细胞有明显的杀伤作用,并伴有高水平的INF-γ分泌。     

耐药乳腺癌裸鼠模型免疫治疗初探

目的 耐药乳腺癌表现为治疗效果差,转移率高,死亡率高的一种恶性程度极高的肿瘤性疾病。有研究表明,细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）在树突细胞（DC）辅助下,对耐药肿瘤细胞的杀伤能力可能超过T细胞。本实验利用DC与CIK联合培养,比较在不同条件下对乳腺癌多药耐药细胞株的杀伤效应。 方法 分离健康人外周血获得单个核细胞,分别诱导为树突细胞（DC）和CIK细胞,将人类乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR细胞的冻融物抗原冲击DC（AP-DC）,分别将DC与CIK细胞共培养（AP-DC+CIK 、DC+CIK）,CIK细胞单独培养作对照。用流式细胞仪分析细胞表型,酶联免疫吸附法（ELISA）测定分泌IL-12、TNF-α、IFN-γ和IL-2水平,MTT法测定细胞毒效应。结果 DC和CIK细胞共孵育,使CIK细胞的CD3CD56双阳性细胞的比例及分泌IFN-γ、TNF-α和IL-2的水平增高,DC的成熟表型和分泌IL-12的水平增加,其中均以AP-DC+CIK组增高最为明显,和其他组间比较差异有统计学意义。对乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒效应,AP-DC+CIK组杀伤效应最强, 与DC+CIK组和CIK组比较差异均有统计学意义;结论 经耐药肿瘤抗原负载的DC与CIK共同作用后,其对耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR的抗瘤免疫能力最强,为临床治疗耐药肿瘤带来希望。     

树突状细胞以两种不同方式负载大肠癌细胞株体外刺激淋巴细胞抗肿瘤活性的比较

目的 比较树突状细胞(DC)以两种不同方式负载大肠癌细胞株体外刺激淋巴细胞的抗瘤活性.方法 分离正常人外周血单核细胞体外诱导DC,分别负载热休克诱导凋亡的大肠癌细胞株和肿瘤细胞裂解物,以此刺激淋巴细胞作为效应细胞,大肠癌细胞株为靶细胞.MTT法测定效应细胞对靶细胞的杀伤作用.结果 负载热休克大肠癌细胞的DC 与负载肿瘤细胞裂解物的DC都显示对靶细胞的杀伤活性,但前者的杀伤率明显高于后者(P＜0.05).结论 负载热休克肿瘤细胞的DC是一更为有效的负载方式.     

脐血浆培养的脐血树突状细胞对胃癌细胞的特异杀伤作用

目的尝试用脐血浆代替胎牛血清培养脐血树突状细胞（DCs）,并使之负载胃癌抗原,观察其对胃癌细胞的特异杀伤作用。方法分离脐血单个核细胞（CBMCs）并在含10％同源脐血浆的培养体系中诱导培养,部分细胞加入胃癌冻融抗原冲击。流式细胞仪检测细胞表面抗原CD1a和CD83表达,MTT法检测DCs体外刺激淋巴细胞增殖活性,LDH法检测DCs诱导的细胞毒T淋巴细胞（CTLs）对胃癌及肝癌细胞的细胞毒作用。结果CBMCs能分化为表型正常的未成熟DCs,并进而吞噬胃癌细胞冻融抗原成熟,刺激淋巴细胞增殖并诱导对胃癌细胞株特异的CTLs毒性。结论脐血浆培养的脐血DCs能有效捕获胃癌冻融抗原,激发针对胃癌细胞的特异杀伤效应。本实验采用的DCs制备方法具有方法简单、成本较低、瘤苗制备时间较短等优点。     

Morphologic Evidence of Anti-Tumor Specificity of T Cells Activated by Denritic Cells Derived from Peripheral Blood Mononuclear Cells of Thyroid Cancer Patients

Recent studies suggest that immunization with autologous dendritic cells (DCs) results in protective immunity and rejection of established tumors in various human malignancies. The purpose of this study is to determine whether DCs are generated from peripheral blood mononuclear cells (PBMNs) by using cytokines such as F1t-3 ligand (FL), granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF), IL-4, and TNF-α, and whether cytotoxic T cells activated against the thyroid cancer tissues by the DCs. Peripheral blood was obtained from 2 patients with thyroid cancer. DCs were established from PBMNs by culturing in the presence of FL, GM-CSF, IL-4, and TNF-α for 14 days. At day 14, the differentiated DCs was analyzed morphologically. The immunophenotypic features of DCs such as CDla, CD83, and CD86 were analyzed by immunofluorelescence microscopy. At day 18, DCs and T cells were incubated with thyroid cancer tissues or normal thyroid tissues for additional 4 days, respectively. DCs generated from the PBMNs showed the typical morphology of DCs. Activated cytotoxic T lymphocytes (CTLs) were observed also. DCs and the CTLs were attached to the cancer tissues on scanning electron microscope. The DCs activated the CTLs, which able to specifically attack the thyroid cancer. This study provides morphologic evidence that the coculture of T cells/cancer tissues activated the T cells and differentiated CTLs. The CTLs tightly adhered to cancer tissues and lysed cancer tissues vigorously. Therefore DCs could be used as potential vaccines in the immunotherapy.     

Blocking drug-induced autophagy with chloroquine in HCT-116 colon cancer cells enhances DC maturation and T cell responses induced by tumor cell lysate

Autophagy is an important mechanism for tumor escape, allowing tumor cells to recover from the damage induced by chemotherapy, radiation therapy, and immunotherapy and contributing to the development of resistance. The pharmacological inhibition of autophagy contributes to increase the efficacy of antineoplastic agents. Exposing tumor cells to low concentrations of select autophagy-inducing antineoplastic agents increases their immunogenicity and enhances their ability to stimulate dendritic cell (DC) maturation. We tested whether the application of an autophagy-inhibiting agent, chloroquine (CQ), in combination with low concentrations of 5-fluorouracil (5-FU) increases the ability of tumor cells to induce DC maturation. DCs sensitized with the lysate of HCT-116 cells previously exposed to such a combination enhanced the DC maturation/activation ability. These matured DCs also increased the allogeneic responsiveness of both CD4+ and CD8+ T cells, which showed a greater proliferative response than those from DCs sensitized with control lysates. The T cells expanded in such cocultures were CD69+ and PD-1- and produced higher levels of IFN-γ and lower levels of IL-10, consistent with the preferential activation of Th1 cells. Cocultures of autologous DCs and lymphocytes improved the generation of cytotoxic T lymphocytes, as assessed by the expression of CD107a, perforin, and granzyme B. The drug combination increased the expression of genes related to the CEACAM family (BECN1, ATGs, MAPLC3B, ULK1, SQSTM1) and tumor suppressors (PCBP1). Furthermore, the decreased expression of genes related to metastasis and tumor progression (BNIP3, BNIP3L, FOSL2, HES1, LAMB3, LOXL2, NDRG1, P4HA1, PIK3R2) was noted. The combination of 5-FU and CQ increases the ability of tumor cells to drive DC maturation and enhances the ability of DCs to stimulate T cell responses.     

灯盏花素对肝癌细胞HepG2和正常肝细胞LO-2的体外增殖抑制作用

目的 观察灯盏花素对人肝癌细胞HepG2及人正常肝细胞LO-2体外增殖的影响.方法 以不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25、50 mg·L-1)的灯盏花素分别处理HepG2和LO-2细胞,24 h后采用MTT法检测各组细胞生长情况;Hoechst 33258荧光法和流式细胞术观察HepG2和LO-2的凋亡情况.结果 灯盏花素在3.1~50.0 mg·L-1范围内呈浓度依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,24 h的IC50为8.4 mg·L-1,并能诱导HepG2细胞凋亡;但对LO-2的增殖影响较小,且几乎无诱导凋亡作用.结论 灯盏花素体外可选择性地抑制肝癌细胞的增殖,可能与其诱导肝癌细胞凋亡有关.     

木瓜苷对环磷酰胺增强的小鼠接触性超敏反应的影响(英文)

目的　探讨胸腺在环磷酰胺 (Cy)增强的小鼠接触性超敏反应 (CHS)中的作用及木瓜苷 (GCS)对胸腺T淋巴细胞亚型的影响。方法　采用了 2 ,4 二硝基氟苯 (DNFB)诱导小鼠CHS模型及Cy诱导小鼠增强CHS模型 ,检测ConA诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、胸腺T淋巴细胞亚型和ConA诱导的胸腺T淋巴细胞培养上清中TGF β1,IL 4和IL 2水平。结果　小鼠CHS模型中 ,ConA诱导的脾淋巴细胞增殖增强 ,CD4 +CD8+双阳性胸腺T淋巴细胞比例增加 ,胸腺细胞产生的Th1和Th3型细胞因子IL 2和TGF β1水平增高而Th2型细胞因子IL 4水平降低。DNFB初次致敏前 3d腹腔注射Cy (2 5 0mg·kg- 1)可以增强CHS反应。GCS(12 0和 2 4 0mg·kg- 1)连续灌胃 12d可以提升Cy增强的小鼠CHS胸腺T淋巴细胞中CD4 - CD8- 和CD4 +CD8- 细胞比例 ,降低CD4 +CD8+细胞比例 ;并提高胸腺淋巴细胞培养上清中IL 4水平 ,降低IL 2和TGF β1水平。结论　GCS对Cy增强的小鼠CHS有明显抑制作用 ;可有效调节小鼠胸腺CD4 /CD8和Th 淋巴细胞亚群及细胞因子产生平衡。     

黄芪总提物对肝癌细胞生长、甲胎蛋白分泌及γ—GT活性的影响

目的研究黄芪总提物(TEA)对肝癌细胞生长、甲胎蛋白(AFP)分泌及γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活性的影响。方法以两种人肝癌细胞株HepG2细胞和Bel-7404细胞分别与TEA(5～160rng     

舒芬太尼对体外培养HepG 2 细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的了解阿片类镇痛药舒芬太尼对体外培养肝癌细胞株HepG2细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,实验组在RPMI-1640培养液中加入不同浓度舒芬太尼（0.0001,0.001,0.01,0.1,1,10,20μmol·L-）1,对照组RPMI-1640培养液中不加舒芬太尼,分别孵育48小时后,采用MTT比色法检测HepG2细胞增殖活性,采用流式细胞技术检测舒芬太尼对HepG2细胞周期的影响,用Hoechst33258染色方法分析鉴定舒芬太尼对HepG2细胞凋亡的影响。结果舒芬太尼浓度≥1μmol·L-1时,细胞增殖活性较对照组显著下降（P〈0.05）;随着舒芬太尼浓度增加,G1期细胞比例逐渐增高,S期细胞比例逐渐降低。用Hoechst33258方法染色后在表面荧光显微镜下发现实验组部分HepG2细胞发生凋亡,当舒芬太尼浓度≥0.1μmol·L-1时,荧光显微镜下一个视野内凋亡细胞占总细胞数的比例较对照组显著增加（P〈0.05）。结论舒芬太尼在临床常用剂量范围内对肝癌细胞株HepG2细胞增殖和凋亡无明显影响,当浓度≥1μmol·L-1时可以抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖,主要将细胞周期阻滞在G1期,当舒芬太尼浓度≥0.1μmol·L-1时可引起肝癌HepG2细胞凋亡。     

牛耳枫生物碱F21对HepG-2细胞的抑制作用及机制

目的探讨牛耳枫生物碱F21对HepG-2增殖的影响及抗肿瘤作用机制。方法 F21 6.25～100 mg.L-1作用24,48和72 h,MTT法检测细胞抑制率并计算IC50。F21 10～100 mg.L-1作用48 h,瑞姬氏染色光学显微镜下观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳观察DNA的梯形条带,流式细胞仪检测细胞凋亡。F2110,30 mg.L-1+Z-VAD-FMK(胱天蛋白酶抑制剂)20μmol·L-1作用48 h,MTT法检测抑制率。结果 F21可明显抑制HepG-2细胞增殖,其于24,48和72 h的IC50值分别为5.3±0.1,1.3±0.1和(0.13±0.1)mg.L-1,且具有量效(F=232.39,P<0.05)和时效(F=65.59,P<0.05)关系。F21 10～30 mg.L-1可使HepG-2细胞体积增大、胞质内细胞核周围出现大量空泡、细胞膜完整、细胞核破碎甚至细胞形态消失。琼脂糖凝胶电泳未观察到典型的凋亡细胞DNA梯形条带。流式细胞术分析显示,与正常对照组比较,F21 10,30和100 mg.L-1处理HepG-2细胞48 h后,晚期凋亡率分别(17.34±0.01)%,(25.45±0.01)%和(43.67±0.03)%(P<0.05)。Z-VAD-FMK可明显抑制星形孢菌素诱导的细胞死亡。F21 10和30 mg.L-1组的增殖抑制率分别为(18.42±0.09)%和(42.77±0.01)%,而F21 10,30 mg.L-1+Z-VAD-FMK组的增殖抑制率分别为(16.46±0.01)%和(44.01±0.01)%,与相应的F21组相比无统计学差异。结论 F21在体外对HepG-2细胞具有显著的抑制作用,其作用机制并非通过激活胱天蛋白酶途径而诱导肿瘤细胞的凋亡。     

Immunomodulatory activity of resveratrol: discrepant in vitro and in vivo immunological effects

trans-Resveratrol is a dietary polyphenolic compound present in grapes, which has been shown to exhibit strong anti-inflammatory, antioxidant, and chemopreventive activities. In this study we have compared the in vitro and in vivo effects of resveratrol on the development of various cell-mediated immune responses, including mitogen/antigen-induced T cell proliferation, induction of cytotoxic T lymphocytes (CTLs), interleukin-2 (IL-2) induced lymphokine activated killer cells, and cytokine production. We found significant suppression (>90%) of the mitogen/antigen-induced T cell proliferation and development of allo-antigen specific CTLs in vitro with resveratrol at a concentration of 25 microM. Intragastric administration of resveratrol (2 mg daily) to mice for 4 weeks showed no effect on age-related gain in body weight, peripheral blood cell counts (WBC, RBC, or platelets), or the cellularity of bone marrow or spleen. The CD4(+) and CD8(+) T cells in spleen or colony-forming units-total in the marrow also remained unaffected by treatment with resveratrol. Spleen cells, which were stimulated in vitro after being removed from mice which had been administered resveratrol for 2 or 4 weeks, showed no significant change in IL-2 or concanavalin A induced proliferation of T cells or production of IL-2 induced lymphokine activated killer cells. Further, the production of in interferon-gamma and IL-12 was not affected by administration of resveratrol, but production of tumor necrosis factor-alpha was reduced. Even when conducted entirely in vivo, treatment with resveratrol was found to only marginally reduce allo-antigen induced T cell proliferation and the generation of CTLs in the draining lymph nodes. Thus, even though resveratrol strongly inhibits T cell proliferation and production of cytolytic cells in vitro, oral administration of resveratrol for 4 weeks does not induce hematologic or hematopoietic toxicity, and only marginally reduces the T cell-mediated immune responses.