目的 观察肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2在人肝细胞癌细胞中的表达及下调后对增殖生存的影响并探讨其机制。方法 以蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时定量逆转录聚合酶链反应法（qRT-PCR）检测肝细胞癌细胞株中肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达，并采用小干扰RNA转染Hep3B细胞株对肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达进行下调，Western blot和qRT-PCR检测转染效率、增殖凋亡相关基因表达；甲基噻唑基四唑检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期及凋亡。结果 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2蛋白及mRNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、HepG2、MHCC97H中均有表达，在Hep3B细胞株中表达量最高（F=5.742，P <0.01；F=3.452，P <0.05）；与空白对照（siNC）组比较，si肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2组中P-P21及磷酸化的蛋白激酶B蛋白表达下调（t =8.462，P <0.01；t =9.742，P <0.01），P21、蛋白激酶B及Cleaved Capase-9蛋白表达上调（t =12.247，P < 0.001；t =6.452，P <0.01；t =11.634，P <0.001；t =12.273，P < 0.001）；与siNC组比较，在72 h和96 h，si肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达下调后Hep3B细胞增殖能力下降（t =8.176，P <0.01；t =2.246，P <0.05），Hep3B停留在G1期比例增高，G2及S期比例减少（t =4.23，P <0.05；t =2.13，P <0.05；t =5.72，P <0.05），凋亡率升高（t =8.633，P <0.01）。结论 下调肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达通过P21磷酸化及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制肝细胞癌细胞增值及生存，可作为肝细胞癌治疗的靶向候选基因。
相似文献目的 探讨转染白细胞介素18（IL18）基因对大鼠C6胶质瘤细胞顺铂化疗敏感性的影响及可能的作用机制。方法 体外培养转染IL18基因的C6/IL18细胞株和未转染的C6细胞系，MTT法观察顺铂对两类肿瘤细胞的抑制率；流式细胞术检测顺铂作用后转染及未转染肿瘤细胞的凋亡率；反转录PCR及蛋白质印迹法（Western blot）检测转染细胞内多药耐药基因（Mdr1）和拓扑异构酶TopoⅡα的mRNA水平和蛋白质水平的表达变化。 结果 顺铂对转染IL18基因的胶质瘤细胞株的抑制率明显高于未转染细胞（P <0.05），半数抑制浓度分别为29.66μg/ml和55.49μg/ml；流式细胞术显示顺铂作用后的转染细胞凋亡增多（P <0.05）；反转录PCR及Western blot显示转染细胞的Mdr1基因表达显著下降，TopoⅡα基因表达无明显变化。结论 转染IL18基因能够下调多药耐药基因Mdr1的表达，增强顺铂对大鼠C6胶质瘤细胞的毒作用。
相似文献目的 探讨核转录因子κBp65（NF-κBp65）沉默对鼻咽癌的生物学作用。方法 构建NF-κBp65特异性小干扰核糖核酸（siRNA）质粒表达载体（pGPU6/RFP/Neo-NF-κBp65）和阴性对照质粒表达载体（pGPU6/RFP/Neo-NC）。采用非脂质体脂类转染剂将重组质粒表达载体转入人鼻咽癌CNE2细胞,建立NF-κ Bp65沉默的稳定转染CNE2细胞株（NF-κBp65沉默组）和阴性对照细胞株（阴性对照组）;蛋白质印迹法（Western blot）分析癌细胞中NF-κBp65基因的表达水平,MTT实验及流式细胞术分析癌细胞的增殖能力和细胞周期变化;复制裸鼠移植瘤模型,分析沉默NF-κBp65对癌细胞成瘤性的影响。结果 成功获得稳定转染CNE2细胞株,NF-κBp65沉默组细胞中NF-κBp65蛋白表达水平降低;NF-κBp65沉默后,CNE2细胞周期阻滞于S期,增殖速度减慢;NF-κBp65沉默组裸鼠移植瘤生长慢,重量轻,与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义（F =14.386,P <0.05）。结论 NF-κBp65沉默能降低鼻咽癌CNE2细胞的恶性生物学行为。
相似文献目的 分析小剂量低分子肝素联合硫酸镁治疗重度子痫前期对血清和胎盘中病情相关分子的调节作用。方法 选取2012年7月-2014年7月于本院收治的重度子痫前期患者68例作为研究对象，随机分为观察组及对照组。对照组患者接受单纯硫酸镁治疗，观察组患者接受小剂量低分子肝素联合硫酸镁治疗，对比两组患者的血清及胎盘组织中激肽释放酶表达、妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）、妊娠特异性β1糖蛋白（SPI）、胎盘生长因子（PLGF）、人胎盘催乳素（HPL）水平、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）及E选择素水平等差异。结果 观察组患者的治疗后血清及胎盘组织中激肽酶表达量均高于对照组患者，差异有统计学意义（P <0.05）；血清及胎盘组织中PAPP-A水平低于对照组患者，差异有统计学意义（P <0.05）；血清及胎盘组织中，TGF-β1水平高于对照组，VCAM-1及E选择素水平低于对照组患者，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 重度子痫前期患者接受小剂量低分子肝素联合硫酸镁治疗，可以促进内源性激肽释放酶表达，降低妊娠期高血压相关预测因子水平，减弱细胞滋养细胞的浸润能力。
相似文献目的 观察麒麟丸联合人绝经期促性腺激素（HMG）治疗未破裂卵泡黄素化综合征（LUFS）的临床疗效。方法 将门诊69例未破裂卵泡黄素化综合征患者，随机分为治疗组（A组35例）和对照组（B组34例），两组用HMG注射治疗，A组加以口服麒麟丸联合治疗。观察比较两组治疗后排卵率、妊娠率和不同时间血清黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）的差异。结果 两组排卵率（76.1% vs 59.8%）、妊娠率（40.0% vs 17.6%）比较，差异有统计学意义（P <0.05）。A组卵泡成熟日血LH和E2值、排卵后1周血P值均显著高于B组（P <0.05）。结论 麒麟丸联合HMG治疗LUFS可明显提高排卵率和妊娠率。
相似文献目的 探讨microRNA-10b（miR-10b）及其靶基因同源异性盒基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及转染miR-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法 分析HOXD10基因在3种肝癌细胞株Huh7、HepG2、SMMC-7721中的基础表达量,筛选出HOXD10基础表达量高的HepG2作为后续研究对象。设计合成外源性miR-10b序列,用脂质体瞬时转染肝癌细胞株,设置miR-10b转染组、无关序列转染组（阴性对照组）和未处理组（对照组）。用RT-PCR及Western blot检测肝癌细胞转染miR-10b后HOXD10基因及蛋白表达量的变化,细胞侵袭实验研究转染miR-10b对肝癌细胞侵袭能力。结果 在基因水平和Western blot分析蛋白水平HOXD10基因表达量2-ΔΔCT分别是（1.24±0.23）、（1.00±0.02）,P >0.05差异无统计学意义。在蛋白分析HepG2细胞灰度计算值是值分别是653.492和1 968.742,蛋白水平表达降低。HOXD10基因在肝癌细胞株HepG2的表达量显著高于Huh7和SMMC-7721;miR-10b成功转染HepG2后,HOXD10基因表达水平与对照组比较无明显变化,但HOXD10蛋白表达量与对照组比较下降及侵袭性也增强。结论 miR-10b可能通过抑制靶基因HOXD10表达发挥作用,促进肝癌细胞的侵袭。
相似文献目的 原子力显微镜（AFM）观察雌激素受体（ER）表达的乳腺癌细胞膜的表面形态变化，为亚细胞水平下探索肿瘤发生机制、发展过程和细胞水平诊断和早期诊断提供新方法，并为探索肿瘤的治疗新途径提供依据。方法 利用原子力显微镜分别观察雌激素受体抗体阳性表达和阴性表达的乳腺癌细胞膜表面形态特征并对特征参数平均粗糙度、平均峰高度、平均凹陷深度和表面积差值进行定量测量，采用统计学方法进行差异性分析。结果 雌激素受体抗体阳性表达组的乳腺癌细胞形态和阴性表达组相比具有明显的不同，阳性表达组乳腺癌细胞膜表面凸凹不平，可见“细密尖锐”的“麦芒样”隆起，而阴性表达组的乳腺癌细胞膜呈“粗大饱满”的“沟渠样”隆起。两组细胞在平均粗糙度、平均峰高度、平均凹陷深度和表面积差值方面有明显差异（P <0.05）。结论 细胞膜表面结构因细胞的功能状态的不同而不相同。相同肿瘤细胞在不同功能状态下，其细胞膜在形态结构上存在很大的差异，这为探讨肿瘤的发生机制、发展过程和早期诊断及细胞诊断提供依据。
相似文献目的 研究急性髓细胞白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因的表达以及在预后判断中的意义。方法 构建实时定量PCR检测BCRP基因表达的技术，定量检测20例初治组AML患者、20例完全缓解组AML患者及20例难治复发组AML患者BCRP基因的表达水平，分析其在AML患者和非血液系统恶性肿瘤患者中的差异及与临床疗效的关系。结果 急性髓系白血病患者中BCRP的表达高于对照组（P <0.01），初治组、完全缓解组、难治复发组的BCRP表达均存在差异（P <0.01），其中难治复发组表达最高，初治组次之，完全缓解组最低。结论 BCRP基因在急性髓系白血病患者中表达增高，BCRP的表达水平可能是疾病进展的重要标志，可能是AML的独立危险因素。
相似文献目的 探讨乙型肝炎病毒蛋白诱导白细胞介素32（IL-32）的表达以及临床意义。方法 用Lipofectamine 2000 TM介导转染HepG2细胞。转染48 h后,采用聚合酶链反应（RT-PCR）,蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测HepG2细胞中IL-32的mRNA及蛋白的表达量。结果 RT-PCR结果显示转染HBV的HepG2细胞中IL-32 mRNA的表达量比转染空载体（未转染）的细胞中IL-32 mRNA高2.3倍;Western blot结果显示与空载体转染的HepG2细胞比较,转染pIRES2-HBV-EGFP的HepG2细胞中IL-32蛋白质表达增高,且差异有统计学意义（P <0.05）。结论 HBV促进IL-32蛋白的表达,从而证实乙型肝炎的严重程度与IL-32的表达有关。
相似文献目的 探讨嗜铬粒蛋白A（CgA）与去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的相关性。方法 选取2011年1月-2012年8月于川北医学院附属医院经前列腺穿刺活检证实为前列腺癌的75例组织标本,以免疫组织化学方法检测CgA在穿刺标本中的表达情况,分析CgA表达率与前列腺癌各临床病理参数的关系,并比较CgA表达阳性组与阴性组发展至CRPC的差异。结果 75例前列腺癌穿刺标本中,36例CgA表达阳性（48.0%）。CgA的表达与PSA水平、Gleason评分以及临床分期有关（P <0.05）,CgA阳性组发展至CRPC的发生率明显高于CgA阴性组（P <0.01）。结论 CgA与CRPC的发生密切相关。监测CgA的表达情况,对前列腺癌的内分泌治疗效果的预测可能有一定的临床指导意义。
相似文献临床治疗靶点的可能性。方法实时荧光定量PCR 和免疫印迹法检测小细胞肺癌细胞H69 和多药耐药细胞株H69AR中
HOXA5 mRNA和蛋白水平,采用表达质粒和siRNA升高或降低HOXA5基因表达水平,CCK8法分析细胞对小细胞肺癌常用
化疗药物顺铂（Cisplatin,DDP）和足叶乙甙（Etoposide,VP-16）敏感性的变化。结果H69细胞中HOXA5 mRNA水平是耐药细
胞株H69AR中的8.99倍。HOXA5 siRNA显著降低H69细胞中HOXA5的表达水平,降低了H69细胞对DDP和VP-16的敏感
性。将HOXA5表达质粒稳定转染入H69AR细胞,建立稳定转染细胞株,细胞对DDP和VP-16敏感性增加。结论HOXA5可
能参与了小细胞肺癌耐药过程,可能会成为小细胞肺癌临床治疗的新靶点。
相似文献
目的 研究孟鲁司特联合强的松对博莱霉素诱导的肺纤维化（PF）大鼠模型的干预作用。方法 将60只Wistar大鼠随机分成5组,即空白对照组、模型对照组、孟鲁司特（MK）组、强的松组及联合干预组。空白对照组以生理盐水0.2 ml注入气管内,其余4组以气管内滴注博莱霉素（5 mg/kg）建立PF模型。分别在造模后第7天和第28天5组各处死6只大鼠取材。采用苏木精-伊红和Masson染色法观察肺组织纤维化改变,酶联免疫吸附试验检测血清结缔生长因子（CTGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）的水平,免疫组织化学法染色检测肺组织中CTGF和TGF-β1的表达水平。结果 联合干预组和模型对照组比较,第7天肺泡炎评分为（1.63±0.16）和（2.73±0.15）,第28天肺间质纤维评分（1.66±0.10）和（2.76±0.13）分,差异有统计学意义（P <0.01）。第7天,各组肺组织TGF-β1表达水平均低于模型对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。第28天,各组肺组织CTGF、TGF-β1表达水平均低于模型对照组,差异有统计学意义（P <0.01）。第7天、第28天血清中CTGF和TGF-β1水平均低于模型对照组,差异有统计学意义（P <0.01）。结论 MK联合强的松更能显著减轻大鼠肺组织肺泡炎及PF程度,其机制与降低血清及组织中CTGF和TGF-β1的表达水平相关。
相似文献摘要：目的 观察酪酸梭菌（Cb）联合四联疗法治疗幽门螺杆菌（Hp）阳性胃溃疡的作用。方法 选取Hp阳性胃溃疡102例，采取随机双盲方法，将其分为观察组和对照组。前2周，观察组口服埃索美拉唑镁肠溶片+枸橼酸铋剂钾片+阿莫西林胶囊+左氧氟沙星片+酪酸梭菌活菌胶囊，对照组在上述四联疗法基础上加空白胶囊；后2周，停用抗生素和枸橼酸铋剂钾片。疗程结束后1个月，比较两组治疗有效率、Hp根除率、不良反应发生率。结果 观察组有效率为89.46%，对照组为76.00%，经χ2检验，差异无统计学意义（P >0.05）。观察组HP根除率为82.69%，对照组HP为64.00%，经χ2检验，差异有统计学意义（P <0.05）。观察组不良反应发生率为11.54%，对照组为18.00%，经χ2检验，差异无统计学意义（P >0.05）。结论 Cb联合四联疗法能够提高胃溃疡Hp根除率。
相似文献目的 探讨西妥昔单抗联合铂类化疗对人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤环氧化酶-2（COX-2）及基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的影响。方法 选择BALB/c裸鼠24只为研究对象,均复制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为西妥昔单抗组、顺铂组、西妥昔单抗联合顺铂组及对照组,各6只。对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.2 ml,西妥昔单抗组腹腔注射1 036 μg/ml西妥昔单抗注射液,顺铂组腹腔注射3μg/ml顺铂注射液,西妥昔单抗联合顺铂组腹腔注射1 036 μg/ml西妥昔单抗注射液和3 μg/ml顺铂注射液,连续4周后,脱颈处理裸鼠。比较瘤体生长情况、COX-2与MMP-7表达及信使核糖核酸（mRNA）表达。结果 西妥昔单抗组、顺铂组、西妥昔单抗联合顺铂组瘤体体积及瘤重均低于对照组（P <0.05）,西妥昔单抗联合顺铂组瘤体体积、瘤重低于西妥昔单抗组与顺铂组,抑瘤率高于西妥昔单抗组及顺铂组（P <0.05）;西妥昔单抗组、顺铂组、西妥昔单抗联合顺铂组裸鼠肿瘤组织COX-2、MMP-7及mRNA表达均低于对照组（P <0.05）,西妥昔单抗联合顺铂组裸鼠肿瘤组织COX-2、MMP-7表达及mRNA表达低于西妥昔单抗组、顺铂组（P <0.05）。结论 西妥昔单抗联合铂类化疗有助于抑制喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤增殖生长,可能与抑制肿瘤组织COX-2与MMP-7表达有关。
相似文献
目的 观察莪术醇联合氟尿嘧啶对胃癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法 将人胃癌细胞株BGC823接种于裸鼠皮下建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为对照组、莪术醇组、氟尿嘧啶组、联合用药组（莪术醇联合氟尿嘧啶）,记录各组的肿瘤体积和瘤重。应用荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、P27的表达。结果 对照组肿瘤体积和重量比其他3组升高（P <0.05）;联合用药组肿瘤体积和重量低于莪术醇组（P <0.05）;联合用药组肿瘤体积和重量与氟尿嘧啶组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。各实验组肿瘤组织中PCNA的表达均低于对照组（P <0.05）;与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组PCNA的表达降低（P <0.05）。各实验组移植瘤组织中P27的表达均高于对照组（P <0.05）;与莪术醇组比较,联合用药组P27的表达增强（P <0.05）;与氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27 mRNA的相对表达有升高趋势,但差异无统计学意义（P >0.05）。与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27蛋白阳性率升高（P <0.05）。结论 莪术醇联合氟尿嘧啶能抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能与调节PCNA、P27基因有关。
相似文献