健康体检时HBsAg测定不能用混合血清法

近年来，诸如儿童入学（托）体检、职工体检等健康体检越来越多，这给检验科增加了许多工作量。据了解，一些单位为了减轻工作量，取几份体检标本混合后进行检测，若混合标本检测结果阴性或未超过正常上限，即认为组成混合标本的每份标本结果均阴性或未超过正常上限。下以ＨＢｓＡｇ检测为例，讨论其可行性。１　实验方法与结果１．１　材料　随机选择来本院体检者血清１０００例，试剂为上海科华公司ＨＢｓＡｇＥＬＩＳＡ试剂盒。１．２　方法　Ⅰ法：每份标本均单独测定；Ⅱ法：取５份血清等量混匀，将混合血清当作１份标本测定，若阳性，…     

22例抗-HIV国产ELISA试剂检测假阳性报告

笔者在用国产ELISA双抗原夹心法试剂对无偿献血者的血液进行抗 -HIV检测时 ,曾检出 2 2份“阳性”样品 ,再用进口ELISA双抗原夹心法试剂复检为阴性 ,最后经送滨州市卫生防疫站用蛋白印迹技试剂检测 ,证实为假阳性 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　样品　 2 0 0 4年 8月份至 11月份无偿献血者血液标本 5 5 0 0人份 ,每份标本均采用北京金豪有限公司及北京高达有限公司生产的抗 -HIV试剂同时作抗 -HIV筛选 ,收集两种试剂检测同时“阳性”或仅一种试剂“阳性”的样品 2 2份 (0 .4 % )。1.2　试剂　国产队ELISA双抗原夹心法抗 -…     

TRUST 与 TP-ELISA、TPPA法在献血者血液检测中的分析

本站于 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 1年 5月对体检合格和全血 HBs Ag金标法检测为阴性的供血者共采血 1 0 2 5 2人份 ,根据国家《献血员健康标准》用两种不同厂家生产的试剂分别进行全项检测 ,其中梅毒检测采用 TRUST法 (甲苯胺红不加热血清试验 ) ,检测呈阳性反应 2 4份。再用两种不同厂家生产的 TP- ELISA双抗原夹心法和 TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验 )对 TRUST呈阳性反应的 2 4份标本和两种不同厂家 TRUST法检测均呈阴性的 66份标本进行检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　试剂 TRUST分别由厦门新创科技有限公司、上海荣盛…     

献血者抗-HCV ELISA阳性结果RIBA分析

笔者将本中心对献血者丙型肝炎抗体筛选所采用两种试剂同时阳性或仅一种试剂阳性的标本 ,采用RIBA法进行抗原区带分析 ,现将 1年的分析结果报告如下。1　材料与方法1 1　材料　 2 0 0 1年 5月～ 2 0 0 2年 5月献血者标本 4 4 0 0 7份 ,每份标本均采用ORTHO及华美抗 HCV试剂同时作抗 HCV筛选 ,收集两种试剂检测同时阳性或仅一种试剂阳性的标本 12 2份 ;CHIRONRIBAHCV 3.0SIA试纸条。1.2　方法　按照CHIRONRIBAHCV 3.0SIA说明书操作 ,在CHIRONRIBA分析仪上作抗体原区代分析。2　结果试验的内控带IgG条带Ⅱ颜色明显强…     

多次重复加样对HBsAg测定结果的影响

实验室在利用半自动生化分析仪测定生化项目的试验中存在着部分手工操作。按照相应试剂盒中的说明书进行手工加样本加试剂 ,反应一定时间后在半自动生化分析仪上进行比色测定。这样同一份血清标本往往要经过多次重复加样。为探讨其对定性试验ＨＢ ｓＡｇ检测结果的影响 ,作者对多次重复加样后的血清标本进行了ＨＢｓＡｇ复检 ,结果报告如下。资料与方法1 .1 .一般资料作者收集了乙肝患者ＨＢｓＡｇ阳性血清 87例 ,健康体检者ＨＢｓＡｇ阴性血清 87例。1 .2 .方法1 .2 .1 .将 87例ＨＢｓＡｇ阳性血清与 87例ＨＢｓＡｇ阴性血清进行分组 ,按照…     

快速滴金免疫法检测肺炎支原体IgM抗体

笔者采用快速滴金免疫法检测肺炎患者血清中 MP-Ig M抗体 ,并与 ELISA法进行比较。1　材料与方法　滴金免疫测定试剂盒购自兰波生物技术研究所。ELISA试剂盒购自华美生物制品有限公司。均按说明书操作和判断结果。2　结果与讨论2 .1　特异性和稳定性　 1 5例溶血、高胆红素、高脂血的标本 ,用滴金免疫法检测结果均为阴性。 2 0例健康体检标本 ,其检测结果均为阴性。2 .2　滴金免疫法与 ELISA法的比较　两种方法平行测定临床标本 2 1 4例 ,其中两法均阳性 98例 ,均阴性 1 1 6例 ,符合率为 1 0 0 %。2 .3　临床应用　用滴金法测定后的…     

梅毒螺旋体明胶凝集试验对酶联免疫吸附试验法和金标法梅毒抗体检测的结果评价

目的应用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法对ELISA法和胶体金法梅毒血清学检测试剂的临床适用性进行评价。方法收集6 291例临床手术前或输血前住院患者的血清标本,采用ELISA法(试剂A、试剂B)和金标法分别进行初筛检测,初筛阳性或弱阳性标本用TPPA法做确证试验。结果血清标本6 291份中,试剂A、试剂B、金标法检测阳性分别为66、64、56份,金标法阳性检出率与试剂A、B比较,差异无统计学意义(P0.05)。阳性标本经TPPA确证为66份,其中试剂A、试剂B阳性均为61份,金标法为56份。试剂A检测为阳性的5份标本及试剂B检测为阳性的3份标本,经TPPA确证为阳性的分别为3、2份,金标法灵敏度与试剂A、B比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法灵敏度高,易实现自动化酶联免疫分析,适合临床手术前或输血前患者标本的筛查,金标法灵敏度低,但特异度高,方法简捷,适用于大规模健康体检及急诊手术前的初筛试验。为避免医疗纠纷,对ELISA法和金标法阳性的标本应用TPPA法来确诊。     

血液分析仪ADVIA 120对不同保存条件标本的检测结果分析

已知血液标本在不同保存时间和温度对 AD-VIA1 2 0血液分析仪检测参数有一定影响 ,但各家说法略有差异。我们作了观察 ,现报道如下。材料和方法一、仪器　 ADVIA 1 2 0血液分析仪 ( Bayer公司 )及配套试剂。二、标本　健康体检者静脉血 5 0份 ,以 ED-TA- K2 抗凝 ( 1 .5 g/L± 0 .2 5 g/L) ,每份血分 2组 ,一组置室温 :另一组保存于 4℃ ,实验前再置室温平衡 1 5 min后测定。三、方法　严格按照说明书操作 ,将 4℃及室温标本在采血后 0、2、4、6、8、1 2和 2 4 h分别测定 3次 ,结果取均值 ( x) ,求标准差 ( s) ,与 2 h结果进行配…     

混合供血者标本可以降低抗HIV-1检测的成本

作者将15份献血者血清标本混合,用改良酶联免疫法(EIA)检测抗HIV—1,获得成功。 改良EIA,修改了原来的EIA,其原则是:①在常规试验中,标本预先作稀释。选用商业出售的Abbott抗HIV—1 EIA试剂,将14份血清(每份10μl)混合代替原来的稀释剂140μl,稀释标本时稀释剂只加60μl。②用5份而不是3份阴性对照,每一阴性对照为150μl而不是10μl。3份10μl阳性对照仍同原EIA。根据原公式计算的临界值(C):阴性对照均值+10％阳性对照均     

三种方法检测梅毒螺旋5体抗体的结果分析

对本单位 2 0 0 1年献血员初筛ＴＲＵＳＴ结果阳性标本 30份、阴性标本 10份 ,用测定梅毒螺旋体抗体的酶联免疫双抗原夹心法试剂 (批号 2 0 0 110 2 0 ,吉比爱生物公司产品 )、ＴＲＵＳＴ试剂 (批号 2 0 0 10 912 ,荣盛公司产品 )、ＴＰＨＡ诊断试剂 (批号ＨＬ .0 2 ,美国Ｌｉｆｅｋｅｙｂｉｏｍｅｄｉｔｅｃｈｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ产品 )进行检测。操作均按试剂说明书。结果 ,30份ＴＲＵＳＴ法初检阳性标本 ,实验当日再次检测 ,18份ＴＲＵＳＴ法阳性均与ＥＬＩＳＡ、ＴＰＨＡ相符 ;4份阳性而ＥＬＩＳＡ、ＴＰＨＡ均是阴性 ;8份ＴＲＵＳＴ…     

2种测定血清丙氨酸氨基转移酶方法的比较

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定项目是常用检测肝功能的试验,在健康人群体检中作为了解肝功能情况的主要指标之一,以前一直使用赖氏法检测,该方法存在着血清需要量大、检测时间长、操作步骤多、每批试剂都需要绘制标准曲线等缺点;在健康人群体检时标本数量很大,需要一种能够简便、快速、准确的适合大量筛选的检测方法。然而用丙酮酸氧化酶法测定ALT ,具有血清用量小、检测时间短、步骤简单、无需绘制标准曲线等优点,可以作为体检筛选ALT的好方法。一、材料和方法1.标本来源　随机抽取体检血清标本4 0份。2 .试剂来源　赖氏法检测试剂和…     

四种生化分析试剂对生化分析仪测定血清镁结果的影响

目的探讨肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）4种分析试剂对奥林帕斯AU2700全自动分析仪测定血清镁结果的影响。方法4个项目各检测后再测镁与单测血清镁结果作比较;混合血清加入生理盐水和4种分析试剂1,制成5份标本,每份均重复测定10次;混合血清单测镁10次作为对照,分别测定每一项目5次后,再连续测定混合血清镁10次。结果CK或CK-MB、HDL-C、TG测定后再测镁与单测镁结果比较,差异均具有统计学意义﹙P〈0.01﹚;4种分析试剂1对血清镁测定结果均有明显的正干扰;测CK或CK-MB、TG后再测镁对结果影响持续到第2管,测HDL-C后再测镁对结果影响持续到第3管。结论自动生化分析仪测定CK或CK-MB、TG后再测定血清镁,中间间隔至少要有2个、测定HDL-C后再测定血清镁,中间间隔至少要有3个对镁离子测定无干扰的分析项目或启用试剂针特殊的清洗程序,如为高级生化分析仪应将该实验的项目置于不同的分析模块,以避免试剂针携带污染对测定结果的影响。     

32例两对半中单一HBeAg阳性的结果分析

我们在对病人血清标本进行乙型肝炎五项指标检测时,发现有32例单一HBeAg阳性的乙型肝炎病例。我们对其病人的血清进行稀释,测定其HBSAg,发现有10例是阳性。现报告如下：1材料与方法1．1标本来源本院门诊及住院患者的血清。1．2试剂与方法乙型肝炎五项指标检测均为＊u＊A法,试剂由深圳华元生物制品有限公司提供,严格按说明书操作。我们对单一HBeAg阳性血清,用0．9％生理盐水5倍稀释后,用ELISA法测定其HThSAg。2结果与讨论32例单一HBeAg阳性中,将血清5倍稀释,重新测定其HBsAg,结果发现有10例是阳性。乙型肝炎e抗原的检出…     

四种分析试剂对生化分析仪测定血清镁结果的影响

摘要 目的 探讨肌酸激酶（CK-MB）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）四种分析试剂对奥林帕斯AU2700全自动分析仪测定血清镁结果的影响。方法 单测血清镁分别与四个项目检测后再测镁结果做比较；混合血清分别加入生理盐水和四个项目分析试剂1，制成5份标本，每份均重复测定10次；混合血清单测镁10次作为对照，分别测定四个项目3次后，各重复测定混合血清镁10次。结果 凡CK、CK-MB、HDL-C、TG测定后再测镁与单测镁结果比较，差别均有非常显著性意义﹙P＜ 0.01﹚；四种分析试剂1对血清镁测定结果均有明显的正干扰；四种试剂对镁测定结果影响：CK、CK-MB、TG持续到第3管，HDL-C持续到第4管。结论 自动生化分析仪测定CK还是CK-MB、TG后再测定血清镁，中间间隔至少要有三个项目分析试剂，测定HDL-C后再测定血清镁，中间间隔至少要有四个项目分析试剂对镁离子测定无影响的分析项目或启用试剂针特殊的清洗程序，如为高级生化分析仪应将相互有影响的项目置于不同的分析模块，以避免试剂携带污染对测定结果的影响。     

荧光定量PCR检测HBV—DNA的临床意义

本文采用荧光定量ＰＣＲ法对本院临床和门诊血清标本2 0 0份进行ＨＢＶ ＤＮＡ含量测定 ,探讨ＨＢＶ ＤＮＡ含量与肝病变发展的关系。1　材料和方法1 1　材料　标本取自确诊或怀疑乙肝的患者及无症状体检者 ,共检测 2 0 0例。试剂∶荧光定量ＨＢＶ ＤＮＡ试剂盒由匹基公司提供。仪器∶ＰＥ5 70 0ＰＣＲ仪。1 2　方法　ＨＢＶ ＤＮＡ定量分析采用荧光定量ＰＣＲ法。按操作说明书进行。1 3　统计学方法　各组ＨＢＶ ＤＮＡ含量均数比较采用ｔ检验。遇有阴性结果不参加平均值的统计。2　结果2 1　ＨＢＶ ＤＮＡ、ＦＱ ＰＣＲ标准曲线　ＨＢＶ …     

四种生化分析试剂对生化分析仪测定血清镁结果的影响

目的 探讨肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)4种分析试剂对奥林帕斯AU2700全自动分析仪测定血清镁结果的影响.方法 4个项目各检测后再测镁与单测血清镁结果作比较;混合血清加入生理盐水和4种分析试剂1,制成5份标本,每份均重复测定10次;混合血清单测镁10次作为对照,分别测定每一项目5次后,再连续测定混合血清镁10次.结果 CK或CK-MB、HDL-C、TG测定后再测镁与单测镁结果比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01);4种分析试剂1对血清镁测定结果均有明显的正干扰;测CK或CK-MB、TG后再测镁对结果影响持续到第2管,测HDL-C后再测镁对结果影响持续到第3管.结论 自动生化分析仪测定CK或CK-MB、TG后再测定血清镁,中间间隔至少要有2个、测定HDL-C后再测定血清镁,中间间隔至少要有3个对镁离子测定无干扰的分析项目或启用试剂针特殊的清洗程序,如为高级生化分析仪应将该实验的项目置于不同的分析模块,以避免试剂针携带污染对测定结果的影响.     

血清SOD在4～8℃和冰冻贮存中的稳定性

在临床检验质量控制工作中，标本的贮存条件也是影响常规试验准确性的重要因素．笔者观察了4～8℃和冰冻贮存中血清超氧化物歧化酶（SOD）的稳定性。材料和方法1．标本取无溶血、无黄疸、无脂浊度的当日新鲜混合血清，分装22份于洁净的小试管中加塞保存，11份放4～8℃冰箱，另11份放于冰格．余下的血清即刻测定其SOD活力。于1、2、3、5、10、15、25、35、45、55、65天各取出存放的血清1份，测定SOD活力．每次充分混匀并作三管平行测定，取均值．2．测定方法SOD采用黄嘌呤氧化酶法．试剂由南京建成生物工程研究所提供．整个试验用同一批…     

HBsAg、抗-HCV及抗-HIV试剂质控结果分析

全国血液质量管理委员会在血站评审时明确要求 ,试剂使用前必须由质控部门对试剂进行抽样检查 ,合格后方可使用 ,笔者将 2 0 0 1年HBsAg、抗 HCV及抗 HIV试剂质控情况分析报告如下。材料与方法1　检测参比品　HBsAg血清盘 :阴性参考品 2 0份 ,阳性参考品 3份 ,灵敏度参考品 4份 ,(1ng/ml,2ng/ml,5ng/ml,高浓度 ) ,精密性参考品 1份 ;抗 HCV血清盘 :阴性、阳性参考品各 4 0份 ,抗 HIV血清盘 :阴阳参考品各 2 0份 ,精密性参考品为阳性 18号。以上产品均由中国药品生物制品检定所提供。表 1　 2 0 0 1年 1～ 12月HBsAg试剂质控结果厂…     

ELISA法检测无偿献血者梅毒特异性抗体设置灰区的意义

目的探讨ELISA法检测无偿献血者梅毒特异性抗体设置灰区的意义。方法献血者标本经ELISA试剂初复检,以Cut off值上下20%为灰区,初复检OD值落在灰区的标本经原批号试剂双孔复测并用TPPA试剂进行确认试验。结果共检测无偿献血者标本13 568份,有176份标本OD值分别落在新创和万泰两种ELISA法试剂设定的灰区内。用新创试剂对89份灰区标本双孔复测,检出36份阳性标本,经TPPA确认32例阳性,53份阴性标本经确认51例阴性。用万泰试剂对87份灰区标本双孔复测,检出38份阳性标本,经TPPA确认34例阳性,49份阴性标本经确认47例阴性。结论灰区标本双孔复检后呈一阴一阳结果时应进行确认试验。对双孔复测后OD值仍处于低值灰区的标本,应按阳性结果进行淘汰。     

不同酶联试剂抗-HCV ELISA阳性标本的WB确认分析

目的通过分析抗-HCV酶联检测阳性结果与确证实验结果之间的关系,评价2种不同试剂检测抗-HCV不同片段的能力。方法使用2种酶联抗-HCV试剂检测献血者血浆标本,对于单独阳性和2种试剂检测都为阳性的标本,使用WB(Western Blot)法进行确证实验。结果 135例阳性标本中,70份2家酶联试剂都是阳性的标本WB试剂检测也为阳性,65例2家不一致标本中20例WB试剂为阳性;9份不确定,36例为阴性。真阳性标本中B品牌试剂有2例检测为阴性;不确定标本中单独NS4片段阳性的3例标本使用A品牌试剂检测为阳性,B品牌试剂检测为阴性;单独NS3-1或者NS3-2片段阳性的4例标本使用2种试剂检测各检出3例阳性;2例core片段+标本A品牌试剂检测阳性,B品牌试剂检测阴性。结论 2种不同品牌试剂在检测抗-HCV阳性标本中存在片段检出能力上的存在差异,A品牌试剂在core片段和NS4片段上检出能力强。