丹参对大鼠移植肝脏再灌注损伤的防护及肝细胞凋亡的影响

目的 研究含丹参冷灌注液对移植肝缺血再灌流损伤的防护及肝细胞凋亡的影响.方法 将40只SD大鼠分为对照组、丹参组及假手术组,建立原位肝移植模型,在供肝灌注冷保存时,以4℃乳酸林格氏液为基液,丹参组灌注保存液中加丹参注射液(60ml/L),对照组不加丹参.保存5 h后置入受体.移植后6h处死大鼠取样,检测血清中AST、ALT及肝组织中氧自由基代谢相关指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平,采用TUNEL法检测移植术后肝细胞凋亡情况,光镜及透射电镜下观察移植肝脏组织形态学及超微结构的改变.结果 移植肝再灌注后丹参组AST、ALT显著低于对照组.与对照组相比,丹参组肝细胞凋亡指数明显下降(P<0.01),肝组织中MDA含量较对照组降低(P<0.01),SOD、GSH-PX活性较对照组升高(P<0.01).丹参组较对照组肝组织形态及超微结构上再灌注损害程度明显减轻.结论 丹参可抑制冷保存再灌注导致的肝细胞凋亡,对原位肝移植肝脏的缺血-再灌注损伤有保护作用.     

ICAM-1在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨ICAM-1在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用。方法 将大鼠随机分为假手术组（对照组）和全胰十二指肠移植组。于再灌注后1h、3h、6h取血测定血清淀粉酶水平，并切取胰腺标本进行组织病理学观察及ICAM-1免疫组化染色。结果 （1）移植组胰腺组织损伤随再灌注时间的延长而加重，血淀粉酶升高，与中性粒细胞浸润直接相关；而对照组胰腺组织损伤不明显．血淀粉酶不升高。（2）移植组各时段ICAM-1均表达，且随再灌注时间的延长表达逐渐增加，对照组ICAM-1不表达。结论 中性粒细胞的活化以及释放出各种蛋白酶和活性因子．是导致胰腺移植缺血再灌注损伤的直接原因。ICAM-1参与胰腺移植缺血再灌注损伤的病理过程。     

Effect of cyclooxygenase-2 inhibitor on P-selectin and intercellular adhesion molecule 1 in rats with ischemia/reperfusion injury following pancreaticoduodenal transplantation

[目的]探讨特异性环氧合酶-2抑制剂(cyclooxygenase-2 inhibitor,COX-2 inhibitor)NS398能否抑制大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤中P选择素(P-selectin,P8)及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达.[方法]采用单纯随机抽样的方法将75只SD大鼠分为3组:假手术组(15只)、移植组(15对)、移植+NS398组(15对).各组均于术后1、3、6h取血测定血清淀粉酶含量,光镜下观察胰腺病理改变,免疫组织化学法和RT-PCR法分别检测胰腺组织中ICAM-1及Ps的表达情况和基因水平的变化.[结果]假手术组各时间点胰腺组织损伤不明显,血淀粉酶不升高(P＞0.05);随再灌注时间的延长,移植组胰腺组织损伤加重,血淀粉酶较同时点假手术组明显升高(P＜0.05);但与移植组比较,移植+NS398组胰腺组织损伤及血淀粉酶升高均较轻(P＜0.05).假手术组各时点Ps和ICAM-1均不表达;移植组、移植+NS398组各时点Ps和ICAM-1均有表达,但移植+NS398组Ps和ICAM-1的表达均明显低于移植组(P＜0.05).[结论]NS398能抑制胰十二指肠移植缺血再灌注损伤大鼠的Ps及ICAM-1表达,对大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤有保护作用.     

P-选择素在大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤中的作用及P-选择素单克隆抗体的保护作用

目的探讨P-选择素在大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤中的作用及P-选择素单克隆抗体的保护作用。方法75只SD大鼠随机被分为假手术组、移植组和治疗组。移植组和治疗组均进行全胰十二指肠移植术,但治疗组于再灌注前5min静注P-选择素单克隆抗体。3组分别于再灌注后1、3、6 h（n=5）取血测定血清淀粉酶水平,并切取胰腺标本进行组织病理学观察及P-selectin免疫组化染色。结果移植组胰腺组织损伤随再灌注时间的延长而加重,血淀粉酶升高,与中性粒细胞浸润直接相关;而治疗组胰腺组织损伤不明显,血淀粉酶降低。移植组各时段P-选择素均有阳性表达,且在再灌注1h达高峰,假手术组、治疗组P-选择素不表达。结论P-选择素在大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的病理过程中起重要作用。抗P-选择素单克隆抗体对移植胰腺缺血再灌注损伤有保护作用。     

COX-2抑制剂在大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤中对P选择素和细胞间粘附分子-1的影响

目的探讨特异性环氧合酶-2抑制剂(cyclooxygenase-2 inhibitor,COX-2 inhibitor)NS398能否抑制大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤中P选择素(P-selectin,Ps)及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达。方法采用单纯随机抽样的方法将75只SD大鼠分为3组:假手术组(15只)、移植组(15对)、移植+NS398组(15对)。各组均于术后1、3、6 h取血测定血清淀粉酶含量,光镜下观察胰腺病理改变,免疫组织化学法和RT-PCR法分别检测胰腺组织中ICAM-1及Ps的表达情况和基因水平的变化。结果假手术组各时间点胰腺组织损伤不明显,血淀粉酶不升高(P>0.05);随再灌注时间的延长,移植组胰腺组织损伤加重,血淀粉酶较同时点假手术组明显升高(P<0.05);但与移植组比较,移植+NS398组胰腺组织损伤及血淀粉酶升高均较轻(P<0.05)。假手术组各时点Ps和ICAM-1均不表达;移植组、移植+NS398组各时点Ps和ICAM-1均有表达,但移植+NS398组Ps和ICAM-1的表达均明显低于移植组(P<0.05)。结论 NS398能抑制胰十二指肠移植缺血再灌注损伤大鼠的Ps及ICAM-1表达,对大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤有保护作用。     

茶多酚对大鼠肾缺血再灌注损伤保护作用实验研究

目的探讨茶多酚（Tea polyphenols TP）预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法建立大鼠肾缺血再灌注损伤（renal ischemia reperfusion injury RIRI）模型。选用健康SD大鼠42只,随机分为3组：假手术组、单纯肾缺血再灌注损伤组,茶多酚预处理组。于肾缺血再灌注（renal ischemia reperfusion RIR）开始时刻、RIR后2h、RIR后24h分别检测血清肌酐（SCr）,血清超氧化物岐化酶（SOD）、血清丙二醛（MDA）、肾组织SOD、肾组织MDA及观察肾组织的病理变化。结果茶多酚预处理组与假手术组相比较,RIRI组SCr水平升高（P〈0.05）,肾组织及血清中的SOD降低及MDA水平增加（P〈0.05）。而茶多酚预处理组SCr、血清MDA和肾组织MDA均比单纯RIRI组低（P〈0.05）,血清SOD水平及肾组织SOD水平升高（P〈0.05）。结论在肾脏缺血再灌注损伤过程中,茶多酚能起到对肾脏的保护作用。     

缺血后处理对抗肾脏缺血-再灌注大鼠的抗氧化损伤的作用

目的研究缺血后处理减轻大鼠肾脏缺血-再灌注氧化损伤的作用.方法大鼠右肾切除,左肾45min缺血再灌注24h,给予6个循环10-s/10-s再灌/停灌缺血后处理方案干预后,测定血肌酐和尿素氮水平评价肾功能;HE染色观察肾组织病理形态学变化;分光分析法测定肾组织丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;采用Real Time RT-PCR和Western blotting法分别测定SOD mRNA和蛋白表达情况.结果缺血后处理能明显减轻肾组织病理形态学损伤和降低血肌酐和尿素氮水平（P〈0.05）,并减少肾组织MDA含量（P〈0.05）,升高SOD活性、mRNA和蛋白表达（P〈0.05）.结论缺血后处理可减轻肾脏缺血-再灌注损伤,其保护作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、升高组织抗氧化物酶的活性、mRNA和蛋白表达,提高肾组织的抗氧化能力有关.     

糖尿病大鼠氧自由基变化及灯盏花素对其的影响

目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠氧自由基的影响及机制.方法:给大鼠腹腔注射链脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组、灯盏花素治疗组和对照组.用灯盏花素四周后处死大鼠,检测血清、心脏、肝脏、肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性.结果:与对照组相比,糖尿病组血清、心脏、肝脏MDA明显升高,肾脏MDA无明显变化;血清、心脏、肝脏SOD和GSH-PX明显降低,肾脏SOD和GSH-PX无明显变化.用灯盏花素四周后血清、心脏、肝脏MDA低于糖尿病组,肾脏MDA无明显变化;心脏、肝脏SOD高于糖尿病组,血清、肾脏SOD无明显变化;血清、肝脏GSH-PX高于糖尿病组,心脏、肾脏GSH-PX无明显变化.结论:糖尿病大鼠心脏、肝脏等重要脏器存在脂质过氧化损伤,灯盏花素通过提高心脏、肝脏SOD活性,降低心脏、肝脏MDA含量,减轻脂质过氧化和自由基损伤.     

依达拉奉对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨依达拉奉注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法：实验大鼠分为假手术对照组（A组）、缺血再灌注组（B组）和依达拉奉3个不同剂量治疗组（C1、C2、C3组）,观察各组大鼠肾脏缺血再灌注24h后血清及肾组织匀浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、血肌酐、血尿素氮和肾组织超微结构的改变。结果：同A组比较,B组缺血再灌注24h后,血清及肾组织匀浆MDA、血肌酐、血尿素氮显著升高（P〈0．01）,血清及肾组织匀浆SOD显著下降（P〈0．01）。使用依达拉奉治疗后,C组各组血清和肾组织匀浆MDA、血肌酐均低于B组（P〈0．01）;C组各组血清和肾组织匀浆SOD均高于B组（P〈0．01）;C组血尿素氮同B组血尿素氮之间无明显差异（P〉0．05）。透射电镜观察发现,依达拉奉治疗后肾组织超微结构的损伤明显减轻。结论：依达拉奉注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用。     

褪黑素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨褪黑素（melatonin,Mel）对大鼠缺血再灌注（IR）损伤的保护作用及机制。方法通过手术建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,将实验动物随机分为Sham组、IR组和Mel＋IR组,测IR后24 h各组大鼠血清中尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）、肾组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量变化,并观察肾脏组织结构的病理变化。结果IR后24 h大鼠血清BUN、Cr水平明显升高,组织匀浆SOD活力明显降低,MDA水平明显升高。Mel＋IR组较IR组肾脏SOD活性明显升高（P〈0.01）,MDA水平明显降低（P〈0.01）;肾功能、组织变化较IR组得到了明显改善。结论褪黑素可通过提高组织抗氧化酶活性、降低组织脂质过氧化反应发挥对肾功能及肾脏结构的保护作用。     

A retrospective monocenter review of simultaneous pancreas-kidney transplantation with bladder drainage in China

Background  Simultaneous pancreas-kidney transplantation (SPKT) frees the diabetic patient with end-stage nephropathy from dialysis and daily insulin injections. Herein, we review consecutive cases of SPKT with bladder drainage performed at our institution over an 8-year period.

Methods  The study population included 21 patients (16 males and 5 females) who underwent SPKT between September 2001 and September 2009. Seven patients had type-1 diabetes and 14 had type-2 diabetes. Nineteen patients were on dialysis at the time of transplantation. Donation after cardiac death donors were selected for SPKT. The mean human leukocyte antigen match was 2 (range 0–4). SPKT was always performed using bladder drainage and vascular anastomoses to the systemic circulation. Immunosuppressive treatment consisted of anti-lymphocyte globulin induction followed by tacrolimus, mycophenolate mofetil, and prednisone.

Results  The mean hospital stay was 45.43 days. After a mean follow-up of 39.4 months, survival rates for patient, kidney, and pancreas were 76.2%, 76.2%, and 66.7% at 1 year; 76.2%, 59.3%, and 55.6% at 5 years; and 57.1%, 39.5%, and 41.7% at 8 years, respectively. Major complications included anastomotic leaks, reflux pancreatitis, and rejection. Six patients died from septic shock (n=3), duodenal stump leak (1), cardiac arrest (1), or renal failure (1). Eight kidney grafts were lost due to acute rejection (n=2), chronic rejection (3), and death with a functioning graft (3). Pancreatic graft failure (9) was caused by thrombosis (n=1), rejection (2), duodenal stump leak (1), and death with a functioning graft (5).

Conclusions  SPKT is a valid therapeutic option for uremic diabetics although few hospitals in China can undertake SPKT.

     

Simultaneous pancreas-kidney transplantation in a single center: 10-year retrospective analysis

Background  Simultaneous pancreas-kidney transplantation (SPKT) is the best treatment option for diabetic patients with advanced chronic renal failure. The current study aimed to analyze the surgical indications, treatments and prognosis of SPKT.

Methods  We retrospectively analyzed 40 cases of SPKT performed between December 1999 and January 2010 in our center, including the survival rate, complications and the reasons of reoperation.

Results  Of all the 40 SPKT cases, the one-year survival rates of the recipients, kidney and pancreas transplant graft were 97.6%, 97.6% and 92.7%, while 97.6%, 91.1%, 92.7% at 3 years and 83.6%, 78.0%, 79.4% at 5 years, respectively. After SPKT, 10 patients need reoperation because of surgical complications (14 operations). The reoperation rate was 25%, including 2 patients (4 operations) with hematuria, 4 patients with abdominal hemorrhage, 2 patients (3 operations) with abdominal infection, 1 patient with pancreatic venous thrombosis, 1 patient with anastomotic leakage, and 1 patient with fistula.

Conclusion  Although SPKT provides a successful and effective treatment for diabetics with end-stage renal disease, how to reduce the complications of this treatment still need further effort.

     

肠内引流式胰肾联合移植

目的: 探讨肠内引流式胰肾联合移植术的术前准备与并发症的防治.方法: 对1例Ⅱ型糖尿病胰岛素依赖期合并尿毒症的患者施行肠内引流式胰肾联合移植术,术后应用他克莫司(FK506)、霉酚酸酯(MMF)、皮质激素三联免疫治疗. 结果: 患者术后第3日肌酐降至正常,术后7 d撤除外源性胰岛素,血糖6~11 mmol/L. 结论: 肠内引流式胰肾联合移植术是治疗Ⅱ型糖尿病合并尿毒症患者的有效方法. 充分的术前准备与严密的术后监测有利于手术的成功.     

胰肾联合移植手术方法探讨

目的：总结胰肾联合移植的手术经验。方法：回顾性分析1998年9月至2001年1月本院对3例晚期糖尿病患者实施的胰肾联合移植手术。结果：1例65岁患者为胰液膀胱引流，术后继发膀胱炎和低俯肠梗阻，2个月后死于肝功能衰竭，2例行胰液空肠引流，1例存活10个月，其间出现腹腔脓肿、肠梗阻等并发症；另1例存活至今，曾出现消化道出血，经治疗后痊愈。3例术后移植器官功能均良好，符种指标均在正常范围。结论：胰液空肠引流和胰液膀胱引流各有优缺点；胰液空肠引流符合消化生理，且可通过观察十二指肠造瘘管引流物的量和性质，监测供胰功能和排斥反应。     

猪胰肾联合移植动物模型的建立

目的:建立符合生理的猪胰肾联合移植的动物模型,研究胰肾联合移植的手术方法。方法:16只猪随机配对行胰肾联合移植8次,供胰、肾原位灌注后大块联合切取,将供肾动、静脉分别与受体左髂总动、静脉吻合,供胰门静脉与肠系膜上静脉(或脾静脉)吻合,含有腹腔动脉和肠系膜上动脉的腹主动脉袖片与右髂总动脉吻合,所带小段十二指肠与空肠吻合。结果:8例受体猪中除1例因术后内环境紊乱于术后当天死亡外,其余7例移植效果满意,术后移植胰、肾均即可发挥功能,受体存活超过7 d后予以处死。结论:建立门静脉回流胰液内引流式猪胰肾联合移植模型是可行的,且该术式符合生理特点,可用于临床。良好的外科技术是胰肾联合移植成功的基础。     

MRI and magnetic resonance angiography in evaluating simultaneous pancreas-kidney transplantation

目的　评价磁共振成像 (MRI)和三维 (3D)增强磁共振血管成像 (MRA)对胰肾联合移植并发症的诊断价值 ,并与穿刺活检和DSA进行对比。方法　 5位患者于术后 2 8天至 2年进行 5次MR检查 (采用GE 1 5TMR机型 ) ,成像技术包括轴位和矢状位脂肪抑制SE序列T1WI及FSE序列T2WI,3D增强MRA扫描后行轴位或矢状位脂肪抑制T1WI扫描 ,计算胰肾移植物的实质增强平均百分率 (MPPE)。 3D增强MRA采用“Smartprep”技术 ,其资料均采用最大信号强度投影 (MIP)及多平面重建 (MPR)进行处理。结果　在 5例移植胰腺中 ,MRI示 2例正常 ,1例急性排斥反应 ,1例慢性排斥反应伴 70 %纤维化和 1例迟发性胰腺炎。在 5例移植肾中 ,MRI示 4例正常 ,1例急性排斥反应伴肾梗死。MPPE能鉴别梗死和其他并发症。 3D增强MRA能显示血管并发症 ,如移植血管狭窄、闭塞、动脉瘤形成或血管连接处狭窄等 ,其结果与DSA相当。结论　MRI和 3D增强MRA的联合应用便于胰肾联合移植并发症的诊断。     

神经干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响

目的探讨神经干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响。方法分离培养新生大鼠海马神经干细胞,BrdU进行标记。采用大脑中动脉阻塞法复制脑缺血模型,动物于造模3d后侧脑室注射标记细胞,分别于1、7、14和28d处死动物,观察动物神经功能和移植细胞存活情况。结果神经干细胞能移行至缺血部位并存活,移植后缺血大鼠神经功能明显得到恢复,在14、28d与模型组差异有显著性。结论神经干细胞移植能促进局灶性脑缺血大鼠神经功能的恢复,是中风治疗的有效方法。     

"两袖套法"大鼠原位肝移植模型的技术改进

目的探讨建立稳定的大鼠肝脏移植模型。方法采用改进的“二套管法”对190只大鼠进行原位肝脏移植手术。结果切取供肝的时间平均为32min，修肝时间为13．5min，无肝期为17min，手术成功率达到91.7％。结论改进后的肝脏移植模型操作相对简单易学，可重复性好，模型稳定，可作为肝脏移植实验研究的有效手段。     

嗅鞘细胞移植联合甲基维生素B12修复髓鞘组织的研究

目的研究嗅鞘细胞（OECs）的培养及其对实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗功用。方法用新生wistar大鼠嗅球培养OEC，移植组将OECs悬液注入实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠的侧脑室；联合移植组在侧脑室注入OECs的基础上，腹腔注入甲基维生素B12；假手术组按以上方法注入等量生理盐水；观察两组大鼠运动功能评分、组织病理学变化。结果运动功能评分：联合移植组优于OECs移植组，以上两组均显著优于假手术组，差别有显著意义（P〈0．05）；组织病理切观察：联合移植组髓鞘修复程度优于OECs移植组，以上两组髓鞘修复程度均显著优于假手术组。结论OECs移植可以促进自身免疫性脑脊髓炎的髓鞘修复，改善运动功能，OECs与甲基维生素B12对于髓鞘的修复有较好的协同作用。     

小体积肝移植后再生肝脏中受体来源骨髓干细胞跨分化的实验研究

目的研究小体积肝移植后受体来源的造血干细胞跨分化现象及影响因素。方法采用性别错配的大鼠不同体积肝脏移植，动态观察移植肝体积的大小和缺血损伤对术后骨髓干细胞向移植物内肝细胞跨分化促肝脏再生过程的影响。结果全肝移植组Y-染色体肝细胞阳性率为0．66％，而60％和30％肝移植组Y-染色体肝细胞阳性率分别增加到1．89％和3．78％，3组间差异均有显著性（P〈0、05）。延长冷缺血时间使得肝内Y-染色体阳性肝细胞率减少到0、73％，与1h缺血时间组差异有显著性（P〈0．05）。结论减体肝移植能增强HSCs在肝脏内向肝细胞跨分化。而延长冷缺血时间明显降低HSCs在肝内的跨分化。