紫草素对人胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移能力影响

目的 观察紫草素对人胃癌细胞SGC-7901增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法 MTT法检测细胞增殖抑制作用,Transwell小室侵袭迁移实验检测细胞侵袭、迁移能力.实时荧光定量PCR测定加入不同浓度紫草素24h的SGC-7901细胞的MMP-2、MMP-7 mRNA的表达水平.结果 紫草素可以抑制人胃癌细胞的增殖,在2μg/ml之前其抑制效应呈浓度-时间依赖性;紫草素作用胃癌细胞株SGC-7901细胞48h后SGC-7901细胞的侵袭、迁移能力降低;紫草素作用胃癌细胞株SGC-7901细胞24h后,紫草素组的MMP-2的相对表达量均显著低于阴性对照组的相对表达量.结论经紫草素作用后SGC-7901细胞的侵袭、迁移能力降低,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7 mRNA的表达有关.     

LY294002对胃癌细胞株生长增殖及侵袭能力的影响

目的探讨LY294002（PI3K/Akt信号通路特异性阻断剂）对胃癌细胞生长增殖、凋亡和侵袭转移的影响。方法采用不同浓度LY294002处理胃癌AGS细胞,MTT法检测胃癌AGS细胞经LY294002作用后生存率的变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;Transwell实验和划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变。结果 MTT检测结果显示,一定浓度的LY294002可抑制AGS细胞的生长,且随着浓度的增加和作用时间的延长,其抑制作用明显增强（P〈0.05）。流式细胞术显示,AGS细胞经LY294002作用48h后,细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,细胞有明显凋亡,并呈现浓度依赖性（P〈0.05）。Transwell实验和划痕实验显示,AGS细胞经LY29400作用后,其侵袭和转移能力受到抑制。结论 LY294002可抑制胃癌AGS细胞的生长增殖,且呈时间和剂量的依赖性。其机制可能是阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡。LY294002也可抑制胃癌AGS细胞的侵袭和转移。     

紫草素诱导人结肠癌细胞SW620凋亡及机制研究

目的探讨紫草素诱导人结肠癌细胞株SW620凋亡及分子机制。方法体外培养人结肠癌细胞株SW620,加入终浓度分别为2.5～15μmol/L的紫草素。采用MTT法测定紫草素对肿瘤细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率,Western blot方法测定对bcl-2、bax蛋白表达水平。结果紫草素随时间和浓度的增加对SW620细胞增殖抑制率增加,细胞凋亡率增加（P〈0.05）。Western blot法检测发现bax蛋白表达升高同时bcl-2蛋白表达下降。结论紫草素有抑制结肠癌细胞增殖和诱导凋亡的作用,可以通过调控bax和bcl-2蛋白的表达经线粒体途径诱导细胞凋亡。     

紫草素对人白血病MV4-11细胞的增殖抑制和促凋亡作用

目的：探讨紫草素对FMS样酪氨酸激酶3受体基因内部串联重复序列（FLT3-ITD）突变急性髓系白血病（AML）MV4-11细胞的增殖抑制和促凋亡作用,并初步阐明其分子机制。方法：生长状态良好的MV4-11细胞分为二甲基亚砜（DMSO）组和不同浓度（0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 μmol·L^-1）紫草素组,处理细胞24和48 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度（IC₅₀）。MV4-11细胞分为空白对照组、DMSO组和不同浓度（0.25、0.50和1.00 μmol·L^-1）紫草素组,处理细胞48和72 h,采用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记法检测各组细胞增殖率。MV4-11细胞分为DMSO组和不同浓度（0.702、1.404和2.808 μmol·L^-1）紫草素组,处理细胞48 h,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。MV4-11细胞分为DMSO组和不同浓度（0.351、0.702和1.404 μmol·L^-1）紫草素组,处理细胞48 h,Real-time PCR法检测各组细胞中微小RNA-155（miR-155）的表达水平。结果：CCK-8法和CFSE法检测,与DMSO组比较,不同浓度紫草素组细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05或P<0.01）,增殖率明显降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性;24和48 h时IC₅₀分别为1.743和1.404 μmol·L^-1。流式细胞术检测,与DMSO组比较,不同浓度紫草素组细胞凋亡率明显升高（P<0.01）,且呈剂量依赖性。Real-time PCR法检测,与DMSO组比较,不同浓度紫草素组细胞中miR-155表达水平明显降低（P<0.01）,1.404 μmol·L^-1紫草素组细胞中miR-155表达水平降低超过75%。结论：紫草素对人FLT3-ITD突变AML MV4-11细胞具有增殖抑制和促凋亡作用,并可下调miR-155表达,提示紫草素可能作为FLT3-ITD突变AML的潜在治疗药物之一。     

染料木素与大豆甙元对子宫内膜癌细胞株ERRα的影响

目的探讨两种植物雌激素（染料木素、大豆甙元）对子宫内膜癌细胞株（Ishkawa细胞系）中雌激素受体相关受体α（estrogen-related receptorα,ERRα）的表达及细胞增殖的影响。方法采用Real-Time PCR方法检测不同浓度（40、20、10、5μmol/L）的两种植物雌激素作用于Ishkawa细胞系不同时间（24、48 h）后ERRαmRNA的变化,并用MTT法检测细胞的增殖情况。结果Ishkawa细胞系经低浓度染料木素处理后ERRαmRNA的表达均有上调趋势,以10-20μmol/L较为明显,40μmol/L浓度时ERRαmRNA的上调受到抑制。且染料木素在低浓度（5、10μmol/L）对Ishkawa细胞的增值有着抑制作用,而在较高浓度（20、40μmol/L）有着促进Ishkawa细胞生长的作用。大豆甙元处理24 h组ERRαmRNA均有上调,以40μmol/L最为明显;48 h组均有上调,以20μmol/L上调最为明显,40μmol/L浓度时ERRαmRNA的上调受到抑制。且24 h和48 h组各浓度均对Ishkawa细胞增殖有着抑制作用,24 h以低浓度抑制较为明显,48 h组各浓度之间增值率的差异不明显。结论大豆甙元和染料木素在低浓度时均可上调ERRdmRNA并抑制Ishkawa细胞增殖,在高浓度时却对Ishkawa细胞ERRetmRNA的上调作用不明显,染料木素高浓度时促进Ishkawa细胞增殖,大豆甙元高浓度时抑制Ishkawa细胞增殖作用较低浓度为差。     

5-烯丙基-7-二氟亚甲氧白杨素体外抗肝癌作用

目的研究白杨素（ChR）衍生物5-烯丙基-7-二氟亚甲氧白杨素（5-ally-7-gen-difluormethylenechrysin,ADFMChR）对体外培养肝癌SMMC-7721细胞生长抑制作用及诱导凋亡的作用机制。方法 1）细胞计数法研究ADFMChR对SMMC-7721细胞生长曲线及细胞倍增时间的影响;2）Western blot法分析ADFMChR对SMMC-7721细胞Bcl-2、Bax蛋白表达变化情况。结果 1）细胞计数结果表明：0.3μM～30.0μM浓度的ADFMChR与对照组相比均可抑制SMMC-7721细胞生长,且呈浓度和时间依赖性;常规培养SMMC-7721细胞群体倍增时间为23.81小时,当ADFMChR为30.0μM时则可使其延长至61.22小时;2）Western Blot分析证实ADFMChR上调Bax和下调Bcl-2呈浓度依赖性。结论以ChR为先导物,选择性引入烯丙基和二氟亚甲氧基的衍生物ADFMCHR对肝癌的生长抑制作用较ChR明显增强,可能与细胞增殖周期延长,Bcl-2/Bax比值下降,诱导细胞凋亡相关。     

黄芩素对宫颈癌细胞凋亡的影响

目的：观察不同浓度的黄芩素干预宫颈癌HeLa细胞后细胞迁移及细胞周期的变化,观察细胞培养基中具有活性的金属基质蛋白酶－2（MMP －2）、金属基质蛋白酶9（MMP －9）的变化,及 MMP －2、MMP －9、金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP2）、细胞周期蛋白 D1（CyclinD1）、B 细胞淋巴瘤／白血病－2（Bcl －2）相关 X 蛋白（Bax）、Bcl －2 mRNA 及蛋白水平表达的变化。方法体外黄芩素干预 Hela 细胞株24 h,分不含黄芩素的无血清DMEM 高糖培养基培养的细胞为空白对照组,无血清 DMEM 高糖细胞培养基中加入终浓度为100μmol／L 的黄芩素为100μmol／L 组,无血清 DMEM 高糖细胞培养基中加入终浓度为200μmol／L 的黄芩素为200μmol／L 组,共3组。镜下观察各组细胞形态及数量的变化、细胞迁移实验检测细胞迁移的改变、流式细胞技术法检测细胞周期发生的变化、RT －PCR 法及 Western blot 法检测 MMP －2、MMP －9、TIMP2、CyclinD1、Bax、Bcl －2 mRNA 及蛋白水平的表达变化。结果黄芩素干预24 h 后,与空白对照组比较,两干预组细胞周期 G1期受阻滞,阻滞程度与黄芩素干预浓度一致（P ＜0．05）,细胞迁移受抑制,随着黄芩素浓度逐渐增加,迁移距离逐渐减少（P ＜0．05）,MMP －2、MMP －9活性受到抑制,抑制程度与黄芩素浓度呈正相关（P ＜0．05）,MMP －2、MMP －9、CyclinD1、 Bcl －2的mRNA 及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加,呈逐渐降低的趋势（P ＜0．05）,TIMP2、Bax 的 mRNA 及蛋白表达趋势随黄芩素浓度增加而逐渐增强（P ＜0．05）。结论黄芩素干预宫颈癌 HeLa 细胞,通过阻滞细胞周期 G1期,抑制 MMP －2、MMP －9活性,上调 TIMP2、Bax 的表达,下调 MMP －2、MMP －9、CyclinD1、Bcl －2的表达,促进 HeLa细胞的凋亡。     

紫草素通过PI3K/Akt信号通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡

目的通过研究紫草素诱导Ishikawa细胞凋亡的过程中对PI3K/AKT信号通路的影响,探讨紫草素通过PI3K/Akt信号通路诱导子宫内膜癌细胞凋亡的机制。方法 Ishikawa细胞体外培养,经0.3μg·m L-1、0.5μg·m L-1、0.7μg·m L-1紫草素处理细胞后,倒置显微镜观察不同时间Ishikawa细胞生长变化;RT-PCR及Western-blot检测相关蛋白的表达。结果随着紫草素作用浓度的增加及干预时间的延长,Ishikawa细胞数量逐渐减少;紫草素作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞48 h后,p Akt、Bcl-2的蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05),而Akt的蛋白表达含量与空白对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论紫草素能够抑制Ishikawa细胞的生长,且呈浓度依赖性;紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡是通过抑制PI3K/Akt信号通路中Akt的磷酸化,从而对Akt下游靶蛋白Bax上调和Bcl-2下调,发挥了诱导细胞凋亡的作用。     

紫草素对涎腺腺样囊性癌SACC-83增殖和凋亡的影响

目的探讨紫草素对人腺样囊性癌SACC-83增殖和凋亡的影响。方法甲基塞唑蓝检测紫草素对SACC-83体外生长抑制作用;吖啶橙-溴化乙锭荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率。结果紫草素以剂量和时间依赖的方式抑制SACC-83细胞生长,以剂量依赖的方式使SACC-83细胞周期阻滞在S期,诱导细胞凋亡;染色可见细胞呈明显凋亡特征。结论紫草素对SACC-83细胞具有明显增殖抑制及诱导凋亡作用,且具有浓度和时间依赖性。     

细胞外基质对7721肝癌细胞粘附性及迁移性的影响

目的观察各种不同细胞外基质成分在体外对７７２１细胞粘附和迁移的影响。方法运用细胞粘附实验和细胞迁移实验进行观察。结果显示随着纤连蛋白、层连蛋白、Ⅳ型胶原浓度升高,７７２１细胞在相应的基质上粘附及迁移能力有所上升,低浓度时增强幅度更大。Ⅰ、Ⅲ型胶原在低浓度（＜５μｇ／ｍｌ）时表现为轻微诱导粘附和迁移作用,高浓度时（＞５μｇ／ｍｌ）抑制粘附和迁移,且随着浓度加大抑制作用更明显。加入各种特异性抗体以及ＲＧＤ三肽证明上述影响具有基质特异性。结论纤连蛋白、层连蛋白、Ⅳ型胶原可通过诱导肿瘤细胞粘附和迁移,从而促进肿瘤细胞浸润和转移;而Ⅰ、Ⅲ型胶原则相反,可抑制肿瘤细胞的浸润和转移。     

不同类型标本不同时间微生物检验结果阳性率分析

目的：研究不同类型标本不同时间微生物检验结果阳性率差异。方法整群选择2012年4月—2013年4月,2013年7月—2014年8月两个时间段在北华大学校医院的临床病样标本共计1630份作为研究对象。根据标本采集时间分为两组,其中2012年4月—2013年4月标本820份为I组,另2013年7月—2014年8月标本810份为II组。结果 I组呼吸道标本阳性率显著高于II组(χ2=6.731,P<0.05);I组血培养标本阳性率显著低于II组(χ2=4.461,P<0.05);I组其他非呼吸道标本阳性率显著高于II组(χ2=5.291,P<0.05);两组粪便标本阳性率差异不显著(1.17%vs 1.15%;χ2=0.000,P>0.05)。结论分析不同类型标本不同时间微生物检验结果阳性率差异,有利于提高临床微生物检测水平,提高对疾病诊断的准确性,从而为临床提供治疗可靠的治疗依据。     

艾滋病合并神经梅毒的临床特征分析

目的 了解艾滋病（AIDS）合并神经梅毒（NS）的临床特征,为该病的诊治提供帮助。 方法 回顾分析近 1 年多来 22 例 AIDS 合并 NS 患者的病史、临床表现、实验室检查、头颅 CT 及 MRI 检查情况。 结果 22 例患者均为男性,近半数有男 - 男性行 为史。18 例为无症状型 NS,4 例为有症状型,其中脑实质型 2 例、脑血管型 2 例。血清快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）滴度≥1:32 者 19 例（86.6%）,有症状型患者头颅影像学检查均有异常。所有患者均进入 AIDS 期,需进行驱梅及抗人类免疫缺陷病毒（HIV）治 疗。 结论 本组 AIDS 合并 NS 的患者以无症状型多见,需积极驱梅、抗 HIV 治疗,对于血清 RPR 滴度≥1:32 的患者,随访中应加强 脑脊液复查。对于出现神经系统症状的年轻男性患者,需警惕 AIDS 合并 NS 的发生。     

苦豆子不同生长期不同器官总生物碱含量的动态变化研究

目的考察不同生长期和不同器官苦豆子总生物碱的含量,以确定苦豆子的适宜药用部位及合理的采收期。方法采用醇溶法提取苦豆子总生物碱,用酸碱滴定法测定总生物碱的含量。结果不同器官总生物碱含量变化较大,籽中最高,根中最低;不同生长期根、叶、花、籽中总生物碱含量变化不显著,茎中呈现随月份的增长,含量递减的趋势（5月份最高）;结论建议苦豆子采收期为果实成熟期,以地上部分入药。     

特殊异位妊娠临床误诊分析

异位妊娠是妇产科常见的一种急腹症。随着近几年来影像技术的发展及腹腔镜的介入。异位妊娠的诊断技术已经有了很大的提高，加之广大人民健康意识的提高。在临床上有相当一部分病人在未破裂之前已经进行有效的诊治，避免了异位妊娠破裂所导致的出血等不良后果。但在基层，特别是经济落后的边远地区仍有一部分病人不能得到及时有效的诊治，造成了不良后果。现将我院近5年来诊治的3例特殊类型的异位妊娠误诊情况分析如下。     

不同剂量乌司他丁对心肺复苏后患者临床疗效研究

目的：探讨研究使用不同剂量的乌司他丁,对于心肺复苏后患者的治疗效果。方法整群选取该院在2013年6月—2014年5月期间所收治的心肺复苏后患者共计106例,以上患者全部为心脏骤停后经心肺复苏后自我循环康复,并且均是能够生存超过72 h的患者。按照随机原则分成实验组与对照组各为53例。两组患者全部进行普通心肺复苏抢救,使用普通心肺复苏常用的急救药物；在心肺复苏自我循环康复后；实验组患者使用乌司他丁剂量为40万U/次,2次/d。对照组患者使用乌司他丁,剂量20万U/次,2次/d。然后观察所有患者多器官功能衰竭产生情况；并统计对比两组患者在治疗28 d之后的生存状况。结果经治疗以后,观察组患者中多器官功能衰竭的发生率为33.3%(18/53)；明显低于对照组患者(58.5%,31/53)；该两组患者的多器官功能衰竭发生率对比,其差异具有统计学意义(χ2=8.374,P<0.05)；治疗28 d后,观察组患者的生存率为73.6%；明显高于对照组(37.7%,20/53),该两组患者在治疗28 d以后的生存率对比；差异有统计学意义(χ2=9.115,P<0.05)。结论使用乌司他丁能够帮助提高心肺复苏后患者的生存率；并且使用超剂量乌司他丁的临床治疗效果比较小剂量要好,值得该院学习与应用。     

不同剂量米索前列醇用于人工流产的观察

目的:探讨不同剂量米索前列醇用于人工流产的临床效果。方法:选取临床资料为2012年7月-2013年7月本院接受人工流产手术的孕妇150例,按随机数字表法分为A组、B组、对照组各50例,A组于人工流产术前口服米索前列醇200μg,B组于人工流产术前口服米索前列醇400μg,对照组行单纯无痛人工流产术。结果:全部150例人工流产手术均成功,术后无感染病例。A、B组显效率和镇痛效果明显高于对照组,B组显效率和镇痛效果高于A组,差异均有统计学意义(P0.05);A、B组手术时间、术中出血量、不良反应发生率均低于对照组,B组手术时间、术中出血量、不良反应发生率明显低于A组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:米索前列醇用于人工流产手术前具有良好的扩宫和镇痛作用,剂量为400μg时的宫颈松弛和镇痛效果最佳,手术时间、术中出血量、不良反应发生率均较低,具有良好的临床疗效。     

对不同专业学生《流行病学》课程教学的思考

从《流行病学》课程设置的目的与意义、当前教学中存在的问题、教学改革的几点思考和建议等几个方面进行了探讨。     

不同剂量血必净急诊治疗脓毒症的疗效分析

目的观察分析不同剂量血必净注射液急诊治疗脓毒症的临床疗效。方法选取2010年3月-2012年3月急诊收治的64例脓毒症患者为研究对象,按照血必净用量分为3组,观察对比三组治疗效果及不良反应。结果三组疗效指标随着使用剂量的增加,改善幅度也更显著(P<0.05)。结论大剂量血必净注射液急诊治疗脓毒症的临床疗效显著。     

小儿毛细支气管炎应用氨茶碱治疗中剂型对疗效与依从性的影响

目的探讨应用不同剂型的氨茶碱对患有毛细支气管炎的患儿进行治疗的临床效果。方法抽取94例患有毛细支气管炎的患儿病例,将其分为对照组和观察组,平均每组47例。采用氨茶碱针剂对对照组患儿进行治疗;采用氨茶碱针剂与片剂联合对观察组患儿进行治疗。结果观察组患儿的毛细支气管炎症状治疗效果明显优于对照组;不良反应率明显低于对照组。结论应用氨茶碱针剂与片剂联合对患有毛细支气管炎的患儿进行治疗的临床效果非常明显。     

檀香不同部位总黄酮含量比较

目的比较不同部位檀香总黄酮的含量,为其综合利用提供依据。方法定期采集檀香不同部位样品,以芦丁为对照品,紫外-可见光光度法在500nm处测定其总黄酮含量。结果檀香叶、嫩枝、树干的总黄酮含量分别为5.42%、2.38%、0.72%。结论檀香叶和嫩枝总黄酮含量均较高,可考虑综合利用。