4种中药调节细胞色素P450 3A4转录表达的研究

目的从中药中筛选通过激活人孕烷x受体(PXR)诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)转录表达的中药;研究其诱导能力与药物浓度和作用时间之间的关系.方法在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因试验筛选对CYP3A4转录表达有诱导作用的中药,研究其在不同浓度和不同作用时间下对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用.结果中药莪术、苍术、白术和茯苓均能通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达,且具有浓度.效应关系和时间-效应关系.在浓度-效应关系中,500 mg·L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间24 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO处理细胞的(6.82±0.09),(6.76±0.20),(5.49±0.13),(4.97±0.07)倍.在时间.效应关系研究中,500 mg·L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间为48 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO作用细胞的 (7.74±0.54),(7.34±0.10),(5.54±0.11),(5.32±0.18)倍.结论中药莪术、苍术、白术和茯苓均能够通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达.     

梓醇对人肝细胞HL-7702胰岛素抵抗的影响及其机制研究

目的探讨梓醇对正常肝细胞系HL-7702细胞胰岛素抵抗的改善作用及其可能机制。方法以MTT法检测梓醇对HL-7702细胞增殖的影响;以高浓度胰岛素及地塞米松作用于HL-7702细胞建立胰岛素抵抗模型。用葡萄糖氧化酶法检测梓醇对胰岛素抵抗HL-7702细胞葡萄糖消耗的影响,Western blot法检测细胞内磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)蛋白的表达。结果梓醇低、中、高剂量组(5,10,20μmol·L-1)对HL-7702细胞增殖无显著影响,中、高剂量的梓醇可促进胰岛素抵抗HL-7702细胞的葡萄糖消耗,并可增加细胞内PI-3K的表达。结论梓醇可有效改善肝细胞胰岛素抵抗,可能是通过激活PI-3K途径而实现的。     

人参皂苷对人肝细胞HL-7702内性激素受体水平的影响

目的 观察人参皂苷（ginsenoside,GSS）对人肝细胞HL-7702内性激素受体水平的调节作用。方法 以四唑盐比色法（MTT）观察细胞生长以确定药物浓度,应用免疫组化法,免疫蛋白印迹法（Western blot）和RT PCR法分析人参皂苷对HL-7702细胞性激素受体蛋白和其mRNA水平的影响。结果 随GSS药物浓度增大,细胞内雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesterone receptor,PR）、雄激素受体（androgen receptor,AR）蛋白及mRNA表达水平均逐渐增高,与溶剂对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,且细胞内性激素受体蛋白及mRNA表达呈剂量依赖性增加。结论 GSS可上调HL-7702细胞内性激素受体蛋白及mRNA的表达。     

银杏叶提取物及其萜类单体对人孕烷X受体介导CYP3A4转录的调节作用

目的 研究银杏叶提取物(GBE)及其萜类单体白果内酯(BB)、银杏内酯A(GA)和银杏内酯B(GB)是否能通过孕烷X受体(PXR)的活化而诱导CYP3A4转录.方法 采用脂质体瞬时转染的方法,在人肝肿瘤细胞株HepG2细胞中转入PXR表达质粒、CYP3A4报告基因质粒和内参质粒,与不同浓度的银杏叶提取物及其萜类单体(BB、GA和GB)共同孵育24 h后,检测细胞中荧光素酶.结果 GBE(100 ng/mL、500 ng/mL、5μg/mL和25 μg/mL)分别通过活化PXR诱导CYP3A4 1.32、1.57、1.71和1.92倍,BB(10 ng/mL、100 ng/mL和1μg/mL)分别通过活化PXR诱导CYP3A4 1.52、1.79和1.89倍,GA和GB则不能通过活化PXR诱导CYP3A4.结论 GBE和BB能通过PXR的活化而诱导CYP3A4转录,GA和GB不能活化PXR,对CYP3A4转录无诱导作用,提示在GBE或BB与CYP3A底物合用时要注意药物之间的相互作用.     

4种中药调节细胞色素P4503A4转录表达的研究

目的:从中药中筛选通过激活人孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)转录表达的中药;研究其诱导能力与药物浓度和作用时间之间的关系。方法:在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因试验筛选对CYP3A4转录表达有诱导作用的中药,研究其在不同浓度和不同作用时间下对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用。结果:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达,且具有浓度-效应关系和时间-效应关系。在浓度-效应关系中,500 mg.L^-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间24 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO处理细胞的(6.82±0.09),(6.76±0.20),(5.49±0.13),(4.97±0.07)倍。在时间-效应关系研究中,500 mg.L^-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间为48 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO作用细胞的(7.74±0.54),(7.34±0.10),(5.54±0.11),(5.32±0.18)倍。结论:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能够通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达。     

基于高内涵细胞成像系统研究黄芩苷对人肺癌A549 细胞上皮间质转化模型的影响

目的基于高内涵细胞成像系统（HCS）探讨黄芩苷（Baicalin）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肺癌 A549 细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法体外培养人肺癌A549 细胞,用TGF-β1 诱导A549 细胞发生上 皮间质转化,设立空白对照组（TGF-β1 0 ng·mL-1）、TGF-β1 模型组（TGF-β1 5 ng·mL-1）和黄芩苷干预组 （TGF-β1 5 ng·mL-1 +黄芩苷5、10、20 μmol·L-1）。采用MTT 法检测黄芩苷对A549 细胞活性的影响;以 TGF-β1 诱导人肺癌A549 细胞发生上皮间质转化,并加入不同浓度黄芩苷干预,采用HCS 分析细胞肌动蛋白 应激纤维（F-actin）纹理强度、细胞面积、细胞圆度和细胞长度等形态学变化,以及细胞黏附能力和运动迁移能 力变化;RT-qPCR 法检测上皮间质转化相关标志基因Collagen I、FN1、Vimentin 和E-cadherin 的相对表达 量。结果黄芩苷干预A549 细胞48 h 后半数抑制浓度（IC50）为22.59 μmol·L-1。HCS 分析结果显示,与空白对 照组比较,TGF-β1 模型组细胞形态呈间质细胞样（纺锤形）变化,F-actin 纹理强度增强（P＜0.01）,细胞长度 和细胞面积增大（P＜0.01）,细胞圆度减小（P＜0.01）,黏附率降低（P＜0.01）,迁移率和迁移速度升高（P＜ 0.01）;与TGF-β1 模型组比较,黄芩苷干预组细胞形态呈上皮细胞样（不规则多边形）变化,F-actin 纹理强度 减弱（P＜0.05,P＜0.01）,细胞长度和细胞面积减小（P＜0.01）,细胞圆度增大（P＜0.01）,黏附率升高（P＜ 0.01）,迁移率和迁移速度降低（P＜0.05,P＜0.01）。RT-qPCR 结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1 模型组 Collagen Ⅰ、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量升高（P＜0.01）,E-cadherin 的mRNA 相对表达量降低（P＜ 0.01）;与TGF-β1 模型组比较,黄芩苷干预组Collagen I、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量降低（P＜ 0.05,P＜0.01）,E-cadherin 的mRNA 相对表达量升高（P＜0.05,P＜0.01）。结论黄芩苷能够有效阻止 TGF-β1 诱导的人肺癌A549 细胞上皮间质转化进程,提示HCS 是一种多参数系统分析细胞上皮间质转化的有 效工具。     

苦参碱对人孕烷X受体介导的CYP3A4调节及药物相互作用分析

目的:研究苦参碱(Matrine)对CYP3A4转录激活、mRNA诱导作用的影响,并对其在联合用药中药物的相互作用进行评价。方法:利用CCK-8方法检测苦参碱对人结直肠癌LS174T细胞、人肝癌Hep G2细胞增殖的影响;瞬时共转染报告基因方法检测苦参碱对人孕烷X受体(PXR)介导的CYP3A4荧光素酶活性影响;Real-time PCR检测苦参碱对人孕烷X受体、CYP3A4 mRNA诱导作用影响。结果:在一定的浓度范围内,苦参碱对Hep G2和LS174T细胞的增殖均具有抑制作用;在Hep G2细胞中,苦参碱可通过激活PXR而诱导CYP3A4转录,并通过诱导PXR mRNA表达进而上调CYP3A4 mRNA表达。在LS174T细胞中,苦参碱可通过激活PXR诱导CYP3A4转录,并通过诱导PXR mRNA表达进而上调CYP3A4 mRNA表达,且其作用呈浓度依赖性。结论:苦参碱对CYP3A4的诱导可能与人孕烷X受体通路有关,与其他药物联合使用时有可能干扰其他药物的代谢。     

APOE-TREM2 介导的蛇床子素对阿尔兹海默病体外细胞模型的抗炎机制研究

目的探究载脂蛋白E（APOE）-髓细胞触发受体2（TREM2）信号通路介导的蛇床子素（Osthole）对阿尔兹 海默病体外细胞模型的抗炎作用机制。方法将小鼠小胶质细胞（BV2 细胞）分为：空白组、溶剂组（0.1% DMSO）、模型组（Aβ1-42,10 μmol·L-1）、阳性药组（地塞米松,2.5 μmol·L-1）及蛇床子素高、中、低剂量组 （25、5、1 μmol·L-1）。给药组分别给予药物预保护4 h 后,再给予Aβ1-42 诱导损伤24 h,建立阿尔茨海默病 BV2 细胞模型。采用CCK-8 法检测细胞存活率;ELISA 法检测细胞炎性因子白细胞介素（IL）1β、肿瘤坏死因 子（TNF）α 的表达;免疫荧光法检测细胞促炎表型M1 型标志物CD16/32 的表达;倒置显微镜观察BV2 细胞培 养上清对SH-SY5Y 细胞形态的影响;流式细胞术检测BV2 细胞培养上清对SH-SY5Y 细胞凋亡的影响;采用 Western Blot、qPCR 法检测细胞中APOE、TREM2 蛋白及基因的表达情况。结果与空白组比较,模型组BV2 细胞存活率明显降低（P＜0.001）,TNF-α、IL-1β 分泌量明显增加（P＜0.001）,CD16/32 荧光明显增强, SH-SY5Y 细胞损伤明显,SH-SY5Y 细胞凋亡率明显升高（P＜0.001）,APOE、TREM2 蛋白及mRNA 表达显著 上调（P＜0.01,P＜0.001）。与模型组相比,蛇床子素组的BV2 细胞存活率明显升高（P＜0.01,P＜0.001）, TNF-α、IL-1β 分泌量明显减少（P＜0.01,P＜0.001）,CD16/32 荧光明显减弱,SH-SY5Y 细胞形态有所改善 且凋亡率明显降低（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）,APOE、TREM2 蛋白及基因表达明显下调（P＜0.05,P＜ 0.01,P＜0.001）。结论蛇床子素对Aβ1-42 诱导的BV2 细胞的炎性反应有较好的治疗作用,其机制可能与下 调APOE、TREM2 蛋白及基因表达有关。     

士的宁对K562/A02细胞经典及非经典多药耐药机制作用的实验研究

目的:研究士的宁(Strychnine)对K562/A02细胞经典及非经典多药耐药机制的逆转作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测士的宁的细胞毒作用;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western Blot)分别检测非细胞毒浓度(IC10)的士的宁对K562/A02细胞MDR1基因、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)基因、拓扑异构酶Ⅱ(topoi-someraseⅡ,TopoⅡ)基因、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione s-transferase,GST-π)基因及其表达产物的影响。结果:非细胞毒浓度(IC10)的士的宁作用后,K562/A02细胞的MRP基因及其表达产物表达降低;而MDR1、TopoⅡ、GST基因及其蛋白的表达无明显变化。结论:士的宁能部分逆转K562/A02细胞的耐药性,其作用机制可能与下调K562/A02细胞MRP基因及其蛋白的表达有关。     

天然植物活性成分通过转录因子调节UGT的研究进展

尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶能催化诱变剂,内源性和包括草药中的植物活性物质在内的外源性物质与辅因子尿苷二磷酸葡萄糖醛酸结合。作为药理活性分子的前体,植物化学物质已经受到越来越多的关注。在中药和常见药物的使用中,植物化学物质对UGT的表达应该没有显著的影响。然而,大量的植物化学物质可以通过调控各种转录因子影响UGT基因表达,并诱导药物间的相互作用。本文总结了植物化学物质通过13个关键转录因子AhR、CAR、PXR、PPARα、LXR、FXR、Nrf2、HNF1α、HNF3α、HNF4α、ERα、AR、NF-kB调节人UGT基因表达的当前研究进展,并对其潜在的机制进行了讨论。     

苦丁冬青苷 D 对人 HCC-1806 乳腺癌细胞增殖、凋亡、自噬的影响及机制研究

摘要：目的 探讨苦丁冬青苷 D （KD-D） 对人 HCC-1806 乳腺癌细胞增殖、凋亡、自噬的影响及机制。方法 将人 HCC-1806 乳腺癌细胞作为研究对象,给予不同浓度 KD-D 处理后,采用 CCK-8 法检测细胞存活率; EdU 法检测细胞增殖能力;结晶紫染色法检测细胞克隆形成能力;流式细胞术 （Annexin V-FITC/PI 法） 检测细 胞凋亡;JC-1 染色法检测细胞线粒体膜电位;免疫荧光法检测细胞 Cleaved Caspase-3、LC3、P62 蛋白表达; Western Blot 法检测细胞 Cleaved Caspase-3、Pan-AKT、Phosp-AKT、LC3Ⅱ蛋白表达;自噬双标 mRFP-EGFP- LC3 腺病毒感染实验检测细胞自噬流。结果 与对照组比较,12.5、25、50、100、200、400 μmol·L-1 KD-D 处理 HCC-1806 细胞 24、48 h 后,随着给药浓度增大和处理时间延长,细胞活性显著降低 （P＜0.001） ,细胞 内吸光度值显著降低 （P＜0.001） ,细胞增殖受到抑制;60、80 μmol·L-1 KD-D 组的细胞克隆形成计数显著减少 （P＜0.001） ;50、100、150 μmol·L-1 KD-D 组细胞的早期及晚期凋亡比例均显著升高 （P＜0.05,P＜0.001） ; 40、60、80 μmol·L-1 KD-D组的红色荧光比例显著下降 （P＜0.001） ,绿色荧光比例显著升高 （P＜0.01,P＜0.001） , HCC-1806 细胞线粒体膜电位下降;60、80、100 μmol·L-1 KD-D 组细胞的 Cleaved Caspase-3 蛋白表达均显著 上调（P＜0.001）,60 μmol·L-1 KD-D 组细胞的 Pan-AKT、Phosp-AKT 蛋白表达均显著上调（P＜0.001）; 60 μmol·L-1 KD-D 组细胞的 LC3 蛋白荧光小点数量显著增加 （P＜0.001） ,P62 蛋白平均荧光强度显著降低 （P＜0.001） ,LC3Ⅱ蛋白表达显著上调 （P＜0.001） ,自噬小体及自噬溶酶体数量显著增加 （P＜0.01,P＜0.001） , 自噬流激活。与 60 μmol·L-1 KD-D 组比较,KD-D+AKT 抑制剂（Afuresertib）组细胞的 Cleaved Caspase-3、 Pan-AKT 蛋白表达显著下调 （P＜0.01,P＜0.001） ,Phosp-AKT 蛋白表达显著上调 （P＜0.001） 。结论 KD-D 能抑制人乳腺癌 HCC-1806 细胞增殖,并诱导其发生凋亡和自噬,KD-D 诱导 HCC-1806 细胞凋亡可能与激活AKT 信号影响 Cleaved Caspase-3 表达有关。     

何首乌6种成分对人孕烷X受体介导的CYP3A4的调控作用北大核心CSCD

该文探讨何首乌中6种化学成分(没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素)对人孕烷X受体(humanpregnant X receptor,PXR)介导的CYP3A4的转录调控作用。利用前期建立的PXR介导的CYP3A4药物诱导快速筛选技术,采用MTS细胞检测方法考察化学成分对细胞活性的影响,计算IC50;利用双荧光素酶报告基因系统,将PXR表达载体和含CYP3A4转录调控区的报告基因载体共转染HepG2细胞,10μmol·L-1利福平为阳性对照,10μmol·L-1酮康唑为阴性对照,用何首乌中6种成分--没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素(5,10,20μmol·L-1)分别处理24 h,进行双荧光素酶活性检测。结果表明,空载质粒pc DNA3. 1与p GL4. 17-CYP3A4共转染时没食子酸、白藜芦醇对CYP3A4的调控为抑制效应,槲皮素、山柰酚、木犀草素对CYP3A4产生诱导作用;pc DNA3. 14-PXR与p GL4. 17-CYP3A4共转染时,槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素均产生诱导效应。综上所述,6种成分对CYP3A4产生抑制或激活效应,PXR参与后,5种成分对CYP3A4产生诱导效应,其中3种成分的诱导效应具有显著性差异。该研究提示,在与何首乌联合用药时应注意潜在的药物相互作用,提高安全性和有效性。     

萱草花总黄酮改善肝细胞HL-7702氧化损伤的研究

目的研究萱草花总黄酮(HCTF)对氧化应激引起的肝细胞损伤的改善作用,并探讨其作用机制。方法采用CCl4诱导小鼠肝氧化损伤和H2O2诱导体外肝细胞损伤2种模型,HCTF给药后检测肝组织抗氧化指标,HE染色观察肝组织形态学改变,应用MTT法测定肝细胞存活率,ELISA法检测肝细胞中丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blotting法检测LXRα、FAS m RNA及蛋白的表达。结果 HCTF可以明显降低CCl4肝损伤小鼠肝组织内MDA水平,提高肝组织GSH-Px和SOD活性,保护肝组织;HCTF可以明显提高H_2O_2损伤的HL-7702细胞存活率(P0.01):使HL-7702细胞中MDA水平降低(P0.05、0.01),GSH-Px和SOD活性升高(P0.01),ALT、LDH、AST活性降低(P0.05、0.01),LXRα和FAS m RNA及蛋白的表达水平下降(P0.05、0.01)。结论 HCTF可能通过提高机体抗氧化能力而起到对CCl_4肝损伤小鼠的保护作用;同时可能通过降低氧化反应、减少LXRa和FAS的转录及蛋白表达,从而抑制H_2O_2对HL-7702细胞的损伤。     

人孕烷X受体介导的UGT1A1报告基因模型的建立及初步应用

 目的 建立基于人孕烷X受体（human pregnane X receptor,hPXR）的UGT1A1的报告基因模型,研究中药提取物通过人孕烷X受体途径对UGT1A1的潜在诱导能力。方法 以人基因组DNA为模板扩增UGT1A1的远端和近端启动子,连接到pGL3载体上,构建pGL3-PXRE重组质粒,并与人孕烷X受体表达质粒共转染HepG2细胞,从而建立报告基因模型。运用该模型考察了9种常见中药对人孕烷X受体的激活作用,即对UGT1A1的潜在诱导作用。结果 将UGT1A1启动子片段克隆到pGL3载体上,构建了pGL3-PXRE重组质粒,成功构建了报告基因模型,并考察了多种常见中药的提取物通过人孕烷X受体途径对UGT1A1的诱导作用。结论 成功地建立了基于人孕烷X受体的UGT1A1的报告基因模型,为人孕烷X受体激活剂的体外筛选提供了一种有效的方法。     

士的宁对多巴胺能神经元的保护作用

目的:选择2种神经毒物1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)和谷氨酸在体外诱导多巴胺能神经元退行性损伤,并检测士的宁对此细胞的药理毒理作用,及对其退行性损伤的协同作用或拮抗作用。方法:采用孕14 d小鼠,取出胎鼠中脑,分离出多巴胺能神经元,调整细胞密度7.5×105/mL,于5%CO2,37℃,100%湿度条件培养,于体外培养的第10天分别加入士的宁0.1,1,5,10μmol.L-1,MPP+10μmol.L-1,谷氨酸500μmol.L-1作用48 h,第12天染色。选取细胞数,神经元树突长度和数量作为观察指标,并做出分析。结果:士的宁对未损伤的多巴胺能神经元在48 h培养过程中无毒性影响。在10μmol.L-1士的宁作用下,多巴胺能神经元数量明显高于对照组(P<0.05);在5～10μmol.L-1士的宁作用下,树突数量与对照组相比也有明显提高(P<0.05)。士的宁(10μmol.L-1)和MPP+共同培养48 h后,细胞计数明显高于MPP+单独培养组(P<0.05);这种保护作用更为明显的表现在细胞形态学变化方面,在10μmol.L-1的士的宁剂量下,神经树突长度明显高于MPP+单独培养组(P<0.05);神经树突的数量在5μmol.L-1士的宁作用下与MPP+单独培养组相比有明显增加(P<0.05)。在对谷氨酸(500μmol.L-1)诱导的神经元损伤模型中,与谷氨酸组相比,10μmol.L-1的士的宁对所有的观察指标的数值都有递增影响(P<0.05)。结论:首次证实士的宁具有可在体外刺激中脑分离出的多巴胺能神经元的生长,并且对此神经元退行性损伤有保护作用。     

人参皂苷Rg1诱导人肝HL-7702细胞糖皮质激素受体报告基因表达的作用

目的探讨人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,G-Rg1)对人肝HL-7702细胞糖皮质激素受体(GR)的调节作用。方法将含有糖皮质激素受体反应元件(GRE)的荧光素酶报告基因的表达质粒载体pGRE-tk-LUC与内参照基因载体质粒pRL-SV40,通过脂质体介导瞬时转染至人肝HL-7702细胞中,利用双荧光素酶报告基因检测系统,观察报告基因的表达变化;利用Western blotting方法检测药物对细胞GR蛋白表达的影响。结果G-Rg1与地塞米松均可诱导pGRF-tk-LUC报告基因表达,且呈剂量依赖性,而且这种诱导作用可以被糖皮质激素受体阻断剂RU486(Mifepristone)所阻断,G-Rg1对细胞GR蛋白表达有显著的抑制作用。结论G-Rg1在体外能够表现出一些类似糖皮质激素样的生物活性,可能是GR的配体。     

β-细辛醚与冰片对Aβ1-42损伤PC12细胞自噬相关蛋白LC3和线粒体功能的影响

目的 观察β-细辛醚与冰片对β-淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）诱导PC12细胞损伤自噬相关蛋白轻链3（LC3）的作用,以及对细胞内钙离子浓度 和线粒体膜电位（MMP）的影响。方法 体外培养PC12细胞,β-细辛醚与冰片预处理,用终浓度为1.25 μmol·L-1 Aβ1-42诱导细胞产生自噬,光镜观察细胞形态,3-（4, 5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法（MTT法）检测细胞活力,流式细胞仪检测LC3蛋白的表达、细胞内钙离子浓度及MMP,电镜观察细胞超微结构。结果 与模 型组比较,β-细辛醚组、冰片组及其β-细辛醚+冰片组能提高细胞活力（P＜ 0.05）,升高LC3蛋白的含量（P＜ 0.05）,降低细胞内钙离子浓度及升高MMP（P＜ 0.05）, 减少自噬体,保护线粒体形态结构。结论 β-细辛醚与冰片及其配伍对Aβ1-42诱导的细胞损伤有保护作用。     

丹参酮ⅡA 促进氧糖剥夺再灌注神经干细胞的增殖作用

目的观察丹参酮ⅡA 对原代培养的小鼠神经干细胞（NSCs）在氧糖剥夺再灌注（OGD/R）损伤条件下增殖 作用的影响。方法对原代小鼠NSCs 进行培养、鉴定;采用CCK-8 法测定细胞活力;通过检测神经球细胞 直径来观察NSCs 的增殖情况;对OGD/R 损伤条件进行筛选,建立OGD/R NSCs 模型。结果与溶剂对照组相 比,0.03、0.1、0.3、1、3、10、30 μmol·L-1 丹参酮ⅡA 干预48 h后,NSCs 的细胞活力显著提高（P＜0.01）; 0.3、1、3 μmol·L-1 丹参酮ⅡA 干预48 h 后,NSCs 神经球细胞透光性良好,神经球细胞直径明显增大（P＜ 0.05,P＜0.01）。NSCs 糖氧剥夺4 h 再灌注后的细胞活力介于40%~60%之间,故选择OGD/R（4 h/20 h）作为 NSCs 的OGD/R 损伤条件。与溶剂对照组比较,模型组NSCs 神经球细胞直径明显缩小、细胞活力明显下降 （P＜0.01）;与模型组比较,3 μmol·L-1 丹参酮ⅡA 干预48 h后,NSCs 神经球细胞直径明显增大、细胞活力明 显升高（P＜0.01）。结论丹参酮ⅡA 可促进正常条件及OGD/R 损伤条件下NSCs 的增殖及其细胞活力,丹参 酮ⅡA 对脑缺血损伤的保护作用机制值得进一步探讨。     

7种中药提取物对PXR介导的CYP3A4 转录调节作用

目的:观察7种中药的粗提取物能否通过活化人孕烷X受体(PXR)诱导CYP3A4的转录表达.方法:采用浸提法和回流法制备中药的粗提取物.用PXR依赖的瞬时转染报告基因试验检测7种中药粗提取物的诱导作用.结果:菊花、枸杞子、丹参水提取物,菊花、山楂、金银花、山药、丹参醇提取物等均能通过活化PXR诱导HepG2细胞CYP3A4基因的转录表达.结论:菊花水提取物、枸杞子水提取物、丹参水提取物、菊花醇提取物、山楂醇提取物、枸杞子醇提取物、金银花醇提取物、山药醇提取物和丹参醇提取物等7种中药的提取物均能诱导CYP3A4基因的转录表达,其作用机制是通过活化PXR.菊花、山楂、枸杞子、金银花、山药和丹参的摄入可能影响其他CYP3A4底物在体内的代谢.     

京尼平苷酸对ANIT诱导胆汁淤积大鼠的酮洛芬肝代谢和胆汁排泄的影响及机制探究

目的探讨京尼平苷酸(GPA)对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导胆汁淤积模型大鼠的酮洛芬(Ketoprofen,KP)及结合型代谢产物酮洛芬葡萄糖醛酸复合物(KPG)的肝代谢和胆汁排泄的影响及其可能机制。方法将80只SD大鼠随机分为5组,依次为灌胃100、50、25 mg·kg~(-1)·d~(-1)的GPA高、中、低剂量组,ANIT模型组以及空白对照组,给药10 d;在第8天给药后,除空白对照组外,所有大鼠一次性灌胃65 mg·kg~(-1)ANIT诱导肝内胆汁淤积模型;末次给药后,各组静脉注射KP 20 mg·kg~(-1),以HPLC-UV法测定大鼠血浆、胆汁中KP及其酮洛芬葡萄糖醛酸结合物(S-KPG和R-KPG)含量。检测各组大鼠血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TB)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肝组织中组成型雄甾烷受体(CAR)、孕烷X受体(PXR)以及尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1(Ugt1a1)mRNA的转录。蛋白质印迹法(WB)检测CAR、PXR、Ugt1a1的蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,ANIT模型组大鼠KPG的累计胆汁排泄量显著降低(P 0.01);与ANIT模型组比较,100和50 mg·kg~(-1)·d-1GPA干预组大鼠KPG的累计胆汁排泄量显著提高(P 0.01)。与空白对照组比较,ANIT模型组大鼠血浆中KP曲线下面积AUC0-∞显著增加(P 0.01)、消除半衰期T1/2显著延长(P 0.01);与ANIT模型组比较,100,50 mg·kg~(-1)·d~(-1)GPA干预组大鼠血浆中KP的曲线下面积AUC0-∞显著降低(P 0.01)、消除半衰期T1/2显著缩短(P 0.01)。与ANIT模型组比较,100和50 mg·kg~(-1)·d~(-1)GPA干预组血清中TB、GPT、GOT和TB的含量明显下降(P 0.01),25 mg·kg~(-1)·d~(-1)GPA干预组降低不明显,无统计学意义。GPA能显著增加CAR、PXR、Ugt1a1 mRNA转录和蛋白表达量,与剂量呈正相关。结论 ANIT诱导的胆汁淤积大鼠KPG胆排泄降低,可引起KP的药动学参数的变化。GPA可改善胆汁淤积大鼠对酮洛芬肝代谢和胆汁排泄的影响,有可能是通过调节CAR和PXR对Ugt1a1基因转录和蛋白表达来实现的。