沉默信息调节因子2相关酶1的研究进展

沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)是一种NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶,与多种细胞生物学功能如基因转录沉默、细胞生长周期调节、能量代谢包括糖异生和脂质累积、胰岛素分泌、血管生成、神经保护、病毒感染以及细胞衰老等有着密切的关系。SIRT1作用于各种蛋白质如p53、核因子κB、转录激活蛋白等使其去乙酰化而调节其功能。此外,SIRT1的调节剂有可能成为治疗疾病的新靶点。     

沉默信息调节因子2相关酶1在直肠癌中的表达及临床意义

目的：探讨沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）在直肠癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测86例直肠癌组织和30例癌旁正常直肠组织中SIRT1的表达情况,并与临床病理资料进行相关性分析。结果直肠癌组织中SIRT1的阳性表达率为88.4%,癌旁正常组织阳性率为16.6%,显著高于癌旁正常直肠组织（P<0.001）;直肠癌组织中SIRT1的表达与TNM分期（P<0.05）、淋巴结转移的有无（P<0.05）、肿瘤浸润深度（P<0.05）呈正相关;与肿瘤组织分化程度（P<0.05）呈负相关;而与性别、年龄、肿瘤直径无关（P>0.05）。结论 SIRT1在直肠癌中表达明显高于癌旁正常直肠组织,且与TNM分期、淋巴结转移、浸润深度及肿瘤分化程度密切相关。提示SIRT1在直肠癌发生发展过程中可能具有重要作用,可以作为直肠癌判断预后的重要指标之一。     

沉默信息调节因子2相关酶1:一种新的潜在药物作用靶点

沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的Ⅲ类组蛋白脱乙酰化酶,为哺乳动物Sirtuin家族成员之一。Sirt1可通过将组蛋白及多种非组蛋白去乙酰化,从而实现对基因转录、细胞生长周期调节、炎症反应以及能量代谢等多种信号通路的调节,进而参与细胞衰老、代谢稳态调节、自身免疫及肿瘤等一系列生理病理过程。随着研究的深入,Sirt1将有望在新药作用靶点及疾病治疗方面发挥作用。     

抑制核转录因子κBp65对鼻咽癌CNE2细胞的生物学影响

目的  探讨核转录因子κBp65（NF-κBp65）沉默对鼻咽癌的生物学作用。方法  构建NF-κBp65特异性小干扰核糖核酸（siRNA）质粒表达载体（pGPU6/RFP/Neo-NF-κBp65）和阴性对照质粒表达载体（pGPU6/RFP/Neo-NC）。采用非脂质体脂类转染剂将重组质粒表达载体转入人鼻咽癌CNE2细胞,建立NF-κ Bp65沉默的稳定转染CNE2细胞株（NF-κBp65沉默组）和阴性对照细胞株（阴性对照组）;蛋白质印迹法（Western blot）分析癌细胞中NF-κBp65基因的表达水平,MTT实验及流式细胞术分析癌细胞的增殖能力和细胞周期变化;复制裸鼠移植瘤模型,分析沉默NF-κBp65对癌细胞成瘤性的影响。结果  成功获得稳定转染CNE2细胞株,NF-κBp65沉默组细胞中NF-κBp65蛋白表达水平降低;NF-κBp65沉默后,CNE2细胞周期阻滞于S期,增殖速度减慢;NF-κBp65沉默组裸鼠移植瘤生长慢,重量轻,与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义（F =14.386,P <0.05）。结论  NF-κBp65沉默能降低鼻咽癌CNE2细胞的恶性生物学行为。

     

沉默信息调节因子相关酶类1/核因子κB信号通路与2型糖尿病的关系

2型糖尿病是一种年龄、肥胖及炎症相关性疾病。随着年龄增长以及脂肪组织的积聚,炎性细胞激活以及炎性因子释放导致胰岛素靶细胞敏感性下降,形成胰岛素抵抗,即2型糖尿病前期。沉默信息调节因子相关酶类1(SIRT1)是一种组蛋白脱乙酰化酶,在哺乳动物糖脂能量代谢和生命活动中扮演重要角色;核因子κB可诱导多种炎性细胞因子,是炎性反应和细胞生存的枢纽环节。该文主要讨论SIRT1通过调节核因子κB的表达作用于2型糖尿病的发病,为2型糖尿病的预防以及治疗提供更多理论基础。     

肝X受体激动剂上调人肾小球内皮细胞血栓调节蛋白表达的机制和作用

目的  探讨肝X受体（LXR）激动剂T0901317上调人肾小球内皮细胞（HRGEC）血栓调节蛋白（TM）表达的机制和作用。方法  Western blot检测25 mmol高糖和2μmol T0901317刺激后的HRGEC上IκBα、磷酸化IκBα、核转录因子-κB（NF-κB）p65、磷酸化NF-κB p65表达;免疫共沉淀法检测LXR与P300之间有无结合;重组腺病毒AdTMshRNA转染HRGEC,观察其对高糖下HRGEC分泌炎症介质的影响。结果 T0901317能显著降低高糖刺激后的IκBα和NF-κB p65磷酸化（P <0.05）,LXR-α沉默后NF-κB活性增强;2μmol T0901317刺激HRGEC 24 h后以Co-IP检测LXR与P300的表达上调;T0901317明显抑制高糖刺激下的HRGEC培养上清中TNF-α、IL-1β浓度（P <0.05）,AdTMshRNA转染HRGEC后,有或无T0901317刺激,HRGEC培养上清中TNF-α、IL-1β浓度与高糖组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论  LXR可能通过与P300发生相互作用阻断了NF-κB与P300之间的竞争性结合而提高TM的表达并抑制炎症介质的分泌。

     

白藜芦醇对糖尿病性白内障大鼠晶状体中P53表达的影响

目的：本实验通过研究白藜芦醇对STZ（链脲佐菌素）诱导糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞（lens epithelial cell,UEC）的凋亡及晶状体中P53表达的干预影响,以探讨白藜芦醇对糖尿病性白内障大鼠晶状体中上述指标的影响.方法：应用免疫组织化学染色法对大鼠LEC进行P53基因蛋白表达的检测,计算P53基因蛋白表达阳性细胞百分率.结果：P53在正常晶状体上皮细胞中几乎无蛋白表达,在糖尿病性白内障晶状体中蛋白表达高于白藜芦醇治疗组,且白藜芦醇低剂量组中蛋白含量高于白藜芦醇低剂量组.结论：白蓉芦醇能在一定程度上影响糖尿病性白内障晶状体中P53的表达,押制大鼠LEC凋亡,从而抑制糖尿病性白内障的进展.     

辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌沉默信息调节因子2相关酶2/核因子-κB信号通路的影响

目的研究辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌沉默信息调节因子2相关酶2(SIRT2)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 24只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、心力衰竭组和辛伐他汀组,每组8只。心力衰竭组和辛伐他汀组兔每日经耳缘静脉注射1 g·L-1阿霉素生理盐水注射液建立慢性心力衰竭模型,正常组兔经耳缘静脉注射相同剂量的生理盐水注射液;同时,辛伐他汀组兔每日给予1.5 mg·kg-1辛伐他汀灌胃,正常组和心力衰竭组兔给予相同剂量生理盐水灌胃,均连续12周。造模结束时各组兔做心脏超声观察心功能情况,并处死取左心室做石蜡包埋切片,苏木精-伊红染色观察心肌组织变化,免疫组织化学法检测各组兔心肌细胞中SIRT2、NF-κB蛋白表达,反转录-聚合酶链式反应检测心肌组织中SIRT2 mRNA、NF-κB mRNA的变化。结果与正常组比较,心力衰竭组和辛伐他汀组兔的左心室射血分数(LVEF)降低(P<0.01),左心室舒张末期内径(LVDd)增高(P<0.01);辛伐他汀组兔的LVEF高于心力衰竭组(P<0.01),LVDd低于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率降低(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率升高(P<0.01),且辛伐他汀组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率高于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率升高(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率降低(P<0.01),且辛伐他汀组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率低于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量降低(P<0.05),辛伐他汀组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量升高(P<0.01)。与心力衰竭组比较,辛伐他汀组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量升高(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量升高(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量降低(P<0.01);与心力衰竭组比较,辛伐他汀组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量降低(P<0.01)。结论辛伐他汀可能通过上调SIRT2的表达而抑制NF-κB的表达,从而改善兔的心功能。     

SIRT1对糖尿病胃轻瘫小鼠胃排空的影响及机制

目的 研究沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）对糖尿病胃轻瘫小鼠胃排空率的影响及机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠采用数字法随机分为空白组、模型组、溶剂对照组、白藜芦醇（resveratrol,Res）组,每组8只。除空白组以外,其余小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）造模,空白组小鼠给予等量的柠檬酸缓冲液腹腔注射。造模成功后,Res组小鼠给予Res 30 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射,溶剂对照组小鼠给予等量DMSO0.9%（质量分数）氯化钠注射液溶液腹腔注射,持续6周。6周后采用固体胃排空法测胃排空率,比色法检测小鼠胃窦组织中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）浓度,免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法（Western blotting,WB）检测胃窦组织中SIRT1、BTB-CNC异体同源体1（BTB and CNC homology 1,Bach1）、酪氨酸激酶受体（tyrosine kinase receptor,c-kit）和血红蛋白氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）的表达变化。结果 与空白组小鼠相比,模型组小鼠胃排空率明显下降,与模型组小鼠相比,Res组小鼠胃排空率明显升高（P<0.05）;与空白组小鼠相比,模型组小鼠胃窦组织中T-SOD活力下降,MDA含量升高,与模型组小鼠相比,Res组小鼠T-SOD活力升高,MDA含量下降（P<0.05）;模型组小鼠胃窦组织中SIRT1、c-kit、HO-1较空白组下降,而Bach1浓度高于空白组;Res组小鼠SIRT1、c-kit、HO-1均较模型组上升,而Bach1浓度低于模型组（P<0.05）。结论 上调SIRT1可以通过调控Bach1和HO-1蛋白浓度,减轻糖尿病胃轻瘫小鼠胃组织中的氧化应激,维持小鼠正常的胃排空。     

NMN在糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化中的作用及其机制

目的：探讨烟酰胺单核苷酸（NMN）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾细胞纤维性变的作用,阐明NMN通过沉默信息调节因子1（Sirt1）和AKT途径缓解肾实质细胞纤维化的机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）制备SD大鼠2型糖尿病模型,模型大鼠随机分为实验组（n=30）和对照组（n=10）：实验组大鼠分为糖尿病+NMN组（n=15,连续皮下注射NMN）和糖尿病+PBS组（n=15,大鼠注射200 μL无菌PBS）,之后断头处死大鼠,取肾脏组织进行切片和蛋白提取,Westen blotting法和免疫共聚焦法检测2组大鼠肾小球细胞中Sirt1、AKT、p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达水平。采用高浓度葡萄糖（200 mmol·L^-1）处理大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞3~6 d后,随机将培养细胞分为4组（分别给予0、50、100和200 μmol·L^-1 NMN）,以给予5.6mmol·L^-1葡萄糖不给予NMN的细胞作为对照组,继续培养24 h后收集细胞提取蛋白,采用Westen blotting法检测各组HBZY-1细胞中Sirt1、AKT和p-FoxO3a蛋白表达水平。结果：与糖尿病+PBS组比较,糖尿病+NMN组大鼠肾实质细胞中Sirt1和AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,糖尿病+NMN组大鼠肾实质细胞中p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达水平升高（P<0.01）。与对照组（给予5.6 mmol·L^-1葡萄糖）比较,50 μmol·L^-1NMN组HBZY-1细胞中Sirt1和AKT蛋白表达水平升高（P<0.05）,100和200 μmol·L^-1NMN组HBZY-1细胞中Sirt1、AKT和p-FoxO3蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：NMN能够通过调节Sirt1与AKT蛋白表达提高DN大鼠肾小球细胞中内源性p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达,NMN及其类似物可能具有潜在预防或治疗DN大鼠肾小球纤维化的作用。     

白藜芦醇对实验性兔肺动脉高压相关炎症因子表达的影响

目的  通过检测白藜芦醇（Res）干预后实验性兔肺动脉高压（PAH）模型肺组织中相关细胞因子表达水平的差异,探讨其在PAH发病机制中的作用。方法  将36只新西兰兔随机分为6组。对照组（A组）：动物皮下注射二甲基亚砜30 mg/kg。造模组：实验组动物适应性饲养1周后,皮下注射野百合碱30 mg/kg,连续注射7 d造模,然后将造模动物随机分为5组：模型组（B组）、实验药物组（C组）、高剂量组（D1组）、中剂量组（D2组）、低剂量组（D3组）,每组6只。注射后第45天,分别进行B超、心肌细胞苏木精-伊红染色和Tunnel染色,检测造模是否成功,造模成功后按体重计算给药剂量,受试药物高剂量120 mg/（kg·d）,中剂量60 mg/（kg·d）,低剂量30 mg/（kg·d）,阳性对照药物前列腺环素1 mg/（kg·d）喂饲相应的动物,1次/d,连续6周,每日观察动物的食量、活动、毛色及大小便变化,每周称体重。每隔2周随机采集各组实验动物外周血样本,采用酶联免疫吸附法试剂盒,分别对实验动物血清3种生物学标志物[转录因子-κB（NF-κB）、环氧化酶-2（COX-2）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）]的含量进行检测。结果  Res干预实验性兔PAH模型后,NF-κB、COX-2、iNos血清表达水平改善,其中高剂量组改善效果优于阳性对照药物前列腺环素。且在实验中经对比发现,NF-κB的特异性最明显,其他指标虽然有变化,但显著性不如NF-κB。结论  Res抑制血清中分泌NF-κB、COX-2、iNos的能力优于前列腺环素,Res可以通过抑制NF-κB/iNOS/COX2通路避免细胞损伤,改善PAH症状,表现出和前列腺环素相同或更好的作用。

     

白藜芦醇对人前列腺癌细胞株PC-3增殖及TGF-β1/Smad2信号通路影响研究

目的  探讨白藜芦醇对前列腺癌细胞株PC-3增殖及转化生长因子β1（TGF-β1）/Smad2信号通路的影响。方法  不同浓度白藜芦醇干预体外培养前列腺癌细胞株PC-3白藜芦醇不同时间。MTT检测白藜芦醇对PC-3细胞生长情况的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化情况,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测细胞内TGF-β1和Smad2 mRNA和蛋白表达水平的变化情况。  结果  MTT结果显示白藜芦醇显著抑制了前列腺癌细胞的生长。流式细胞结果表明白藜芦醇明显降低了前列腺癌细胞S期含量而增加了G0/G1期含量。而TGF-β1和其下游因子Smad2的mRNA和蛋白水平的表达也明显受到白藜芦醇的抑制,且这种抑制作用呈浓度一时间依赖性。结论  白藜芦醇可能够通过阻断TGF-β1/Smad2信号通路抑制前列腺癌细胞生长前列腺癌。

     

白芍总苷调控Sirt1/Foxo1通路对慢性心力衰竭大鼠的保护作用研究

目的:探讨白芍总苷对慢性心力衰竭大鼠的保护作用及沉默信息调节因子1（Sirt1）/叉头状转录因 子1（Foxo1）通路的影响。方法:腹主动脉缩窄法建立慢性心力衰竭大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、 白芍总苷组、Sirt1激活剂组,每组8只;假手术组除不缩窄腹主动脉外,其余操作步骤相同。白芍总苷组给予 1 g/kg白芍总苷胶囊生理盐水稀释液;Sirt1激活剂组给予5 mg/kg Sirt1720生理盐水稀释液;假手术组和模 型组给予等体积生理盐水,连续给药28 d。无创血压测量系统读取左室舒张末期压（LVEDP）和左心室收缩压 （LVSP）;苏木素-伊红（HE）、Masson染色观察心肌组织形态;酶联免疫吸附（ELISA）法检测心肌组织中纤 维连接蛋白（FN）、血清白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;蛋白免疫印迹检测大鼠 心肌组织中Sirt1、Foxo1、乙酰化Foxo1（Ac-Foxo1）蛋白水平。结果:模型组心肌纤维化严重,细胞破坏严 重和排列紊乱,心肌细胞增生性炎症浸润现象明显;白芍总苷组、Sirt1激活剂组心肌纤维化得到缓解,细胞 排列较整齐、炎症程度降低。模型组LVEDP水平、纤维化评分,心肌组织中FN水平、Ac-Foxo1蛋白水平,血清 IL-1β、TNF-α水平明显高于假手术组,差异有统计学意义（q=4.661、15.058、15.834、17.689、26.087、 10.157,均P＜0.05）;模型组LVSP水平,心肌组织中Sirt1蛋白水平明显低于假手术组,差异有统计学意义（ q=9.194、18.782,均P＜0.05）。与模型组相比,白芍总苷组、Sirt1激活剂组LVEDP水平、纤维化评分,心肌 组织中FN水平、Ac-Foxo1蛋白水平,血清中IL-1β、TNF-α水平降低,差异有统计学意义（q=4.334、4.007、 6.472、5.052、11.888、7.791、30.120、17.689、20.274、11.133、7.136、6.701,均P＜0.05）;而LVSP水 平、心肌组织中Sirt1蛋白水平升高,差异有统计学意义（q=7.522、5.983、30.130、26.217,均P＜0.05）。 结论:白芍总苷对慢性心力衰竭大鼠的保护可能是通过激活Sirt1/Foxo1通路实现的。     

促血管生成素重组腺病毒对糖尿病鼠肾血管新生的影响

目的  通过SD大鼠糖尿病肾病（DN）模型,观察经腺病毒外源性表达Ang-1对肾脏血管新生的作用,以期为DN的临床治疗提供参考。方法  SD大鼠DN造模选用链脲佐菌素（STZ）,设计两个大的组别,即正常对照组和DN模型组,并将DN模型组进一步划分为3个亚组,即糖尿病组、空白载体组、Ang-1腺病毒组。STZ造模成功后的第8周开始,从尾静脉注入Ang-1腺病毒载体以及空白载体,在8、12、20和28周,检测各组大鼠的尿蛋白水平,实时定量聚合酶链法分析肾脏Ang-2 mRNA水平。结果  ①DN模型组大鼠的尿蛋白水平较正常对照组升高（P <0.01）,且只有在20周前,空白载体组及糖尿病组的尿蛋白水平才低于Ang-1腺病毒组（P <0.01）;②在正常对照组大鼠肾组织中未检测到尿蛋白和Ang-2 mRNA表达,而其他DN模型组（糖尿病、空白载体、Ang-1腺病毒组）大鼠12周后的尿蛋白和Ang-2 mRNA表达升高,特别是Ang-1腺病毒组升高（峰值在20周）更为明显（P <0.05）,在28周时降低,糖尿病、空白载体和Ang-1腺病毒组的Ang-2 mRNA表达比较差异有统计学意义（P <0.05）;③Ang-2与尿蛋白排泄量呈负相关（r =-0.601,P <0.05）。结论  外源性给予Ang-1对糖尿病肾脏新生微血管生成有保护作用。

     

西红花苷-1对急性低氧条件下大鼠学习记忆及海马SIRT1表达的影响

目的 研究西红花苷-1对急性低氧条件下大鼠学习记忆及海马区沉默信息调节因子1（SIRT1）表达的影响。方法 SD大鼠随即分为5组：对照组,低氧模型组,西红花苷-1低、中、高剂量（25、50、100 mg/kg）组。西红花苷-1各组每天im给药1次,给药3 d后低氧环境下刺激72 h,采用Morris水迷宫观察大鼠的学习记忆行为,免疫组化法与Western blotting法检测大鼠海马SIRT1蛋白表达。结果 与低氧模型组相比,西红花苷-1各剂量使Morris水迷宫实验中大鼠逃避潜伏期均明显缩短,且穿越平台次数增加（P＜0.05）。免疫组化和Western blotting法检测显示,西红花苷-1各组大鼠海马组织SIRT1蛋白表达均显著高于低氧模型组（P＜0.05）,其中以中、高剂量组作用明显。结论 西红花苷-1预先给药,可增加急性低氧大鼠海马组织SIRT1蛋白表达,这可能是其改善低氧条件下大鼠学习记忆的机制之一。     

活动性肺结核患者巨噬细胞相关细胞因子与外周血单个核细胞中沉默信息调节因子1和叉头框蛋白O3水平的相关性

目的 探究活动性肺结核（active pulmonary tuberculosis, APTB）患者外周血单个核细胞中沉默信息调节因子1（silent information regulator 1, SIRT1）、叉头框蛋白O3（forkhead box protein O3, FOXO3）水平与巨噬细胞相关细胞因子诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）、精氨酸酶-1（arginase-1, Arg-1）的相关性。方法 选取2020年1月—2021年12月期间于重庆医科大学附属第一医院渝北医院接受治疗的64例APTB患者为APTB组,选取59例潜伏结核感染（LTBI）者为LTBI组,同期选取62例健康体检人群作为对照组。实时荧光定量PCR（qPCR）法进行外周血单个核细胞中SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA水平检测,ELISA法进行血清iNOS、Arg-1水平检测;采用ROC曲线分析SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA水平对LTBI、APTB的鉴别诊断价值;采用Pearson相关分析APTB患者外周血单个核细胞SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA与血清iNOS、Arg-1水平相关性。结果 对照组、LTBI组、APTB组外周血单个核细胞SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA及血清iNOS水平依次降低,血清Arg-1水平依次升高（P<0.05）。SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA水平鉴别诊断LTBI、APTB的AUC分别为0.876、0.887,灵敏度分别为71.2%、76.3%,特异度分别为96.9%、90.6%。APTB患者外周血单个核细胞SIRT1 mRNA与FOXO3 mRNA水平呈正相关（r=0.500,P<0.05）,且二者与血清iNOS呈正相关,与血清Arg-1呈负相关（P<0.05）。APTB患者治疗6个月后外周血单个核细胞SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA及血清iNOS高于治疗前,血清Arg-1低于治疗前（P<0.05）。结论 APTB患者外周血单个核细胞中SIRT1 mRNA、FOXO3 mRNA水平较低,且二者与巨噬细胞相关细胞因子iNOS呈正相关,与Arg-1呈负相关。     

淫羊藿苷联合地塞米松对人髓核细胞增殖及分泌表达的影响

目的  探讨淫羊藿苷（ICA）与地塞米松（Dex）联合作用对人髓核细胞（hNPs）增殖及聚集蛋白聚糖（Aggrecan）、II型胶原蛋白（Col2a）、IL-6、IL-8和基质金属蛋白酶（MMP-13）表达的影响。方法  取生长状态良好的hNPs按不同处理因素分为：control组（只含培养基）、ICA组（20μmol/L ICA）、Dex组（0.2μmol/L Dex）、ICA+Dex组（20μmol/L ICA+0.2μmol/L Dex）、IL-1β组（10 ng/ml IL-1β）、ICA+IL-1β组（20μmol/L ICA+10 ng/ml IL-1β）、Dex+IL-1β组（0.2μmol/L Dex+10 ng/ml IL-1β）、ICA+Dex+IL-1β组（20μmol/L ICA+0.2μmol/L Dex+10 ng/ml IL-1β）,各组作用48 h;CCK-8法检测细胞的增殖;Western blot、RT-PCR以及ELISA检测Aggrecan、Col2a、IL-6、IL-8和MMP-13表达。结果  CCK-8结果显示：与control组比较,低浓度的ICA（≤20μmol/L）和Dex（≤0.2μmol/L）单独作用均提高hNPs存活率但差异无统计学意义（P >0.05）。然而,10μmol/L ICA和0.2μmol/L Dex联合用药对hNPs的存活率大于单独用药（P < 0.05）;Western blot、RT-PCR以及ELISA结果表明：与单独用药组相比,ICA和Dex联合作用促进Aggrecan、Col2a蛋白和mRNA表达（P <0.05）;另外,ICA和Dex联合处理抑制IL-1β诱导的hNPs炎症介质IL-6、IL-8的分泌表达（P <0.05）,同时降低MMP-13蛋白、mRNA水平（P <0.05）。结论  ICA与Dex联合作用对促进hNPs增殖、Aggrecan和Col2a表达有效果;同时抑制IL-1β诱导的hNPs炎症介质IL-6、IL-8和MMP-13的表达,为椎间盘退行性病变的药物治疗提供理论依据。

     

消渴灵浓缩液对糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的影响

目的：探讨消渴灵浓缩液对糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的影响。方法：将30只链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型随机分为模型组、西药对照组、中药治疗组,每组10只。另选10只鼠龄、体重相匹配的大鼠作为正常组。采用相对定量逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测病程8周后各组大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的水平。结果：中药组、西药组、正常大鼠组坐骨神经IGF-1 mRNA相对表达量均增加,差异无统计学意义（P=0.213,P=0.822,P=0.304）;模型组坐骨神经IGF-1 mRNA相对表达量下降,与中药组、西药组、正常大鼠组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。IGF-1 mRNA表达水平与血糖呈负相关（P<0.05）。结论：糖尿病大鼠坐骨神经组织IGF-1 mRNA的表达下降,消渴灵浓缩液可上调糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA的表达水平,可能是消渴灵浓缩液防治糖尿病周围神经病变的作用机制之一。