盐酸左氧氟沙星眼用即型凝胶治疗兔金黄色葡萄球菌角膜炎

目的 盐酸左氧氟沙星眼用即型凝胶治疗兔金黄色葡萄球菌角膜炎的药效学研究.方法 选取60只双眼均正常的新西兰大白兔,给予左眼角膜基质内注射10μL含105个菌落形成单位(colony-forming unit,CFU)的金黄色葡萄球菌菌液,建立角膜炎动物模型.挑选炎症程度相近的48只兔,采用完全随机设计方法分为4组,即24 h基线组、磷酸盐缓冲液(PBS)空白对照组、盐酸左氧氟沙星滴眼液组及盐酸左氧氟沙星眼用即型凝胶组,每组12只.观察24 h基线组兔眼临床炎症情况并评分,观察角膜病理变化及进行细菌菌落计数;其余3组每日治疗3次,至第7天最后一次给药后2h对3组兔的处理同24 h基线组.各组角膜临床炎症评分和角膜细菌菌落计数值比较均使用多个样本均数比较中的完全随机设计资料的方差分析,即F检验.结果 第7天时,相对于PBS空白对照组,盐酸左氧氟沙星滴眼液与盐酸左氧氟沙星眼用即型凝胶均降低角膜炎感染的临床症状(P=0.00),角膜炎临床评分分别为4.21±1.10和3.63±0.86;第7天时,盐酸左氧氟沙星滴眼液组与盐酸左氧氟沙星眼用即型凝胶组兔眼角膜菌落数均降低(P=0.00),角膜菌落计数分别为(4.87±0.05)和(4.64±0.10)CFU,差异有统计学意义(P=0.00).结论 盐酸左氧氟沙星眼用即型凝胶局部给药治疗金黄色葡萄球菌角膜炎可明显改善临床症状、降低角膜菌落数,其作用优于常用的盐酸左氧氟沙星滴眼液,是一种有效的新型眼用制剂.     

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶治疗角膜上皮缺损的临床疗效

目的: 观察含20%小牛血去蛋白提取物眼用凝胶治疗机械性损伤角膜上皮的临床效果。方法: 选取
机械性损伤致角膜上皮缺损的病人120 例，220 眼，随机分为观察组用小牛血去蛋白提取物眼用凝胶60 眼，对照
组使用0．3%氧氟沙星滴眼液，两组均滴眼4 次/d，用药后第3 d，第7 d 观察两组病人眼部症状反应及角膜上皮
愈合情况。结果: 含20%小牛血去蛋白提取物眼用凝胶组治疗机械性角膜上皮缺损第3 d、第7 d 有效率
78．33%、93．33%。0．3%氧氟沙星滴眼液治疗机械性角膜上皮缺损第3 d、第7 d 有效率55．00%、71．67%。两者有
效率比较差异有统计意义( P＜0．05) 。结论: 含20%小牛血去蛋白提取物眼用凝胶在短时间内对角膜上皮愈合
有显著促进作用，值得在临床上广泛应用。     

兔机械性角膜上皮损伤后伤口愈合的形态学动态变化

目的 观察兔机械性角膜上皮损伤后伤口愈合的形态学动态变化.方法 选取新西兰大白兔12只,随机分为A、B两组,均建立机械性角膜上皮损伤模型(刮除直径为8 mm的角膜中央上皮),术后给予盐酸林可霉素滴眼液滴眼,3次/日,1滴/次.A组在建模后第0、1、4、7天共4个时间点采用前节裂隙灯照相系统进行眼表照相,并计算损伤面积.B组在建模后第1、4、7天,按随机数字表法取2只兔的实验眼角膜,行透射电镜及病理检查. 结果前节裂隙灯照相系统记录了不同观察时间点损伤范围(伤口愈合面积)的动态变化.造模后第1天, 角膜上皮全层缺如,损伤边缘处上皮细胞胞膜向损伤区内伸出褶皱的伪足;造模后第4天,上皮自周边向缺损区域爬行生长,覆盖整个角膜,可见2～3层细胞,主要为基底细胞和多角细胞,细胞连接松驰;造模后第7天,再生上皮分化较完全,约 5～6层细胞,极向齐,连接较紧密,可见均匀分布的半桥粒结构. 结论兔机械性角膜上皮损伤后伤口愈合的动态形态学变化包括上皮细胞向心性移行、增殖,以及随后的分化,连接.     

盐酸小檗碱离子型眼用原位凝胶的研究*

[目的]制备并评价眼用盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂.[方法]采用结冷胶作为离子敏感型高分子材料制备盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂;黏度计考察其流变学特征;采用荧光示踪法测定凝胶剂的眼部滞留时间;同体自身对照法考察凝胶剂的眼部刺激性.[结果]盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂为假塑性流体,对兔眼无刺激;该原位凝胶剂的滞留时间为3h,比滴眼液增加了6倍.[结论]盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂的刺激性低,眼部滞留时间长,具有一定的缓释效果.     

胸腺素β4壳聚糖纳米粒的制备及其对NF-κB表达调节治疗兔角膜创伤

目的 考察胸腺素β4壳聚糖(thymosin β4 chitosan,Tβ4/CS)纳米粒的体外性质及其在兔角膜创伤中通过调节核转录因子NF-κB的表达修复角膜的作用.方法 采用离子交联法制备Tβ4/CS纳米粒,考察纳米粒粒径、zeta电位、包封率及体外释放情况.2.0 mg/L的Tβ4/CS纳米粒混悬液滴兔眼,右眼为实验眼,左眼为对照眼,HE染色观察眼表组织学变化,并观察其是否有眼表毒性.建立兔角膜创伤模型,右眼作为实验眼,采用单纯随机抽样法,分为Tβ4-/CS纳米粒组(A组)、Tβ4滴眼液组(B组)、损伤对照组(C组),每组20只.治疗后1、3、7、14 d大体观察及HE染色观察角膜修复情况,并使用RT-PCR方法检测角膜核转录因子NF-κB的表达.结果 Tβ4/CS纳米粒大部分呈规则的球型,粒径为(354.0±1.6)nm,zeta电位为(22.5±0.7)mY,包封率为(76.2±2.8)％,体系较为稳定,具有缓释功能.Tβ4/CS纳米粒滴眼液对兔眼睑、结膜、角膜无损害;明显下调兔创伤角膜中的NF-κB的表达促进角膜修复,各时间点各组间差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 胸腺素β4壳聚糖纳米粒滴眼液通过下调兔创伤角膜中的NF-κB的表达促进角膜修复,对兔眼表无损害.     

兔角膜碱烧伤后LYVE-1的表达及意义

目的：研究探讨新西兰大白兔角膜碱烧伤后LYVE-1（淋巴管内皮透明质酸盐受体1）的表达及意义,进一步证实角膜新生淋巴管的存在,揭示其与角膜碱烧伤损伤修复的关系。方法：饲养24只健康新西兰大白兔,左眼制作角膜碱烧伤模型作为实验组,右眼不做手术作为对照组。术后1天、3天、7天、14天分别处死6只兔,免疫组化测定两眼LYVE-1的表达情况。结果：实验组于术后第3天出现表达,第7天、第14天表达增加;实验组术后3天、7天和14天LYVE-1表达均高于对照组。结论：角膜新生淋巴管在角膜碱烧伤中扮演重要角色。     

贝复舒滴眼液联合维生素A棕榈酸酯眼用凝胶治疗眼表面损伤疗效观察

目的探讨贝复舒滴眼液联合维生素A棕榈酸酯眼用凝胶对眼表面损伤的治疗效果。方法将195例眼表面损伤患者随机分为A、B、C三组各65例。A组给予复方硫酸软膏素滴眼液治疗,B组给予维生素A棕榈酸酯眼用凝胶治疗,C组给予贝复舒滴眼液联合维生素A棕榈酸酯眼用凝胶治疗,连续治疗两周后,比较三组患者的治疗效果。结果 A组患者痊愈率为45.16%,总有效率为80.00%;B组患者痊愈率为61.54%,总有效率为89.23%;C组患者痊愈率为73.84%,总有效率为98.46%。3组患者痊愈率与总有效率差异均有统计学意义（均P〈0.05）。C组患者化学伤及眼外伤治疗总有效率均高于其他两组患者,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论贝复舒滴眼液与维生素A棕榈酸酯眼用凝胶联合用药的疗效显著,值得推广应用。     

环孢素眼凝胶治疗干眼症的疗效观察

目的探讨环孢素眼凝胶对干眼症的疗效。方法通过泪腺摘除手术制作新西兰兔泪液缺乏型干眼症模型,经Schirmer试验、BUT试验鉴定模型成功建立。随后将干眼症新西兰兔随机分成高、中、低三个剂量组以及阴阳性对照组,受试新西兰兔每天在眼部滴注环孢素眼凝胶或阴性、阳性对照液,连续用药35d,进行药效学对比研究。结果显示阳性对照组从第2周、环孢素眼凝胶中和高剂量组从第3周开始与同周阴性对照组相比差异有显著性;环孢素眼凝胶中剂量组、高剂量组以及阳性对照组从第3周开始与同周阴性对照组相比差异有显著性,低剂量组第5周与同周阴性对照组相比差异有显著性。结论本实验表明环孢素眼凝胶对泪液缺乏型干眼症新西兰兔有一定的疗效。     

针药结合对兔干眼模型角膜及泪腺形态学的影响

目的 评估电针结合润目灵颗粒对水样缺乏性干眼模型角膜及泪腺组织的影响。方法 60只健康3~4月龄新西兰大白兔随机分为6组（空白对照组、模型组、西药组、中药组、电针组及针药组, 分别以A,B,C,D,E和F组表示）,每组10只。A组不作处理;B组双眼滴1%硫酸阿托品滴眼液进行造模,每日4次,直至实验结束;C,D,E和F组实验兔同模型组一样双眼滴1%硫酸阿托品滴眼液,3d后（即实验第4天,干眼实验动物模型制作成功）开始,分别用毛果芸香碱滴眼液、润目灵颗粒灌胃、电针以及电针加润目灵颗粒对其治疗,同时双眼滴1%硫酸阿托品滴眼液,直到实验结束。不同时段分别观察各组泪液分泌及第17天角膜、泪腺形态学的改变。结果 在实验第10天、17天,C,D,E和F组兔的泪液分泌量均显著高于模型组（P<0.05）。F组泪腺胞浆饱满丰富及角膜层次分明、排列有序最接近于空白对照组。结论 电针和中药润目灵颗粒可以最大程度的促进泪液分泌,减少泪腺和角膜上皮损伤及其局部炎症反应。电针及中药润目灵颗粒结合比单纯电针及单纯中药治疗干眼效果更好。      

培养角膜上皮和自体角膜缘移植治疗眼表损伤的比较

目的比较培养角膜上皮移植和自体角膜缘移植治疗严重眼表损伤的效果.方法对去除全角膜缘的新西兰大白兔行培养自体角膜上皮和自体角膜缘联合羊膜移植,观察术后角膜形态改变,并进行组织学和免疫细胞化学检测.结果培养角膜上皮移植后兔眼表面平整稳定,角膜中央无新生血管生长,自体角膜缘联合羊膜移植后兔眼表面不同程度结膜上皮化,两者治疗效果有显著性差异.结论培养角膜上皮移植能有效治疗以角膜缘干细胞受损为特征的严重眼表损伤.     

氢溴酸后马托品原位凝胶刺激性和药效学研究

目的:研究氢溴酸后马托品原位凝胶的眼刺激性和药效作用。方法:18只家兔被随机分为两组,分别进行眼刺激性试验和药效学研究。每组再分成氢溴酸后马托品原位凝胶组、氢溴酸后马托品滴眼液组和生理盐水对照组3个亚组,裂隙灯显微镜观察眼局部反应情况,斜视尺测量不同时间点瞳孔直径。结果:氢溴酸后马托品原位凝胶多次给药后,裂隙灯显微镜观察家兔眼角膜无混浊,虹膜和结膜未见红肿、充血、肿胀等异常现象。组织病理学检查显示,家兔眼给药后,与生理盐水组相比,给药组组织病理学改变无明显差异。药效学结果显示,氢溴酸后马托品原位凝胶散瞳时间长达8h。结论:氢溴酸后马托品原位凝胶是安全的,并能够有效地延长药物释放时间。     

重组人角质细胞生长因子异构体抑制兔角膜基质细胞增殖分化的研究

目的 观察重组人角质细胞生长因子异构体(recombinant human keratinocyte growth factor variant,K102)对实验性兔角膜损伤的治疗作用.方法 108只家兔均在显微镜下造成板层切割损伤模型,并分成K102药物大剂量(0.5 mg/ml)、中剂量(0.25 mg/ml)、小剂量(0.125 mg/ml)治疗组、贝复舒对照组(贝复舒滴眼液治疗,2 400 AU/ml)、地塞米松对照组(地塞米松磷酸钠滴眼液治疗,0.25 mg/ml)和空白组(K102滴眼液的溶媒滴眼治疗).通过裂隙灯观察角膜上皮下雾状浑浊(Haze)差别.于术后30、90 d处死动物取角膜行光镜及电镜检查.结果 术后30、90 d,K102药物治疗的各组Haze评分及前50 μm角膜基质层内平均角膜细胞数均明显低于阳性对照组及空白组(P＜0.05),光镜及电镜检查结果显示K102大剂量组角膜成纤维细胞活化及增殖程度明显轻于贝复舒对照组、空白组.结论 K102滴眼液可抑制角膜损伤后的角膜基质细胞过度增殖、活化,减少早期Haze形成.     

蒸馏水及泪然在UBM检查中对角膜上皮影响的对比研究

目的 探讨两种不同超声介质在超声生物显微镜（ultrasound biomicroscopy,UBM） 检查中对角膜上皮的影响。方法 采用前瞻性研究方法将2012 年1-4 月在我院行超声生物显微镜的患者随机分为2 组,蒸馏水组（30 例46 眼,采用蒸馏水作为超声介质） 和泪然组（33 例37 眼,采用泪然作为超声介质）,两组均于检查后10 min 及24 h 行角膜荧光素染色（corneal fluorescein staining,CSF） 评分,评估角膜上皮缺损情况。结果 检查后10 min 泪然组角膜荧光素染色评分明显低于蒸馏水组（P ＜0.05）,差异有统计学意义;24 h 后两组角膜上皮荧光素染色均较前明显好转,差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论 UBM 检查有损伤角膜上皮的风险,采用泪然作为超声介质能有效保护角膜上皮,缓解检查后不适症状。     

52例药源性角膜病变的临床回顾分析

目的 分析10年临床中局部应用抗生素滴眼剂、抗病毒滴眼剂,以及激素滴眼剂对眼表的毒性作用,探讨药源性角膜病变的临床特征及治疗效果.方法 对临床所见的52例71眼滴眼剂诱发的药源性角膜病变的临床资料进行回顾性分析.结果 本组52例71眼,均于滴眼液点眼1周后,出现眼部刺激症状:异物感、流泪、畏光、视力下降;体征:眼部睫状...     

兔同种异体角膜缘移植术后免疫排斥反应的实验研究

目的：本研究旨在探索同种异体角膜缘移植免疫排斥反应规律并观察环孢霉素A（CsA）滴眼液的免疫抑制作用。方法：32只新西兰白兔随机分成实验组和CsA对照组．建立右眼角膜缘缺陷症动物模型，1月后实施同种异体角膜缘移植术，术后分别予生理盐水及1％CsA眼液滴眼并观察4周。术前1天及术后1～8周动态监测外周血T淋巴细胞上CD25的表达；分别取术后第4、8及10周的角膜缘植片观测淋巴细胞浸润及T淋巴细胞上CD25的表达。结果：实验组术后第1周外周血表达CD25的T淋巴细胞数就有增高，第3周已达到高峰，第5周开始缓慢下降。CsA组角膜缘植片中浸润的淋巴细胞及表达CD25的T淋巴细胞数目显著低于实验组。结论：同种异体角膜缘移植术后排斥反应的发生与表达CD25的T淋巴细胞数目密切相关：CsA眼液可抑制外周血及植片中T淋巴细胞上CD25的表达，从而抑制排斥反应发生。     

人表皮生长因子缓释型滴眼剂对角膜碱烧伤的基因治疗

目的观察人表皮生长因子基因对角膜细胞的转染情况,探讨用人表皮生长因子基因对角膜损伤治疗的可行性。方法利用基因重组技术构建了人表皮生长因子全基因序列,将该基因序列插入 pcDNA3.1真核表达高效穿梭质粒,用脂质体制成人表皮生长因子基因缓释型滴眼剂,滴眼治疗家兔角膜碱烧伤。在治疗后的不同天数,分别测定了角膜组织中人表皮生长因子 mRNA 和 DNA 的表达,用 ELISA 法测定了人表皮生长因子在兔角膜组织中的含量。结果在基因转染后24h 至28天,角膜组织分别用 RT-PCR 和 PCR 均可检测出人表皮生长因子 mRNA 和 DNA 表达。用 ELISA 法测定人表皮生长因子蛋白质表达水平。结果表明,在转染后24h,实验组分别与对照组和空白组平行对比,实验组蛋白质表达水平明显升高(P<0.01),第7天达高峰,为224.286mg/g 角膜湿重,随后逐渐降低,持续可表达20天以上;在转染后24h,免疫组织化学染色在全层角膜细胞内亦可见 hEGF 蛋白质表达,第7天达到高峰,细胞转染率高达98%以上,随后逐渐降低,持续可表达20天以上。结论用 pcDNA3.1真核表达高效穿梭质粒作为载体,携带人表皮生长因子基因用脂质体包裹后制成缓释型滴眼液,以滴眼的方式给药转染角膜,可达到极高的转染率,具有良好的应用前景。     

PRK术后转化生长因子β1 mRNA表达的实验研究

目的 :探讨准分子激光角膜切削术 (PRK)后转化生长因子β1(TGF β1)在角膜伤口愈合和角膜雾状混浊发病机制中的作用。方法 :将 2 4只新西兰大白兔 (2 4只眼 )随机分为正常组 (n =4 )和手术组 (n =2 0 )。手术组每只左眼行PRK术 ,术中采用准分子激光器 ,角膜中央激光去上皮 ,然后按 10 .0 0D近视进行切削 ,分别于术后第 7d ,14d ,2 8d和 3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物 ,将角膜组织制成石蜡切片 ,应用原位杂交技术检测角膜组织中TGF β1mRNA的表达。结果 :①从术后第 7d开始 ,术眼均不同程度地发生了角膜haze ,严重者可达 3级 ,haze高峰约在术后第 2 8d。②正常角膜上皮中TGF β1mRNA有低水平表达 ,PRK术后第 7d ,14d和 2 8d ,角膜上皮TGF β1mRNA表达明显增高 ,术后 3月已开始降低 ;正常组角膜基质中未检测出TGF β1mRNA ,术后第 7d ,14d和 2 8d ,角膜基质中TGF β1mRNA表达明显增高 ,术后 3月己开始降低。结论 :TGF β1可能参与了PRK术后的伤口愈合 ,它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生。     

Epi-LASIK术中去除与保留角膜上皮瓣治疗高度近视的疗效研究

目的研究机械法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(Epi-LASIK)中角膜上皮瓣的弃留对高度近视(≥-6.00 D)术后反应、效果及并发症的影响。方法选取40例欲行Epi-LASIK手术的高度近视患者80只眼,征得患者同意后,随机一眼行保留上皮瓣的Epi-LASIK手术(留瓣组),另一眼行丢弃角膜上皮瓣的Epi-LASIK手术(弃瓣组),术后均配戴亲水性角膜接触镜。观察术后第3、5天角膜刺激症状、角膜上皮愈合时间,对术后1周,1、6个月裸眼视力及1、6个月角膜haze进行评价及统计学分析。结果术后第3、5天弃瓣组的角膜刺激症状明显轻于留瓣组,差异有统计学意义(P<0.05);弃瓣组和留瓣组的角膜愈合时间分别为(2.96±0.51)d、(4.92±1.38)d,差异有统计学意义(P<0.05);术后1周,弃瓣组裸眼视力优于留瓣组,差异有统计学意义(P<0.05),术后1、6个月,两组裸眼视力对比均无显著差异(P>0.05);术后1、6个月,两组角膜haze差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Epi-LASIK手术丢弃角膜上皮瓣虽然能减轻患者的角膜刺激症状,缩短上皮愈合时间,但同时增加了高度近视患者角膜haze的发生率,所以手术时应尽量保留角膜瓣。     

几丁糖促进兔角膜碱烧伤愈合的作用

目的 观察2％医用几丁糖在兔角膜碱烧伤早期对角膜上皮愈合，抗过氧化损伤和炎症反应的影响。方法 用15只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型，设立几丁糖组(右眼)和磷酸盐缓冲液对照组(左眼)。裂隙灯观察角膜烧伤后角膜炎症反应及上皮修复过程。于烧伤后第7，14，28天各随机处死5只兔，取角膜和房水检测超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量，并观察角膜组织病理学变化。结果 医用几丁糖组较对照组同期角膜上皮修复快，SOD活性高，MDA生成量少。角膜炎症反应轻。结论 几丁糖在角膜碱烧伤急性期治疗中具有较强的促进上皮修复，抗过氧化损伤及抑制炎症的作用。     

超声乳化术后粘弹剂代谢及不同灌注液影响的实验研究

目的 观察超乳术后，小梁网对粘弹剂代谢的时间和途径，不同灌注液对角膜内皮细胞的影响。方法 哈白兔6只，双眼行手术，一眼注入Viscoat后正常冲洗，一眼不冲洗，做透射电镜观察小梁网的代谢情况。另取哈白兔9只，分成3组，一组以BSS＋为灌注液，一组为林格液加5％葡萄糖，一组为林格液，做扫描电镜观察术后角膜内皮细胞情况。结果 小梁网扫描电镜示：3天时冲洗组小梁网内Viscoat已完全被吸收，未冲洗组仍充满Viscoat，至7天时大部分才被吸收；粘弹剂是直接通过小梁网间隙及细胞主动转动两种方式吸收的。角膜内皮透射电镜示：3天时BSS＋液组角膜内皮细胞形态完整，加葡萄糖组内皮细胞有少数脱落，林格液组内皮细胞脱落较多；7天时前两组内皮细胞已基本覆盖，林格液组细胞14天时才基本恢复。结论 多量粘弹剂会加重小梁网代谢负担，应尽量吸附，如术中需要保留，术后最好观察7天。BSS＋液对角膜内皮细胞的保护作用最好，林格液加葡萄糖可加强保护作用。虽然一段时间后角膜内皮细胞均可恢复，但林格液组的细胞损伤严重，抗再次损伤能力差，值得注意。