肾乐胶囊对大鼠5/6肾切除肾衰模型作用机理的实验研究

目的 :通过对大鼠 5/6肾切除 (5/6NX)所致肾衰模型的研究 ,探讨中药复方肾乐胶囊治疗慢性肾衰的作用机理。方法 :采用纤维蛋白原平板溶环法 ,检测尿中纤溶酶原激活物PA的活性 ;用半定量法分析残肾组织中组织型纤溶酶原激活物 ,尿激酶型纤溶酶原激活物 /纤溶酶原激活物抑制物 (tPA ,uPA/PAI-1)的染色强度和面积 ;用Northernblot来观察转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达。 结果 :模型对照组大鼠尿PA活性下降 ,肾组织tPA ,uPA表达下降 ;而肾组织中PAI-1和TGF-βmRNA表达增高。肾乐胶囊治疗后 ,尿PA的活性升高 ,肾组织中tPA ,uPA的表达增强 ;而肾组织中PAI-1和TGF-βmRNA的表达却下降。 结论 :肾乐胶囊可以通过调节 5/6NX模型大鼠尿PA的活性 ,肾组织tPA ,uPA/PAI-1,TGF-βmRNA的表达 ,延缓肾小球硬化和间质纤维化病变的进展。     

尼古丁对血管内皮细胞PAI-1表达水平的影响

目的研究尼古丁对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）表达纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的影响。方法 HUVECs培养后接种于25 cm2培养瓶,随机分为对照组（培养液中不加任何干预）和尼古丁组（培养液中加入尼古丁,使其终浓度100μmol/L）,分别孵育12 h后收集各组细胞及细胞上清液,采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析法（ELISA）测定各组细胞上清液中PAI-1的抗原浓度;采用逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测各组细胞PAI-1mRNA的表达水平。结果尼古丁组PAI-1含量在12h显著升高,与对照组比较有统计学意义（P〈0.01）,且PAI-1 mRNA的表达显著升高,与对照组比较有统计学意义（P〈0.01）。结论尼古丁损伤血管内皮细胞,显著上调HUVECs PAI-1 mRNA的转录和PAI-1蛋白的分泌,抑制内皮细胞的纤溶活性。     

水蛭地龙提取液对急性脑梗死大鼠纤溶影响的实验研究

目的：探讨水蛭地龙提取液对局灶脑缺血大鼠组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator；tPA)及其抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1；PAI-1)活性和含量及DD二聚体(D-dimer；DD)含量的影响。方法：采用自体血栓阻塞大脑中动脉建立局灶脑缺血模型，分别用发色底物法及ELASA方法测定实验各组DD含量及tPA、PAI-1活性和含量。结果：水蛭地龙提取液治疗组DD含量、tPA活性和含量均高于假手术组及局灶脑缺血对照组；而PAI-1活性及含量均低于其他两组。结论：水蛭地龙提取液能够提高纤溶活性，从而促进血栓的溶解。     

黄芪对高糖环境下肾间质成纤维细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂的影响

目的:体外研究高糖刺激人肾间质成纤维细胞时纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达,以及黄芪延缓糖尿病肾病与其相关性。方法:将人肾间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,24 h 后采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测 PAI-1 mRNA 转录水平,免疫组化方法检测 PAI-1蛋白的表达。随即用黄芪药物血清刺激细胞,观察 PAI-1表达情况。结果:高浓度葡萄糖培养的细胞 PAI-1表达升高,并呈现剂量和时间依赖性。说明 PAI-1表达与高糖作用存在相关性。同时等渗甘露醇也可以诱导 PAI-1表达。黄芪含药血清可以显著抑制细胞表达 PAI-1。结论:高糖可诱导 PAI-1表达,抑制细胞外基质成分降解。黄芪通过抑制 PAI-1的产生,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展。     

补阳还五汤有效组分对血管内皮细胞抗血栓功能及蛋白激酶C的影响

目的探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱、苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗血栓功能改变及蛋白激酶C(PKC)活化的影响。方法以凝血酶(10 U/mL)作用于培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304),同时加入药物,24 h后测定上清液中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平、细胞组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、凝血酶调节蛋白(TM)mRNA表达及PKCα蛋白表达。结果凝血酶作用内皮细胞后,tPA释放增加(P<0.01),TF、TFPI mRNA表达增强(P<0.05),而PAI-1释放及TM mRNA表达无显著性变化(P>0.05);PKCα表达增强(P<0.05)。补阳还五汤可抑制凝血酶诱导的tPA释放增加(P<0.01),生物碱对tPA释放增加无显著影响(P>0.05);苷(1.25 mg/mL)可使凝血酶诱导的tPA分泌增加(P<0.05);原方、生物碱(2 mg/mL)和苷(5 mg/mL)均可抑制内皮细胞分泌PAI-1(P<0.01)。原方、生物碱(1,2 mg/mL)和苷均可抑制凝血酶诱导的TF mRNA表达增强;生物碱(0.5和1 mg/mL)可抑制TFPI mRNA表达(P<0.05);各药对TM mRNA表达无显著影响;原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的内皮细胞PKCα表达的增强(P<0.01)。PKC激活剂佛波酯(PMA)刺激内皮细胞后,PKCα被激活(P<0.01);PKC抑制剂H7作用于PMA刺激的内皮细胞后,PKCα表达增强不明显,PAR-1受体抑制剂CATG作用于凝血酶刺激的ECV304细胞后,PKCα表达显著抑制(P<0.05)。结论凝血酶可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。补阳还五汤原方、生物碱和苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗凝、纤溶功能的改变具有调节作用,使血管内皮细胞的抗凝、纤溶作用趋于正常,其作用可能主要是通过抑制凝血酶诱导的PKCα的激活而介导的。生物碱和苷类有效组分可能为该方抗血栓作用的药效物质基础。     

酒大黄对动脉粥样硬化兔PAI-1及其基因的调节作用

目的:研究酒大黄对实验性动脉粥样硬化(AS)兔纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)及其基因的调节作用,探讨酒大黄抗AS机制。方法:将健康雄性新西兰兔32只随机分为4组(n=8):空白对照组(N组)、AS模型组(M组)、酒大黄低剂量组(L组)和酒大黄高剂量组(H组),常规高脂饮食构建动脉粥样硬化模型。治疗给药12周,免疫组织化学法检测主动脉组织PAI-1蛋白表达,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测兔主动脉组织PAI-1 mRNA的表达。结果:与模型组相比,酒大黄低剂量组能显著抑制主动脉组织PAI-1 mRNA以及蛋白的表达(P0.05或P0.01);酒大黄高剂量组显著上调主动脉组织PAI-1 mRNA和蛋白的表达(P0.05或P0.01)。结论:酒大黄对AS兔PAI-1蛋白及其mRNA表达的调节作用呈现剂量双重性。     

脑梗死患者急性期血浆PAI-1与t-PA比值的变化及临床意义

目的研究脑梗死患者急性期（发病7 d内）血浆纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）与血浆组织型纤溶酶原激活物（t-PA）比值的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测67例脑梗死患者急性期血浆PAI-1t、-PA、计算PAI-1/t-PA（P/t）值,并与50名健康对照组作对照。结果脑梗死患者急性期血浆t-pA活性及PAI-1活性均升高,与正常对照组比较有统计学意义（P〈0.05）,P/t值较正常对照组降低（P〈0.05）。结论脑梗死患者急性期体内纤溶活性相对亢进。在判定体内纤溶活性指标中,P/t值较t-PA、PAI-1稳定可靠。P/t值与纤溶活性呈反比关系。     

血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1对肥胖相关疾病的影响机制

血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1（plaminogen activator inhibitor-1,PAI-1）是丝氨蛋白酶抑制剂家族成员之一,是组织型和尿激酶型纤溶酶原激活剂的特异性抑制剂。遗传因素、脂肪含量、细胞因子以及肾素-血管紧张素-醛固酮系统等可调控PAI-1的表达,肥胖患者血浆PAI-1水平普遍增高,从而导致纤溶系统失衡,易引发肥胖相关的代谢紊乱及心血管疾病。     

常通口服液对兔术后肠粘连的预防作用

目的:观察常通口服液对兔术后肠粘连的预防作用.方法:选取36只雄性新西兰白兔随机分为6组(n=6).除正常对照组外,其余各组均制成肠粘连模型.正常对照组及模型对照组予以蒸馏水灌胃(20ml/kg);四磨汤组以10ml/kg灌胃给药;常通口服液低、中、高剂量组分别按2.15、4.30、8.60g/kg剂量灌胃给药.术后第3天兔耳缘静脉取血,测定血浆中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及其抑制因子(PAI-1)活性;术后第9天进行粘连程度肉眼分级.结果:常通口服液能明显减轻肠粘连的程度,增加肠粘连兔血浆中tPA活性,而抑制PAI-1活性.结论:常通口服液能够预防术后肠粘连形成.     

加强u-PA纤溶途径与基质金属蛋白酶互促反应的研究概况

纤溶是纤溶酶原(PLG)经特异性激活物使其转化为纤溶酶(PL),导致纤维蛋白(Fb)溶解或降解的过程。近年研究表明尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)除了纤溶作用外,还参与细胞与细胞,细胞与细胞外基质(ECM)的基质金属蛋白酶(MMP)之间的相互反应和调节[1-2]。协同研究它们的互促反应将会促进细胞微环境、炎症和免疫应答、血管新生、细胞迁移和肿瘤转移方面的新认识,应引起对它们的重视。1 u-PA纤溶u-PA纤溶途径由u-PA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、PAI-2和PLG组成。PLG在u-PA作用下转化为活性…     

蝎毒纤溶活性肽对血管内皮细胞分泌纤溶因子的影响

目的　研究蝎毒纤溶活性肽 (SVFAP)对血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂 (t -PA)和纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI - 1)的影响。方法　将不同浓度SVFAP与脐静脉内皮细胞共同孵育 10min及 4h后 ,分别收集培养液 ,以发色底物法测定培养液中t-PA和PAI -1的活性。结果　SVFAP在用药后 10min及 4h各浓度大多使t-PA活性增强 ,PAI - 1活性降低 ,t-PA/PAI - 1比值升高。结论　SVFAP的纤溶作用与抑制内皮细胞分泌PAI - 1和促进t-PA释放有关。     

全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶活性的影响

目的观察不同浓度全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞（VEC）释放组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）活性的影响。方法以凝血酶和不同剂量的全蝎纯化液同时作用于培养的人脐静脉内皮细胞（VEC-340）,12h后收集细胞液测定t-PA和PAI活性。结果与空白组比较,凝血酶组t-PA活性降低,PAI活性增高,差异有统计学意义（P〈0.01）,与凝血酶组比较,全蝎大剂量、中剂量、小剂量组t-PA活性均增高,PAI活性降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凝血酶对VEC-340细胞具有损伤作用,可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。全蝎纯化液可促进血管内皮细胞释放t-PA,抑制PAI分泌,对纤溶平衡具有调节作用。提示这可能与全蝎纯化液增加血管内皮细胞抗血栓能力有关。     

PAI-1 mRNA在糖尿病大鼠肾脏的表达与通心络胶囊的干预作用研究

目的研究纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）在糖尿病大鼠肾皮质的表达和中药通心络胶囊对其的干预作用。方法将SD大鼠随机分为两组,一组经链尿佐菌素诱发的糖尿病模型（DM）组,另一组为血糖正常对照组（C）,两组均再随机分为DMl组、DM2组、Cl组、C2组,其中DM2组、C2组给予通心络治疗5周。治疗前后称体重、监测血糖,最后取肾脏称重,采用逆转录一多聚酶链式反应（RT-PCR）观测肾皮质PAI-1mRNA表达量。结果 DM组大鼠肾重/体重值及PAI-lmRNA表达明显高于C组（P〈0.01）,DM2组PAI-1mRNA表达低于DMl组,差异有统计学意义（P〈0.05）,肾皮质PAI-1mRNA表达量在C1与C2组间无统计学意义（P〉0.05）。结论 PAI-1mRNA在糖尿病大鼠肾皮质的表达增高,PAI-1增高参与糖尿病肾病的病理生理过程。中药通心络对糖尿病时PAI-1mRNA肾皮质的表达增高有下调作用。     

银胶菊内酯对PGCL3细胞uPA活性和表达的影响

目的:研究银胶菊内酯对人肺癌细胞PGCL3尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)蛋白表达及活性的影响,探讨其抗肿瘤的作用机制.方法:MTT法检测银胶菊内酯对PGCL3细胞的增殖抑制作用;发色底物法检测银胶菊内酯对PGCL3细胞分泌的uPA活性的影响;Western blot法检测银胶菊内酯对uPA表达的影响.结果:5～160μmol/L的银胶菊内酯作用PGCL3细胞24 h后,明显抑制PGCL3细胞的增殖,IC50值为17.6 μmol/L;5、10、20 μmol/L银胶菊内酯明显降低PGCL3细胞分泌的uPA活性;银胶菊内酯还能降低PGCL3细胞uPA蛋白表达.结论:银胶菊内酯抗肿瘤活性与uPA蛋白表达及活性有关.     

狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理及局部凝血纤溶的相关性分析

目的 研究狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理及局部凝血纤溶的相关因素.方法 采用电镜及免疫组化方法对30例狼疮性肾炎热瘀证与30例狼疮性肾炎非热瘀证肾脏病理分型、肾组织活动指数(AI)及慢性化指数(CI)、肾组织纤维蛋白原相关抗原(FRA)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)和1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)进行对比分析.结果 狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理分型无相关性;热瘀证组肾脏病理的AI显著高于非热瘀证组(P<0.01);热瘀证组肾组织FRA沉积程度明显强于非热瘀证组(P<0.05);热瘀证组tPA、PAI-1阳性强度平均积分显著高于非热瘀证组(P<0.05).结论 狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理活动及肾脏局部高凝和纤溶低下有一定相关性.     

非酒精性脂肪肝痰瘀证与纤溶状态的关系

目的 探讨非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver,NAFL)痰瘀证与纤溶状态的关系。方法 将符合NAFL诊断的患者辨证分为痰瘀证组18例与非痰瘀证组52例,并设健康人对照组28名,比较各组纤溶酶原(plasminogen,PLG)、组织纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA)、1型纤溶酶原激活物抑制物(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、D-二聚体的变化。结果 NAFL患者t-PA活性明显低于健康人对照组(P<0．01),PLG、PAI-1活性明显高于健康人对照组(P<0．05);与非痰瘀证组比较,痰瘀证组患者t-PA活性明显降低,PLG、PAI-1活性明显升高(P<0．01),而D-二聚体差异无显著性(P>0．05)、结论 NAFL痰瘀证患者纤溶活性明显降低,存在不同程度的微循环障碍或高黏状态,采用化痰散瘀治疗有积极意义。     

Effects of baicalein isolated from roots of Scutellaria baicalensis Georgi on interleukin 1β- and tumour necrosis factor α-induced tissue-type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor-1 production in cultured human umbilical vein endothelial cells

The effects were examined of baicalein on tissue-type plasminogen activator (t-PA) and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) production stimulated by interleukin-1α (IL-1β) and tumour necrosis factor-α (TNF-α) in cultured human vein umbilical endothelial cells (HUVECs). IL-1β and TNF-α increased PAI-1 production, but they decreased t-PA production. Baicalein isolated from the roots of Scutellaria baicalensis Georgi, inhibited the PAI-1 production stimulated by IL-1β and TNF-α, but it had no effect on the t-PA. In addition, protein kinase C (PKC) inhibitors such as H7 and sphingosine decreased the reduction of t-PA and the increase of PAI-1 by IL-1β and TNF-α. On the other hand, dibutryl cAMP and forskolin had no effect on the t-PA reduction and PAI-1 increase by IL-1β and TNF-α. Moreover, IL-1β and TNF-α did not cause [Ca²⁺] elevation. These results suggest that the inhibitory action of baicalein on the PAI-1 production by both cytokines might be directly mediated through PKC inhibition. © 1997 John Wiley & Sons, Ltd.     

全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成t-PA、PAI-1的影响

目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原活化物抑制剂（PAI-1）、血小板计数（Pt）的变化。方法将50只健康新西兰白兔随机分成5组：空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组（20mg/kg）、全蝎纯化液中剂量组（10mg/kg）和全蝎纯化液小剂量组（5mg/kg）。耳缘静脉注射药物（空白组、模型组注射同等体积的生理盐水）后,采用H2O2损伤新西兰白兔颈总动脉制备血栓模型,造模2h后,采血并取血栓,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血浆t-PA、PAI-1的含量。结果与空白组比较,模型组t-PA明显降低,PAI-1明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组相比,全蝎纯化液各剂量组能明显抑制PAI-1活性,增加t-PA活性,差异均有统计学意义（P〈0.01）,而各组的血小板计数差异无统计学意义（P〉0.05）。结论全蝎纯化液各剂量组可明显促进血浆t-PA的分泌,抑制血浆PAI-1活性,提示全蝎纯化液抗血栓作用机制可能与其促纤溶作用有关。     

阴阳透刺法对急性脑梗死患者t-PA及PAI-1的影响

目的观察阴阳透刺法对急性脑梗死患者的组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）、其抑制物组织型纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）的影响,探讨针刺治疗缺血性脑血管病可能的作用机制。方法将80例急性脑梗死患者分为治疗组和对照组各40例。分别观察治疗前、治疗后血浆t—PA、PAI-1的活性,并与正常组40例进行对照。结果治疗前,两组t—PA的活性较明显低下,相反,PAI-1的活性明显增高,与正常组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。治疗后,两组t—PA的活性各与其自身治疗前比较明显增强,而PAI-1活性各与其自身治疗前比较明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,且治疗后两组间t—PA及PAI-1活性比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论治疗前,急性脑梗死患者t—PA活性明显低下和PAI-1活性明显增高,阴阳透刺法可降低PAI-1活性和增高t—PA活性,调节纤溶功能,促进溶解血栓,确为临床针刺治疗急性脑梗死的一种较可靠治疗方法。