大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中NO生成及iNOS表达的变化

目的探讨重症急性胰腺炎（SAP）时胰腺组织一氧化氮（NO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的变化。方法 36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为2组。SAP组（n=18）以逆行胰胆管内加压注射5%牛磺胆酸钠的方法建立SAP模型;对照组（n=18）以同法注射等剂量生理盐水。造模后6、12、24 h每组随机处死大鼠6只,检测血淀粉酶、胰腺组织病理组织学改变、胰腺组织NO水平及iNOS活性以及腺腺组织iNOS mRNA表达的变化。结果与对照组相比,SAP组在6 h时间点上,胰腺组织中NO水平、iNOS活性明显升高（P〈0.01）,免疫组化和RT-PCR结果也显示iNOS蛋白及iNOS mRNA表达增高（P〈0.01）;随时间延长,在12 h和24 h各指标到达高峰,24 h仍维持在较高水平（P〈0.01）。结论在SAP时,随着时间的延长,iNOS表达增高,从而产生高浓度的NO,加重胰腺组织的损伤。     

酪酪肽对实验性重症急性胰腺炎大鼠的作用

目的:通过检测血清一氧化氮(NO),诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及超氧化物歧化酶(SOD)水平,研究酪酪肽(PYY)对重症急性胰腺炎大鼠的作用。方法:健康雄性SD大鼠40只,体重250～300g。随机分成胰腺炎组(20只)和治疗组(20只)两组,实验前大鼠禁食12h,自由饮水。两组大鼠均分3次腹腔内注射6%l-精氨酸溶液(3×1.5mg/g),中间间隔1h。治疗组大鼠在第1次腹腔内注射精氨酸后立即皮下注射酪酪肽(0.8pmol/g体重),此后每间隔4h皮下注射1次,共注射10次。将实验大鼠分别在造模后48h作血清NO,iNOS及SOD测定。结果:酪酪肽治疗组血清NO及iNOS明显低于重症急性胰腺炎组,而血清SOD明显高于重症急性胰腺炎组。结论:酪酪肽对重症急性胰腺炎的保护治疗作用可能与降低血清NO含量,抑制iNOS活性,提高SOD活性有关。     

酪酪肽对急性胰腺炎细菌易位的影响

目的:探讨酪酪肽(PYY)对急性胰腺炎大鼠肠粘膜的屏障功能。方法:SD大鼠40只,雌雄不拘,采用经腹腔注射精氨酸建立急性胰腺炎大鼠模型后,随机分为对照组(n=20)及治疗组(n=20),治疗组给与PYY皮下注射,治疗后第48h处死大鼠,测定肠粘膜组织匀浆丙二醛(MDA)含量、肠粘膜蛋白含量以及肠管细菌易位率。结果:治疗组动物肠粘膜蛋白含量显著高于对照组(P<0.01);肠粘膜组织匀浆MDA含量显著低于对照组(P<0.01);肝脏及脾脏细菌培养阳性率显著低于对照组(P<0.05)。结论:PYY对急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障具有保护作用。     

奥曲肽作用大鼠急性胰腺炎胰腺病理改变及对淀粉酶分泌影响

目的：观察奥曲肽作用于大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺组织的病理改变及对血液、腹腔液、尿液淀粉酶的影响。方法：实验研究分A、B、C三组，每组8只，共24只，采用随机分配原则分组。A组：空白对照组；B组：ANP模型组：C组：奥曲肽治疗组。通过光镜及透射电镜观察各组胰腺组织的病理改变，同时测定各组血液、腹腔液及尿液中淀粉酶含量。结果：实验性大鼠急性坏死性胰腺炎时胰腺组织充血、水肿、坏死明显，线粒体明显肿胀，嵴消失，间质中可见酶原颗粒，使用奥曲肽治疗时上述变化明显减轻，间质中未见到酶原颗粒积聚。大鼠急性坏死性胰腺炎时血液、尿液淀粉酶水平有下降趋势，但尚无显著差异；腹腔液淀粉酶则有显著下降。结论：奥曲肽作用于大鼠急性坏死性胰腺炎时可减轻胰腺组织充血、水肿及坏死的程度，同时可减少胰腺组织腺泡细胞淀粉酶向腹腔内分泌。     

外源性Apelin-13对重症急性胰腺炎大鼠治疗作用及其机制研究

目的:探究NO在重症急性胰腺炎(SAP)损伤中的作用机制,并明确外源性Apelin-13对SAP的治疗效果。方法:通过开腹胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作SAP大鼠模型。应用随机数表法将60只SPF级SD大鼠随机分三组,每组20只,分别为空白组、SAP组、治疗组。其中空白组分离胃十二指肠,找到胰胆管,不做其他处理;SAP组及治疗组按照SAP动物模型制作标准进行,治疗组在造模同时通过尾静脉注射外源性Apelin-13,SAP组给予注射等量生理盐水。分别于造模后3、6、12、24、48h采集下腔静脉血同时取其胰腺组织。通过ELISA法检测大鼠血清AMS、IL-6、TNF-α、NO浓度,通过蛋白免疫印记检测胰腺组织iNOS、eNOS表达情况,胰腺组织HE染色明确胰腺组织病理损伤。结果:同一观察点治疗组与空白组相比,AMS、IL-6、TNF-α、NO均增高(P<0.05),iNOS呈高表达、eNOS则呈现低表达(P<0.05),胰腺组织损伤较明显。同一观察点SAP组与空白组相比,AMS、IL-6、TNF-α、NO均明显增高(P<0.05),iNOS呈高表达、eNOS则呈现低表达(P<0.05),胰腺组织损伤更显著。同一观察点治疗组与SAP组相比,血清淀粉酶、IL-6、TNF-α、NO均降低(P<0.05),iNOS呈低表达、eNOS则呈现高表达(P<0.05),胰腺组织损伤较轻。结论:外源性Apelin-13对大鼠重症急性胰腺炎的治疗有较明显效果,其机制可能是通过上调eNOS表达、下调iNOS表达从而调节体内NO含量。     

实验性急性胰腺炎胰腺组织中一氧化氮合酶基因表达

目的 为探讨急性胰腺炎（AP）发病机制与一氧化氮（NO）的关系。方法 本文采用实验性急性胰腺炎的动物模型，对AP形成后不同时相的胰腺组织中一氧化氮合酶（NOS）的基因表达进行了检测。同时检测了血清淀粉酶，红细胞超氧化物歧化酶（SOD）和病理组织。结果 术后24h已形成出血性、坏死型AP，胰腺组织中iNOSmRNA在术后48h达高峰，且增高的幅度较大。结论 在AP形成过程中，由于iNOS生成大量的NO，可导致AP发生不可逆损害。因此，临床上可通过寻找特异性抑制iNOS试验，这就为临床治疗AP开辟了新的途径。     

糖皮质激素对机械通气大鼠肺组织iNOS、NO表达的影响

目的通过观察糖皮质激素对机械通气大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)表达的影响,探讨糖皮质激素对呼吸机所致肺损伤(ventilator induced lung injury,VILI)的干预作用。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、机械通气组、地塞米松(DXM)干预组。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织iNOS mRNA表达,用免疫组织化学染色法检测肺组织iNOS蛋白表达,用硝酸还原酶法测定肺组织和血浆NO含量。结果机械通气组和DXM干预组大鼠肺组织iNOS mRNA及其蛋白表达水平,以及血浆和肺组织NO含量均明显高于对照组(P<0.01);DXM干预组上述指标与机械通气组比较均明显降低(P<0.01)。结论糖皮质激素可通过抑制肺组织iNOS的表达,减少NO的生成,对机械通气大鼠肺组织具有保护作用。     

瘦素对重症急性胰腺炎大鼠肺组织NF-k B、iNOS及NO的影响

目的 探讨外源性瘦素对重症急性胰腺炎大鼠肺组织核因子-k B、诱生型一氧化氮合酶、NO表达的影响,以及瘦素在SAP肺损伤的治疗效果及作用机制.方法 36只大鼠随机分为正常对照组、SAP组和外源性瘦素治疗组.以5%牛磺胆酸钠制作SAP模型.造模后6h取材,检测肺组织NF-k B活性、NO、iNOS含量,同时观察血浆淀粉酶及其病理改变等.结果 正常对照组几乎无NF-k B活化,SAP时NF-k B活化及iNOS、NO高表达.瘦素对SAP肺组织NF-k B活性有抑制作用,可使iNOS活性表达降低,并可降低血浆淀粉酶.肺病理可见:给予外源性瘦素后,SAP大鼠肺组织损伤明显减轻.肺组织NF-k B活化与iNOS表达及肺组织病理评分均呈正相关.结论 肺组织NF-k B活化及iNOS过度表达可能是SAP肺损害发生的原因之一.瘦素可能通过抑制NF-k B活性途径减少iNOS的表达,从而减少过量NO的生成,减轻SAP肺组织损害.     

中药WPY对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺及肺组织表达ICAM-1及MPO活性的影响

目的探讨中药WPY对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺及肺组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达及细胞过氧化物酶(MPO)活性的影响。方法35g／L牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射诱发大鼠．ANP及中药WPY治疗后,用免疫组化技术观察胰腺、肺组织ICAM-1的表达改变,测定胰腺、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果ANP后3h胰腺的ICAM-1表达及MPO活性明显增强,12h达高峰。ANP后6h肺组织的ICAM-1表达及MPO活性明显增强,12h达高峰。中药WPY治疗组胰腺及肺组织ICAM-1表达及MPO活性下降,在12h时相点与模型组比较具有统计学意义。结论中药WPY可以减轻胰腺及肺组织ICAM-1的表达,使MPO活性下降。     

实验性急性胰腺炎性胰腺组织一氧化氮合酶基因表达的研究

探讨急性胰腺炎发病机制与一氧化氮的关系，用十二指肠闭袢法诱导大鼠实验性ＡＰ模型，并对ＡＰ形成后检测不同时相的胰腺组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ，以了解ＡＰ病程中ＮＯＳ基因表达水平的动态变化，４８只大鼠随机分四组，一组为对照组，三组为实验组。     

腹腔巨噬细胞对急性胰腺炎大鼠腹腔炎症反应的影响

目的：研究腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophages,PMs）对实验性胰腺炎大鼠腹腔炎症反应的影响。方法：胰胆管逆行注射2%去氧胆酸钠制作出血坏死性胰腺炎大鼠模型,使用氯屈磷酸二钠脂质体（Liposome-CL2MBP）腹腔注射特异性清除腹腔巨噬细胞,采用纯雄性S-D大鼠24只,随机分为腹腔巨噬细胞保留/PMs（＋）组、腹腔巨噬细胞清除/PMs（-）组和假手术/SO组。造模后12h活杀大鼠取标本,做胰腺病理学检查,血清淀粉酶测定,腹水定量,检测腹水细胞因子和一氧化氮水平。结果：PMs（-）组和PMs（＋）组间在胰腺病理学评分、血清淀粉酶水平方面无显著差异,两组在腹水定量、腹水细胞因子和一氧化氮水平方面差异显著（P〈0.05）。结论：腹腔巨噬细胞对急性胰腺炎大鼠腹腔炎症反应有重要影响。     

Fluid therapy for severe acute pancreatitis in acute response stage

Background Fluid therapy for severe acute pancreatitis （SAP） should not only resolve deficiency of blood volume, but also prevent fluid sequestration in acute response stage. Up to date, there has not a strategy for fluid therapy dedicated to SAP. So, this study was aimed to investigate the effects of fluid therapy treatment on prognosis of SAP. Methods Seventy-six patients were admitted prospectively according to the criteria within 72 hours of SAP onset. They were randomly assigned to a rapid fluid expansion group （Group I, n=36） and a controlled fluid expansion group （Group II n=-40）. Hemodynamic disorders were either quickly （fluid infusion rate was 10-15 ml.kg-1-h-1, Group I） or gradually improved （fluid infusion rate was 5-10 ml-kg1.h-1, Group II） through controlling the rate of fluid infusion. Parameters of fluid expansion, blood lactate concentration were obtained when meeting the criteria for fluid expansion. And APACHE II scores were obtained serially for 72 hours. Rate of mechanical ventilation, incidence of abdominal compartment syndrome （ACS）, sepsis, and survival rate were obtained. Results The two groups had statistically different （P 〈0.05） time intervals to meet fluid expansion criteria （Group I, 13.5±6.6 hours; Group II, （24.0±5.4） hours）. Blood lactate concentrations were both remarkably lower as compared to the level upon admission （P 〈0.05） and reached the normal level in both groups upon treatment. It was only at day 1 that hematocrit was significantly lower in Group I （35.6%±6.8%） than in Group II （38.5%±5.4%） （P〈0.01）. Amount of crystalloid and colloid in group I （（4028±1980）ml and （1336±816）ml） on admission day was more than those of group II （（2472±1871）ml and （970±633）ml）. No significant difference was found in the total amount of fluids within four days of admission between the two groups （P〉0.05）. Total amount of fluid sequestration within 4 days was higher in Group I （（5378±2751）ml） than in Group II （（4215±1998）ml, P 〈0.05）. APACHE II scores were higher in Group I on days 1, 2, and 3 （P〈0.05）. Rate of mechanical ventilation was higher in group I （94.4%） than in group II （65%, P〈0.05）. The incidences of abdominal compartment syndrome （ACS） and sepsis were significantly lower in Group II （P 〈0.05）. Survival rate was remarkably lower in Group I （69.4%） than in Group II （90%, P〈0.05）. Conclusions Controlled fluid resuscitation offers better prognosis in patients with severe volume deficit within 72 hours of SAP onset. Chin Med J 2009; 122（2）： 169-173     

银杏叶提取物对重症急性胰腺炎大鼠一氧化氮及诱导型一氧化氮合成酶的影响

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达的影响。方法 72只SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO)、SAP组、GBE干预组。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管注射方法建立SAP动物模型。GBE治疗组于建模后5 min将GBE溶液通过股静脉给药。SO组和SAP组注入同样量的生理盐水。检测3组6、12、24 h血清淀粉酶、胰腺组织病理评分、血清及胰腺组织NO水平、实时荧光定量PCR检测胰腺组织iNOS mRNA表达情况。结果 GBE组胰腺组织病理评分6、12 h均显著低于SAP组,但在24 h胰腺组织病理评分与SAP组无显著差异;GBE组在6 h时血清及胰腺组织NO水平、12 h时胰腺NO水平较SAP组低,但随着时间延长,两组无显著差异;6 h时GBE组iNOS mRNA表达较SAP组低(P<0.05);12、24 h时SAP组与GBE组iNOS mRNA表达无统计学意义。结论 GBE在SAP早期可能通过抑制iNOS mRNA表达而降低NO水平,对胰腺组织起保护作用;但随着病程进展,这种作用不明显。     

重症急性胰腺炎早期低白蛋白血症的临床研究

目的:探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)早期低白蛋白血症的发生机制和临床特点,及其对预后的影响和防治措施.方法:2003年8月1日～2004年12月31日收治的SAP早期并发低白蛋白血症患者138例,分成轻度低白蛋白血症组(血浆白蛋白30～35 g/L)54例和重度低白蛋白血症组(血浆白蛋白＜30 g/L)84例,比较分析两组的早期并发症、相关参数、后期感染及病死率.结果:重度低白蛋白血症组肾功能衰竭、休克、心衰及消化道出血的发生率高于轻度低白蛋白血症组(P＜0.01),肝功能衰竭发生率两组比较无统计学差异;Ranson评分及Balthazar CT评分两组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);重度低白蛋白血症组的急性生理和慢性健康评价指标Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ, APACHEⅡ)评分、脉搏和呼吸频率均明显高于轻度低白蛋白血症组(P＜0.05或P＜0.01);重度低白蛋白血症组后期感染发生率及病死率均高于轻度低白蛋白血症组(P＜0.01).结论:SAP早期低白蛋白血症对SAP的病理生理过程起着促进作用,血浆白蛋白水平越低,则并发症越多,后期感染发生率及病死率也越高.减轻SAP早期的炎性反应,及时足量补充白蛋白、氨基酸及脂肪等营养物质,是防止低白蛋白血症发生和发展的关键.     

艾普拉唑联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎的效果及安全性分析

［摘要］ 〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗探讨艾普拉唑联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎的有效性、安全性及对氧化应激水平的调节作用。 〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗纳入符合条件的重症急性胰腺炎患者共98例,按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组49例。2组参见《中国急性胰腺炎诊治指南》给予常规干预措施。对照组采用注射用生长抑素治疗。治疗组在对照组基础上给予艾普拉唑肠溶片2片/次,1次/d。2组疗程均为14 d。比较2组症状改善时间。记录2组4周内多器官功能障碍综合征（multi-organ dysfunction syndrome,MODS）、急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）的发生率、病死率以及治疗期间不良反应发生情况。检测2组氧化应激指标超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平。 〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗治疗组发生率腹胀缓解、腹痛缓解、肠鸣音恢复、肛门排便、体温恢复时间均短于对照组（P＜0.05）。在4周内,治疗组ARDS发生率（12.24%）和MODS发生率（10.2%）均低于对照组（P＜0.05）;2组病死率差异无统计学意义（P＞005）。2组头痛头晕、恶心呕吐、腹泻、皮疹、胸闷发生率差异均无统计学意义（P＞005）。治疗后,治疗组血清SOD、GSH-Px水平明显高于对照组,MDA明显低于对照组（P＜0.05）。 〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗在基础治疗的同时,应用艾普拉唑联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎,可促进症状改善,降低ARDS和MODS 发生率,且安全性好,其疗效可能与抑制氧化应激水平有关。     

重症急性胰腺炎患者血清C-反应蛋白的动态监测及临床意义

目的动态监测重症急性胰腺炎(SAP)患者外周血C-反应蛋白(CRP)水平,探讨CRP对SAP的早期诊断与预后评估的参考价值。方法分别检测45例SAP患者和45例轻型急性胰腺炎(MAP)患者入院后第1、3、5、7、10、14天外周血CRP水平,并进行分析比较。结果MAP组患者CRP高峰值出现在住院第3天,第7天开始下降,14天后恢复正常。而SAP组患者住院第1天即可出现CRP显著增高,且下降速度缓慢,在后期CRP仍可维持在一个较高水平。入院第1天,SAP组血清CRP水平均显著高于MAP组(P<0.01)。轻症与重症组之间、无并发症与有并发症的SAP患者血清CRP水平差异均有高度显著性(P<0.01)。结论动态监测CRP可作为SAP疾病严重程度评估、早期诊断及预后判断的一个独立的衡量指标,值得临床推广应用。     

多巴胺对急性重症胰腺炎合并感染性休克患者肾功能的影响

目的:研究多巴胺对急性重症胰腺炎合并感染性休克患者肾脏功能的影响.方法:选择1998年以来在我院接受治疗的急性重症胰腺炎合并感染性休克患者39例,按照患者多巴胺最大泵注速率的不同分为A组14例,B组14例,C组11例,3组患者多巴胺最大泵注速率依次为2～9 μg/(kg·min), 10～15 μg/(kg·min), ＞15 μg/(kg·min).测定、记录所有患者MAP, HR,尿量,BUN, CRE, U-ALB和Uβ2-MG定量及APACHE III评分.结果:治疗前,3组患者均表现有低血压、心动过速和少尿,多数患者CRE, BUN, U-ALB, Uβ2-MG和APACHE III评分高于正常值上限.经过抗休克治疗,所有患者的MAP, HR, 尿量及BUN, CRE均恢复到正常范围(P＜0.01), U-ALB, Uβ2-MG定量及APACHE III评分也有所恢复(P＜0.01),但仍高于正常.结论:在急性重症胰腺炎合并感染性休克的治疗中,应以恢复脏器血流灌注为首要目标,以容量复苏为主,必要时辅以多巴胺等血管活性药物来维持循环稳定.     

氢饱和生理盐水对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的保护作用

目的：探讨静脉注射氢饱和生理盐水（HRS）对牛磺胆酸钠诱导的大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤（APALI）是否具有保护作用及其可能的机制。方法将54只健康SD雄性大鼠分成假手术组（Sham组）、模型组（SAP＋ NS组）和 HRS处理组（S A P＋ H RS组）,各组再按时间点每个亚组分成6、12、24 h 3个亚组,每个时间点处死6只大鼠。收集血清、肺组织及胰腺组织。检测血清TNF‐α、IL‐1β水平;肺组织湿干质量比;测定肺组织中 TNF‐α、IL‐1βmRNA的表达;并对胰腺组织、肺组织损伤进行病理学评价。结果（1）SAP＋ NS组和SAP＋ HRS组血清中 TNF‐α、IL‐1β水平、胰腺和肺组织病理评分、肺组织 TNF‐α、IL‐1βmRNA的表达,肺组织湿干质量比在6、12、24 h各个时间点均高于Sham组（P＜0．05）。（2）SAP＋ HRS组与SAP＋ NS组比较,SAP＋ HRS组血清TNF‐α水平、肺组织TNF‐αmRNA的表达、肺组织湿干质量比在各个时间点均低于SAP＋ NS组（均P＜0．05）。血清IL‐1β水平、胰腺和肺组织病理评分、肺组织中IL‐1βmRNA表达在6 h时两组间差异无统计学意义（P＞0．05）,但在12、24 h时SAP＋ HRS组低于SAP＋NS组（均 P＜0．05）。结论 HRS可能是通过其选择性抗氧化作用抑制了氧化应激损伤相关细胞因子表达来实现对APALI的保护。