p53 cDNA突变和突变型p53蛋白表达与大肠癌预后的关系

目的 探讨p53基因cDNA突变和突变型p53基因蛋白表达与大肠腺癌预后的关系。方法 RT-PCR-SSCP检测大肠腺癌组织p53基因cDNA突变,PAb240单抗免疫组化检测大肠腺癌组织突变型p53基因蛋白表达,比较两者与大肠腺癌预后的关系。结果 100例大肠腺癌中,p53基因cDNA突变51例（51%）,突变型p53基因蛋白高表达76例（76%）,两者同步阳性49例;p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白高表达相关,有显著统计学差异（P<0.01）;与Dukes分期无关（P>0.05）。从Kaplan-Meier 生存曲线和log-rank 分析结果看,突变型p53基因蛋白高表达与大肠腺癌预后无显著统计学差异（P=0.72）;p53基因cDNA突变与大肠腺癌预后有关,统计学差异明显 （P=0.03）。结论 p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白高表达密切相关。高频率p53基因cDNA突变直接反映大肠腺癌预后差。突变型p53基因高表达则可能受多因素影响,不能直接反映大肠腺癌预后。     

p53和MDM2在胃腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨p53和MDM2在胃腺癌组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学染色方法检测94例胃腺癌组织中p53和MDM2的表达水平,分析两者表达的相关性.结果 p53(突变型)的检出率为36％(34/94),在这些可检出突变型p53蛋白表达的胃腺癌原发灶组织中并非所有癌细胞均为p53阳性表达,其阳性率差异较大,从10％ ～ 99％,均数约30％;在62.8％ (59/94)的胃腺癌原发灶组织中可检测到MDM2蛋白表达,定位于胞质和胞核,呈异质性表达;MDM2蛋白表达水平在p53野生型胃腺癌组织(免疫组织化学染色阴性)中高于p53突变型胃腺癌组织(免疫组织化学染色阳性).结论 在胃腺癌组织中,p53和MDM2呈异质性表达;在部分胃腺癌细胞中,高水平MDM2蛋白表达是限制野生型p53蛋白积聚活化的主要原因之一.     

食管鳞状细胞癌p53基因突变研究

目的 为进一步阐明p53基因突变和p53蛋白过度表达的关系及两者与食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）发生发展的相关性。方法采用激光显微切割，PCR扩增，单链构象多态性分析，直接测序和免疫组织化学方法，检测56例ESCCp53基因突变和p53蛋白过度表达情况。结果 总的突变率为77％（43／56），主要形式为点突变64％，而最好发生突变的部位是外显子5，占51％。最多的碱基转化形式是G→CA：T或C：G→T：A，占55％。p53蛋白过表达阳性为46％（26／56），其中23例含有p53基因突变，两者符合率高达95％（53／56）。结论 p53基因的缺失突变及p53蛋白过表达与食管鳞状细胞癌的发生发展密切相关。p53蛋白过表达在很大程度上可以反映p53基因的功能状态。     

贲门癌与食管癌组织p53蛋白表达和基因突变分析

目的：探讨河南食管癌高发区人群贲门癌和食管癌组织p53基因突变和蛋白聚集的变化规律，进一步深人了解食管癌癌变机制。方法：采用PCR—SSCP、DNA测序分析和免疫组织化学染色方法对19例贲门腺癌手术切除标本和50例食管鳞癌手术切除标本的p53基因突变和蛋白聚集的变化进行检测。结果：①食管鳞癌和贲门腺癌组织中p53蛋白过度表达的阳性率分别为70％和68％，p53基因突变率分别为58％和53％，p53基因突变和蛋白过度表达的一致率分别为64％和42％；②食管鳞癌组织p53基因突变在第5—8外显子中均有分布，而在贲门腺癌组织集中分布于第5和第7外显子；③对p53基因突变谱分析显示，在食管鳞癌和贲门腺癌组织中，G：C→A：T是最常见的碱基突变类型(48％和30％)，碱基的插入和缺失在贲门腺癌中也较为常见。结论：p53基因在食管鳞癌和贲门腺癌组织中的相似变化提示林州地区贲门和食管癌可能存在共同的致病危险因素；对p53蛋白检测能从一定程度上反映P53基因的变化特点。     

甲状腺癌p53抑癌基因蛋白表达的研究

目的：观察不同类型甲状腺癌中p53抑癌基因蛋白的表达。方法：应用LSAB免疫组织化学技术对113例不同类型甲状腺癌石蜡组织中p53蛋白的表达进行研究。结果：10例低分化甲状腺癌中有3例（30％）,9例未分化甲状腺癌中有6例（67％）呈现p53蛋白染色阳性,而乳头状癌（除2例伴有低分化区域呈现散在阳性外）,滤泡型癌中均未见p53蛋白的表达。组织学分析表明,肿瘤分化较低的细胞区p53蛋白阳性染色的范围和强度明显高于分化相对高的区域。结论：p53基因突变是甲状腺癌发生,发展中的晚期遗传事件,P53蛋白的表达与甲状腺癌的进展,浸润和去分化有关,检测该基因蛋白可以作为判断甲状腺癌生物学行为,估价预后的有效参考指标。     

P53蛋白表达水平与大肠腺癌病理及预后的探讨

应用免疫组织化学方法对40例大肠腺癌P53蛋白表达进行检查，探讨P53蛋白表达水平与大肠腺癌各病理因素及预后的关系。发现50％（20／40）大肠腺癌组织中存在P53蛋白表达，其表达程度与大肠腺癌各项病理因素无关；P53蛋白表达阳性患者5年生存率为25％（5／20），明显低于P53蛋白表达阴性组的60％（12／20），P＜0。05。结果提示：P53免疫组化检测可以作为判断大肠腺癌预后的指标。     

胃癌p53蛋白表达与临床病理因素及雌孕激素受体表达的关系

应用免疫组织化学S－P法检测63例胃癌组织中抑癌基因p53蛋白表达，分析其与雌孕激素受体表达及临床病理因素间的关系．结果显示，胃癌中p53蛋白阳性率为36．5％（23／63），其中呈明显阳性（＋＋～＋＋＋）者为19．1％（12／63）。在各组织学类型癌中，高分化腺癌（包括乳头状腺癌）阳性率最低，为24％（6／25），印戒细胞癌阳性率最高达75％（6／8）。p53蛋白表达与胃癌浸润深度及淋巴结转移状态呈正相关，但与病人性别、年龄、肿瘤部位、大小及大体类型等因素无关。p53蛋白表达阳性者，雌激素受体及孕激素受体阳性率较低．呈负相关趋势，但无统计学意义。     

p53蛋白在肺癌中的表达及其意义

应用免疫组织化学S～P法检测50例肺癌组织中p53蛋白表达情况，结果发现：50例肺癌中，p53总阳性率为46％（23／50），其中肺鳞癌为44％（11／25），肺腺癌为46．67％（9／21），未分化癌为75％（3／4），其阳性表达与患者局部淋巴结有无癌转移有显著相关性，与肺癌的组织学类型及鳞癌的分化程度无关。在肺腺癌中p53表达越高，预后越差。未分化癌中p53强阳性均伴有局部淋巴结的转移。     

PCNA、p53蛋白在喉癌组织的表达及临床意义

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）、抑癌基因的突变蛋白（p53）在喉癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化S－P法,对58例喉癌和10例喉正常组织检测,用有关统计学方法结合临床及随访资料进行分析。结果：58例例喉癌中,PCNA、p53蛋白阳性率分别为72．41％（41／58）和51．72％（30／58）。正常组织染色阴性。喉癌组织分化、临床分期、有无淋巴结转移和复发与PCNA、p53蛋白阳性表达率有关。结论：PCNA、p53蛋白的过度表达与喉癌预后有关。     

大肠腺瘤及癌变组织中p53基因突变与bcl-2、PCNA表达关系的研究

研究p53、bcl－2及PCNA在大肠癌发生发展中的意义。应用聚合酶链反应一单链构象多态性分析检测40例腺瘤和80例腺癌中p53基因第5－8外显子突变,同时应用免疫组化SP法分别检测大肠正常粘膜,增生性息肉,腺瘤以及腺癌中p53、bcl－2、PCNA的蛋白表达。结果中17．5％（7／40）腺瘤和46．25％（37／80）腺癌可见p53基因突变;腺瘤、腺瘤癌变及腺癌中p53蛋白表达率分别为22．5％、70．6％和58．8％;正常粘膜和增生性息肉中未见p53表达,p53蛋白表达与其基因突变相关（rs=0．54）,但和临床病理因素及预后无关（P＞0．05）;bcl-2在所有正常粘膜和增生性息肉基底部上皮细胞、77．9％腺瘤、64．7％腺瘤癌变和55％腺癌可见表达,在腺瘤和腺癌中bcl－2表达差异显著（P＜0．05）,高分化腺癌bcl－2表达率明显高于差分化腺癌（P＜0．01）。应用Spearman相关分析,bcl－2与P53表达在腺瘤及腺癌组中呈负相关。PCNA表达率在大肠腺瘤一癌序列中逐渐增高,它与腺瘤p53表达和木典型增生程度、腺癌组织分化和淋巴结转移相关（P＜0．05）,但与p53、bcl－2表达及其它因素无关。p53基因改变主要涉及到良性腺瘤和腺癌的转变过程,p53基因突变是参与和影响p53蛋白表达和生物学功能的主要因素。bcl－2表达是大肠癌发生中的早期     

突变型P53蛋白在128例HCC中的表达

研究Ｐ５３蛋白在肿瘤组织中的表达。选择４种抗突变Ｐ５３蛋白抗体，应用免疫金银染色法检测１２８例人肝细胞癌及癌旁组织的表达。Ｐ５３阳性表达总体阳性率为７４．２％，其中ＰＡｂ１８０１和ＣＭ－１阳性率最高，分别为６９．５３％和６７．１８％，ＤＯ－７为３９．８％，ＰＡ２４０最低，为１９．５３。４６例蛋白的阳笥表达与组织学分级，肿瘤预后复发及肿瘤大小关系密切，但与组织学类型无相关性。     

PCR-SSCP检测胃癌中p53基因突变

目的　研究p5 3基因表达及突变在胃癌发生中的地位。方法　采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (S -P)法与聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)分析技术分别检测胃癌p5 3基因表达及突变。结果　p5 3蛋白表达在正常胃粘膜均为阴性 (0 / 2 0 ) ,在不典型增生为 18% (11/ 6 0 ) ,其中轻度全为阴性(0 / 2 0 ) ,中度 2 5 % (5 / 2 0 ) ,重度 30 % (6 / 2 0 ) ,明显低于胃癌的 5 8% (70 / 12 0 ) (P <0 .0 5 ) ,而中度、重度不典型增生高于正常胃粘膜及轻度不典型增生 (P <0 .0 5 )。胃癌中p5 3基因第 5外显子突变率高达 2 5 % (5 / 2 0 ) ,显著高于无突变的正常胃粘膜 0 % (0 / 2 0 ) (P <0 .0 5 )。结论　p5 3基因突变可出现于中度、重度不典型增生 ,是胃癌发生的一个早期事件。在胃癌发生中p5 3基因第 5外显子突变频繁     

p53基因在肺癌患者中的突变

目的　探讨肺癌组织中p5 3基因蛋白表达和肺癌患者血白细胞p5 3基因突变及其相互关系。方法　应用免疫组织化学S -P法检测肺癌组织中p5 3基因蛋白表达及聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR -SSCP)检测其中肺癌患者血白细胞p5 3基因突变。结果　p5 3基因蛋白在 5 1例肺癌组织中的阳性表达率为 5 9% ,其中p5 3蛋白在鳞癌、腺鳞癌和腺癌的表达差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但有淋巴结转移者 ( 77% )显著高于无淋巴结转移者 ( 4 5 % ,P <0 0 5 ) ,p5 3蛋白在肺癌癌旁正常肺组织及白细胞中均为阴性 ;5 1例肺癌患者中 2 8例血白细胞DNA均未见p5 3基因突变。结论　p5 3基因在肺癌患者血白细胞DNA未见突变 ,p5 3基因蛋白阳性的肺癌患者更易发生淋巴结转移     

大肠癌p53基因突变及p16基因缺失检测及临床意义

目的：探讨本地区散发性大肠癌p53、p16蛋白表达、临床病理因素的关系。方法：SSCP－PCR检测p53基因突变、p16基因缺失,免疫组化检测p53,p16蛋白表达,结果p16基因缺失率48％（19／40例）,未见突变,p16蛋白缺失率为55％（22／40）。p53基因突变率30％,p53蛋白阳性表达率为68％（27／40例）。组织学分组Ⅱ,Ⅲ级p16基因缺失率明显高于Ⅰ级（P＜0．01）,临床分期D期p53估变明显高于临床分期B,C期（P＜0．05）,结论p16基因缺失、53基因突变与大肠癌的发生、发展有关。     

胃癌组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的比较胃癌和癌旁组织中p53基因突变及p53蛋白的表达与淋巴结转移和预后的关系。方法采用PCR．SSCP技术和免疫组织化学S-P法，对石蜡包埋组织进行p53基因外显子6．7和8，9以及p53蛋白的检测。结果（1）p53蛋白的阳性表达在癌组织和癌旁组织中分别为47．6％和38．1％；有淋巴结转移的病例p53蛋白表达52．8％。（2）癌组织中p53外显子7的突变率为23．9％；癌旁组织中突变率为19．0％。癌组织中p53外显子6的突变率为10．5％；癌旁组织为8．6％。癌组织中p53外显子8，9的突变率为1．9％；癌旁组织为1．0％。结论有淋巴结转移的病例中，筇3外显子的突变率和蛋白的表达率均明显增高，提示p53外显子的突变在胃癌的发生发展中是一个重要因素，并促进肿瘤的转移。p53基因突变与p53蛋白高表达在癌组织和癌旁组织中无显著差异。     

p53基因失活与大肠腺癌病理改变的关系

目的探讨ｐ５３基因失活与大肠腺癌Ｄｕｋｅｓ分期、转移等病理改变的关系。方法Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ和ＲＦＬＰ分析大肠腺癌组织中１７ｐＬＯＨ的改变：ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测大肠腺癌ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变;两种单抗（ＰＡｂ２４０．ＰＡｂ１８０１）ＬＳＡＢ免疫组化方法检测大肠腺癌ｐ５３蛋白表达,ＳＰＳＳ下Ｆｉｓｈｅｒ'ｓｅｘａｃｔｔｅｓｔ处理结果。结果１０９例大肠腺癌中,１７ｐＬＯＨ与Ｄｕｋｅｓ＇Ｄ期和远处转移有关（Ｐ＜０．０１）;１８７例大肠腺癌中,ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变与Ｄｕｋｅｓ'Ｃ期和淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１）;１００例大肠腺癌中,ＰＡｂ２４０和ＰＡｂ１８０１单抗阳性率分别为７６％和６２％,两种单抗相加总阳性率为８２％。ｐ５３蛋白高表达与Ｄｕｋｅｓ＇分期及癌转移间的关系无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论ｐ５３基因失活参与大肠腺癌的病理发展各阶段和转移行为;高频率的ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变和高频率１７ｐＬＯＨ的出现,分别提示Ｄｕｋｅｓ'Ｃ期和Ｄｕｋｅｓ'Ｄ期的病理阶段形成,这两种ｐ５３基因的改变分别提示淋巴结转移和远处转移的分子生物学标记。免疫组化方法可检测突变型ｐ５３基因产物高表达,对大肠肿瘤良恶性细胞鉴别     

胃肠恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的 探讨胃肠道恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达与手术切缘的安全性关系。方法 用PCR－SSCP和免疫组化S－P方法检测20例胃癌和10例大肠癌标本和切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达情况。结果 （1）胃肠道恶性肿瘤组织中有很高的p53基因突变率（63％）和p53蛋白阳性表达率（53．33％）。（2）肿瘤组织中p53蛋白表达是切缘组织中p53蛋白表达的前提。（3）p53基因突变和p53蛋白表达随肿瘤切缘距离的增加而呈现极显著的递减趋势。结论 就p53基因突变和p53蛋白表达而言,距离肿瘤边缘5cm可定为肿瘤的分子切缘。     

喉癌中P53基因突变与突变型P53基因蛋白表达的相互关系及意义

目的：探讨喉癌Ｐ５３基因突变与突变性Ｐ５３基因蛋白表达之间的相互关系及意义。方法：对４０例喉癌新鲜手术标本采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ｐ５３基因突变,免疫组化方法（ＬＳＡＢ）检测突变型Ｐ５３基因蛋白表达,并比较其相互间的关系。结果：４０例喉癌中有２６例基因突变阳性（６５％）,Ｐ５３基因蛋白表达阳性者２３例（５７．５％）;Ｐ５３基因突变与其突变型蛋白表达比较,两者皆阳性为４５％,两者均阴性为２２．５％,     

大肠癌患者外周血CK20表达及p53基因突变的研究

目的建立高效,快速的外周血Cytokeratin20(CK20)表达的检测方法,探讨大肠癌患者外周血中CK20的表达与微转移的关系,研究大肠癌与P53基因突变的关系.方法,运用荧光监测技术结合RT-PCR,检测36例大肠癌患者术前后不同时间外周血中的CK20的表达,用SSCP技术对大肠癌患者进行P53基因突变检测.结果36例患者术前的外周血中检出CK20表达的有27例,阳性率为75%手术后24h患者外周血中检出CK20表达的有30例,阳性率为83.3%,术后早期化疗结束后仅13例为阳性,阳性率为36%.36表达可以监测癌症微转移的发生,简便快速,检出率高.     

大肠癌患者粪便p53基因检测及其临床意义

目的: 研究大肠癌患者p53基因突变及蛋白表达之间关系,并探讨从粪便中检测p53基因突变在大肠癌早期诊断中的临床意义。方法: 采用聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,检测大肠癌患者癌组织和粪便标本中p53基因第5~8外显子突变情况;同时运用免疫组化法分析癌组织中p53表达情况。结果: 34例大肠癌患者癌组织标本中,p53基因第5~8外显子突变及蛋白表达阳性率分别为52.9%和55.9%,正常黏膜未见p53表达(P<0.01)。p53表达与基因突变呈正相关关系(P<0.05)。p53表达阳性率与肿瘤组织大小有关,肿瘤≤ 5cm者阳性率高于>5 cm者(P<0.05),但与其它临床病理因素无关。12例癌组织中有p53基因突变的患者其粪便中基因突变阳性率为41.7%,正常人未检测出突变。结论: p53基因突变是参与和影响p53表达和生物学功能的主要因素;大肠癌患者粪便中可检测出p53基因突变,粪便中p53基因检测可成为一种新的肿瘤标志物用于大肠癌的诊断及高危人群的筛检普查。