支气管哮喘患儿诱导痰液中白细胞介素-4及γ-干扰素水平的研究

目的研究支气管哮喘患儿诱导痰液中白细胞介素（IL）-4及γ-干扰素（IFN-γ）水平变化，探讨其在哮喘发病机制中的作用。方法2004年2月～2006年6月儿科住院哮喘患儿36例，用ELISA法测定诱导痰中急性期及缓解期IL-4及IFN-γ水平。结果哮喘患儿诱导痰IL-4水平急性期明显高于缓解期和正常对照组（P〈0．01）；IFN-γ水平急性期低于缓解期及对照组（P〈0．05）；IL-4／IFN-γ比值急性期高于缓解期及对照组（P〈0．05）。急性期患儿诱导痰IL-4水平重症组明显高于轻症组（P〈0．01），IFN-γ水平重症组明显低于轻症组（P〈0．05），IL-4／IFN-γ比值重症组高于轻症组（P〈0．05）。结论哮喘患儿存在Thl／Th2功能紊乱，IL-4及IFN-γ参与哮喘患儿的免疫状态改变，在哮喘发病机制中发挥一定作用。     

哮喘综合治疗对哮喘儿童Th1／Th2免疫状态的影响

目的本研究拟测定健康儿童及支气管哮喘儿童外周血单个核细胞（PBMC）分泌白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）、γ干扰素（IFN-γ）的水平以及哮喘综合治疗后的变化，以观察哮喘和健康儿童PBMC中Th1／Th2的平衡状态及哮喘综合治疗对其的影响。方法支气管哮喘患儿64例（哮喘组），哮喘组中又分未正规治疗组26例，综合治疗组38例。对照组为32例健康儿童，采静脉血3ml，分离PBMC，体外经植物血凝素（PHA—P）刺激，细胞培养48h，用ELISA法检测培养上清液中自细胞介素-4、白细胞介素-10和γ干扰素含量。结果（1）哮喘未正规治疗患儿外周血单个核细胞分泌细胞因子IL-4、IL-10水平高于正常对照组，差异有显著性（P〈0．01～0．05），而IFN-γ水平则较正常对照组低，两者差异有显著性（P〈0．05）。（2）综合治疗8～12周后，综合治疗组较未正规治疗组PBMC分泌IL-4、IL-10水平下降、IFN-γ水平升高，与未正规治疗组比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论哮喘未正规治疗患儿PBMC中Th2类因子（IL-4、IL-10）强势表达。以吸入糖皮质激素为主的综合治疗可显著下调IL-4、IL-10水平，上调IFN-γ水平，从而减轻气道炎症，有效地防止哮喘的发作。     

IL-12对小鼠哮喘模型Th亚群和气道炎症的影响

目的观察腹腔注射IL-12对哮喘小鼠Th亚群的调节和气道炎症的影响,并寻找更有效的干预阶段。方法将36只BALB/c小鼠分为4组,每组9只,分别为哮喘组、IL-12干预A组、IL-12干预B组及正常对照组。采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法制成哮喘模型,正常对照组小鼠同时以等量的生理盐水腹腔注射加雾化吸入。干预A组在致敏和激发阶段均给予IL-12腹腔注射进行干预,干预B组仅在激发阶段给予IL-12腹腔注射进行干预。最后1次激发结束后24h处死所有小鼠,取左肺作病理切片(HE染色),右肺提取总RNA并逆转录成cDNA后,应用半定量RT-PCR法检测肺组织内IFN-γ基因mRNA的转录表达情况,实时定量PCR法检测肺组织内IL-4基因mRNA的转录表达情况。结果与正常对照组相比,哮喘组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达显著减少(P<0.05),IL-4mRNA表达显著增多(P<0.05);与哮喘组相比,IL-12干预A、B组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达均显著增多(P均<0.05),IL-4mRNA表达均显著减少(P均<0.05)。干预A组与干预B组相比,IL-4mRNA的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),而IFN-γmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-12能有效纠正哮喘小鼠失衡的Th亚群及控制气道炎症;致敏、激发阶段同时干预与仅激发阶段的干预均能有效的抑制Th2型免疫反应和气道炎症改变,前者能更有效的降低IL-4mRNA的表达水平。     

黄芪对哮喘大鼠模型支气管肺泡灌洗液白细胞介素-4、-12表达的影响

目的研究哮喘大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞介素-4（IL-4）和IL—12水平变化及黄芪对其影响。方法雄性SD大鼠30只随机分为正常对照组、哮喘组和黄芪组（AM组）。以卵蛋白（OVA）致敏激发法制备大鼠哮喘模型．对PALF进行嗜酸性粒细胞（EOS）计数和分类计数；应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定BALF中IL-4、-12水平。结果1．哮喘组BALF细胞总数、EOS绝对值和EOS占细胞总数百分比（EOS％）均高于对照组（P均〈0．01），AM组上述指标均低于哮喘组（P均〈0．01）；2．BALF中IL-4水平哮喘组显著高于对照组（P〈0．01），AM组显著低于哮喘组（P〈0．01）；3．IL-12水平哮喘组显著低于对照组（P〈0．01），AM组最著高于哮喘组（P〈0．01）。结论IL-4高表达、IL-12低表达参与哮喘的病理生理过程；黄芪下调IL-4、上调IL-12表达水平，可能为其抑制哮喘呼吸道炎症的重要作用机制之一。     

烟碱样乙酰胆碱受体α7在支气管哮喘患儿CD4+T淋巴细胞上的表达

目的探讨哮喘患儿血CD4＋T淋巴细胞表达烟碱样乙酰胆碱受体α7（nAChRα7）与相应的细胞培养液IL-4、干扰素-γ（IFN-γ）水平的关系,分析nAChRα7在哮喘发病过程中的临床意义。方法哮喘患儿30例（哮喘组）与健康儿童20例（健康对照组）,分别抽取静脉血8mL,分离外周血淋巴细胞,并分别加入100μmol/L烟碱、1.0mg/Lα-银环蛇毒（α-BTX）,另设空白对照,恒温孵育24h后提取其淋巴细胞,并收取培养液置-20℃冰箱保存。用三色流式细胞仪检测各组淋巴细胞CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7表达。ELISA法检测其淋巴细胞培养液中IFN-γ、IL-4水平。结果哮喘组患儿血CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7表达较健康对照组儿童明显增高（P〈0.05）。烟碱刺激24h后哮喘组、健康对照组外周血CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7的表达均较空白对照明显增加（Pa〈0.01）;且烟碱刺激24h后哮喘组较健康对照组表达显著增加（P〈0.05）。α-BTX刺激24h后外周血CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7表达降低,但无统计学意义（Pa〉0.05）。哮喘组培养液中IL-4水平较健康对照组增加,IFN-γ水平较健康对照组减低。烟碱刺激24h后IL-4水平较空白对照增高（P〈0.01）,IFN-γ水平较空白对照明显减低（P〈0.05）。α-BTX刺激24h后IL-4、IFN-γ水平均无明显变化（Pa〉0.05）。外周血CD4＋T淋巴细胞nAChRα7表达与淋巴细胞培养液IL-4水平呈正相关（r=0.517P〈0.05）,与IFN-γ水平呈负相关（r=-0.288P〈0.05）。结论哮喘患儿血CD4＋T淋巴细胞表面的nAChRα7表达增加,nAChRα7表达影响培养液IL-4、IFN-γ水平和Th1/Th2平衡,是影响哮喘的发病的重要因子。     

支气管哮喘大鼠血管内皮生长因子与γ-干扰素、白细胞介素-4变化的相关性及布地奈德干预对其的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、IFN-γ、IL-4在急性哮喘大鼠模型中的表达变化及其相关性及布地奈德混悬液干预后的变化.方法清洁级雄性SD大鼠36只随机分为对照组、哮喘组和布地奈德干预组.实验第1天和第8天,哮喘组和布地奈德干预组大鼠腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)/氢氧化铝混合液致敏2次,第15天开始给予大鼠喷雾(10 g/L OVA,30 min/d),连续激发2周,制备哮喘模型.对照组致敏和激发均以9 g/L盐水替代OVA.布地奈德干预组于每次抗原激发前0.5 h予布地奈德雾化吸入,12 h后相同剂量再雾化1次,共2周.各组大鼠末次激发24 h后处死,收集血液与支气管肺泡灌洗液(BALF).应用ELISA法测定其血清和BALF中IL-4、IFN-γ和VEGF水平.结果哮喘组和布地奈德干预组大鼠BALF和血清IL-4水平均显著高于对照组(P<0.01,0.05);布地奈德干预组BALF和血清IL-4水平均显著低于哮喘组(Pa<0.01).哮喘组BALF和血清IFN-γ水平均显著低于对照组和布地奈德干预组(Pa<0.01).哮喘组BALF和血清VEGF水平均显著高于对照组和布地奈德干预组(Pa<0.01);布地奈德干预组血清和BALF中VEGF水平与对照组比较均无显著差异.BALF中IL-4 与VEGF水平呈显著正相关(r=0.818P<0.01),IFN-γ水平与VEGF水平呈显著负相关(r=-0.646P<0.01);血清IL-4水平与VEGF水平呈显著正相关(r=0.690P<0.01),IFN-γ水平与VEGF水平呈显著负相关(r=-0.479P<0.01).结论哮喘急性发作时存在Th1/ Th2 失衡,且Th1/ Th2失衡与VEGF的表达存在明显的相关性,布地奈德雾化吸入可调节Th1/Th2的平衡及抑制VEGF的表达.     

新生期卡介苗接种对实验性哮喘小鼠肺Th17细胞和IL-17的影响

目的：通过实验性哮喘小鼠模型探讨新生期卡介苗（bacillus Calmette-Guérin,BCG）接种对肺Th17细胞和IL-17的影响。方法：新生期小鼠分3组：对照组,卵白蛋白组（OVA）,BCG干预组（BCG/OVA）。除对照组外,其余两组均给予OVA致敏和激发。观察支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中细胞总数及分类,ELISA法检测BALF中IFN-γ、IL-17含量,流式细胞术检测肺Th17细胞。结果：两哮喘组BALF中细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞比例均明显高于对照组,而BCG/OVA组上述细胞均显著低于OVA组。两哮喘组BALF中IFN-γ水平明显低于对照组,IL-17显著高于对照组,同时BCG/OVA组IL-17水平明显低于OVA组。流式细胞术显示,两哮喘组Th17细胞比例均明显高于对照组,但两哮喘组间差异无统计学意义。结论：Th17细胞/IL-17在实验性哮喘小鼠发病中起作用,新生期BCG接种可抑制气道IL-17的产生,其抑制的IL-17可能并非主要由Th17细胞产生,而来源于其他细胞。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：650-653］     

卡介苗多糖核酸与减毒活卡介苗治疗哮喘患儿疗效比较及治疗前后细胞因子的变化

目的探讨卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）与减毒活卡介苗治疗儿童哮喘临床疗效及其对哮喘患儿TH1／TF12调节的差异。方法急性发作期哮喘患儿60例随机分A、B、C3组，每组20例。A组予全球哮喘防治创议（GINA方案）＋BCG-PSN0．5mg／次，肌注，1次偶日，共36次；B组予GINA方案＋减毒活卡介苗0．1mL，皮内注射，仅1次；C组单纯GINA方案治疗。酶联法检测治疗前后血清IgE及外周血单个核细胞（PBMC）诱生的IL-4、IL-5及IFN-γ。结果1．疗效：A组优于B组，B组优于C组（P均〈0．05）。2．治疗组治疗后IFN-γ均高于治疗前，IL-4、IL-5、IgE均低于治疗前。对于调整IL-5，A组优于B组和C组（P〈0．05，0．01）；对于上调IFN-γ及下调IL-4、IgE，A与B组比较无显著差异（P〉0．05）。结论1．BCG—PSN的疗效优于减毒活卡介苗。2．减毒活卡介苗一次性小剂量接种对哮喘儿IL-4、IFN-γ、IgE失衡的调节与BCG-PSN多次肌注效果相当，对IL-5失衡的调节不及BCG—PSN。     

新生儿缺氧缺血性脑病与T辅助细胞亚群功能失衡研究

目的研究缺氧缺血性脑病（HIE）新生儿T辅助细胞（Th）亚群功能失衡的特点，探讨，Th1和Th2类细胞因子与HIE严重程度之间的关系。方法酶联免疫吸附试验方法，对35例HIE患儿和15例健康对照者外周血单个核细胞（PBMO）经植物血凝素（PHA）刺激后，对培养上清液中Th1和Th2类细胞因子含量进行测定。结果经（PHA）刺激后，HIE组，Th1产生IFN-γ、IL-2水平（中位数）明显低于正常对照组（IFN-γ：106pg／ml比427pg／ml，P〈0．01。IL-2：527pg／ml比1218pg／ml，P〈0．01），而Th2产生IL-4、IL-6水平（中位数）则明显高于正常对照组（IL-4：248pg／ml vs．112pg／ml，P〈0．05。IL-6：643pg／mlVS．86pg／ml，P〈0．01）。相关分析发现：IL-6水平与HIE严重程度呈显著正相关，r=0．474，P〈0．01；IL-2、IFN-γ水平与HIE严重程度呈负相关，r分别为-0．352和-0．357，P值均〈0．05；IL-4水平与HIE严重程度无相关性，r=0．277，P〉0．05。结论HIE新生儿Th1类细胞因子水平明显降低，Th2类细胞因子水平明显增高，导致T辅助细胞亚群功能失衡，此在HIE的发病机制中起重要作用。Th类细胞因子水平与HIE严重程度相关。     

香菇多糖对哮喘大鼠模型气管炎性反应及辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2免疫应答失衡的调节

目的 研究哮喘大鼠模型辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫应答失衡及香菇多糖(LNT)对哮喘气管炎性反应及Th1/Th2失衡影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分为健康对照组、哮喘组和LNT组.以卵清清蛋白(OVA) 致敏激发法复制大鼠哮喘模型.对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(Eos)计数和分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich ELISA)法测定BALF中IL-4和γ干扰素(IFN-γ)水平变化.结果 1.哮喘组BALF中Eos绝对值和Eos占细胞总数百分比(Eos%)均高于对照组(t=21.94,12.81 Pa＜0.01),LNT组上述指标均低于哮喘组(t=17.26,8.55 Pa＜0.01);2.BALF中IL-4水平哮喘组显著高于对照组(t=8.04 P＜0.01),LNT组显著低于哮喘组(t=6.25 P＜0.01);而IFN-γ水平哮喘组显著低于对照组(t=10.82 P＜0.01),LNT组显著高于哮喘组(t=11.63 P＜0.01).结论 LNT下调IL-4表达水平,上调IFN-γ水平,可能为其抑制哮喘呼吸道炎性反应的重要作用机制之一.     

Th1/Th2、Th17/Treg平衡与幼年特发性关节炎

CD40+T细胞在免疫防御中起了核心的作用.根据细胞的功能,迄今为止已经证明至少存在4种不同的CD4+T细胞亚群--Th1、Th2、Th17和调节性T细胞(Treg).幼年特发性关节炎(JIA)是常见的以慢性非化脓性关节炎为特征的自身免疫性疾病,主要由免疫网络失调引起,其中Th1/Th2细胞平衡、Th17/Treg细胞平衡发挥了重要作用.文章就Th1/Th2细胞、Th17/Treg细胞的分化、调节及Th1/Th2细胞失衡、Th17/Treg细胞失衡参与JIA发病的机制作一综述.     

毛细支气管炎患儿Th1/Th2的改变

目的了解毛细支气管炎(毛支)患儿淋巴细胞亚群的改变及Th1/Th2平衡状况。方法对2003～2005年确诊为急性期毛细支气管炎的住院患儿34例,采用流式细胞仪对其外周血淋巴细胞亚群进行检测。其中呼吸道合胞病毒(RSV)性毛支23例,非RSV毛细支11例,均与22例健康对照组比较。结果毛细支气管炎组CD3 及CD4 细胞百分率均较对照组高(P<0.05,P<0.01),但CD4/CD8比值毛支组1.95%±0.64%与对照组1.87%±1.18%比较统计学无差异(P>0.05)。Th1/Th2在毛支组明显高于对照组,分别为6.06%±4.15%及2.90%±1.45%,有显著差异(Z=3.121Pa<0.01)。结论毛细支气管炎患儿细胞免疫功能增强,并呈现Th1应答优势。     

特发性血小板减少性紫癜患儿Th亚群细胞因子的检测

目的探讨Th亚群细胞因子在儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的变化及作用。方法采用BioPlex系统和悬浮阵列技术通过荧光编码检测43例ITP患儿血清中的Th1型细胞因子TNFα、IFNγ、IL2、GMCSF和Th2相关细胞因子IL4、IL5、IL6、IL10的变化,并与20例正常儿童作对照。结果与正常健康儿童相比,ITP患儿Th1型细胞因子显著升高(P<0.01),而Th2型细胞因子显著降低(P<0.01)。结论儿童ITP发病中存在异常的淋巴细胞极化状态,是一种Th1优势的疾病。     

Das Th1/Th2-Paradigma bei allergischen Asthma bronchiale

The incidence of allergic asthma, which is characterized by chronic airway inflammation and airway hyperreactivity, has increased dramatically in the last two decades and is present in as many as 10% of individuals in industrialized nations. Allergic asthma is caused by an inappropriate immune response to common aero-allergens in genetically predisposed individuals. The central role in this immune response is played by CD4⁺ T helper(Th)2 cells. Through the release of cytokines like interleukin (IL)-4, IL-13, and IL-5, Th2 cells orchestrate the recruitment and activation of mast cells, eosinophils and basophils and induce the production of IgE by B cells. While Th2 cells promote airway inflammation in asthma, interferon (IFN)-γ producing Th1 cells are proposed to protect against allergic disease by dampening the activity of Th2 effector cells. Accordingly, new therapeutic strategies aim at inhibition of Th2 cells and promotion of Th1 cells. Recent studies demonstrated that Th1 cells are not always able to inhibit Th2 cell-mediated disease and can even be unexpectedly harmful. These studies indicate that the Th1/Th2 paradigm is more complex than initially appreciated and that suppression of allergic inflammation and Th2 activity may depend – at least in part – on cells other than Th1 lymphocytes.     

Das Th1/Th2-Paradigma bei allergischen Asthma bronchiale

Die Inzidenz des allergischen Asthma bronchiale hat in den letzten 2 Jahrzehnten besonders in den westlichen Nationen sehr stark zugenommen. Aufgrund dieser Entwicklung ist ein besseres Verst?ndnis der pathophysiologischen Zusammenh?nge für die Konzeption innovativer, m?glichst kausaler Therapiekonzepte von gro?er Bedeutung.     

Th17细胞研究进展

Th17细胞是一类新型CD4＋T细胞,它与Th1、Th2、调节性T细胞一起构成了CD4＋T细胞的4个主要亚群。Th17细胞的分化过程需要IL-6和转化生长因子-β、转录因子孤独核受体γt及信号传导和转录激活子3等参与,这一分化过程在细胞和分子水平都受到精细的调节。Th17细胞分泌IL-17、IL-22、IL-6等多种细胞因子,在自身免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥中发挥着重要作用。因此,Th17细胞及相关细胞因子可能为此类疾病的治疗提供新的靶点和途径。     

Th17细胞研究进展

Th17细胞是一类新型CD4+T细胞,它与Th1、Th2、调节性T细胞一起构成了CD4+T细胞的4个主要亚群.Th17细胞的分化过程需要IL-6和转化生长因子-β、转录因子孤独核受体γt及信号传导和转录激活子3等参与,这一分化过程在细胞和分子水平都受到精细的调节.Th17细胞分泌IL-17、IL-22、IL-6等多种细...     

小儿外科脓毒症患儿Th1/Th2细胞免疫应答状况

目的 探讨外科治疗中严重腹腔感染脓毒症患儿Th1/Th2细胞免疫应答的变化规律.方法 选择本院收治的30例严重腹腔感染患儿为脓毒症组.同期门诊查体的30例健康儿童为健康对照组.脓毒症组(于术前和术后第1、5天)及健康对照组抽取空腹静脉血2 mL,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组儿童血清IFN-γ和IL-4水平,计算IFN-γ/IL-4比值.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 脓毒症组血清IFN-γ水平术前与健康对照组、术后第5天与术前、术后第5天与健康对照组比较,均无显著性差异(Pa>0.05);术后第1天与术前比较下降(t=6.083 P<0.01).脓毒症组血清IL-4水平术前与健康对照组、术后第1天比较均升高(t=11.65,1.996 Pa<0.01),与术后第5天比较下降(t=8.275 P<0.01),术后第5天与健康对照组比较仍高,未恢复至正常水平(t=3.453 P<0.01).脓毒症组IFN-γ/IL-4比值术前与健康对照组、术后第1天比较均明显降低(t=10.98,3.072 Pa<0.05),术后第5天与术前比较明显升高(t=6.417 P<0.01),但与健康对照组比较末恢复至正常水平(t=3.482 P<0.01).结论 严重腹腔感染脓毒症患儿Th1细胞应答减弱,Th2细胞应答增强,存在免疫抑制状态,手术打击加重Th1细胞向Th2细胞偏移,经手术干预、合理治疗,免疫功能可逐渐恢复.     

儿童自身免疫性甲状腺疾病Th1/Th2细胞极化偏移的研究

目的 从T淋巴细胞分化的多环节观察儿童自身免疫性甲状腺疾病Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(HT)Th1/Th2类细胞的极化偏移方向,探讨其免疫学发病机制.方法 采用ELISA和RT-PCR法同步检测GD(46例)和HT(64例)患儿的转录因子、细胞因子以及游离CD30(sCD30)水平,另设24例健康体检儿为对照组.结果 GD、HT患儿外周血单个核细胞(PBMC)转录因子GATA-3的表达较正常组明显降低,T-bet、T-bet/GATA-3比值明显升高.GD、HT患儿PBMC产生IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值较正常组明显增加,而IL-4水平明显减少.GD、HT患儿sCD30水平高于正常对照组.结论 GD及HT患儿的前体T细胞具有向Th1分化发育的趋向.