细胞周期蛋白cyclinD1和p16在胃癌中的表达及其意义

应用免疫组化SP法检测cyclinD1和p16在50例胃癌和24例慢性胃炎中的表达。结果:50例胃癌中,cyclinD1的阳性表达率为64%(32/50),p16蛋白的阳性表达率为44%(22/50)。24例慢性胃炎中,cyclinD1的表达率为0,p16的表达率为100%。高分化腺癌中cyclinD1的过表达率为38.5%(5/13),低分化腺癌中为90.9%(20/22),两者差异显著(P<0.0.1);有淋巴结转移组的cyclinD1过表达率为73.1%(19/26),无淋巴结转移组为54.1%(13/24),两者无显著性差异(P>0.05)。高分化腺癌中p16的表达率为76.9%(10/13),低分化腺癌为27.3%(6/22),两者差异显著(P<0.01);有淋巴结转移组的p16的表达率为30.8%(8/26),无淋巴结转移组的为58.3%(14/24),两者有差异(P<0.05)。认为cyclinD1的过表达和p16的缺失两者可能共同参与了胃癌的发生发展过程,cyclinD1和p16作为反映胃癌病理学特点的参考指标有一定的临床意义。     

Vav1 蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的 检测Vav1 蛋白在胃癌患者外周血和肿瘤组织中的表达,并对其相关性和临床意义进行探 讨。方法 选取行胃癌根治术的200 例患者作为手术组,同期就诊的术后复发患者62 例作为复发组,年龄、 性别相匹配的健康体检者100 例作为对照组。取肿瘤组织及正常胃黏膜组织的石蜡标本进行免疫组织化学SP 法染色,检测肿瘤组织及周围正常黏膜组织中Vav1 蛋白的表达;酶联免疫吸附试验检测各组外周血中Vav1 蛋白的含量。结果 手术组患者术前外周血中Vav1 浓度高于对照组（P <0.05）;术后Vav1 浓度下降,与对 照组比较差异无统计学意义（P >0.05）。复发组外周血Vav1 水平高于手术组术前水平（P <0.05）。手术组肿 瘤组织Vav1 蛋白表达较正常胃黏膜升高（P <0.05）。复发组肿瘤组织Vav1 蛋白表达较手术组升高（P <0.05）。 手术组和复发组患者肿瘤组织与外周血Vav1 蛋白表达有相关性（P <0.05）。结论 Vav1 蛋白在胃癌患者外 周血及肿瘤组织中表达升高,且有相关性。外周血Vav1 可作为新的肿瘤标志物,对评价肿瘤变化、预测肿瘤 复发有重要意义。     

RASSF1基因在胃癌组织和细胞中的表达及意义

目的 研究RASSF1基因的3种剪接体(RASSF1A、RASSF1B、RASSF1C)在胃癌组织及细胞中的表达特点.方法 应用生物信息学分析RASSF1基因的3种剪接体的结构特点; 同时利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组织、癌旁组织及不同胃癌细胞系BGC-823和SGC-7901细胞中3种剪接体的mRNA表达水平.结果 RASSF1基因3种剪接体在胃癌不同分化程度的细胞系BGC-823和SGC-7901细胞中均有表达,在60例胃癌组织中RASSF1A、RASSF1B表达缺失率分别为60.2%(37/60)、25%(15/60),RASSF1C基因在胃癌组织及癌旁组织表达率相近约为86.7%(55/60).结论 RASSF1 3种剪接体在胃癌组织中的表达下调, RASSF1B和RASSF1C在胃癌中的表达差异无显著性,其余基因比较差异有显著性.RASSF1B的表达可能与细胞的分化程度有关.     

胃癌组织中ATBF1蛋白的表达及临床病理意义

 目的 观察胃癌发生和演进过程中ATBF1蛋白表达的作用及相关机制。方法 福尔马林固定、石蜡包埋的胃癌及癌旁黏膜标本制作成组织芯片,制备4种ATBF1抗体（NT440、1-12、D1-120和AT6）后进行免疫组化反应,检测胃癌中ATBF1蛋白表达,并比较其与胃癌临床病理特征和ki-67表达的关系。 结果 胃癌中细胞质NT440和AT6阳性表达率低于癌旁黏膜（P<0.05）,但细胞核NT440的表达与其相反（P<0.05）。老年胃癌患者中D1-120 和AT6的阳性表达率高于年轻患者（P<0.05）,D1-120 和AT6表达与胃癌淋巴结转移或局部脉管侵袭呈正相关（P<0.05）。值得注意的是,胃癌中1-12和ki-67阳性表达水平呈正相关（P<0.05）。结论 胃癌发生和演进中异常ATBF1表达及核质转位发挥重要作用,ATBF1表达通过调节细胞增殖参与胃癌局部脉管侵袭和淋巴结转移。     

CyclinD1在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探讨胃癌组织中细胞周期素D1(cyclinDl)的表这及其意义。方法 采用S-P免疫组织化学方法测定胃癌组织中cyclinD1的表达水平。结果 胃癌组织中cyclinDl的阳性率为31．46％，明显高于癌周正常组织，而cyclinD1与胃癌大小、分化程度、淋巴结转移、浸润深度及分期无相关性。结论 cyclinD1在胃癌组织中有较高的表达率，与胃癌的发生、发展关系密切，可能是胃癌发生的早期分子事件，与预后无关。     

CIAPIN1和P-gp蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(CIAPIN1)和P糖蛋白(P-gp)蛋白在胃癌组织中的表达,分析二者对胃癌诊断的临床意义.方法 回顾性分析2017年8月至2019年3月于本院行手术切除治疗的60例胃癌患者的临床资料,分析CIAPIN1、P-gp蛋白在胃癌及癌旁组织中的阳性率,分析临床分期、淋巴结转移情况对胃癌...     

Survivin和rac1蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

[摘要] 目的 探讨Survivin和rac1蛋白在正常胃和胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 应用链酶亲和素-生物素过氧化物酶复合物(SABC)免疫组化法检测65例胃癌及癌旁6cm处正常胃黏膜组织中Survivin和rac1蛋白的表达,并分析其与胃癌临床、病理参数之间的关系。结果 (1)Survivin蛋白在癌旁正常胃黏膜组织中染色均为阴性,在胃癌组织中52.3%染色阳性（P<0.01）;rac1蛋白染色阳性率在胃癌组织中(75.4%)显著高于癌旁正常胃黏膜组织（21.5%）（P<0.01）;（2）随胃癌组织分化程度的降低、浸润深度的增加、TNM分期的升高及淋巴结和远处转移的发生, Survivin和rac1蛋白的染色阳性率明显升高(P<0.05);(3) Survivin阳性胃癌组织中的rac1蛋白表达水平显著高于Survivin阴性者(P<0.01); 结论 Survivin和rac1的表达与胃癌的生物学行为密切相关,对胃癌组织中Survivin和rac1的联合检测有助于预测胃癌患者的预后。     

MicroRNA-188在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究microRNA-188在胃癌患者的组织和血液中的表达情况,并研究microRNA-188对人胃癌细胞MGC-803增殖和凋亡的影响及其机制。方法:收集10例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,应用PCR方法检测microRNA-545、microRNA-575、microRNA-1269、microRNA-99a、microRNA-452、microRNA-188的表达水平;收集健康志愿者和胃癌患者的血液,应用PCR检测这6种microRNAs的表达水平;应用转染试剂将microRNA-188 mimics、microRNA-188 AMO及其NC转染人胃癌细胞MGC-803, 24 h后应用CCK-8实验和TUNEL染色检测细胞增殖能力和凋亡情况;应用在线网站,预测microRNA-188的靶基因;应用q-PCR和Western blot实验检测microRNA-188对SIX1是否具有调控作用。结果:与癌旁组织相比, microRNA-188在胃癌组织中表达显著降低。与健康人相比,microRNA-188在胃癌患者的血液中显著降低。CCK-8结果显示,microRNA-188 mimics显著抑制胃癌细胞的增殖,而microRNA-188 AMO能够显著提高胃癌细胞的增殖能力。TUNEL染色结果显示,microRNA-188能够促进胃癌细胞发生凋亡,而其AMO能够显著抑制胃癌细胞发生凋亡。q-PCR和Western blot实验结果表明,microRNA-188能够显著降低其靶点SIX1的mRNA和蛋白水平。结论:MicroRNA-188在胃癌患者的组织和血液中的表达水平显著降低,且其通过抑制SIX1发挥调控胃癌细胞增殖和凋亡的作用。     

SMURF1蛋白在人胃癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究SMAD泛素化调节因子1（SMURF1）蛋白在人胃癌组织中的表达及临床意义。方珐：采用免疫组化SP法检测68例胃癌及对应癌旁组织中SMURF1蛋白表达情况,分析SMURFl蛋白表达与胃癌不同临床病理特征的相关性。结果：SMURFl蛋白在胃癌组织中的阳性率为76．5％（52／68）,而在对应癌旁组织中的阳性率仅为26．5％（18／68）,差异具有统计学意义（χ2=34．029,P=0．000）。胃癌组织中SMURFl蛋白表达与浸润深度（χ2=5．461,P=0．019）、淋巴结转移（χ2=9．141,P=0．002）和肿瘤分期（χ2=8．380,P=0．004）显著相关,而与性别、年龄和肿瘤大小无明显相关。结论：胃癌组织中SMURFl蛋白异常高表达,其高表达与胃癌侵袭转移密切相关,提示SMURFl在胃癌发生、发展中可能发挥重要作用。     

LYVE-1在胃癌中的表达及意义

目的：通过LYVE-1在胃癌组织中的表达,探讨胃癌组织癌内、癌周淋巴管生成机制及其与淋巴结转移的关系。方法：选用泸州医学院附属医院病理科随访的53例胃癌患者的手术切除组织病理存档蜡块,利用免疫组织化学方法检测LYVE-1和nm23在53例胃癌组织及正常胃黏膜组织中的表达,并进行微淋巴管密度（lymphatic vessel density,MLD）计数;分析nm23表达与LYVE-1阳性MLD、淋巴结转移的关系。结果：在胃癌组织中,癌周LYVE-1阳性MLD在淋巴结转移阳性组明显高于淋巴结转移阴性组（P〈0.01）;并显著高于正常胃黏膜组织及癌内组织（P〈0.01）;后两者MLD无显著性差异（P〉0.05）。而癌内LYVE-1阳性MLD在各临床病理参数之间无显著差别（P〉0.05）。结论：癌周淋巴管生成可能促进了淋巴结转移的发生,癌周淋巴管对胃癌的发生、发展起重要作用。     

环状RNA-VANGL1对胃癌细胞增殖和凋亡的作用及机制研究

目的 探讨环状RNA-VANGL1(circ_VANGL1)对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其中的分子机制。方法 采用qRT-PCR检测circ_VANGL1在胃癌组织和细胞中的表达水平,并分析circ_VANGL1与患者临床病理因素如年龄、性别、肿瘤体积、病理分型、分期、淋巴结转移之间的相关性。构建携带circ_VANGL1全长序列的慢病毒（Lenti-circ_VANGL1）和携带circ_VANGL1 shRNA的慢病毒（Lenti-circ_VANGL1-shRNA）分别转染胃癌细胞株（NCI-N87和HGC-27）。CCK-8实验检测circ_VANGL1表达上调或下调后NCI-N87和HGC-27细胞的增殖变化。Annexin Ⅴ/PI实验检测circ_VANGL1表达上调或下调后NCI-N87和HGC-27细胞凋亡的变化。JC-1法检测circ_VANGL1表达上调或下调后NCI-N87和HGC-27细胞线粒体势能变化。Western印迹法检测Fas、FADD、bax、bcl-2、细胞色素C以及Caspase-3活性片段的蛋白表达变化。结果 circ_VANGL1在胃癌组织中表达显著高于癌旁组织,且其表达水平与肿瘤体积、分期和淋巴结转移显著正相关。Lenti-circ_VANGL1可以上调NCI-N87和HGC-27细胞内circ_VANGL1表达并促进细胞增殖;Lenti-circ_VANGL1-shRNA可以下调circ_VANGL1表达并诱导细胞凋亡。Lenti-circ_VANGL1-shRNA可以导致细胞线粒体膜势能降低。Lenti-circ_VANGL1-shRNA可以促进Fas细胞表面死亡受体（Fas cell surface death receptor, Fas）、Fas相关蛋白死亡结构域(Fas associated via death domain, FADD)、bax（BCL2 associated X）、胞质细胞色素C（cytoplasmic cytochrome C）以及Caspase-3活性片段表达增高,降低bcl-2和线粒体细胞色素C蛋白表达。miRDB软件显示circ_VANGL1存在12个潜在的靶miRNAs,其中miR-605-3p、miR-377-5p、miR-4468以及miR-5008-5p等4个miRNAs的表达在circ_VANGL1表达下调后显著增高。结论 circ_VANGL1在胃癌中表达异常增高,参与调控胃癌细胞的增值和凋亡,在胃癌发生发展过程中发挥重要作用。     

一种独特的凋亡调节蛋白IEX-1

IEX-1基因于1993年被克隆.IEX-1在多种组织器官中表达,是一种凋亡相关调节蛋白.已有研究表明,IEX-1具有正性或负性调节细胞生长和凋亡作用,可抑制细胞生长,促进细胞凋亡;也可抑制细胞凋亡.且与病毒感染、心血管疾病有关,特别是在多种肿瘤中高表达.其调控机制种类繁多,过程复杂,至今尚未完全明确.深入研究其功能对...     

INI1调节胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力的机制研究

目的：探讨INI1在胃癌进展中的作用及其调节胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力的相关机制。 方法：以荧光定量RT-PCR和Western-blot技术检测胃癌、癌旁组织的INI1表达情况并进行比较;将INI1-GFP真核表达质粒转染人胃癌SGC7901细胞株,MTT法检测肿瘤细胞增殖活性、流式细胞术检测细胞周期,以TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划伤试验和侵袭小室试验检测细胞侵袭转移能力。同时,用荧光定量RT-PCR和Western-blot技术检测转染前后细胞株的INI1水平,检测增殖相关基因P16、P21、Cyclin D1、Cyclin A水平,检测凋亡相关基因P53、Bax、Bcl2、Caspase3水平和侵袭相关基因ICAM1、MMP2、MMP9、TIMP1水平。 结果：胃癌组织的INI1表达水平低于癌旁组织。INI1-GFP真核表达质粒转染人胃癌SGC7901细胞株后细胞的增殖和侵袭能力受到抑制、凋亡能力及G0/G1期细胞增高。转染后INI1和P16、P21、P53、Bax、TIMP1表达增高,Cyclin D1、Cyclin A、Bcl2、ICAM1、MMP2、MMP9表达下调,而Caspase3表达无明显变化。 结论：INI1在胃癌癌变、进展中发挥重要作用,这种作用是通过调节胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭能力而实现的。     

硝酸镓对胃癌细胞增殖与凋亡的作用

目的通过硝酸镓、顺铂单药及二者联合用药对胃癌BGC823细胞作用,观察其对胃癌BGC823细胞诱导凋亡、抑制增殖的影响。方法通过对胃腺癌BGC823细胞培养及干预,采用流式细胞仪技术对凋亡细胞进行测定;MTT技术对肿瘤细胞增殖进行测定。结果MTT及流式细胞仪检测结果显示：硝酸镓对BGC823细胞作用呈剂量一时间依赖效应;小剂量硝酸镓与顺铂配伍应用能大大提高顺铂作用效应,配伍高浓度组在24h、48h、72h的抑制率为70．0％、71．4％、72．3％。结论硝酸镓对胃癌细胞的作用与顺铂无明显差异,为肿瘤治疗及制备抗肿瘤药物提供新的途径。     

Max二聚化蛋白1（Mad1）真核表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的：构建Max二聚化蛋白1 (Max dimerization protein 1,Mad1) 的真核表达载体,研究Mad1对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法：利用DNA重组技术将Mad1基因克隆至pEGFP-N1载体,构建成pEGFP-N1-Mad1重组真核表达载体。经酶切和测序鉴定后,采用脂质体转染技术将重组质粒瞬时转染人胃癌AGS细胞, RT-PCR及Western blot检测Mad1基因和蛋白的表达。荧光显微镜观察Mad1在AGS细胞内的定位情况。CCK-8和Transwell实验研究Mad1对胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。结果：成功构建携带Mad1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Mad1。将重组质粒瞬时转染AGS细胞后,RT-PCR和Western blot检测到Mad1 基因和蛋白的表达。Mad1基因表达产物定位于AGS细胞核中。CCK-8和Transwell实验结果显示,转染Mad1的AGS细胞与转染空载体的AGS细胞、及正常AGS细胞相比,细胞增殖活力和迁移能力明显降低。 结论：成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-Mad1,研究表明Mad1可以抑制胃癌AGS细胞的增殖和迁移。     

汉防己甲素联合紫杉醇对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TET)联合化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响?方法:MKN-45细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞长至亚单层后加TET和 (或)PTX,连续培养48 h?四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖情况,DAPI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况?结果:TET和PTX单药或联合均呈剂量依赖性地抑制MKN-45细胞增殖,两药联合时IC50较两药单用时显著降低(P < 0.05)?DAPI染色和流式细胞仪显示TET和PTX联合用药组细胞凋亡率显著高于单药组(P < 0.05)?结论:TET联合PTX对胃癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导有良好的协同效应?     

双氢青蒿素促胃癌细胞凋亡的作用

目的 研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)生长抑制和促凋亡的作用.方法 用WST-1方法检测DHA处理后的胃癌细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 不同浓度的DHA可以抑制胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)的增殖,且呈现浓度依赖性增长趋势.DHA作用48 h后,胃癌细胞的周期阻滞在S期,同时有诱导胃癌细胞凋亡的作用;DHA作用24 h和48 h后,对胃癌细胞的迁移能力有抑制作用.结论 DHA可有效地抑制胃癌细胞的增殖,并促进其凋亡.     

SP-141抑制胃癌细胞增殖、迁移并促进凋亡

目的：探讨MDM2的新型小分子抑制剂SP-141对胃癌细胞株MGC803和BGC823增殖、凋亡以及迁移的影响。方法：胃癌细胞经SP-141处理后,采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术、Hoechst染色法和划痕实验分别检测细胞存活率、细胞增殖、周期分布、凋亡以及迁移能力改变。Western blot检测相关分子蛋白质表达水平。结果：TCGA数据库中32对胃癌组织中的MDM2 mRNA表达水平高于癌旁组织（P<0.01）;5种胃癌细胞株均检出MDM2,表达水平差异不大;SP-141抑制MGC803和BGC823的细胞存活率以及克隆形成,诱导其细胞周期阻滞在G2/M期;SP-141增加细胞凋亡发生率,并下调Bcl-2同时上调Bax、Caspase-3剪切体、PARP剪切体的蛋白表达;SP-141抑制细胞迁移并伴有FAK蛋白表达量的下降。结论：MDM2的新型小分子抑制剂SP-141可有效抑制胃癌细胞增殖、迁移并促进细胞凋亡。     

血管生成素-1在体外对人胃癌细胞生物学作用的研究

目的:探讨人血管生成素-1(Ang1)及其与血管内皮生长因子165(VEGF165)共同作用对人胃癌细胞的生物学作用,研究其在肿瘤发生中的作用机制。方法:应用复制缺陷型腺病毒(Ad)-绿色荧光蛋白(GFP)、Ad-Ang1、Ad-VEGF165和Ad-Ang1 Ad-VEGF165/2转染人胃癌细胞株MGC-803,使用MTT比色法分析它们对胃癌细胞增殖的影响;通过流式细胞仪分析血浆饥饿时其对凋亡的影响;使用免疫细胞化学法检测Ki-67的表达;应用RT-PCR方法半定量检测bcl-2 mRNA、bax mRNA的表达情况。结果:MTT结果显示24、48和72 h Ad-Ang1转染组、Ad-VEGF165转染组和Ad-Ang1 Ad-VEGF165/2转染组吸光度均明显高于Ad-GFP组及对照组(P<0.05);Ad-GFP组与对照组相比无显著差异(P>0.05);Ad-Ang1 Ad-VEGF165/2转染组吸光度明显高于Ad-Ang1转染组和Ad-VEGF165转染组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示Ad-Ang1、Ad-VEGF165及Ad-Ang1 Ad-VEGF165/2处理组与对照组及空转染组相比均能够显著抑制细胞凋亡(P<0.01)。免疫细胞化学法显示各转染组Ki-67表达强度均显著高于对照组和Ad-GFP组(P<0.01)。RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA在各转染组中的表达要明显高于对照组(P<0.05);bax mRNA在各转染组中的表达要明显低于对照组(P<0.05)。结论:Ang1、VEGF165和Ang1 VEGF165/2能够明显促进人胃癌细胞MGC-803增殖,抑制血浆饥饿时的凋亡,Ang1 VEGF165/2组的作用要显著强于Ang1组和VEGF165组。