脂联素减轻心脏骤停后综合征小鼠脑损伤的机制研究

目的 在建立心脏骤停后综合征(PCAS)小鼠模型的基础上,探究脑组织神经细胞凋亡与炎症介质TNFα、IL-6的关系,以及经尾静脉注射脂联素(Adiponectin,APN)后,能否减少炎症介质释放,从而减轻神经细胞凋亡损伤。方法 将60只小鼠随机分为3组:心脏骤停后综合征组(PCAS组)、脂联素干预组(APN组)及对照组(C组)。使用经食道交流电诱发室颤导致心脏骤停,再经心肺复苏恢复自主循环的方式建立PCAS小鼠模型。APN组和PCAS组在自主循环恢复(ROSC)后,通过尾静脉分别注射10μg APN溶液0.25ml和等体积无菌生理盐水,分别在ROSC后第0.5、3、6、12h采集标本,采用TUNEL染色检测脑组织神经细胞凋亡情况; 免疫组化法半定量检测脑组织中TNFα、IL-6表达情况。结果 1PCAS组小鼠的脑组织出现噬神经、神经元细胞凋亡,脑组织内TNFα、IL-6表达增加。2PCAS后神经细胞凋亡数与TNF-α、IL-6之间具有正相关性(P<0.05)。3APN减少ROSC后脑组织的细胞凋亡,减轻脑组织内TNFα、IL-6的表达。结论 PCAS后小鼠脑组织中炎症因子TNFα、IL-6的释放导致脑组织神经细胞凋亡。APN可通过降低ROSC后小鼠脑组织中TNFα及IL-6的表达而减轻神经细胞凋亡。     

人脂联素受体1和2的真核表达

目的 扩增和表达人脂联素受体1（AdipoR1）和人脂联素受体2（AdipoR2）基因。方法 利用RT-PCR方法扩增AdipoR1和AdipoR2全长cDNA。将AdipoR1和AdipoR2的cDNA构建到真核表达载体pcDNA3．1。重组质粒转染HEK293细胞。通过免疫荧光技术标记HEK293细胞的AdipoR1和AdipoR2融合蛋白,共聚焦显微镜观察AdipoR1和AdipoR2在细胞中的定位。结果 成功构建真核表达重组质粒pcDNA3．1-adipoR1和pcDNA3．1-adipoR2．重组质粒转染HEK293细胞后。定位于HEK293细胞膜上。结论 AdipoR1和AdipoR2重组质粒的构建和在HEK293细胞中的成功表达。为进一步研究其与胰岛素抵抗的关系创造了条件。     

脂联素与脑卒中关系研究进展

脂联素是一种由脂肪细胞分泌的血浆蛋白,其具有抗动脉粥样硬化、抗炎等多种生物学作用,本文中作者就脂联素与脑血管病关系研究进展作一综述。     

脂联素与2型糖尿病及炎症反应

脂联素是由脂肪细胞特异性分泌的激素,研究证实脂联素具有胰岛素增敏及抗炎作用.其改善胰岛素抵抗及糖代谢的机制包括：脂联素可增加骨骼肌脂肪酸氧化及抑制肝糖原的异生,另外脂联素基因多态性与2型糖尿病有关.脂联素的抗炎作用可能与抑制巨噬细胞功能及抑制肿瘤坏死因子-α基因表达有关.因此对脂联素的研究有助于为糖尿病及其他炎症性疾病的发生及治疗提供新思路.     

脂联素的抗动脉粥样硬化作用

动脉粥样硬化是多种心血管疾病发生的病理基础,其发生机制的研究进展对相关心脑血管疾病的治疗具有指导意义.脂联素是一种由分化中的脂肪细胞分泌的细胞因子,是血浆中含量较高的信号分子之一,对心血管系统具有保护作用.本文就脂联素在动脉粥样硬化发生和发展过程中的相关作用机制进行综述.     

脂联素与心血管疾病关系的研究

脂联素是脂肪组织分泌的主要的脂肪因子。脂联素参与高血压病、冠状动脉粥样硬化性心脏病等心血管疾病的发生、发展。脂联素是通过改善内皮功能和对血管的抗炎作用来发挥抗动脉粥样硬化作用的。脂联素还可改变血管细胞内的氧化还原反应信号系统,发挥对人类血管和心肌的间接抗氧化作用。现就近年来脂联素与心血管疾病关系的研究予以综述。     

脂联素与2型糖尿病脂代谢紊乱的相关性及药物干预研究

目的探讨初诊2型糖尿病脂代谢紊乱者脂联素水平与血脂的相关性,以及给予非诺贝特、氟伐他汀调脂治疗后对脂联素水平的影响。方法选取初诊2型糖尿病无脂代谢紊乱及严重并发症组,伴以总胆固醇(TC)升高为主脂代谢紊乱组(T2DM HTC),伴以甘油三脂(TG)升高为主脂代谢紊乱组(T2DM HTG)各30例,正常对照组30例,测身高,体重,腰围,臀围,血压,抽空腹静脉血测空腹血糖(FPG),胰岛素(FINS),TC,TG,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)及脂联素;计算腰臀比(WHR),体重指数(BMI),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分别给实验组调脂治疗8周,复查上述指标,并进行统计分析。结果血浆脂联素水平与体重、腰围、臀围、BMI,WHR、TG、TC、LDL-C、VLDL-C及HOMA-IR呈负相关,与HDL-C呈正相关。以脂联素为因变量,其他相关指标为自变量进行多元逐步回归分析显示:HOMA-IR、腰围、TG、体重及VLDL-C进入回归方程;调脂治疗后血糖、血脂均有下降,脂联素水平显著升高。结论2型糖尿病早期脂联素浓度降低,糖尿病伴脂代谢紊乱者显著降低,而T2DM加HTG组与T2DM加HTC组间差别无统计学意义;调脂治疗可以提高糖尿病脂代谢紊乱者脂联素水平。     

脂联素与老年2型糖尿病患者相关性研究

目的:探讨老年2型糖尿病和血清脂联素水平的关系。方法:纳入60例老年2型糖尿病(T2DM)患者和28例健康者为对照组。受试者的临床资料包括年龄、性别、体质指数(BMI)、踝臂指数(ABI)、血清脂联素、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖、胰岛素和血脂等生化指标,同时计算稳态模型的胰岛素抵抗指数和采用多普勒显像测量双侧颈总动脉IMT。结果:2型糖尿病组脂联素和双侧颈总动脉IMT和对照组比较差异有统计学意义。2型糖尿病脂联素与双侧颈总动脉IMT呈负相关。结论:血浆脂联素与2型糖尿病的发生发展密切相关,对其防治有重要临床意义。低脂联素是2型糖尿病的独立危险因素,对其血管病变的发展有重要意义。     

PPAR-γ激活剂对脂联素及脂联素受体的影响

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)是核受体超家族成员之一,通过PPAR-γ激活剂特异激活,促进脂肪细胞分化,增加胰岛素敏感性,在胰岛素抵抗、动脉粥样硬化、糖尿病等代谢性疾病的发生、发展及防治过程中扮演重要角色。脂联素是脂肪细胞分泌的一种细胞因子,通过结合脂联素受体——AdipoR1和AdipoR2发挥抗炎、抗糖尿病、抗动脉粥样硬化的作用。PPAR-γ激活剂在动物以及人体中可均增加脂联素的水平,并对脂联素复合物、脂联素受体产生影响。通过对PPAR-γ激活剂对脂联素以及脂联素受体可能作用机制的阐述,对于糖尿病和动脉粥样硬化的治疗具有积极的临床意义。     

脂联素基因多态性和血清脂联素水平与2型糖尿病的相关性研究

目的：探讨血清脂联素水平及脂联素基因（apM1）第45位点单核苷酸多态性（SNP45）与2型糖尿病的关系。方法：采用放射免疫法对289例2型糖尿病组患者和85例对照组人群进行血清脂联素水平测定,并用Taq-M an探针技术进行apM1基因多态性分析。结果：2型糖尿病组、2型糖尿病伴肥胖组以及单纯肥胖组的血清脂联素水平较正常对照组显著降低（P〈0.05）;2型糖尿病伴肥胖组及2型糖尿病组女性的血清脂联素浓度显著高于男性（P〈0.05）;多元逐步回归分析显示,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及胰岛素抵抗指数是影响2型糖尿病患者血清脂联素水平的独立相关因素。apM1基因多态性分析显示,SNP45在2型糖尿病组、2型糖尿病伴肥胖组以及单纯肥胖组与正常对照组比较有显著性差异（P〈0.05）;等位基因分布频率提示,G等位基因在糖尿病人群中多见（P〈0.05）,糖尿病组中携带TG′GG型的患者血清脂联素水平显著低于TT型患者（P〈0.05）。结论：2型糖尿病及单纯性肥胖患者血清脂联素水平明显降低;HDL-C及HOMA-IR是影响2型糖尿病患者血清脂联素水平的独立相关因素;糖尿病人群中G等位基因多见,携带等位基因G的患者血清脂联素低水平提示apM1基因SNP45多态性与肥胖、2型糖尿病发生有关。     

COX-2选择性抑制剂valdecoxib对LPS刺激牙龈成纤维细胞生成PGE2的影响

目的:观察valdecoxib对细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生成前列腺素(prostaglandin E2,PGE2)水平的变化?方法:采用ELISA法定量检测LPS及valdecoxib处理后对体外培养的HGFs生成PGE2水平的改变?结果:1~100 ng/ml LPS处理可明显促进HGFs产生PGE2,其作用效果呈浓度依赖和时间依赖关系;6.25~100 μmol/L valdecoxib 能够明显抑制LPS促HGFs产生PGE2的作用,且其抑制作用呈剂量依赖性关系?结论:valdecoxib能明显抑制LPS促HGFs产生PGE2的作用?     

苦参碱对K562细胞培养液中PGE2含量的影响

目的：研究苦参碱诱导K562细胞分化的胞外信号：方法：运用酶联免疫法，动态检测苦参碱作用于K562细胞后，培养液中PGE2含量的变化。结果：培养液中PGE2含量在苦参碱作用于K562细胞2天后有增高，并与苦参碱浓度有关。结论：在苦参碱诱导K562细胞分化的过程中，PGE2含量的增高可能涉及到PLA2的激活，并且PGE2可能作为胞外信号影响K562细胞的增殖与分化。     

PGE2对肝病大鼠创伤弧菌攻击后肺组织的保护作用研究

目的 探讨前列腺素E2（PGE2）免疫干预对肝病大鼠创伤弧菌（vibrio vulnificus，Vv）攻击后细胞因子、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）的影响，及与肺组织超微结构改变的相关性。方法 将正常大鼠9只，肝病大鼠36只，分为正常大鼠Vv攻击组、肝病大鼠Vv攻击组、肝病Vv攻击后氧氟沙星等药物治疗组（简称氧氟沙星组）、肝病Vv攻击PGE2氧氟沙星等联合保护组（简称PGE2免疫干预组）和肝病大鼠对照组，用ELISA法测定IL-10、IL-1β和IL-6含量；化学比色法定量测定SOD、NO含量。取各组大鼠肺标本在电镜下观察超微结构病理改变。结果 肝病大鼠较正常大鼠Vv攻击后IL-10、SOD低，而IL-1β、IL-6和NO高（JDl〈0．05或P〈0．05）；PGE2免疫干预组比氧氟沙星组的IL-10、SOD高（均P〈0，05），而IL-1β、IL-6和NO低（P〈0．05或0．05）；肺组织超微结构明显改善。结论 PGE2通过上调肝病大鼠血清IL-10、SOD含量，抑制IL-1β和IL-6分泌以及降低NO的含量，使肺组织损伤得到改善。     

PGE2对HuH7细胞Survivin表达影响的研究

目的:研究前列腺素E2(PGE2)对人肝癌细胞HuH7 Survivin表达的影响及其与PI3K/AKT信号转导通路的相关性.方法:用PGE2、EP受体激动剂、EP受体抑制剂、PI3K抑制剂(LY294002)处理HuH7细胞,用Western blot检测Survivin蛋白表达.结果:5 μmol/L PGE2处理HuH7细胞8 h后,Survivin的表达水平与对照组相比上升了63.59%(P＜0.01);5 μmol/L EP1、5μmol/L EP3、5 μmol/L EP4受体激动剂分别处理HuH7细胞8 h后,Survivin的表达水平与对照组相比分别上升了114.76%(P＜0.01),76.68%(P＜0.01),70.01%(P＜0.01),而5 μmol/L EP2受体激动剂处理HuH7细胞8 h后,Survivin的表达水平与对照组相比无明显改变(P＞0.05);10 μmol/L EP1,10 μmol/L EP4受体抑制剂分别处理HuH7细胞8 h后,Survivin的表达水平与PGE2组相比分别下降了32.95%(P＜0.01),28.36%(P＜0.05),而10 μmol/L EP2受体抑制剂处理HuH7细胞8 h后,Survivin的表达水平与PGE2组相比无明显改变(P＞0.05);10 μmol/L PI3K抑制剂(LY294002)处理HuH7细胞8 h后,Survivin的表达水平与PGE2组相比下降了28.05%(P＜0.01).结论:PGE2可能通过EP1、EP3、EP4这3种受体影响HuH7细胞中Survivin的表达,且这种调节作用可能与PI3K/Akt信号转导通路有关.     

ERK1／2信号通路对亚急性帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2，PGE2表达的影响

目的：研究ERK1/2信号通路对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）所致帕金森病（PD）小鼠模型中脑黑质环氧合酶-2（COX-2）和前列腺素E2（PGE2）的表达调控作用,探讨多巴胺（DA）能神经元变性失活的可能机制.方法：采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,应用免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶（TH）,COX-2,PGE2以及磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）的表达变化;并观察给予ERK特异性抑制剂U0126对上述因子变化的影响.结果：模型组小鼠出现典型PD样症状,在MPTP第3次注射后1h,黑质区p-ERK1/2阳性细胞数明显增加,在MPTP第5次注射后24h,黑质区出现大量COX-2,PGE2阳性细胞,伴有约50%的TH阳性神经元丢失;给予ERK特异性抑制剂U0126后小鼠PD样症状减轻,p-ERK1/2,COX-2,PGE2阳性细胞数明显减少,MPTP第5次注射后24h,TH阳性细胞数较对照组仅下降25%.结论：ERK1/2通路可能参与调控COX-2及PGE2的表达而在PD发病过程中发挥重要作用,抑制ERK信号通路对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用.     

MDP通过上调口腔癌细胞COX-2/PGE2表达促进其趋化和增殖

目的 研究细菌细胞壁成分MDP对口腔癌细胞Tca8113 COX-2/PGE2表达的影响.方法 RT-PCR检测NOD2、COX-2在Tca8113细胞的表达;不同浓度MDP刺激Tca8113细胞后,采用RT-qPCR、MTT、ELISA及趋化实验分别检测其对COX-2/PGE2表达、细胞增殖和细胞趋化的影响.结果 ①Tca8113细胞表达NOD2、COX-2 mRNA; MDP促进COX-2 mRNA表达;②与对照组比较,MDP刺激Tca8113后PGE2分泌、细胞增殖、趋化显著增加(P＜0.05);与MDP组比较,MDP+NS-398组PGE2分泌、细胞增殖、趋化显著降低(P＜0.05);与NS-398组比较,MDP+NS-398组细胞增殖仍然显著增强(P＜0.05).结论 MDP促进肿瘤细胞趋化和增殖.上调口腔癌细胞COX-2/PGE2表达是其作用机制之一.     

螺旋藻多糖对胃溃疡大鼠胃液分泌和前列腺素E2的影响

目的 探讨螺旋藻多糖（PSP）对实验性胃溃疡大鼠的保护作用及其与前列腺素E2（PGE2）的关系.方法 采用幽门结扎法制备大鼠胃溃疡模型,将50只SD大鼠随机分成正常组、模型组、奥美拉唑组（1.8 mg/kg）和高、低两个剂量的PSP治疗组（400 mg/kg和200 mg/kg）,观察各组大鼠溃疡指数,测定其胃液分泌量,采用酸碱中和滴定法测定总酸度,麦特毛细管法测定胃蛋白酶活性,并用酶联免疫法检测大鼠胃组织PGE2的含量.结果 螺旋藻多糖高剂量组（400 mg/kg）能降低大鼠胃溃疡程度,溃疡抑制率为41.67％,抑制胃液的分泌,降低胃液总酸度[（84.39±7.38）mmol/L]和胃蛋白酶活性[（178.36±55.02）U/mL],并可显著升高大鼠胃组织PGE2含量[（13.07±4.75）ng/mL],与模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 螺旋藻多糖对实验性胃溃疡有促进溃疡愈合、保护胃黏膜的作用,这种作用可能与增加胃黏膜PGE2合成有关.     

饥饿对不同内脏脂肪含量大鼠血清脂联素分泌的影响

目的: 建立不同内脏脂肪含量的大鼠模型,通过观测不同饥饿时段大鼠血清脂联素分泌的变化,探讨脂联素在能量代谢中所发挥的作用。方法: 通过高脂和极低热量饮食建立高脂及减体质量大鼠模型。将大鼠分为正常饲养组、高脂饲养组、减体质量组。使用16排螺旋CT全扫,计算大鼠内脏脂肪含量。将所有大鼠以内脏脂肪含量再次分组。采用放射免疫法测定血清脂联素水平。结果: 大鼠血清脂联素水平与内脏脂肪含量呈负相关关系(P<0.01),脂联素分泌随着饥饿时间的延长而下调,在饥饿72 h后开始明显。内脏脂肪含量≥9%的极度肥胖大鼠,在饥饿24 h血清脂联素分泌量较非饥饿状态小幅上升,但到饥饿120 h后,血清脂联素的分泌量较非饥饿状态下降(P<0.05)。结论: 脂联素的分泌调节与内脏脂肪含量有密切的关系,脂联素可能也是一种重要的传递机体能量平衡的脂肪信号。     

阿托伐他汀对脂多糖诱导的人肺上皮细胞分泌PGE2和IL-6的影响

目的：探讨阿托伐他汀（atorvastatin）对经脂多糖（LPS）诱导人肺上皮细胞(A549)的炎症细胞因子PGE2和IL-6分泌的影响。方法：对LPS诱导的人肺上皮细胞给予不同浓度的阿托伐他汀干预，同时设置对照组，分别收集其培养上清液，采用ELISA方法，比较PGE2和IL-6浓度。结果：①在不同浓度的LPS诱导下，肺泡上皮细胞不同时间分泌PGE2和IL-6浓度明显高于未经LPS诱导的对照组（P<0.05）。②阿托伐他汀不同浓度的干预，肺上皮细胞PGE2和IL-6的分泌浓度较无阿托伐他汀干预组均有不同程度的降低（P<0.05）。结论：阿托伐他汀能降低脂多糖诱导的人肺上皮细胞炎症因子PGE2和IL-6的分泌, 提示他汀类药物对肺上皮细胞有直接抗炎作用。     

电针对自体髓核移植大鼠脊髓后角小胶质细胞活性的影响?

目的观察近部取穴、远部取穴、远近配穴电针对自体髓核移植大鼠模型痛行为及脊髓后角小胶质细胞标记物OX42和环氧化酶2(COX2)表达的影响,为理解不同针灸处方疗效差异提供依据。方法雄性SD大鼠54只,随机分为正常组、模型组、假手术组、远近配穴组、近穴组、远穴组,每组9只。建立自体髓核移植疼痛大鼠模型,远近配穴组取双侧"腰5夹脊穴""大肠俞""委中"和"昆仑",近穴组取双侧"腰5夹脊穴"和"大肠俞",远穴组取双侧"委中"和"昆仑",每天1次,每次20 min,共治疗7 d。测定大鼠热刺激爪退缩阈值(TWL),用免疫组织化学法检测大鼠脊髓后角左侧OX42及COX2的表达变化。结果自体髓核移植大鼠TWL上升,脊髓后角OX42和COX2表达增加。与模型组相比,治疗组可以改善TWL(P0.05),抑制脊髓后角OX42表达,显著抑制脊髓后角COX2表达(P0.05),远近配穴和近部取穴的抑制作用优于远部取穴。结论无论是近部取穴、远部取穴和远近配穴电针均能抑制脊髓后角炎性信号通路发挥抗炎效应,远近配穴和近部取穴的疗效优于远部取穴。