肿瘤细胞来源的外泌体内容物在肿瘤发生发展中的作用

肿瘤发病机制复杂,早期诊断困难,病程进展快,严重威胁着人类生命安全,是当前亟待解决的医学难题.肿瘤细胞与周围细胞之间的信息传递与交流调控肿瘤的发生和发展.外泌体是细胞间信号传递的重要载体之一.各类细胞能够分泌形态、大小、含量和功能不同的细胞外囊泡.细胞外囊泡又可根据大小、来源和分离方法分为3 类:微囊泡、凋亡小体和外泌...     

乳腺癌病人循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的:探讨乳腺癌外周静脉血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)检测的临床意义.方法:收集女性乳腺癌病人60例,在新阶段治疗前采集病人外周静脉血,采用密度梯度离心法联合流式细胞术法检测CTCs,免疫组织化学法检测ER、PR、HER-2、p53、Ki-67表达.同期选取20名健康女性志愿者作为阴性对照组.结果:观察组CTCs阳性表达率为38.3% (23/60),对照组均未检出CTCs阳性表达,2组CTCs阳性表达差异有统计学意义(P<0.01).不同年龄、不同病理类型病人间CTCs阳性表达差异均无统计学意义(P>0.05);不同TNM分期病人CTCs阳性表达差异有统计学意义(P<0.01);转移性乳腺癌病人CTCs阳性表达明显高于非转移性病人(P<0.01).不同ER、PR、HER-2、Ki-67表达病人的CTCs阳性表达差异均无统计学意义(P>0.05),不同分子分型病人间的CTCs阳性表达差异亦无统计学意义(P>0.05).结论:CTCs与乳腺癌TNM分期及肿瘤细胞转移有关,对指导乳腺癌的诊断、治疗及预后判断有重要意义.     

血清外泌体Glypican-1在乳腺癌中的表达水平及临床应用价值

目的 探讨乳腺癌血清外泌体Glypican-1（GPC-1）的表达水平及其临床应用价值。方法 选择河北医科大学第四医院确诊的乳腺癌48例和乳腺良性占位18例,同期健康体检者17名作为健康对照组;采用聚乙二醇8 000沉淀法提取血清外泌体,使用透射电镜和蛋白印迹对外泌体形态和分子表型进行鉴定;Western blot检测各组血清外泌体GPC-1表达水平;采用受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线评价血清外泌体GPC-1对乳腺癌的诊断效能;以最佳截断值0.961将乳腺癌组分为GPC-1阳性组和GPC-1阴性组,分析其与临床特征的关系;采用Wilcoxon秩和检验分析乳腺癌组治疗前后血清外泌体GPC-1表达变化;以病理诊断为金标准,采用Kappa一致性检验评价血清外泌体GPC-1、血清肿瘤标志物、超声、钼靶射线四种诊断方法对乳腺癌的诊断价值。结果 乳腺癌组血清外泌体GPC-1表达水平［1.065(0.501)］高于乳腺良性占位组［0.652(0.117)］和健康对照组［0.625(0.139)］,差异有统计学意义（H=32.051,P＜0.05）;ROC曲线下面积为0.900（95%CI:0.833~0.967）,最佳截断值0.961,能够有效筛查乳腺癌患者;乳腺癌组中GPC-1阳性在不同TNM分期、淋巴结浸润和Ki-67高表达组间差异有统计学意义（P均＜0.05）;乳腺癌组治疗前血清外泌体GPC-1表达水平［1.065(0.501)］高于治疗20 d后血清外泌体GPC-1表达水平［0.844(0.195)］,差异有统计学意义（Z=856.0,P=0.006）;血清外泌体GPC-1检测方法的Kappa值为0.485>0.4,与病理检查比较一致性中等,且优于其他三种检测方法。结论 乳腺癌组血清外泌体GPC-1表达上调,且与多个不良临床特征相关,并在治疗后显著下降,具备作为乳腺癌诊断和治疗效果评价指标的潜力。     

外泌体在乳腺癌微环境中的研究进展

乳腺癌是影响女性健康的重大疾病.肿瘤微环境是肿瘤进展过程中的一群复杂且动态变化的细胞群和非细胞组分.目前,越来越多的证据表明乳腺癌微环境中的外泌体可通过调节乳腺癌细胞的增殖、上皮间充质转化、代谢、干性和耐药性从而参与乳腺癌的发生、发展和预后.本文将从乳腺癌微环境的构成开始,总结目前外泌体在乳腺癌微环境的一系列进展,重点...     

外泌体在肿瘤中的作用及其临床应用

外泌体是内含多种生物学活性物质的小细胞囊泡,几乎参与肿瘤发生发展的全过程,与肿瘤的进展密切相关。外泌体可作为载体进行靶向给药,通过靶向抑制外泌体的释放治疗肿瘤,基于外泌体研发肿瘤免疫佐剂成为了一种新型、高效的肿瘤治疗方式。本文对外泌体的产生及外泌体在调控肿瘤发生中所发挥的功能进行阐述,分析外泌体与肿瘤微环境的关系,评估外泌体在临床治疗肿瘤方面的潜力。     

外泌体在乳腺癌发生发展中的作用

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,严重威胁着女性的健康和生命.根据世界卫生组织国际癌症研究机构发布的2020年全球最新癌症负担数据显示,全球乳腺癌新发病例数正快速增长,并已取代肺癌成为全球第一大癌症[1].乳腺癌的发生和发展是由多种因素共同参与的病理性过程,包括癌基因的异常激活、抑癌基因功能的丧失、信号通路的异常激活或失活等.除了乳腺癌细胞本身的生物学活动改变外,癌细胞和机体其他细胞之间的信息交流和物质交换也是参与调节乳腺癌发生发展的重要因素[2].     

循环肿瘤细胞和外泌体mi R-21检测在肺磨玻璃样 病变诊断中的应用

目的：评价循环肿瘤细胞（CTC）联合外泌体miR-21检测方法用于肺磨玻璃样病变（GGO）临床诊断的实用性和可行性,为GGO的诊断提供依据。方法：按照GGO诊断标准和排除标准筛选出70例患者,均进行胸腔镜下肺段切除,术后病理诊断为肺癌的患者为病例组（n=24）,术后病理诊断为良性病变的患者为对照组（n=46）。术前所有患者通过免疫磁珠负向富集方法从外周血中捕获CTC,采用肿瘤特异性叶酸配体-寡核苷酸偶合物标记捕获的CTC,同时检测同一标本的外泌体,纯化鉴定外泌体,检测患者血清外泌体miR-21表达水平。利用受试者工作特征（ROC）曲线评价CTC和外泌体miR-21对GGO患者的诊断效能。结果：病例组患者CTC阳性率高于对照组（P<0.05）。病例组和对照组不同病理类型患者CTC阳性率比较差异无统计学意义（P>0.05）。纯化样品具备外泌体特征。病例组患者血清外泌体miR-21表达水平高于对照组（P<0.05）。CTC的ROC曲线下面积（AUC）为0.891,外泌体miR-21的AUC为0.711,均具有较好的特异性。二者联合检测的灵敏度和特异度分别为85.64%和86.79%。结论：CTC结合外泌体miR-21检测可以应用于早期肺癌的临床诊断,其灵敏度和特异度较高。     

恶性肿瘤细胞来源的外泌体调控自然杀伤细胞活性的相关机制

外泌体是一种细胞分泌的胞外小囊泡,在细胞之间发挥着传递信息的作用,通过物质的转运来调节各种细胞的生理和病理功能.有研究表明,外泌体直接或通过中间细胞作用于恶性肿瘤细胞,进而在恶性肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用.近年来,自然杀伤(natural killer,NK)细胞与肿瘤细胞源性外泌体(tumor-derived ...     

外泌体在乳腺癌中的研究进展

外泌体是一类由自体细胞分泌的纳米级囊泡样小体,参与细胞及内环境之间的物质运输和信号传递。外泌体可以通过在肿瘤细胞和细胞外基质间运输细胞内的核酸、蛋白和脂类等物质,影响肿瘤的发生和发展,甚至可以影响肿瘤的治疗。不同类型的肿瘤细胞分泌的外泌体,在肿瘤的发生过程中发挥着不同的作用。近来,与乳腺癌相关的外泌体逐渐成为一项新的研究热点,并发现乳腺癌细胞可以刺激分泌某些特定类型的外泌体,并有望成为早期乳腺癌筛查的新型生物学标志。外泌体传递的核酸、蛋白质等物质在乳腺癌的发生、转移和治疗耐药中起到了重要作用。同时外泌体也可以将抗肿瘤药物转运出乳腺癌细胞导致耐药。但外泌体作为肿瘤药物载体时,表现出极低的免疫原性和生物毒性,将为今后的肿瘤靶向治疗提供可行的技术基础。     

乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞相关性探讨

目的探讨乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的相关性。方法抽取116例乳腺癌及20例乳腺纤维腺瘤患者外周静脉血5 ml,利用密度梯度离心法富集单个核细胞,通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)19 mRNA表达阳性的CTC,分析乳腺癌分子分型与CTC的关系。结果 116例乳腺癌患者中CTC阳性率为31%(36/116),20例乳腺纤维腺瘤患者均未检测出CTC。36例CTC阳性患者的中位CTC水平为1.65(1.18,2.87)个MCF-7细胞/2μg总RNA;116例乳腺癌患者中各分子亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)所占比例分别为62.1%(72/116)、17.2%(20/116)、20.7%(24/116);各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性率分别为27.8%(20/72)、35%(7/20)、37.5%(9/24),差异无统计学意义(P=0.615),各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性患者的中位CTC水平分别为2.1(1.18,3.9)、1.37(1.12,2.12)、1.53(1.32,2.64)个MCF-7细胞/2μg总RNA,差异有统计学意义(P=0.046)。结论乳腺癌各分子亚型间CK-19 mR-NA阳性CTC水平存在差异,提示各亚型间临床异质性可能与患者CTC水平相关。     

循环肿瘤细胞在晚期食管鳞癌患者疗效评估中的临床价值*

目的 探究循环肿瘤细胞（CTC）在评估晚期食管鳞癌患者同步放化疗疗效的临床应用。方法 选取2015年12月31日—2016年12月31日安徽医科大学第一附属医院肿瘤放疗科的食管鳞癌晚期患者（Ⅲ、Ⅳ期）38例,予以50?Gy的三维适行放疗联合TP方案（紫杉醇135?mg/m2;顺铂25?mg/m2）化疗,在放化疗前采集患者的外周血检测CTC,并对患者进行2年密切随访,运用t检验,Z检验分析CTC值变化,Kaplan-Meier方法及Log-rank χ2检验分析患者CTC值与生存率的关系,并运用Cox回归模型进行多因素分析。结果 食管鳞癌患者同步放化疗后肿瘤直径较治疗前明显减小,同步放化疗前后CTC差值（dCTC）、CEA的差值（dCEA）、CA199的差值（dCA199）、放疗前CA125值对患者预后有影响,dCTC和放疗前CA125值是评估入组患者预后的独立影响因素。结论 对食管癌同步放化疗的患者,放疗前后CTC的差值,放疗前CA125值相比较放疗前CTC、CEA及CA199值,能更好地评估患者的预后。     

新一代肿瘤标志物循环肿瘤细胞分型在宫颈癌诊断中的临床意义

目的 探究宫颈癌患者外周血中循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）各亚型和循环肿瘤微栓（circulating tumor microemboli,CTM）的分布情况,分析CTC/CTM与肿瘤标志物SCC-Ag、CA125、CA199表达水平的相关性。 方法 收集32例初治宫颈癌患者的肘静脉血,采用差相富集-肿瘤标志物免疫荧光染色-荧光原位杂交技术检测CTC/CTM,采用电化学发光免疫分析法检测血清SCC-Ag、CA125、CA199的表达水平。并分析CTC/CTM与病理特征关系和血清肿瘤标志物的相关性。 结果 32例初治宫颈癌患者中,CTC阳性29例（阳性率为90.6%）,CTM阳性9例（阳性率为28.1%）。不同淋巴结转移情况宫颈癌患者CTC阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。不同临床分期和淋巴结转移情况宫颈癌患者CTM阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。血清CA125阳性28例（阳性率为87.5%）,CA199阳性28例（阳性率为87.5%）,SCC-Ag阳性24例（阳性率为75.0%）。CTC、CTM与血清CA125、CA199和SCC-Ag表达水平无相关性（P＞0.05）。 结论 CTC/CTM监测可作为宫颈癌病情进展的重要指标。     

乳腺癌外周血循环肿瘤细胞变化与新辅助化疗效果的关系

目的 探讨乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)变化情况与新辅助化疗(neoadjuvant or primary chemotherapy,NCT)疗效的关系.方法 抽取70例乳腺癌患者NCT前后健侧上肢静脉血5mL,利用密度梯度离心法富集血标本中单个核细胞,通过荧光定量RT-PCR技术检测所获得单个核细胞中细胞角蛋白-19(cytokeratin-19,CK-19)阳性的CTC数目.结果 NCT前外周血CTC检出率为24.29％ (17/70),与患者年龄(P =0.008)及HER-2(P =0.022)表达情况有关.根据NCT前后CTC检测情况,将患者分为阳性-阳性、阳性-阴性、阴性-阳性及阴性-阴性4组,以RECIST标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67％ (2/3)、78.57％ (11/14)、0(0/4)和71.43％ (35/49),差异具有统计学意义(P=0.023);以Miller-Payne标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67％(2/3)、71.43％ (10/14)、0(0/4)和69.39％ (34/49),差异具有统计学意义(P=0.043).结论 NCT前后CTC的变化情况与疗效有一定关系,CTC可作为评估NCT疗效的潜在预测指标.     

实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:比较运用实时荧光定量PCR法联合不同生物标志物细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)?乳珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)?小黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床价值?方法:运用实时荧光定量PCR法检测人乳腺癌细胞株MCF-7中的生物标志物CK19?hMAM?SBEM的表达情况,对20例健康志愿者和20例乳腺良性疾病患者(对照组人群)进行检测以确定CK19?hMAM?SBEM在外周血中的基础表达水平,检测94例可手术乳腺癌患者外周血中CK19?hMAM?SBEM表达情况?结果:人乳腺癌细胞株MCF-7中CK19?hMAM?SBEM均有表达,Ct值分别为13.87?34.47?20.14;40例对照组人群中有1例表达CK19,另有1例表达hMAM,未检测到SBEM表达;94例可手术乳腺癌患者中CK19表达率49%?hMAM表达率34%?SBEM表达率13%,联合CK19?hMAM?SBEM阳性率为56%?结论:运用多标志物(CK19?hMAM?SBEM)联合的实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血CTCs具有较高的敏感性,同时特异性并不降低?     

循环肿瘤细胞在可手术乳腺癌患者中的检出率及特征分析

目的：探讨循环肿瘤细胞（ CTCs ）在可手术乳腺癌患者外周血中的水平及与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法收集T2～4 N0～3 M0可手术乳腺癌患者126例。抽取入组患者7.5 mL外周血,使用CellSearch系统检测CTCs。分析CTCs与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果在126例患者中,有9例患者检测到CTCs,检出率为7.1％。 CTCs阳性组的Ki67为（51±20）％,CTCs阴性组的Ki67为（33±23）％（ P＝0.04）。可手术乳腺癌患者外周血检出CTCs与患者年龄、月经状态、肿块大小、淋巴结状态、AJCC分期、病理类型、病理学分级、ER、PR、HER2状态以及分子分型无关。结论7.1％的可手术乳腺癌患者检测到CTCs,CTCs与Ki67相关。     

血清CTC联合临床特征对乳腺癌新辅助治疗效果的预测价值

目的 探讨血清循环肿瘤细胞（CTC）联合临床特征对乳腺癌新辅助治疗效果的影响因素分析。方法 回顾性分析2019年4月—2022年4月甘肃省妇幼保健院收治的80例乳腺癌患者的临床资料,根据患者治疗效果分为pCR获得组30例和p CR未获得组50例。比较两组的年龄、体质量指数（BMI）、绝经状态、哺乳史、糖尿病史、高血压史、乳腺疾病史、家族史、肿瘤大小、T分期、N分期、临床分期、组织学分级、腋窝淋巴结状态、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2(HER-2）、细胞增殖指数Ki-67、分子分型、CTC等临床资料。采用非条件Logistic逐步回归分析乳腺癌患者新辅助治疗效果的影响因素,分析血清CTC联合临床特征预测乳腺癌患者新辅助治疗效果的价值。结果 pCR获得组ER阴性、PR阴性、HER-2阳性、Ki-67高表达、HER-2过表达型、CTC阴性患者的占比高于pCR未获得组（P<0.05）。非条件Logistic逐步回归分析结果显示,ER阴性[■=3.113(95%CI:1.524,6.359）]、PR阴性[■=3.242(95%CI:1.431,7.345）]、...     

转移性乳腺癌上皮特异性细胞粘附分子(EpCAM)mRNA阳性循环肿瘤细胞检测及其临床价值

目的:以上皮特异性细胞粘附分子(epithelial cellular adhesion molecule,EpCAM)为标志,用实时定量PCR的方法检测转移性乳腺癌循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。方法:以实时定量PCR的方法检测47例转移性乳腺癌患者及20例健康志愿者EpCAM mRNA的表达,并与原发灶病理特征、转移部位、疗效和疾病进展时间(time to progression,TTP)做相关分析。结果:化疗前和第1周期化疗后转移性乳腺癌患者的EpCAM mRNA阳性率分别37.8%和42.6%,20例健康志愿者均为阴性。转移性乳腺癌患者生存分析显示,第1周期化疗后,EpCAMmRNA阳性的患者与EpCAM mRNA阴性的患者相比,中位TTP明显缩短,分别为7.1个月和11.1个月(P=0.013)。亚组分析显示,一线和二线化疗的患者,TTP存在明显差别(P=0.018),而三线及三线以上化疗的患者TTP无明显差别(P=0.471)。结论:转移性乳腺癌中,EpCAM mRNA的阳性率约为40%。第1周期化疗后,EpCAMmRNA阳性的患者中位TTP明显缩短。     

循环肿瘤细胞与早期乳腺癌临床病理特征的相关性

目的：探讨外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)数量及分子表型与早期乳腺癌临床病理特征 的相关性。方法：收集中南大学湘雅二医院乳腺外科某个乳腺癌治疗小组2017年1月至2018年12月收治的100例早期乳 腺癌患者的临床病理资料,采用CanpatrolTM CTCs检测技术检测患者外周血中的CTCs,并予以计数和分子表型鉴定。 结果：在早期乳腺癌患者外周血中检测到CTCs的阳性率为90%,分子表型以混合型CTCs居多(55.6%);CTCs阳性仅与 肿瘤病理类型相关(P<0.05),与其他临床病理特征无关;CTCs总数、上皮型CTCs数量、混合型CTCs数量均与临床病 理特征无相关性,但间质型CTCs数量与激素受体(本文特指雌激素受体和孕激素受体)的表达及Ki-67的表达相关(均 r=0.200,P<0.05),间质型CTCs比例与Ki-67的表达状态相关(r=0.213,P<0.05)。结论：CTCs数量与早期乳腺癌患者的 临床病理特征均不相关,但在激素受体阴性、Ki-67高表达的早期乳腺癌患者中可能出现更多的间质型CTCs。