异氟醚预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用及PKCγ机制

目的利用离体海马脑片缺氧无糖（oxygen and glucose deprivation，OGD）损伤模型，探讨异氟醚预处理对神经细胞的保护作用及与蛋白激酶Cγ（protein kinase Cgamma，PKC7）的关系。方法将脑片随机分为分4组（n=8）：空白对照组（CON组）、PKCγ抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ组（BIS组）、异氟醚预处理组（ISO组）、异氟醚加抑制剂组（ISO＋BIS组）。采用脑片灌流及电生理技术，记录海马CA1区的顺向群锋电位（orthodromic populationpike，OPS）作为评价脑片不同阶段的活性指标；采用2，3，5-三苯基氯化四氮唑（2，3，5-triphenyltetrazolium chloride，TYC）染色定量比色方法分析脑片损伤程度。采用Western bolt方法，观察PKCγ在不同组别中的表达。结果异氟醚预处理能明显提高脑片的抗缺氧能力，增加OPS恢复率，组织损伤百分率明显低于其他各组，促进PKC向胞膜转位；而抑制PKC7后脑片活性降低，OPS恢复率下降。结论PKCγ的激活参与异氟醚预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用。     

细胞外信号调节激酶在脑缺血损伤中的研究进展

脑缺血是危害人类健康的常见病、多发病,因而一直受到许多科学工作者重视,近年来关于脑缺血的发病机制、病理变化及其防治的实验研究越来越多。研究发现不同脑区的神经元对缺血有不同的敏感性。缺血性脑损伤的分子机制主要包括ATP的耗竭、钙离子移位、兴奋性氨基酸(excitatory amino acids,EAA)的释放、自由基形成等。最近,一种与蛋白激酶C(protein kinasec,PKC)相关在细胞信号传导通路中起重要作用的蛋白激酶——丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)又受到注目,其家族成员成为细胞信号传导研究的热点。本文就细胞外信号调节激酶在脑缺血性损伤中的研究进展进行文献复习,现简要综述如下。     

GSK3β抑制在异氟醚后处理减轻SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤中的作用

摘 要: 【目的】 研究糖原合成酶激酶3β(GSK3β)抑制在异氟醚后处理减轻SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤的神经保护中所起的作用?【方法】 将SH-SY5Y细胞进行分成3组(n = 24):Control组?OGD组及OGD + Isoflurane组?Control组细胞常规培养;OGD组进行1 h氧糖剥夺(OGD)及20 h模拟再灌注;OGD + Isoflurane组进行1 h的OGD及20 h模拟再灌注,OGD开始时立即暴露于2%异氟醚1 h?检测各组模拟再灌注1 h后LDH释放水平及总GSK3β和磷酸化GSK3β表达水平?将高选择性的GSK3β抑制剂chir 98014 或chir 99021分别加入OGD组或OGD + Isoflurane组,检测各组模拟再灌注1 h后LDH释放水平?【结果】 OGD组LDH释放水平增高,与Control组相比差异有统计学意义(P 0.05),p-GSK3β表达增加,差异有统计学意义(P 0.05)?【结论】 异氟醚后处理对SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤具有神经保护效应?异氟醚后处理保护效应部分通过抑制GSK3β发挥作用?     

糖皮质激素受体通过细胞外信号调节激酶途径参与吗啡耐受机制

目的 探讨糖皮质激素受体参与吗啡耐受形成的机制及细胞外信号调节激酶(ERK)信号途径在其中的作用.方法 将40只健康雄性SD大鼠行鞘内置管后随机分为4组(n=10),盐水对照组(C组)鞘内注射生理盐水lOμl;慢性吗啡耐受组(M组)鞘内注射吗啡10μg;糖皮质激素受体拮抗剂组(MR组)鞘内注射吗啡10μg,再注射糖皮质激素受体拮抗剂RU38486 2μg;糖皮质激素受体激动剂组(MD组)鞘内注射吗啡10μg,再注射糖皮质激素受体激动剂地塞米松4μg,鞘内注射每种药物均为2次/d,连续7 d.采用甩尾实验评价大鼠热痛觉,于给药后第8天取出腰膨大处脊髓分别进行Western印迹检测μ阿片受体(MOR)、糖皮质激素受体(GR)、磷酸化ERK(pERK)蛋白表达及TUNEL染色.结果 地塞米松和RU38486分别对吗啡耐受诱导的热痛敏具有促进和抑制作用.与M组(凋亡细胞数5.4±1.1,蛋白表达MOR 37±5,GR 20±6,pERK1 39±4,pERK2 41±5)比较,MR组凋亡细胞数(3.2±0.4)显著少(P<0.01);MD组(16.0±1.6)显著多(P<0.01);MR组MOR(28±5)、GR(12±6)、pERK1(33±4)、pERK2(34±5)蛋白表达均下调(均P<0.01);MD组MOR(55±6)、GR(28±9)、pERKl(49±6)、pERK2(59±5)蛋白表达均上调(均P<0.01).结论 糖皮质激素受体的活性可影响吗啡诱导的脊髓神经凋亡及吗啡耐受中脊髓pERK的表达.

Abstract：

Objective To investigate the mechanism of glucocorticoid receptors(GR)participating in morphine tolerance development via the extracellular signal-regulated kinase(ERK)signal pathway.Methods Forty healthy male SD rats were implanted with intrathecal catheters and then randomized into 4 groups:Group C received an intrathecal injection of 10 μl saline,Group M 10μg morphine,Group MR 10μg morphine followed by 2μg GR antagonist RU38486 and Group MD 10μg morphine followed by 4μg GR agonist dexamethasone(DEX)respectively.Each intrathecal drug was administered twice daily for 7 days.Tail-flick test was employed to evaluate the thermal hyperalgesia.After tail-flick test at Day 8,the lumbar intumescentias were isolated by Western blot to examine the protein expressions of Mu opioid receptor(MOR).GR and pERK.And terminal deoxynucleotidyl transferase mediated X-dUTP nick end labeling(TUNEL)stain was performed.Results DEX and RU38486 enhanced and inhibited morphine induced hyperalgesia to heat respectively.Compared with Group M(count of spinal dorsal horn apoptotic cells 5.4±1.1,protein expression:MOR 37±5,GR 20±6,pERK1 39±4,pERK2 41±5),apoptotic cells decreased in Group MR(3.2±0.4)(P<0.01)and increased in Group MD (16.0±1.6)(P<0.01);the protein expressions of MOR(28±5),GR(12±6),pERK1(33±4)and pERK2(34±5)were down-regulated in Group MR(P<0.01)while up-regulated in Group MD(55±6,28±9,49±6,59±5)(P<0.01).Conclusion The activity of glucocorticoid receptors affects the morphine-induced spinal neural apoptosis and the expression of spinal pERK in morphine tolerance.     

细胞外信号调节激酶对氧糖剥夺后大鼠海马神经元的作用研究

目的:研究细胞外信号调节激酶对氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)后大鼠海马神经元的作用。方法:建立培养乳鼠海马神经元OGD模型,并分为正常对照组、OGD组、PD 98059 10μmol/L、30μmol/L组。流式细胞仪Annexin V/PI双染色法检测神经元细胞凋亡率,Western blot法检测ERK1/2、pERK1/2的表达。结果:与正常对照组相比,OGD组神经元的凋亡率升高(P<0.01),pERK1/2的表达降低(P<0.01),与OGD组相比,PD98059组神经元凋亡率明显升高(P<0.01),pERK1/2的表达明显降低(P<0.01),30μmol/L组较10μmol/L组凋亡率升高及pERK1/2表达降低更为显著(P<0.01),各组ERK含量无明显变化(P>0.05)。结论:ERK可能参与氧糖剥夺后的神经元凋亡,抑制ERK通路可促进神经元凋亡。     

JNK信号通路在异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡的作用

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶(the c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路对异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡以及对磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 48只出生后7d(Py7)的新生大鼠按照随机数的方法随机均分为DMSO对照组(D组)、JNK抑制剂SP600125对照组(SP30组)、异氟醚+DMSO组(Iso+D组)和异氟醚+SP600125组(Iso+ SP30组).对照组吸入空气,异氟醚组吸入1.1％异氟醚4h.麻醉前20 min,幼鼠根据分组分别侧脑室注射SP600125 30 μg或者12％ DMS0 5μl.麻醉结束后6h,部分幼鼠灌注取脑,TUNEL荧光染色检测脑海马CA1区神经细胞凋亡(n=6);部分幼鼠取新鲜脑皮质,Western blotting法检测磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化(n=6).组间资料的比较采用单因素方差分析.结果 幼鼠海马CA1区的TUNEL阳性细胞数比较,Iso+D组[(135.72±21.26)个/mm2]比D组[(24.07±1.35)个/mm2]增加5倍(P＜0.01);与Iso+D组相比,Iso+ SP30组[(42.49±5.56)个/mm2] CA1区的TUNEL阳性细胞数降低了84％ (P＜0.05).Iso+D组磷酸化JNK P46表达比D组增加44.1％ (P＜0.01),而Iso+ SP30组显著降低了磷酸化JNK P54 (p＜ 0.05)和P46(P＜ 0.01)的表达.Iso+D组Bax表达比D组增加1.5倍(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达比D组下降42.2％ (P＜0.05);而Iso+ SP30组Bax表达下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P＜0.01).D组与SP30组TUNEL阳性细胞数,磷酸化JNK,Bcl-2和Bax蛋白表达差异均无统计学意义.结论 JNK信号通路激活促进了异氟醚诱导发育期大鼠海马神经细胞凋亡,SP600125通过维持Bcl-2,降低Bax表达产生抑制凋亡作用.     

安氟醚、异氟醚和七氟醚对大鼠脑缺氧缺糖损伤的保护作用

目的探讨安氟醚、异氟醚和七氟醚对大鼠皮层脑片缺氧缺糖损伤的保护作用及其机制.方法大鼠皮层脑片随机分为四组:对照组、损伤组(缺氧缺糖损伤10 min)、吸入麻醉药+损伤组、印防己毒碱(GABAA受体拮抗剂)+吸入麻醉药+损伤组.通过脑片病理切片、HE染色和TTC 染色、定量比色测定吸光度A值,观察脑片缺氧缺糖损伤程度.结果1.0 MAC安氟醚、异氟醚和七氟醚处理30 min后,皮层脑片神经细胞的病理损伤较损伤组明显减轻.1.0 MAC和2.0 MAC的安氟醚、异氟醚和七氟醚明显提高损伤所致脑片的低A值(P<0.01).50 μmol/L的印防己毒碱完全抑制了2.0 MAC安氟醚的作用(P<0.01),部分抑制了2.0 MAC异氟醚的作用(P<0.01),但不影响2.0 MAC七氟醚的效果 (P>0.05).结论1.0 MAC和2.0 MAC的安氟醚、异氟醚和七氟醚对大鼠皮层脑片缺氧缺糖损伤均有一定的保护作用;GABAA受体参与了安氟醚和异氟醚的脑缺血保护作用.     

细胞外信号调节激酶在高血糖加重脑缺血性损伤中的作用

目的探讨ERK1/2在高血糖加重大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法采用双侧颈总动脉管阻断加低血压法建立脑缺血再灌注模型,大鼠缺血前30min注射25%葡萄糖,使之处于高血糖状态。两侧颈总动脉结扎并放血,使血压下降到45~50mmHg。脑缺血30min后再灌注(解除颈总动脉结扎同时回输血液),分别观察再灌注后30min、1h、3h、6h。另设正常血糖组和对照组,用免疫组化和Western blot比较3组大鼠ERK1/2的表达状态和脑组织病理改变。结果正常血糖组和高血糖组大鼠,再灌注后0~1h,海马CA1区未见明显的ERK1/2表达。而在纹状皮质和海马CA3区,ERK1/2的表达有明显的区别。正常血糖组大鼠在再灌后30min,可见ERK1/2轻度升高,高血糖组大鼠再灌注后30min,ERK1/2升高。ERK1/2在再灌注1h达到高峰并且持续到再灌注3、6h,高于正常血糖组(P<0.05)。用Western blot方法检测皮质和海马的ERK1/2含量,正常血糖组在缺血再灌注30min、1h、3h、6h ERK1/2含量逐渐升高,而高血糖组又高于正常血糖组(P<0.05)。结论高血糖可加重脑缺血再灌注损伤,其机制可能与激活ERK1/2有关。     

细胞外信号调节激酶在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的 :探讨细胞外信号调节激酶ERK 1和ERK 2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义。方法 :用固定化蛋白质印迹法检测 5 2例非小细胞肺癌及癌旁正常肺组织中ERK1、ERK2及磷酸化的ERK(P ERK)蛋白的表达情况 ;应用免疫组织化学法分析其在细胞内的定位。结果 :肺癌组织中ERK1、ERK2及P ERK蛋白的表达水平明显高于癌旁正常组织 ,分别为癌旁组织的 1.5 ,1.8和 1.7倍 (P值均小于 0 .0 1) ;ERK1与ERK2蛋白表达水平呈线性正相关 (r=0 .6 4 ,P <0 .0 1)。免疫组织化学显示ERK蛋白主要位于细胞浆内。结论 :ERK蛋白的过表达可能在非小细胞肺癌的发生、发展过程中起着重要的作用。     

细胞外信号调节激酶及其不同作用

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated pro tein kinase, MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一,参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能、同步等多种细胞过程,普遍存在于多种生物,包括酵母和哺乳动物细胞。MAPK家族本身又是蛋白激酶级联反应的下游激酶,是多条信号通路的汇总点。迄今为止已发现 MAPK 家族有4个成员:(1)细胞外信号调节激酶(extrallular sig nal regulated protein kinase, ERK),又称为P42/44MAPK; (2) c Jun氨基末端激酶(c Jun N terminalkinase, JNK),又称为应激激活蛋白激酶( stressacti…     

雌激素提高去卵巢大鼠海马CA4区ERK2的磷酸化水平

目的研究雌激素对去卵巢大鼠海马CA4区神经元细胞外信号调节激酶1/2(extrauancellular sig-nal-regulated kinase-1/2,ERK1/2)磷酸化水平的影响。方法成年Wistar雌性大鼠随机分为正常对照组(INT)、去卵巢组(OVX)和去卵巢加雌激素组(OVX+estrogen)。用放射免疫分析方法测定血中雌二醇含量,用免疫印迹方法检测ERK1/2的磷酸化水平。结果去卵巢组大鼠体内雌激素水平明显降低,与对照组和加雌激素组比较均有显著性差异;免疫印迹法检测结果表明去卵巢大鼠海马组p-ERK2表达减少,雌激素治疗组p-ERK2表达比去卵巢组明显增加;各组间p-ERK1的表达差异不显著。结论雌激素提高衰老雌性大鼠脑内ERK2磷酸化水平,提示雌激素可通过对衰老状态下ERK信号通路的调节作用达到改善学习和记忆的目的。     

大鼠全肝缺血再灌注后肺损伤及褪黑素的保护作用

目的:探讨大鼠全肝缺血再灌注后肺损伤及其机制和褪黑素的肺保护作用.方法:本实验将分成两部分完成.第一部分,72只SD大鼠随机分成2组:缺血再灌注组(n=36)与假手术对照组(n=36),阻断肝门30min后开放血流,建立大鼠全肝缺血再灌注模型.缺血再灌注组与假手术对照组分别于缺血前5 min和再灌注0、0.5、1、3、6h各时点处死动物(每时点6只),留取肺脏组织标本.通过两组间比较,观察全肝缺血再灌注后肺组织的动态变化.第二部分,将12只SD大鼠随机分成2组:褪黑素治疗组(n=6)与基质对照组(n=6),依上述方法制备全肝缺血再灌注模型,分别于全肝缺血前15 min和再灌注前10min静脉注射0.5%(质量分数)褪黑素溶液(10mg/kg)或相同剂量的溶剂,于再灌注1 h处死动物,留取肺脏组织标本.通过这两组比较,观察褪黑素的治疗效果.留取肺组织标本后,分别检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性,细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1/2, ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达,细胞凋亡,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)表达及肺组织病理学变化.结果:(1)全肝缺血再灌注可导致肺组织结构严重受损.与假手术对照组相比,缺血再灌注组再灌注后肺组织MDA含量与细胞凋亡指数显著增高;SOD活性显著降低;p-ERK/ERK比值与PCNA阳性指数分别于再灌注0h与再灌注0.5h显著降低,此后均逐渐增高.病理学方面,缺血再灌注组肺泡腔完整性破坏,间隔增厚,并可见中性粒细胞浸润.双变量相关分析结果显示,肺组织p-ERK/ERK比值与PCNA阳性指数及凋亡指数均成正相关,分别为r=0.56(P<0.05)、r=0.62(P<0.05).(2)褪黑素治疗可明显减轻肺损伤.褪黑素治疗组与基质对照组比较,病理学改变减轻,MDA含量、细胞凋亡指数显著降低,SOD活性和p-ERK/ERK比值显著增加,但PCNA阳性指数无明显变化.结论:全肝缺血再灌注可引起肺损伤.脂质过氧化增强、内源性自由基清除能力减弱以及细胞凋亡加剧是导致全肝缺血再灌注肺损伤的重要因素.褪黑素可通过抗氧化与抑制凋亡对全肝缺血再灌注肺损伤产生一定保护作用,但褪黑素的肺保护作用与激活ERK1/2信号途径的关系仍有待研究.     

胆酸对人正常食管黏膜上皮细胞增殖和ERK表达的影响

目的: 观察胆酸对人正常食管黏膜上皮细胞的增殖和ERK表达的影响. 方法: 体外培养人正常食管黏膜上皮细胞,分别在含有6种不同胆酸(250 μmol/L)的培养液中培养3～60 min,并设对照(培养液不含胆酸)进行比较. 采用MTT法和流式细胞技术测定细胞增殖状态. 免疫印迹法测定磷酸化ERK1/2蛋白表达. 结果: 胆酸的短时间(3～12 min)作用使细胞增殖比大于1,S期细胞比率升高,磷酸化ERK1/2蛋白表达增加. 当作用时间大于20 min时,细胞增殖比和S期细胞比率下降. 结论: 胆酸的短时间作用可促进人正常食管细胞的增殖,与ERK表达上调有关.     

黄芩苷对氧糖剥夺再复氧损伤大鼠海马神经干细胞的保护作用

目的：探讨黄芩苷对氧糖剥夺再复氧(OGD/R)损伤大鼠海马神经干细胞(NSCs)的保护作用。方法：体外悬浮培养新生大鼠海马NSCs,将培养的海马NSCs分为对照组、OGD/R组、黄芩苷组。OGD/R组用无糖Earle’s液于缺氧后正常培养,黄芩苷组在OGD/R基础上加用黄芩苷培养。四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定NSCs细胞的存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,4",6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测NSCs细胞的凋亡,巢蛋白(Nestin)/5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)染色检测NSCs细胞的增殖。结果：悬浮培养细胞呈Nestin阳性表达；与对照组相比,OGD/R组细胞的OD值、存活率、Nestin/BrdU阳性表达显著降低,LDH漏出率显著增加(P＜0.01),DAPI核染提示OGD可诱导细胞凋亡。与OGD/R组相比,黄芩苷组细胞的OD值、存活率、Nestin/BrdU阳性表达的面密度及细胞数明显增多,LDH漏出率明显减少(P＜0.01),DAPI核染显示黄芩苷可减轻OGD/R所引起的细胞凋亡。结论：黄芩苷能减轻OGD/R对大鼠海马NSCs的损伤,并促进其增殖。     

全脑缺血再灌注损伤后ERK在大鼠海马的表达及热休克预处理对其表达的影响

目的: 研究全脑缺血再灌注损伤后ERK在SD大鼠海马的表达及热休克预处理对其表达的影响,以阐明ERK在脑缺血再灌注损伤中作用机制. 方法: 健康雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组(SO组,n=30),缺血再灌注组(IR组,n=30),热休克预处理组(HSP组,n=30),以四血管法建立全脑缺血再灌注模型,将大鼠置于42℃中15 min行热休克预处理,全脑缺血6 min后2, 6, 12, 24 h, 3, 5 d再灌注后处死,取海马组织行HE染色,ERK免疫组化染色,TUNEL法检测凋亡细胞. 结果: IR缺血再灌注后2 h ERK在CA1区开始表达,24 h达到高峰,5 d仍有表达,CA3区弱于CA1区,同时CA1区细胞损伤明显,HSP组ERK在CA1和CA3区相应时点均弱于IR组(P＜0.05),细胞损伤轻微,凋亡细胞减少(P＜0.05). 结论: 全脑缺血再灌注损伤后ERK过度表达参与了神经元损伤过程,热休克预处理通过下调ERK过度表达具有脑保护作用.     

电针对颅脑伤大鼠海马神经元保护作用的可能机制

目的：探讨电针对颅脑伤大鼠海马神经元保护作用的可能机制。方法：应用原位杂交、透射电镜及生化检测等方法，观察电针治疗前后大鼠海马生长抑素（SS）－mRNA阳性神经元数与NO含量的变化。结果：颅脑伤大鼠经电针治疗海马SS－mRNA阳性神经元数减少，NO含量下降。结论：电针对颅脑伤大鼠海马神经元保护作用可能与SS-mRNA表达和NO含量的变化有关。     

氯氨酮减轻高血糖大鼠脑缺血所致的神经元凋亡

目的:探讨氯氨酮减轻高血糖加重脑缺血损伤的机制.方法:在正常血糖、高血糖以及氯氨酮干预条件下,制作大鼠全脑缺血15 min,再灌注0.5,1和3 h模型.通过免疫组化和免疫印迹技术对比研究细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化,同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法观察神经细胞凋亡.结果:正常血糖组大鼠全脑再灌注0.5 h扣带皮质和海马CA1及CA3区的ERK1/2磷酸化明显增加;在高血糖组缺血再灌注后0.5 h,扣带皮质和海马CA3区的ERK1/2磷酸化明显高于正常血糖组,持续到再灌注后的3 h;氯氨酮组可见由高血糖诱导的ERK1/2磷酸化被抑制.同时,磷酸化ERK1/2的程度与脑组织损伤结果一致.结论:高血糖可通过ERK1/2信号转导通路加重缺血性脑损伤,氯氨酮通过阻断NMDA受体,改善钙离子异常而抑制高血糖介导的ERK1/2磷酸化,从而减轻高血糖加重缺血性脑损伤.     

Activation and subcellular distribution of ERK1/2 following cerebral ischemia/reperfusion in rat hippocampus

Objective： To investigate the activation （phosphorylation） and subcellular localization of extracellular signal-regulated kinase （ERK1/2）, as well as the possible mechanism, following cerebral ischemia and ischemia/reperfusion in rat hippocampus. Methods： Transient brain ischemia was induced by the four-vessel occlusion method in Sprague-Dawley rats. Western blot analysis. Results： During cerebral ischemia without reperfusion ERK1/2 activation immediately increased with a peak at 5 min and then decreased in the cytosol fraction, which was paralleled by the increase of ERK1/2 activation in the nucleus fraction. During reperfusion, ERK1/2 was activated with peaks occurring at 10 min in the cytosol and at 30 min in the nucleus, respectively. Under those conditions, the protein expressions had no significant change. In order to clarify the possible mechanism of ERK1/2 activation, the rats were intraperitoneally administrated with N-methyl-D-aspartate （NMDA） receptor antagonist dextromethorphan （DM）, L-type voltage-gated Ca^2＋ channel （L-VGCC） antagonist nifedipine （ND） 20 rain before ischemia, finding that DM and ND markedly prevented ERK1/2 activation of nucleus fraction induced by reperfusion, not by ischemia. Conclusion： These results suggested that the nuclear translocation mainly occurred during ischemia, while ischemia-reperfusion induced ERK1/2 activation both in the cytosol and the nucleus. Two type calcium channels contributed, at least partially, to the activation of ERK1/2.