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1.

目的  探讨血清磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体与膜性肾病(MN)患者病情的相关性。方法  选取2013年5月-2015年2月河南省南阳市中心医院收治的膜性肾病患者193例,根据肾组织活检病理结果分为特发性膜性肾病(IMN组)和继发性膜性肾病(SMN组),选取同期到该院进行体检的健康者30例(对照组),比较3组受试者的血清白蛋白、血清总蛋白、24 h尿蛋白定量、血肌酐水平、PLA2R抗体浓度及阳性率。分析实验室指标与PLA2R抗体的相关性,并计算PLA2R抗体检测的特异性和阳性预测值。结果  IMN组和SMN组患者的血清白蛋白、血清总蛋白水平明显低于对照组(P <0.05),24 h尿蛋白定量、血肌酐明显高于对照组(P < 0.05)。IMN组和SMN组各项实验室指标的组间比较差异无统计学意义(P >0.05)。IMN组、SMN组、对照组患者的血清PLA2R抗体水平分别为(12.149±5.207)μg/ml、(8.492±3.218)μg/ml及(0.003±0.001)μg/ml,阳性率分别为68.99%、18.75%及0.00%,差异有统计学意义(P <0.05)。血清白蛋白水平与MN患者血清PLA2R抗体呈负相关(r =-0.625,P =0.023),24 h尿蛋白定量水平与MN患者血清PLA2R抗体呈正相关(r =0.796,P = 0.015)。ELISA法PLA2R抗体检测的特异度为96.67%,阳性预测值为99.01%。结论  血清PLA2R抗体水平与膜性肾病病情有明显相关性,其阳性表达与肾组织活检结果符合度较高。

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2.

目的  探讨用博来霉素(BLM)制作硬皮病动物模型的最适浓度。方法  将24只BALB/C小鼠随机平均分为3个实验组和1个对照组,各实验组小鼠分别皮下注射200、700和1 000μg/ml浓度的BLM,对照组小鼠皮下注射等量的磷酸盐缓冲液(PBS),注射4周后处死小鼠,取注射部位皮肤行苏木精-伊红染色法(HE)染色、Masson染色、真皮羟脯氨酸含量检测及真皮厚度检测。结果  700和1 000μg/ml浓度的BLM成功建模,但1 000μg/ml的浓度可导致小鼠皮肤浅表溃疡。结论  硬皮病动物模型成功与否与BLM药物浓度高低关系密切,700μg/ml博莱霉素浓度具有较好的建模效果,且不会出现皮肤溃疡的副作用。

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3.

目的  通过研究成人特发性膜性肾病(IMN)血清抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体的阳性滴度与其他实验室指标的相关性,进一步探讨抗PLA2R抗体对IMN诊断及病情评估的作用。方法  选取B超引导下肾穿刺活检证实为IMN患者55例,追踪观察6个月,同时选取15例健康体检者为对照组,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗PLA2R抗体,同时对IMN患者24 h尿蛋白定量、血清总蛋白、血清白蛋白、血清总胆固醇、血清肌酐进行检测。结果  经过3和6个月治疗后,血清抗PLA2R抗体较治疗前降低(P <0.05)。55例IMN患者治疗前血清抗PLA2R抗体阳性患者47例,阳性率为85.45%;治疗3个月后血清抗PLA2R抗体阳性患者36例,阳性率为65.45%,治疗6个月后血清抗PLA2R抗体阳性患者25例,阳性率45.45%。且治疗前血清抗PLA2R抗体滴度与尿蛋白定量呈正相关,与血清白蛋白、总蛋白呈负相关;治疗6个月后血清抗PLA2R抗体滴度与尿蛋白定量呈正相关,与血清白蛋白、总蛋白呈负相关。结论  血清抗PLA2R抗体可作为IMN血清学诊断的指标之一,血清抗PLA2R抗体滴度下降与尿蛋白的减少密切相关,与疾病预后、病情转归也可能相关。

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4.

目的  观察高胆固醇对原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响。方法  将小鼠原代成骨细胞按1×105接种于6孔板上,待细胞融合至80%左右,分别加入0μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml和50μg/ml的胆固醇溶液培养基继续培养24 h。采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)的方法,检测成骨细胞核转录因子kappa B(NF-κB)和蛋白激酶B(Akt)的蛋白表达;采用实时荧光定量PCR方法,检测成骨细胞中人白细胞介素1α(IL-1α)、人白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的信使RNA(mRNA)表达;采用酶联免疫吸附法,检测细胞培养上清中IL-1α、IL-6和TNF-α的蛋白水平。结果  胆固醇诱导成骨细胞中NF-κB的增加和Akt磷酸化水平降低,增加IL-1α、IL-6与TNF-α的mRNA和蛋白表达,且呈一定的剂量依赖性。结论  高胆固醇可以通过Akt/NF-κB信号通路及其介导的炎症因子表达参与成骨细胞的调节。

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5.

目的  探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)水平对冠状动脉粥样硬化性心脏病(以下简称冠心病)患者脑卒中发病的影响,为临床研究提供参考依据。方法  回顾性收集130例冠心病合并脑卒中的患者作为观察组,同期纳入145例仅有冠心病的患者作为对照组。抽取空腹肘正中静脉血2 ml检测血清Hcy,分析血清Hcy水平对冠心病患者脑卒中发病的影响。结果  观察组糖尿病史、高血压病史、吸烟史、体重指数≥25 kg/m2、冠心病年限患者多于对照组,Hcy及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。多因素分析显示,糖尿病史、高血压病史、吸烟史、Hcy及LDL-C水平增高是冠心病患者脑卒中发生的高危因素(P <0.05)。冠心病患者中Hcy四分位水平最高组(>15.77μg/ml)发生脑卒中的风险是最低组(<10.33μg/ml)的1.84倍(P =0.024),校正相关危险因素后,发生风险仍存在,■为1.74倍(P =0.045)。结论  血清Hcy水平升高是冠心病患者脑卒中发生的高危因素,且随血清Hcy水平升高其发生风险进一步增加。

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6.

目的  观察血液透析合并慢性乙型肝炎(简称慢性乙肝)患者血清β2-微球蛋白(β2-MG)水平,并探讨血清β2-MG的影响因素。方法  按照“慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)”筛选行血液透析治疗的慢性乙肝患者,30例纳入研究。选择30例乙肝病毒(HBV)阴性的血液透析患者作为对照组;用t检验比较两组实验室指标,用多元线性回归分析法分析影响血清β2-MG的因素。结果  HBV阳性组血清β2-MG水平为(65.64±10.18)μg/ml,较HBV阴性组(44.90±12.81)μg/ml显著升高(P <0.010)。多元线性回归分析显示,血清β2-MG水平与血清清蛋白呈负相关(B=-0.001,P =0.015),与HBV感染、透析龄及谷丙转氨酶呈正相关(B=14.127,P =0.000;B=0.421,P =0.001;B=0.077,P =0.032)。结论  血液透析合并慢性乙肝患者血清β2-MG水平较HBV阴性的血液透析患者显著升高,且与血清清蛋白、谷丙转氨酶、HBV感染及透析龄有关。

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7.

目的  探讨血清多基因启动子甲基化在乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)中的诊断价值。方法  随机收集98例HCC、75例肝硬化(LC)、90例慢性乙型肝炎(CHB)患者以及80例健康者血清各2ml,以血清BVES、APC、RASSF1A、TIMP3、GSTP1和HOXA9基因作为候选靶标。采用磁珠法提取血清DNA,MethyLight法检测基因启动子甲基化。通过构建受试者工作特征曲线(ROC)评价各检测指标的诊断效能。结果  血清各基因启动子甲基化在HCC患者检测阳性率分别为:RASSF1A(52.04%)、APC(36.73%)、BVES(29.59%)、HOXA9(20.41%)、GSTP1(17.35%)和TIMP3(11.22%),其中APC甲基化阳性完全与RASSF1A重叠。血清RASSF1A甲基化从慢性HBV感染患者中诊断HCC的效能最高[敏感性=0.520,特异性=0.915,曲线下面积(AUC)=0.718],优于血清AFP(敏感性=0.480,特异性=0.739,AUC=0.609);血清6个基因启动子甲基化联合使用的敏感性、特异性及诊断效能进一步提高,分别为0.806、0.855和0.845。结论  血清BVES、APC、RASSF1A、TIMP3、GSTP1及HOXA9基因启动甲基化联合检测能显著提高高危人群中HCC的诊断能力。

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8.

目的  分析女性不孕症患者血清及宫颈黏液中自身抗体检测对病情的评估价值。方法  选取2012年7月-2014年7月间至该院接受检查的女性不孕患者138例作为观察组对象。另取同期在该院因宫颈炎症接受检查的已育女性106例作为对照组。比较两组研究对象的血清及宫颈黏液自身抗体水平、外周血调解性T细胞(Treg)水平,进一步分析观察组患者中自身抗体与Treg水平的相关性。结果  ①观察组患者的血清及宫颈黏液中抗精子抗体(AsAb)、抗卵巢抗体(AoAb)、抗人绒毛膜促性腺激素(AhCGAb)、抗子宫内膜抗体(EMAb)、甲状腺自身抗体(ATA)、抗-β-2糖蛋白1抗体(α-β-2GP1)水平高于对照组女性(P <0.05);②观察组患者的外周血Treg水平低于对照组(P <0.05);③不孕症女性血清及宫颈黏液中的AsAb、AoAb、AhCGAb、EMAb、ATA、α-β-2GP1等自身抗体水平与外周血Treg水平呈负相关(P <0.05)。结论  女性不孕症患者血清及宫颈黏液中自身抗体水平大幅上升,与患者的疾病发生发展以及病情严重程度均关系密切,是临床诊断及指导治疗的理想指标。

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9.

目的  研究大蒜素体外抗猴甲型轮状病毒(SA11)的作用。方法  通过病毒滴度测定来确定大蒜素能否抗SA11以及最佳浓度。结果  大蒜素对MA104细胞的最大无毒浓度为100 mg/ml,病毒滴度测定可以得出,50 mg/ml的大蒜素可以抑制SA11感染的MA104细胞出现细胞病变效应(CPE)。结论  一定浓度的大蒜素在体外有抗SA11的作用。

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10.

目的  观察不同浓度脂多糖(LPS)对外周血单个核细胞(PBMCs)体外向血管内皮细胞分化的影响。方法  取健康成人PBMCs,以血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行诱导,加入不同浓度的LPS干预处理,倒置相差显微镜下观察PBMCs的形态改变,流式细胞术检测细胞表达CD31和血管假性血友病相关因子(vWF)。结果  体外培养的PBMCs呈贴壁生长,诱导培养后,经历小圆形→梭形→扁平细胞的演变过程。与对照组比较,0.01μg/ml LPS组最后形成的梭形细胞数增加,随着LPS浓度进一步增加,细胞数呈递减趋势。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,0.01μg/ml LPS组,CD31/vWF双阳性细胞数明显增加,差异有统计学意义(P <0.05);0.10μg/ml LPS组CD31/vWF双阳性细胞数无明显改变(P >0.05);随着LPS浓度进一步增加,CD31/vWF双阳性细胞数呈减少趋势,差异有统计学意义(P <0.05)。结论  0.01μg/ml LPS能最大限度地促进PBMCs向内皮细胞分化,随着LPS浓度增加,PBMCs分化呈抑制作用,这可能与LPS激活核转录因子-κB(NF-κB)的数量及亚单位不同有关。

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11.
目的:研制快速评价葛根药材质量的胶体金试纸。方法:通过ELISA与HPLC检测结果的关联确定胶体金试纸的半定量限,通过对胶体金试纸制备过程的优化,确定最优胶体金制备方法。结果:葛根素胶体金试纸的半定量限为34μg/m L,胶体金试纸制备最佳工艺为胶体金标记最佳PH为8、抗体最佳标记量为0.48 mg/m L、胶体金溶液与抗体溶液最佳标记比例为2.5∶1。结论:葛根素胶体金试纸简便、快速、准确,可以满足对葛根药材的质量评价,尤其适用于原料采购现场的快速检测。  相似文献   

12.
目的 采用聚合酶链式反应(PCR)技术和胶体金技术建立一种呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条检测方法,并对其检测效果进行评价。 方法 根据GenBank数据库选择真菌内转录间隔区(ITS)基因片段作为靶基因,应用DNAMAN软件对真菌ITS基因片段进行分析,并分别在真菌通用引物5'端用生物素(Biotin)和异硫氰酸荧光素(FITC)进行修饰标记;建立PCR体系,进行体系的最佳条件优化;确定胶体金免疫层析试纸条标记链霉亲和素的最佳标记量和质控线及检测线最佳包被物浓度,组装核酸胶体金试纸条,对试纸条的特异度、灵敏度、重复性和稳定性进行验证。 结果 水煮法提取白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌DNA,浓度为180 μg·L-1以上,纯度为1.60~2.10;在pH 7.0条件下,每100 μL胶体金溶液中制备胶体金标记链霉亲和素最佳标记量为 3.3 μg,质控线包被Biotin化牛血清白蛋白(BSA-Biotin)浓度为2.00 g·L-1,检测线包被抗FITC抗体浓度为1.00 g·L-1。核酸试纸条的特异度与电泳结果一致,仅白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌出现阳性结果,与金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌等常见呼吸道感染细菌无交叉反应。灵敏度检测,白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌的DNA浓度分别为10-4、10-2和10-3 mg·L-1时核酸试纸条仍可准确检出,而普通PCR电泳结果显示白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌最低检测浓度分别为0.01、1.00和0.10 mg·L-1;重复性检测,在不同实验室不同操作人员对核酸试纸条进行验证,结果一致,重复性良好;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测,结果符合预期,稳定性良好。 结论 本研究建立的呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条可以检测白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌等真菌,特异度和灵敏度均较高,操作简便且快速。  相似文献   

13.
制备迟钝爱德华氏菌胶体金快速检测试纸并对其性能进行检测。以柠檬酸三钠作为还原剂制备胶体金颗粒,标记迟钝爱德华氏菌多克隆抗体,将羊抗兔IgG和纯化后的迟钝爱德华氏菌多克隆抗体包被于NC膜上作为质控线和检测线,以检测样品中的迟钝爱德华氏菌(E. tarda)。结果表明:所研制的试纸特异性良好,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌等常见细菌或病原菌进行测试未出现交叉反应;敏感度达到105 CFU/mL,反应时间仅为5~10 min,可以用于感染迟钝爱德华氏菌大菱鲆腹水的现场检测,具有操作  相似文献   

14.
目的 建立一种检测日本血吸虫感染的胶体金免疫层析方法.方法 将已获得的单抗用protein-G亲和层析纯化,通过间接ELISA测定每株单抗的亲和常数.按改良过碘酸钠标记法,8株单抗标记辣根过氧化物酶(HRP)后进行不同株单抗配对,选出亲和力高、稳定性强的单抗配对组合.胶体金标记株抗体,选择最佳反应模式,建立胶体金免疫层析方法,并对弓形虫感染鼠血样、血吸虫感染前和感染后2、3、、5、6周的鼠血样进行检测.结果 8株抗SjP38单克隆抗体经纯化后纯度达95%以上,其亲和常数介于1×10-8mol/L~2.82×10-10mol/L.根据配对实验,1A6与9H6、1A6与9G7、6G12与9H6、6G12与9G7以及9H6与9G7为最佳配对组合.标记1A6、6G12、9H6与9G7这株单抗后筛选出最佳反应模式,即以9G7为包被抗体,包被浓度为2.5μg/μl;当1A6为金标抗体,抗体稀释浓度为1:时,检测效果最佳.对rSjp38的最低检测量为12.5 ng/ml.抗检测感染3、、5、6周小鼠血清,阳性率分别为0%、50%、60%、80%,而弓形虫感染鼠和血吸虫感染前小鼠血样的检测结果为100%阴性.结论 通过抗体配对、最佳包被量和金标抗体稀释倍数条件的优化,建立了快速、简便、特异的胶体金免疫层析方法,自制的rSjP38试纸条能检测血吸虫早期感染鼠血清中的循环抗原SjP38.  相似文献   

15.
目的 建立并评价抗CCP抗体、类风湿因子(RF)和C反应蛋白(CRP)对类风湿关节炎(RA)的最佳诊断界值。方法 选择2014年6月~2015年3月以RA组130例、非RA组130例和对照组100例作为研究对象,采用酶联免疫吸附法测定血清抗CCP抗体,采用免疫透射比浊法测定血清RF及CRP的浓度,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)确定抗CCP抗体、RF和CRP的最佳诊断界值并评价三者的诊断效能。结果 RA组和非RA组血清RF浓度分别为275.9±317.6和42.8±131.3IU/ml,前者显著高于后者(t=7.571,P<0.05);RA组和非RA组CRP浓度分别为39.2±47.3和29.7±42.2mg/L,前者显著高于后者(t=2.602,P=0.015)。抗CCP抗体、RF和CRP诊断RA的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.868(0.820~0.916)、0.785(0.732~0.846)、0.587(0.512~0.661)。血清抗CCP抗体10RU/ml作为诊断界值时,诊断RA的敏感度、特异性和约登指数分别为0.669、0.892和0.562;RF以25IU/ml作为诊断界值时,诊断RA的敏感度、特异性、约登指数分别为0.715、0.777和0.492;CRP以30mg/L作为诊断界值时的敏感度、特异性和约登指数分别为0.469、0.623和0.092。结论 抗CCP抗体、RF、CRP的对RA的最佳诊断界值分别为10RU/ml、25IU/ml和30mg/L。抗CCP抗体诊断效能高于RF,而RF诊断效能高于CRP。  相似文献   

16.
涂业桃 《医学综述》2014,20(20):3836-3837
目的探讨胶体金法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法在检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体中的应用价值。方法选择2012年3月至2013年3月泸州医学院附属医院收治的860例HCV患者,采用胶体金法和ELISA法进行HCV抗体检测。结果胶体金法和ELISA法检测HCV抗体的阳性检出率分别为3.60%和3.72%,差异无统计学意义(P>0.05)。以ELISA法作为检测HCV抗体阳性的标准,胶体金法对于HCV抗体检测的灵敏度为93.75%,特异度为99.88%。结论胶体金法进行HCV抗体检测与ELISA法并无差异,且胶体金法具有快速简便的优点,值得在临床检测中进行推广。  相似文献   

17.
纳米金层析免疫法快速检测黄热病病毒   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:探索快速、简便、高效、灵敏、低廉地检测黄热病病毒感染的方法。方法:用纳米金免疫层析试验原理研制了一种快速诊断试纸。将制备的纳米金颗粒用SPA标记形成金-SPA复合物,其复合物结合在聚酯膜上制成金标结合释放垫;通过基因工程技术在大肠杆菌中克隆和表达黄热病E蛋白,经纯化的抗原蛋白被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,样品中的病毒抗体通过免疫反应与膜上的抗原蛋白结合,待其渗过膜片后,与金-SPA复合物结合形成肉眼可见的红色线条。结果:用已确证的21份黄热病阳性血清和30份阴性血清进行了试验,该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。结论:该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5min。与传统的ELISA法相比,具有方便快速、成本低廉、应用范围广等优点。  相似文献   

18.
目的:研究肽酰基精氨酸脱亚胺酶-4(PADI-4)、抗环瓜氨酸抗体(抗CCP抗体)联合检测在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测58例RA患者(RA组)、40例其他风湿性疾病患者(非RA组)和30名健康志愿者(健康对照组)的血清PADI-4、抗CCP抗体、抗聚角蛋白傲丝蛋白抗体(AFA)、抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(抗MCV抗体)和抗RA33抗体的浓度,并对其受试者工作特征曲线、灵敏度、特异度、相关性和诊断效能进行分析。结果:RA患者血清中PADI-4、抗CCP抗体、AFA、抗MCV抗体和抗RA33抗体的浓度均显著高于非RA组和健康对照组(P<0.01);采用受试者工作特征曲线,PADI-4和抗CCP抗体诊断RA的最佳临界值为1.284 U/L和26.365 RU/mL,此时的灵敏度为62.1%和81.1%,特异度为91.4%和95.7%;PADI-4与AFA、抗RA33抗体、抗MCV抗体均呈明显正相关关系(P<0.01);PADI-4与抗CCP抗体无相关关系(P>0.05)。在多种抗体联合检测中,PADI-4、抗CCP抗体均为阳性诊断RA的特异度高达100.0%,单项检测PADI-4为91.4%,抗CCP抗体为95.7%。结论:PADI-4、抗CCP抗体联合检测能提高RA的特异性和灵敏度,有助于对RA的诊断。  相似文献   

19.

目的  探讨西妥昔单抗联合铂类化疗对人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤环氧化酶-2(COX-2)及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的影响。方法  选择BALB/c裸鼠24只为研究对象,均复制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为西妥昔单抗组、顺铂组、西妥昔单抗联合顺铂组及对照组,各6只。对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.2 ml,西妥昔单抗组腹腔注射1 036 μg/ml西妥昔单抗注射液,顺铂组腹腔注射3μg/ml顺铂注射液,西妥昔单抗联合顺铂组腹腔注射1 036 μg/ml西妥昔单抗注射液和3 μg/ml顺铂注射液,连续4周后,脱颈处理裸鼠。比较瘤体生长情况、COX-2与MMP-7表达及信使核糖核酸(mRNA)表达。结果  西妥昔单抗组、顺铂组、西妥昔单抗联合顺铂组瘤体体积及瘤重均低于对照组(P <0.05),西妥昔单抗联合顺铂组瘤体体积、瘤重低于西妥昔单抗组与顺铂组,抑瘤率高于西妥昔单抗组及顺铂组(P <0.05);西妥昔单抗组、顺铂组、西妥昔单抗联合顺铂组裸鼠肿瘤组织COX-2、MMP-7及mRNA表达均低于对照组(P <0.05),西妥昔单抗联合顺铂组裸鼠肿瘤组织COX-2、MMP-7表达及mRNA表达低于西妥昔单抗组、顺铂组(P <0.05)。结论  西妥昔单抗联合铂类化疗有助于抑制喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤增殖生长,可能与抑制肿瘤组织COX-2与MMP-7表达有关。

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