miRNA表达谱在缺氧缺血性脑病新生儿血浆中的变化及意义

目的筛选新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）相关的miRNA,探讨miRNA在HIE诊断、治疗和预后中的指导意义。方法选择HIE新生儿117例,根据病情分为轻度组69例和中重度组48例;选择同期分娩的健康足月新生儿30例为健康对照组。利用miRNA芯片检测3组新生儿血浆miRNA表达谱的差异,从中挑选6个miRNA进行Real-timePCR验证,比较各组血浆miRNA表达并分析与HIE诊断、治疗和预后的关系。结果miRNA芯片检测HIE组共有55种miRNA表达有明显差异,有29种miRNA表达上调,26种表达下调。与健康对照组比较,HIE组血浆中miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达明显上调,let-7b-5p表达明显下调,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。HIE中重度组miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达显著高于轻度组,而let-7b-5p表达显著低于轻度组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。与治疗前比较,治疗后HIE轻度组和中重度组miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达量下降,let-7b-5p表达量上升,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。ROC曲线分析显示miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p和let-7b-5p4种miRNA的AUC分别为0.958、0.938、0.986和0.969。miR-4472、miR-6794-5p高表达组后遗症发生率明显高于低表达组（均P＜0.05）,而miR-5195-3p、let-7b-5p与HIE预后无相关性（均P＞0.05）。结论HIE患儿血浆中miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达水平显著升高,而let-7b-5p表达水平显著下降,其中miR-4472、miR-6794-5p可能是预测HIE预后的生物标志物。     

结肠癌血清microRNA 表达谱的检测及临床应用价值

目的 找寻潜在的新型的结肠癌血清microRNA（miRNA）表达谱,探讨其临床应用价值。方法miRNA 微阵列芯片技术检测结肠癌患者和正常人血清中miRNA 表达的差异,并对有差异表达的miRNA 在60 例结肠癌患者血清和60 例正常对照组血清中的表达进行实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）验证。结果①芯片杂交结果中共有87 种miRNAs 在结肠癌患者血清和正常人血清标本中有差异表达,其中上调表达有39 个,下调表达有48 个。② qRT-PCR 对miRNAs 进行验证,其中miR-31、miR-141、miR-224-3p、miR-576-5p 和miR-4669 这5 个miR 分子在结肠癌症患者中的表达相对于正常对照组差异具有统计学意义（P <0.05）。③ miR-31、miR-141、miR-224-3p、miR-576-5p 和miR-4669 这5 个miR 分子组成的miR- 表达谱诊断结肠癌的效率较高（ROC 曲线下面积为0.992）。结论 临床检测结肠癌患者miR-31、miR-141、miR-224-3p、miR-576-5p 和miR-4669 循环分子标志物表达谱有助于诊断结肠癌,有望成为结肠癌患者临床诊疗评估的重要指标。     

血浆microRNA分子联合检测在前列腺癌中的诊断价值

目的: 分析前列腺癌患者血浆microRNA（miRNA）分子的差异表达,探索血浆miRNA分子联合检测在前列腺癌中的诊断潜能。 方法：应用GEO公共数据库筛选前列腺癌患者血浆及血清差异性表达的miRNA;收集上海市宝山区中西医结合医院诊治的前列腺癌患者、慢性前列腺炎患者以及健康体检人群血浆样本,采用反转录荧光定量PCR对候选血浆miRNA表达水平进行验证;应用受试者工作特征模型分析候选miRNA分子以及联合miRNA对前列腺癌的诊断价值。 结果：通过生物信息学分析,获得26个前列腺癌相关的差异miRNA分子,经NCC-AUC模型进一步筛选, miR-21-5p、miR-5189-5p和miR-6780a-5p以综合评分最高进入临床样本验证阶段。结果显示,血浆miR-21-5p在健康对照组、慢性前列腺炎组、前列腺癌组中依次升高,三组之间具有统计学差异（P<0.05）。慢性前列腺炎组血浆miR-5189-5p水平显著低于前列腺癌组与健康对照组（P<0.001）。血浆miR-6780a-5p在前列腺癌组的表达水平显著高于慢性前列腺炎组和健康对照组（P<0.001）。ROC模型显示,血浆miR-21-5p及miR-6780a-5p均有较好的诊断潜能（P<0.001）,曲线下面积AUC分别为0.695和0.787,敏感度分别为95.6%和64.45%,特异度为41.5%和81.7%。联合使用miR-21-5p和miR-6780a-5p诊断,AUC为0.830,敏感度和特异度分别为82.2%和74.4%,可有效提高诊断效能。 结论：血浆miR-21-5p、miR-6780a-5p均有成为前列腺癌诊断标志物的潜能,两者联合显著提高前列腺癌诊断效能。     

MicroRNA-9-3p 在2 型糖尿病合并不稳定型心绞痛患者血浆中的表达分析

目的 检测microRNA-9-3p（miR-9-3p）在2 型糖尿病（T2DM）患者以及T2DM 合并不稳定型心绞（T2DM+UA）痛患者血浆中的表达水平,分析miR-9-3p 对于T2DM 以及T2DM+UA 的诊断价值。方法 选取2012 年1 月-2013 年6 月唐山市工人医院就诊的单纯T2DM 患者50 例为T2DM 组,T2DM+UA患者50 例为T2DM+UA 组,健康体检人员30 例为对照组。抽取患者外周静脉血,提取microRAN（miRNA）,应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）,以miR-423-5p 为内参,检测3 组血浆中miR-9-3p 表达水平,应用受试者工作曲线（ROC）统计分析其对于T2DM 以及T2DM+UA 的诊断价值。结果 3 组血浆miR-9-3p表达水平比较,差异均有统计学意义（P <0.05）,T2DM 组及T2DM+UA 组均高于对照组,T2DM+UA 组高于T2DM 组;miR-9-3p 对于T2DM 的诊断价值AUC=0.723（95%CI ：0.610,0.837,P <0.05）,miR-9-3p对于T2DM+UA 的诊断价值AUC=0.972（95%CI ：0.963,0.981,P <0.05）。结论 miR-9-3p 在T2DM 以及T2DM+UA 患者血浆表达水平升高,miR-9-3p 有望作为T2DM 以及T2DM+UA 早期诊断的分子标志物。     

尿沉渣2种miRNA检测在膀胱癌诊断中的应用价值

目的：研究膀胱癌患者尿沉渣中miR-142-3p和miR-145-5p差异性表达,为临床寻找早期膀胱癌肿瘤标志物提供依据。方法搜集51例未接受经尿道肿瘤切除术的早期膀胱癌患者和38例健康对照者的清晨中后段尿液,从尿沉渣中提取RNA,采用miRNA特异性茎环逆转录荧光定量PCR检测目标miRNA表达水平,分析两组的受试者工作曲线（ROC）,比较miR-142-3p和miR-145-5p及其组合在膀胱癌早期诊断中的价值。结果 miRNA-142-3p在早期膀胱癌患者尿沉渣中显著升高（FC=3.93, P=0.0002,AUC=0.736）。组合测定miR-145-5p/miR-142-3p比值在膀胱癌患者与健康对照者间有统计学差异（P=0.00004, AUC=0.755）。结论测定尿沉渣中的miR-142-3p能有效发现早期膀胱癌,而检测miR-145-5p/miR-142-3p比值的诊断价值更高。     

尿液中miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p检测在前列腺癌中的诊断及临床意义

目的:建立尿液miRNA检测板,作为诊断前列腺癌（PC）的无创性生物标志物。方法:采用miRNAs芯片分析对照1组（6名）及PC1组（18例）中miRNAs表达,并进一步利用qRT-PCR对20名对照2组及59例PC2组（GS2 6组22例,GS2 7组19例,GS28组18例）尿液、血清标本进行差异基因的进一步验证。应用受试者工作特征（ROC）曲线分析组合诊断模型的准确真实性。结果:获得在PC1组中20个miRNAs差异表达谱,与对照1组相比,miRNA-24-3p及miRNA-222-3p显著表达下调（T=5.79、4.59,均P＜0.05）,用于PC诊断检测。在扩大样本量的PC患者尿液及血清样本中,根据GS分组的GS26、GS27及GS28组中,与对照2组相比,miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p表达水平也都显著下调（t=3.89,P＜0.05）,ROC分析联合诊断模型具有较高的准确度（曲线下面积为0.93,OR=1.37,95% CI:0.92~1.76,P＝0.02）。结论:在尿液、血清样本中建立了miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p组合模型,可作为诊断PC的无创性生物标志物。     

七种微小RNA在良恶性肺结节鉴别诊断中的价值

目的 探讨良性肺结节与恶性肺结节[早期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）]患者外周循环血中7种微小RNA（miRNA）的表达差异及诊断价值。方法 使用RT-PCR检测270例早期NSCLS（其中腺癌200例,鳞癌70例）和327例良性肺结节外周循环血中7种miRNA（miR-15b-5p、miR-16-5p、miR-17-5p、miR-19a-3p、miR-20a-5p、miR-92a-3p、miR-146b-3p）的相对表达量,并对其进行统计学分析。结果 miR-16-5p、miR-17-5p、miR-19a-3p的表达量越低,NSCLS风险越大;miR-15b-5p、miR-146b-3p的表达量越高,NSCLS风险越大。miR-16-5p与miR-20a-5p的差值（即miR16-20）对NSCLS的诊断价值最高（曲线下面积0.71,灵敏度77.3%,特异性65.4%）;联合诊断能够提高诊断的灵敏度与特异性。结论 外周血中这7种miRNA在良恶性肺结节的诊断中有较高的灵敏度和特异度,可能成为辅助诊断早期NSCLS可靠的生物标记物。     

血浆微RNA联合检测在前列腺癌中的诊断价值

目的 分析前列腺癌患者血浆miRNA的差异表达,探索血浆miRNA联合检测在前列腺癌中的诊断潜能。方法 应用基因表达汇编数据库获得前列腺癌患者血浆及血清差异表达的miRNA,通过最近邻中心分类器曲线下面积优化模型（NCC-AUC）筛选出3个权重最高的miRNA;收集上海市宝山区中西医结合医院诊治的45例前列腺癌患者（前列腺癌组）、40例慢性前列腺炎患者（前列腺炎组）和42例健康体检者（健康对照组）血浆样本,采用qPCR对候选血浆miRNA表达水平进行检测;应用ROC曲线分析候选miRNA单独及联合检测对前列腺癌的诊断价值。结果 通过生物信息学分析,获得26个前列腺癌相关的差异表达miRNA,经NCC-AUC进一步筛选,miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p和miRNA-6780a-5p权重最高,进入临床样本验证阶段。临床验证结果显示,血浆miRNA-21-5p水平在健康对照组、前列腺炎组、前列腺癌组中依次升高,3组之间差异有统计学意义（P<0.01）;前列腺炎组血浆miRNA-5189-5p水平低于前列腺癌组与健康对照组（P均<0.01）;前列腺癌组血浆miRN...     

急性单核细胞白血病特异性miRNA分子标志物的鉴定

目的：鉴定急性单核细胞白血病中特异高表达的microRNA（miRNA）。方法：通过分析急性单核细胞白血病细胞系（THP-1）与慢性粒细胞白血病细胞系（K562）的miRNA-seq数据,筛选一批在THP-1细胞系中显著高表达的miRNA,通过实时荧光定量PCR技术对这些miRNA在THP-1和K562细胞系中进行验证,获得在THP-1细胞系中特异高表达的miRNA,再通过实时荧光定量PCR技术在急性单核细胞白血病患者骨髓样品中进行验证,鉴定有望应用于该类疾病临床诊断的分子标志物。结果：最终筛选得到了3个在急性单核细胞白血病中特异高表达的miRNA分子标志物：let-7d-5p、miR-222-3p、miR-221-3p。结论：通过结合组学数据,利用实时荧光定量PCR技术在细胞系及临床样本中的验证,最终鉴定了3个在急性单核细胞白血病中特异高表达的miRNA分子标志物。     

循环miRNA21在肝细胞癌早期诊断中的价值

目的 探讨血浆中miRNA21作为肝细胞癌早期生物标志物的诊断价值.方法采用定量RT-PCR（quantitative RT-PCR）检测55例肝细胞癌患者、60例慢性肝炎患者、50例健康对照者血浆中miRNA21的表达水平.结果 血浆miRNA21在肝细胞癌组中水平显著高于慢性乙肝组（P〈0.01）和健康对照组（P〈0.01）.通过绘制受试者工作曲线（receiver-operator characteristic curve,ROC curve）分析,miRNA21作为肝细胞癌和慢性乙肝的诊断标志物,其诊断价值分别为：灵敏度（65%）,特异度（85%）,受试者工作曲线下面积（AUC）为0.771,而miRNA21作为肝细胞癌和健康对照者的诊断标志物,其诊断价值分别为：灵敏度（89%）,特异度（95%）,AUC为0.956.结论 miRNA21是肝细胞癌潜在的早期诊断标志物.     

外周血miR-483-3p联合D-二聚体检测对下肢深静脉血栓的诊断价值

目的 探讨外周血单核细胞微小RNA-483-3p(miR-483-3p)联合D-二聚体对下肢深静脉血栓(DVT)的诊断价值.方法 选择2016年9月至2017年6月安徽医科大学第二附属医院确诊的DVT患者30例为血栓组,选取同期住院非DVT患者30例为对照组.分别通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Sysmex CS5100全自动凝血分析仪检测两组外周血单个核细胞miR-483-3p表达量及血浆中D-二聚体含量.采用受试者工作特征曲线(ROC)统计分析miR-483-3p和血浆D-二聚体分别对DVT诊断的特异性、敏感性和准确率,以及两者联合对DVT诊断的效能.结果 与对照组比较,血栓组患者单个核细胞miR-483-3p表达和血浆D-二聚体值升高,差异有统计学意义(P<0.05).两者对DVT诊断的敏感度和特异度显示,miR-483-3p联合D-二聚体诊断DVT敏感度为96.63％、特异度为90.00％,AUC为0.9382.结论 外周血单个核细胞miR-483-3p联合血浆D-二聚体检测可作为诊断下肢深静脉血栓的参考指标.     

MicroRNA-183-5p在动脉粥样硬化患者中的表达及其临床意义

目的 分析microRNA-183-5p (miR-183-5p)在动脉粥样硬化患者中的表达及其临床意义。方法 选取2021年1月—2022年8月四川省人民医院收治的经血管造影确诊的103例动脉粥样硬化患者为研究组,选取同期该院年龄相当的90例健康体检者为健康组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测两组患者血清miR-183-5p的表达,绘制受试者工作特征（ROC）曲线,分析miR-183-5p在动脉粥样硬化中的诊断价值。结果 研究组血清miR-183-5p mRNA相对表达量高于健康组（P <0.05）;研究组中高Gensini积分组患者血清miR-183-5p mRNA相对表达量高于低Gensini积分组（P <0.05）;Pearson相关性分析结果显示,miR-183-5p与C反应蛋白、颈动脉内中膜厚度及Gensini积分呈正相关（r=0.664、0.571和0.712,均P <0.05）;ROC曲线分析结果显示,miR-183-5p诊断动脉粥样硬化的截断值为2.08,敏感性和特异性分别为87.8%(95%CI:0.832,0.924)和91.6...     

多囊卵巢综合征患者血清miR-143-3p、miR-222-3p及抗苗勒管激素水平检测及其临床价值

  目的  探讨血清miR-143-3p、miR-222-3p水平联合抗苗勒管激素(AMH)在多囊卵巢综合征(PCOS)中的表达及临床价值。  方法  选取2018年1月—2022年3月三亚市妇女儿童医院收治的128例PCOS患者(PCOS组)和50例健康女性(对照组)。PCOS患者根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为胰岛素抵抗组(83例,HOMA-IR≥2.69)和非胰岛素抵抗组(45例,HOMA-IR＜2.69);根据BMI分为肥胖组(40例,BMI≥28)和非肥胖组(88例,BMI＜28);根据睾酮水平分为高雄激素组(71例,睾酮≥0.7 ng/mL)及非高雄激素组(57例,睾酮＜0.7 ng/mL)。采用实时定量PCR法检测血清miR-143-3p及miR-222-3p水平和电化学发光法检测AMH水平。ROC曲线分析miR-143-3p、miR-222-3p联合AMH对PCOS的诊断价值。相关性分析采用Pearson相关分析。  结果  PCOS组血清miR-143-3p、miR-222-3p及AMH水平均明显高于对照组,肥胖组明显高于非肥胖组,高雄激素组明显高于非高雄激素组,胰岛素抵抗组明显高于非胰岛素抵抗组,差异均有统计学意义(均P＜0.001)。ROC曲线显示,miR-143-3p、miR-222-3p及AMH三项联合诊断PCOS的曲线下面积最大(AUC=0.910,95% CI:0.852~0.974)。PCOS患者血清miR-143-3p、miR-222-3p水平与AMH均呈正相关关系(r=0.842、0.795,均P＜0.001)。  结论  PCOS患者血清miR-143-3p、miR-222-3p及AMH水平明显升高,三项联合检测对PCOS诊断具有较高的价值。      

儿童急性白血病耐药相关microRNA的筛选

【目的】 寻找?鉴定与儿童急性白血病耐药相关的microRNA,为治疗耐药白血病探索新的途径?【方法】 在不同的阿霉素(DOX)浓度下培养原代细胞K562/WT,建立三种不同浓度的耐药白血病细胞株K562/DOX?提取K562/WT及其耐药细胞株的RNA进行基因芯片检测?qRT-PCR等方法,初步筛选可能与白血病细胞耐药相关的microRNA?收集治疗前?治疗后骨髓完全缓解及早期复发的儿童急性白血病的骨髓样本,提取RNA检测筛查的白血病细胞耐药相关的microRNA的表达,进一步验证体外实验的结果?【结果】 ①在K562/DOX耐药细胞株,miR-20a?miR-188-3p?miR-214等microRNA表达上调,而miR-331-5p?miR-338-5p?miR-27a?miR-15a和miR-455-3等的表达明显下调?qRT-PCR进一步证实了上述结果,并且发现miR-331–5p 和 miR-27a的表达与P-gp的表达呈反向关系?②在复发的骨髓样本组(13例),miR-331–5p 和miR-27a表达明显低于治疗前骨髓组(24例)和治疗后完全缓解组(11例),证明复发的儿童急性白血病耐药细胞存在miR-331-5p 和miR-27a低表达? 【结论】 耐药白血病细胞存在microRNA差异性表达,其中miR-331–5p 和miR-27a在耐药白血病细胞及复发的急性白血病细胞中低表达?推测miR-331-5p 和miR-27a可能在儿童急性白血病耐药中起到重要作用?     

血清microRNA表达谱对原发性胆汁性肝硬化的诊断价值

目的: 寻找原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者血清中差异表达的microRNAs。方法: 首先,将PBC组和健康对照组血清标本各3例各自混合,采用Illumina GAⅡx高通量测序技术分析上述2组样本,筛选出PBC患者与健康对照者表达差异有统计学意义的miRNAs;其次,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对差异表达的miRNAs在扩大标本中进行验证。最后,预测miRNAs的靶基因并进一步分析其作用。结果： 高通量测序技术筛选出143条miRNAs表达差异有统计学意义,其中,22条差异倍数>2倍。经过qRT-PCR验证,miR-122, miR-141, miR-34a在PBC组中的表达水平明显高于对照组,与测序结果表达趋势一致。靶基因预测结果显示,在细胞核和细胞质中,miRNAs主要通过与蛋白质结合发挥信号转导的作用。结论： PBC患者存在差异表达的miRNAs,且其对PBC的诊断有一定的参考价值。     

研究STEMI患者RBP4、HbA1c与miR-1-3p检测水平的诊断价值及与病情关系

目的 研究ST段抬高型心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI）患者视黄醇结合蛋白4（retinol-binding protein 4,RBP4）、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin,HbA1c）与微小RNA（microRNA,miRNA）-1-3p检测水平的诊断价值及与病情关系。 方法 选取河北省保定市第二医院收治的136例STEMI患者为STEMI组,根据SYNTAX评分分为轻度病变组（n=55）、中度病变组（n=43）、重度病变组（n=38）3个亚组,选取同期65例体检健康者为对照组。收集研究对象临床资料,采用酶联免疫吸附测定检测血清RBP4和HbA1c水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-1-3p水平。Spearman相关系数分析STEMI患者血清RBP4、HbA1c和miR-1-3p水平与SYNTAX评分的相关性。多因素Logistic回归分析STEMI发生的危险因素。受试者工作特征曲线分析血清RBP4、HbA1c和miR-1-3p水平对STEMI的诊断价值。 结果 与对照组比较,STEMI组吸烟史比例和总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol, LDL-C）、空腹血糖、C反应蛋白（C reactive protein,CRP）、RBP4、HbA1c、miR-1-3p水平升高,高密度脂蛋白胆固醇水平降低（t/Z=2.459~9.608,P均＜0.05）。轻度、中度、重度病变组血清RBP4、HbA1c和miR-1-3p水平依次升高（F=18.202~48.798,P均＜0.001）。STEMI患者血清RBP4、HbA1c和miR-1-3p水平与SYNTAX评分呈正相关（r=0.588~0.647,P均＜0.001）。吸烟史、CRP、LDL-C、RBP4、HbA1c、miR-1-3p可作为STEMI发生的独立危险因素（OR=1.037~1.646,P均＜0.05）。血清RBP4、HbA1c和miR-1-3p联合诊断STEMI的曲线下面积高于各指标单独诊断（Z=3.025~4.213,P均＜0.05）。 结论 STEMI患者血清RBP4、HbA1c和miR-1-3p水平升高,与冠状动脉病变程度正相关,可作为反映STEMI患者病变程度的参考指标。     

皮肤鳞状细胞癌中miR-383-5p、KIF3B mRNA的表达及临床意义

目的 分析皮肤鳞状细胞癌(cSCC)组织中微小RNA(miRNA)-383-5p、驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)mRNA的表达及临床意义.方法 选取2016年1月—2021年8月华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤科收治手术切除cSCC患者49例,qRT-PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-383-5p、KIF3...