Semaphorin 4D在喉癌组织中表达及与血管生成、转移的关系

喉癌是常见的恶性肿瘤,近30年来其5年生存率无明显提高,主要原因是局部复发和转移。新近研究发现,轴突导向分子Semaphorin 4D（Sema 4D）能促进血管生成和细胞迁移,在诱导头颈部鳞状细胞癌（包括喉鳞状细胞癌）发生、发展和血管生成起重要作用,但Sema 4D在喉癌的表达尚未见报道。本研究通过检测Sema 4D、血管内皮生长因子（VEGF）及CD31在喉癌中的表达情况,并结合临床病理因素分析其意义,探讨Sema 4D在喉癌发生、血管生成和肿瘤转移中的作用。     

鼻咽癌组织中Survivin蛋白表达及其临床意义

目的　探讨Survivin蛋白表达与鼻咽癌 (NPC)临床及预后的相关性。方法　对 1 992～ 1 994年收治的经病理明确诊断、完成全程根治性放疗、随访 5年以上的 1 1 5例NPC放射治疗前活检标本 (经病理证实均为低分化鳞癌 ) ,应用免疫组织化学技术检测Survivin基因蛋白在NPC组织中的表达情况 ,并分析Survivin的表达与NPC分期、放疗敏感性、生存率、转移和复发之间的关系。结果　NPC组织中Survivin蛋白阳性表达率为 6 8.7%。Survivin的表达活性与鼻咽癌的颈淋巴结转移、放疗敏感性、3年和 5年生存率及复发倾向有密切关系。结论　Survivin高表达对判断病变进展、预测放疗敏感性、颈部淋巴结转移的出现趋势、生存率及转移复发有指导意义。     

凋亡抑制基因Survivin与鼻咽癌预后关系的研究

目的　探讨凋亡抑制基因Survivin蛋白产物在鼻咽癌 (NPC)组织中的表达情况与凋亡指数 (AI)、临床特征及预后之间的关系。方法　应用免疫组化技术S P法及TUNEL法 ,对 5 1例鼻咽癌组织标本进行凋亡抑制基因Survivin蛋白产物及凋亡指数检测。结果　在鼻咽癌组织中Survivin蛋白产物表达阳性率为 82 .4 % ,其中高表达占 5 1% ,AI平均为 2 .6 % ,Survivin的表达与AI存在相关性且与NPC病人的预后密切相关 (P <0 .0 5 )。结论Survivin的过度表达是导致NPC凋亡减少的一个重要原因 ,对NPC发生、发展起一定作用 ,而且对NPC的预后有重要的价值     

鼻咽癌血管生成及血小板聚集功能与侵袭转移关系？…

目的：探讨鼻咽癌血管生成及血小板聚集功能与ＮＰＣ侵袭转移关系,为在分子水平干预肿瘤血管形成,预防ＮＰＣ复发和转移打下基础。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测了５６例ＮＰＣ,２０例无瘤鼻咽部石蜡标本组织中的微血管密度及血管骨皮细胞生长因子表达。随访３年,ＮＰＣ复发转移１７例,无复发或转移３９例。结果：复发转移组的血小板聚集率ＭＡＲ,ＭＶＤ及ＶＥＧＦ的表达较无复发转移的表达高,差异有统计学意义;ＭＶＤ     

鼻咽癌血管生成及血小板聚集功能与侵袭转移关系的研究

目的：探讨鼻咽癌（ＮＰＣ） 血管生成及血小板聚集功能与ＮＰＣ 侵袭转移关系,为在分子水平干预肿瘤血管形成,预防ＮＰＣ复发和转移打下基础。方法：采用免疫组织化学Ｓ－ Ｐ法检测了５６ 例ＮＰＣ,２０ 例无瘤鼻咽部石蜡标本组织中的微血管密度（ ＭＶＤ） 及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ） 表达。随访３ 年,ＮＰＣ复发转移１７ 例,无复发或转移３９ 例。结果：复发转移组的血小板聚集率ＭＡＲ,ＭＶＤ 及ＶＥＧＦ的表达较无复发转移的表达高,差异有统计学意义;ＭＶＤ 及ＶＥＧＦ的表达与临床分期相关。结论：ＮＰＣ 血管生成及血小板聚集功能亢进与癌浸润和转移行为密切相关,有可能作为判断肿瘤生物学行为及预后指标,对采用血管生成抑制剂及血小板聚集抑制剂防止ＮＰＣ转移有参考价值。     

血管内皮生长因子在鼻咽癌组织中的表达及其与淋巴转移的关系

目的检测鼻咽癌中血管内皮生成因子c（VEGF-C）的表达及微淋巴管密度（microlymphatic vessel density，MLVD），探讨鼻咽癌淋巴管生成及淋巴转移之间的关系。方法采用免疫组化sP法检测58例鼻咽癌和20例鼻咽部炎性反应组织中VEGF—C的表达情况，并用淋巴管内皮细胞特异性抗体LYVE-1行免疫组化染色，计数肿瘤内MLVD，并结合临床病理特征进行分析。结果鼻咽癌组和炎性反应对照组VEGF．C的阳性表达率分别为84．5％（49／58）和15．0％（3／20），差异有统计学意义（x。：32．309，P〈0．01）。鼻咽癌组织MLVD为（28．6&#177;6．2）个／视野，鼻咽炎性反应组为（10．5&#177;3．0）个／视野，两组差异有统计学意义（t=12．491，P〈0．01）。鼻咽癌组织中，有淋巴转移组VEGF．C阳性表达率（87．8％）明显高于无淋巴转移组（76．5％）；有淋巴转移组MLVD（30．2&#177;6．4）个／视野高于无淋巴转移组（24．8&#177;3．6）个／视野，经统计学分析，差异均有统计学意义（t=3．259，P〈0．01）。VEGF—C的表达与MLVD（t=3．512，P〈0．01）、淋巴转移（χ^2=7．715，P〈0．01）、临床分期（χ^2=4．250，P〈0．05），与病理分化程度无关（χ^2=0．000，P〉0．05）。VEGF-C的表达与MLVD（t=3．512，P〈0．01）、淋巴转移（χ^2=7．715，P〈0．01，r=0．712）、临床分期（χ^2=4．250，P〈0．05，r=0．481）相关，与病理分化程度无关（χ^2=0．000，P〉0．05）。结论在鼻咽癌组织中VEGF-C呈高表达，VEGF-C表达与鼻咽癌组织MLVD、淋巴转移、临床分期密切相关。VEGF-C可能参与了鼻咽癌发生、浸润和转移的过程。VEGF-C与肿瘤组织微淋巴管密切相关，在鼻咽癌发展过程中起重要作用，可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点。     

血管内皮生长因子在鼻咽癌组织中的表达及其与淋巴转移的关系

目的 检测鼻咽癌中血管内皮生成因子C(VEGF-C)的表达及微淋巴管密度(microlymphatic vessel density,MLVD),探讨鼻咽癌淋巴管生成及淋巴转移之间的关系.方法 采用免疫组化SP法检测58例鼻咽癌和20例鼻咽部炎性反应组织中VEGF-C的表达情况,并用淋巴管内皮细胞特异性抗体LYVE-1行免疫组化染色,计数肿瘤内MLVD,并结合临床病理特征进行分析.结果 鼻咽癌组和炎性反应对照组VEGF-C的阳性表达率分别为84.5%(49/58)和15.0%(3/20),差异有统计学意义(X2=32.309,P＜0.01).鼻咽癌组织MLVD为(28.6±6.2)个/视野,鼻咽炎性反应组为(10.5 4±3.0)个/视野,两组差异有统计学意义(t=12.491,P＜0.01).鼻咽癌组织中,有淋巴转移组VEGF-C阳性表达率(87.8%)明显高于无淋巴转移组(76.5%);有淋巴转移组MLVD(30.2 4±6.4)个/视野高于无淋巴转移组(24.8±3.6)个/视野,经统计学分析,差异均有统计学意义(t=3.259,P＜0.01).VEGF-C的表达与MLVD(t=3.512,P＜0.01)、淋巴转移(X2=7.715,P＜0.01)、临床分期(X2=4.250,P＜0.05),与病理分化程度无关(X2=0.000,P＞0.05).VEGF-C的表达与MLVD(t=3.512,P＜0.01)、淋巴转移(X2=7.715,P＜0.01,r=0.712)、临床分期(X2=4.250,P＜0.05,r=0.481)相关,与病理分化程度无关(X2=0.000,P＞0.05).结论 在鼻咽癌组织中VEGF-C呈高表达,VEGF-C表达与鼻咽癌组织MLVD、淋巴转移、临床分期密切相关.VEGF-C可能参与了鼻咽癌发生、浸润和转移的过程.VEGF-C与肿瘤组织微淋巴管密切相关,在鼻咽癌发展过程中起重要作用,可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点.     

鼻咽癌组织中LMP1和VEGF蛋白表达及其临床意义

目的探讨LMP1和VEGF基因蛋白表达与鼻咽癌（NPC）预后的相关性。方法对40例NPC放疗前活检标本,应用免疫组织化学技术检测LMP1和VEGF蛋白在NPC组织中的表达情况,并分析二者表达与NPC分期、放疗敏感性、生存率、转移及复发之间的关系。结果NPC组织中LMP1和VEGF蛋白阳性表达率分别为72.5%和60.0%。NPC分期、放疗敏感性、淋巴结转移、生存率及远处转移与LMP1蛋白高表达密切关系,VEGF的高表达则与鼻咽癌的分期、颈淋巴结转移、远处转移、生存率密切关系。LMP1蛋白表达与VEGF表达呈正相关（相关系数为r=0.812）。结论LMP1和VEGF蛋白高表达对判断病变进展、预测放疗敏感性、生存率及转移有重要参考价值。     

鼻咽癌中水通道蛋白1表达与血管生成能力的相关性研究

目的:研究水通道蛋白1(AQP1)、血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度在鼻咽部肿瘤及非肿瘤组织中的表达情况及其相关性.方法:收集30例鼻咽部活检标本,分别使用免疫组织化学及实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测组织中AQP1、VEGF的表达情况,计算组织中的微血管密度.结果:免疫组织化学及real-time PCR检测均证实肿瘤组织中AQP1、VEGF的表达强于非肿瘤组织,且两者存在一定相关性.结论:AQP1在鼻咽癌中通过VEGF参与血管生成,从而促进肿瘤生长和转移.     

鼻咽癌间质微血管密度与MMP-2表达和肿瘤转移的关系

目的 研究鼻咽癌组织中微血管密度的分布以及与基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)的表达关系,探讨其与肿瘤淋巴结转移的关系.方法 应用免疫组化Elivision Plus二步法,检测50例鼻咽癌和15例炎性鼻咽部黏膜组织间质微血管密度(microvascular density,MVD)的分布,并检测MMP-2的表达.结果 鼻咽癌组织MVD为21.92±7.80,明显高于炎性鼻咽黏膜组织(9.23±1.84),两者之间差异有显著性(P＜0.01);MMP-2阳性组MVD均值为25.46±6.79,高于MMP-2阴性组17.40±6.69,MMP-2的表达与MVD有关(P＜0.01).此外,鼻咽癌MVD与临床分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.01).结论 MMP-2可能促进鼻咽癌间质血管生成,促进肿瘤的侵袭和转移,MMP-2和MVD有可能成为判定鼻咽癌生物学行为和预后的重要指标.     

效应蛋白酶受体-1在鼻咽癌组织中的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨凝血蛋白酶因子Xa（FXa）的效应蛋白酶受体-1（EPR-1）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达及其与细胞增殖、凋亡之间的关系。方法：用免疫组织化学SP法检测NPC组织、癌旁交界组织各42例及鼻咽部黏膜慢性炎症组织30例中EPR-1、增殖细胞核抗原Ki-67的表达,以Ki-67代表细胞增殖指数（PI）;用TdT酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术（TUNEL法）检测凋亡指数（AI）并进行统计学分析。结果：EPR-1在NPC的组织、癌旁交界组织、鼻咽部黏膜慢性炎症组织中的阳性表达率分别为76．1％、90．5％、100．0％,3组间差异有统计学意义（均P〈0．01）,与AI呈正相关（r=0．551,P〈0．01）,与PI呈负相关（r=-0．338,P〈0．05）。结论：EPR-1促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,为以Survivin为靶向的NPC治疗开创新的途径。     

p16和Cyclin D1表达与鼻咽癌发生的相关性

目的 探讨 p16和Cyclin D1(CD1) 异常表达与鼻咽癌发生、发展的相关性。方法 以免疫组化法,对60例鼻咽癌患者(25例治疗前已远处转移,13例放疗后远处转移,22例放疗后6年以上无瘤生存)治疗前的癌组织和22例非癌鼻咽部炎症组织,进行p16和CD1蛋白表达的检测。结果 ① 癌组织中p16蛋白阴性表达与 CD1蛋白阳性表达有显著相关性( P < 0.05);② 炎症组织p16阴性表达和CD1阳性表达, 均明显低于鼻咽癌各组治疗前组织(P < 0.01);③治疗前NPC组织的p16和CD1的异常表达,在治疗前远处转移组与治疗后远处转移组之间对比,在治疗后远处转移组与治疗后未发生转移组之间对比,差异均无显著性(P >0.05); ④鼻咽癌组织不同临床分期的p16和 CD1表达异常的差异均无显著性(P > 0.05)。结论 p16与CD1蛋白异常表达与鼻咽癌的发生有关,均属于鼻咽癌发生的早期事件。这种异常表达可能与鼻咽癌的病情发展无明显相关性。     

细胞外基质蛋白-1与喉癌血管生成和转移的关系

目的:研究细胞外基质蛋白1(ECM1)与喉癌生长、转移和血管生成的关系。方法:用免疫组织化学方法检测33例喉良恶性肿瘤ECM1和Ⅷ因子相关抗原的表达情况。用RT-PCR分子技术检测5例新鲜喉癌组织及其癌旁组织的ECM1mRNA的表达情况。结果:喉良、恶性两组肿瘤组织ECM1的表达比较差异有统计学意义(P<0.01)。喉癌组ECM1表达明显强于良性组。喉癌组ECM1表达与喉癌微血管密度(24.50±5.96)存在正相关(γ=0.505,P<0.05)。5例喉癌组织及其癌旁组织均检测到ECM1mRNA的表达,两者mRNA的表达量差异不明显。结论:ECM1在喉癌发生、发展过程中起促进癌细胞生长、转移和具有血管生成作用。ECM1的深入研究有利于治疗喉癌和判断喉癌预后。     

Prognostic value of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Survivin and Livin are new members from the family of anti-apoptotic factors. Increased levels of Survivin and Livin have been observed in many malignancies and correlated with poor prognosis. Survivin is expressed almost exclusively in proliferating cells, including various kinds of cancers, but Livin expression is relatively rare in cancer cells. Therefore, the present study examines the expressions of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and investigates whether their expression contributes to the prognosis of NPC. METHODS: We investigated the expression of Survivin and Livin in 80 NPC samples using immunohistochemistry stain and correlated it with the survival of these patients using log-rank test and Cox multifactor regression analysis. RESULTS: All the patients were followed up at least for 60 months. During the following period, 21 cases developed distant metastasis, 9 cases developed local-regional recurrence, and 5 developed both distant metastasis and local-regional recurrence. Among them, 30 patients died of recurrence of tumor. In addition, the expression of Survivin was related with distant metastasis. Patients with low Survivin expression had better overall survival, disease-free survival and distant metastasis-free survival rates than the group with high Survivin expression (P = .0086, .0097, and .0318, respectively). Cox regression analysis confirmed that high Survivin expression was related to worse prognosis in NPC patients. However Livin expression level was not related with the survival of patients with NPC. CONCLUSION: NPC expresses high levels of Survivin and Livin, which may play an important role in the oncogenesis and tumor development. Over-expression of Survivin was related with poor prognosis. We suggest that the determination of Survivin expression may provide predictive information on NPC patients.     

多基因共沉默对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤影响的研究

目的 应用基因克隆技术构建一个载体同时编码四个不同基因的真核表达质粒,并与单基因质粒作对比,通过裸鼠成瘤实验研究其对体内鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的影响.方法 构建同时表达血管内皮生长因子(VEGF)、致癌基因蛋白(c-myc)、存活素(survivin)和端粒酶反转录酶(hTERT)并含荧光素标记的短发夹RNA质粒(命名为P-1),并构建单独表达VEGF、c-myc、survivin 和hTERT的质粒(分别命名为P-2、P-3、P-4和P-5),建立人鼻咽癌细胞CNE-2Z细胞株裸鼠皮下接种模型,分别将其转染于荷瘤裸鼠瘤体内,以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤体内的转染及表达情况.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)在mRNA水平上检测对目的基因表达的抑制作用,免疫印迹法在蛋白水平上检测对目的基因的封闭效果.脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测各组移植瘤细胞凋亡率.结果 所有裸鼠均接种成功,l周左右可见皮下肿瘤形成,并随时间延长不断增大.各质粒组载体转入瘤体后,共聚焦显微镜下见癌组织中有绿色荧光表达,而空白对照组未见绿色表达荧光.肿瘤体积生长曲线表明,单基因组和多基因组肿瘤生长明显受到抑制,以多基因组肿瘤体积抑制最为明显.肿瘤抑制率在Pl～5组分别为82.4%、46.2%、48.5%、51.9%和46.8%.RT-PCR和免疫印迹法在体内实验证实单基因质粒组主要引起单个基因mRNA和蛋白的表达下降,而多基因质粒组可以同时下调四个不同基因mRNA和蛋白的表达,TUNEL实验表明多基因质粒能更有效地促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤的生长.结论 多基因共沉默对鼻咽癌基因治疗有着潜在的应用前景,同时阻断多个基因可能是恶性肿瘤基因治疗的一个希望所在.     

Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系

目的:探讨Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系。方法:应用RT-PCR技术,对41例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽部组织进行Tiam1mRNA表达水平的检测。结果:41例鼻咽癌组织的Tiam1mRNA平均表达水平(1.83±0.73)明显高于正常鼻咽部组织(0.87±0.45)(P<0.01);鼻咽癌组织中Tiam1mRNA高表达率与临床分期、T分级呈正相关;有淋巴结转移者Tiam1mRNA高表达率为59.3%(16/27),无淋巴结转移者为21.4%(3/14),二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Tiam1基因在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽部组织,其过表达与鼻咽癌浸润转移呈正相关。     

鼻咽癌中环氧化酶-2的表达及其与Survivin和Caspase-3的相关性研究

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)在低分化鼻咽癌中的表达及其与Survivin和Caspase-3的关系。方法采用免疫组织化学方法对56例低分化鼻咽癌患者肿瘤组织及20例鼻咽黏膜组织的COX-2和Survivin及Caspase-3蛋白表达进行检测。结果鼻咽癌标本中COX-2的表达阳性率为76.8%,鼻咽黏膜表达阳性率为15.0%,两组之间差异有统计学意义(P<0.01)。鼻咽癌中COX-2和Survivin的表达具有相关性(P<0.05),COX-2和Caspase-3的表达无相关性(P>0.05)。结论COX-2在低分化鼻咽癌致病中起着重要作用,其凋亡抑制作用可能通过调控Survivin途径来实现。