花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用体外培养,细胞毒（MTT法）实验、荧光显微镜观察细胞形态变化、DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA ladder及流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化.结果 花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈剂量依赖性;观察到凋亡细胞典型的形态和生化特征,花边莲提取液作用48 h,SPC-A-1细胞均呈现凋亡细胞所特有的亚二倍体峰（sub-G1）,凋亡率随药物浓度增加而增高,并使细胞生长停滞在S期,从而阻滞细胞周期的进行.结论 花边莲提取液对SPC-A-1细胞具有增殖抑制作用,并可诱导SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与细胞周期的S期阻滞有关.     

TRAIL联合放射线对肺癌细胞增殖及凋亡影响

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合放射线对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法检测不同浓度TRAIL对Lewis肺癌细胞增殖的影响;流式细胞仪检测TRAIL、X射线及两者联合对Lewis细胞凋亡率及细胞周期的影响。结果 TRAIL对Lewis细胞的体外抑制作用与浓度相关(F=9.017～12.465,P<0.05)。TRAIL与X射线联用能够使Lewis细胞的凋亡率及G2/M期比例提高,与对照组及单用TRAIL组和单用X射线组相比,差异有统计学意义(F=203.175、149.276,P<0.05)。结论 TRAIL可抑制Lewis细胞的增殖,并与浓度相关。TRAIL与放射线联用能够提高肿瘤细胞的凋亡率及细胞周期中G2/M期的比例。     

羟喜树碱对人胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究羟喜树碱（ＨＣＰＴ）体外抑制人胰腺癌细胞株ＳＷ－１９９０增殖并诱导其凋亡的作用。方法：体外培养的胰腺癌细胞经不同质量浓度（１．５６２．５,３．１２５,６．２５,１２．５,２５．５０,１００μｇ／ｍｌ）的ＨＣＰＴ处理２０￣２４ｈ后,用ＭＴＴ法测定细胞增殖情况,再分别以Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅴ早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞术和ＴＵＮＥＬ标记以及ｂｃｌ－２免疫细胞化学标记检测细胞凋亡情况。     

利用RNAi技术抑制Bcl 2基因表达增强肺腺癌A549细胞放射敏感性

目的利用RNAi技术抑制Bcl 2基因的表达,观察其对肺腺癌A549细胞凋亡和放射敏感性变化的影响。方法构建Bcl 2基因的干扰质粒pBcl 2 siRNA,稳定转染人肺腺癌A549细胞,同时设立转染无意义链组、空载体组和未转染组。采用Real time RT PCR和Western blot方法, 观察Bcl 2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。采用流式细胞术和克隆形成方法,检测RNA干扰对A549细胞放射敏感性的影响。结果成功构建bcl 2 siRNA质粒,转染A549细胞,获得稳定转染细胞株A549/Bcl2 Ins;Bcl 2mRNA、 Bcl 2蛋白表达明显降低;A549/Bcl2 Ins凋亡率［（10.11±0.92）%］明显高于对照组,6Gy X线照射后凋亡率［（28.81±1.10）%］明显高于对照组及未照射组;A549/Bcl2 Ins的D0和Dq值分别为1.399和1.298,明显低于转染无意义序列细胞株A549/Bcl2 Neg(1.695和2.480)、转染空载体细胞株A549/SD (1.706和2.227)和空白对照细胞A549(1.816和2.777)。结论RNAi技术可以有效抑制肺腺癌A549细胞Bcl 2基因的表达,增强A549细胞对X线的放射敏感性。     

褪黑素对人非小细胞肺癌H1299细胞辐射敏感性的影响

目的：检测褪黑素（MLT）联合放疗对人非小细胞肺癌（NSCLC） H1299细胞增殖和凋亡的影响,阐明MLT在调节H1299细胞辐射敏感性中的作用。方法：将H1299细胞分为对照组、MLT组、照射组及照射+MLT组,对照组H1299细胞不作任何处理,MLT组H1299细胞给予不同浓度（100和500 μmol·L^-1） MLT,照射组H1299细胞采用¹³⁷Cs γ射线进行一次性6 Gy照射,照射+MLT组H1299细胞给予100和500μmol·L^-1 MLT加6 Gy¹³⁷Cs γ射线。克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数,流式细胞术检测照射后24和48 h各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测各组细胞中核转录因子κB（NF-κB）蛋白的磷酸化水平。结果：克隆形成实验,与照射组比较,照射+MLT组H1299细胞克隆形成数明显减少（t=7.234,P<0.01）。流式细胞术,照射后24 h,与对照组比较,照射组和MLT组H1299细胞凋亡率明显升高（t=5.020,t=13.525,P<0.01）,与对照组比较,照射+MLT组H1299细胞凋亡率升高（t=12.884,P<0.01）;照射后48 h,照射+MLT组H1299细胞凋亡率与照射组比较差异无统计学意义（t=0.394,P>0.05）。蛋白免疫印迹法,照射+MLT组H1299细胞中NF-κB蛋白磷酸化水平低于照射组。结论：MLT联合放疗对人NSCLC H1299细胞有明显的抑瘤效应,提高了NSCLCH1299细胞的辐射敏感性。     

三氧化二砷对NCI-H69肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨三氧化二砷（ＡＳ２Ｏ３）对肺癌细胞株ＮＣＩ－Ｈ６９的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：ＭＴＴ法观察不同浓度ＡＳ２Ｏ３作用不同时间后的ＮＣＩ－Ｈ６９生长的产殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单抗ＬＳＡＢ免疫组化染色－流式细胞仪检测ＰＣＮＡ阳性细胞百分比;ＦＴＩＣ－ＴＵＮＥＬ法－流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果：随ＡＳ２Ｏ３浓度增加和作用时间延长,ＮＣＩ－Ｈ６９肺癌细胞的细胞活度渐下降。随ＡＳ２Ｏ３浓度增     

姜黄素对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响.方法 不同浓度(0、10、20、40、60 μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest33258荧光染色法观察细胞凋亡情况.结果 姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且随姜黄素浓度增加,CNE-2细胞抑制率呈上升趋势(P＜0.05),姜黄素作用CNE-2细胞24、48、72 h的半抑制浓度(IC50)分别为(23.54±0.36)、(18.31±0.42)、(8.56±0.37)μmol/L,即姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且呈现明显浓度、时间依赖性;流式细胞检测结果显示,0、10、20、40、60 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞,凋亡率随着姜黄素浓度增加而上升;荧光染色结果可见,CNE-2细胞未给予姜黄素处理,细胞呈圆形或者椭圆形,细胞核大小均匀一致,染色质分布均匀的淡蓝色荧光;10 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞胞体缩小,细胞核染色质凝聚,呈颗粒状亮蓝色荧光;20 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24 h后,细胞出现胞体缩小,细胞核浓缩、染色质不均匀,出现凋亡小体,甚至出现核碎裂;40和60 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24 h后,细胞凋亡小体数量增多,出现大量核碎裂.结论 姜黄素对NPC细胞株CNE-2细胞增殖具有明显抑制作用,且促进CNE-2细胞凋亡.     

MicroRNA-210对卵巢癌细胞生长及放射敏感性的影响

目的：探讨MicroRNA-210（miR-210）在卵巢癌细胞生长过程中的作用及其与放射治疗敏感性的关系,阐明miR-210对卵巢癌发展和治疗的影响及可能的分子机制。方法：体外培养人卵巢癌细胞株OVCAR3和SKOV3,应用细胞转染法分别将miR-210 mimic和抗miR-210抑制剂转染至OVCAR3和SKOV3细胞中,并利用Real-time PCR法进行鉴定,得到miR-210过表达和低表达卵巢癌细胞模型。将2种细胞分别分为对照组、miR-210过表达组和miR-210低表达组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性;采用不同剂量（30、50和100 Gy）电离辐射照射对照组和miR-210过表达组细胞,采用MTT法检测各组细胞增殖活性;采用Western blotting法检测50Gy照射剂量组卵巢癌细胞中凋亡相关蛋白表达水平。所有实验细胞培养采用3复孔,并重复3次。结果：与对照组比较,miR-210过表达组细胞增殖活性升高,miR-210低表达组细胞增殖活性降低（P<0.05）;在给予电离辐射照射后,与对照组比较,miR-210过表达组细胞增殖活性升高（P<0.05）;且凋亡相关蛋白BAX在2株细胞中表达水平均明显下降,而BCL-2表达水平均明显升高。结论：miR-210可促进卵巢癌细胞的生长,同时通过抑制凋亡作用降低卵巢癌细胞对放射治疗的敏感性。     

毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞增殖和凋亡的影响*

目的 探讨毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞增殖与凋亡的影响。方法 将25、50及100?μg/ml毛蕊异黄酮分别作用SPC-A1细胞12、24、36及48?h后,用MTT法检测其对SPC-A1细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色观察SPC-A1细胞核变化,流式细胞术检测SPC-A1细胞凋亡情况;不同浓度毛蕊异黄酮作用SPC-A1细胞48?h后,Western blotting及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SPC-A1细胞Cyclin D1、CDK4、CDK6蛋白及mRNA的表达水平。结果 毛蕊异黄酮能有效抑制SPC-A1细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性（P?<0.05）,100?μg/ml毛蕊异黄酮作用SPC-A1细胞48?h后,细胞增殖抑制率可高达（81.26±0.05）%;毛蕊异黄酮能够诱导SPC-A1细胞凋亡,引起核固缩,形成凋亡小体,细胞凋亡率从（3.12±1.07）%升至（42.78±2.16）% （P?<0.05）;毛蕊异黄酮可以抑制SPC-A1细胞中Cyclin D1、CDK4、CDK6蛋白及mRNA的表达,组间比较差异有统计学意义（P?<0.05）。结论 毛蕊异黄酮可通过降低Cyclin D1、CDK4、CDK6蛋白及mRNA的表达抑制SPC-A1细胞的增殖,毛蕊异黄酮对SPC-A1细胞具有诱导凋亡作用。     

YAP对非小细胞肺癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的：探讨长链非编码RNA （lncRNA） MALAT1在YAP调控的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖和迁移中的作用,并阐明其作用机制。方法：选择A549和H1299细胞系分为Scramble siRNA组（转染Scramble siRNA）、siYAP-1组（转染siYAP-1）和siYAP-2组（转染siYAP-2）。RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中YAP和MALAT1mRNA及YAP蛋白表达水平;在A549和H1299细胞中分别转染pcDNA3.1-YAP质粒（pcDNA3.1-YAP组）、共转染pcDNA3.1-YAP质粒和siMALAT1-2（pcDNA3.1-YAP+siMALAT1-2组）及对照质粒（pcDNA3.1-YAP+Scramble siRNA组）,CCK-8法检测各组细胞增殖能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。结果：siYAP-1组和siYAP-2组A549和H1299细胞中YAP mRNA及蛋白表达水平均明显低于Scramble siRNA组（P<0.05）,siYAP-1组和siYAP-2组A549和H1299细胞中MALAT1mRNA表达水平低于Scramble siRNA组（P<0.05）;与pcDNA3.1-YAP组比较,pcDNA3.1-YAP+siMALAT1-2组A549和H1299细胞增殖能力降低（P<0.05）,H1299细胞迁移能力降低（P<0.05）。结论：在NSCLC细胞中,YAP通过调控lncRNA MALAT1的表达促进细胞的增殖和迁移。     

黄芪注射液对SPC-A1肺肿瘤细胞株细胞增殖活力和细胞凋亡影响的实验研究

目的：观察黄芪注射液对人肺肿瘤细胞株SPC-A1细胞增殖活力和细胞凋亡影响。方法以SPC-A1肿瘤细胞株为研究材料,分别用终浓度为0、4、8、16、32μl/ml黄芪注射液刺激细胞株,分别用CCK8 kit法检测细胞活力和用流式细胞仪PI染色检测细胞凋亡。结果高浓度的黄芪注射液对SPC-A1的增殖有促进作用,对其凋亡无显著性影响。结论高浓度黄芪注射液促进SPC-A1增殖。     

UbcH10基因沉默对肺癌NCI-H226细胞增殖及细胞周期的影响

目的：通过脂质体转染siRNA方法沉默人肺鳞癌细胞NCI-H226中UbcH10基因,观察基因沉默后细胞增殖活性的变化及其对细胞周期的影响。方法：设计3条针对UbcH10基因CDS区不同位点的siRNA序列并构建shRNA表达载体,脂质体法转染重组质粒至NCI-H226细胞。转染后48小时,RT-PCR,Western-blot检测细胞内UbcH10 mRNA及蛋白含量。使用有效siRNA序列（pshRNA2）转染细胞,转染后24、48小时CCK-8检测细胞活性。使用有效siRNA序列转染细胞,转染后48小时收集细胞,流式法检测细胞周期。结果：成功构建shRNA重组质粒并转染NCI-H226细胞。转染siRNA 48小时后,3组NCI-H226细胞中UbcH10基因的mRNA及蛋白含量均明显下降;其中2号siRNA序列的沉默效果最好,UbcH10基因剩余表达量为对照组的14%。使用有效序列转染NCI-H226细胞24、48小时,细胞增殖活性明显降低,与基因未干预组比较,差异显著（P＜0.05）。使用有效序列转染NCI-H226细胞48小时,细胞明显阻滞于G2期,与基因未干预组比较有显著差异（P＜0.05）。结论：UbcH10基因沉默,可显著抑制NCI-H226细胞增殖活性,并使肺癌细胞阻滞于细胞G2期。     

荜茇明碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨荜茇明碱（PL）对人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法体外培养人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞;采用活细胞计数试剂盒（CCK‐8）法检测不同浓度的PL对MDA‐MB‐231细胞增殖的影响;流式细胞术检测PL对细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹（Westernblot）法检测PL对MDA‐MB‐231细胞Bcl‐2和Bax蛋白表达水平的影响。结果PL抑制MDA‐MB‐231细胞增殖,并呈现出浓度、时间依赖性。PL诱导MDA‐MB‐231细胞凋亡,而乙酰‐L‐半胱氨酸则抑制了PL诱导的细胞凋亡。Westernblot结果提示随着PL浓度的增加,Bax的表达逐渐增加,而Bcl‐2的表达逐渐减少。结论PL对人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与Bcl‐2蛋白表达的减少和Bax蛋白表达增加有关。     

慢病毒介导FGFR1 沉默对肺癌细胞 增殖和凋亡的影响

目的 探讨慢病毒介导成纤维生长因子受体1（FGFR1）沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。 方法 构建慢病毒表达载体LV-shFGFR1,对其进行包装和病毒颗粒制备。将A549 肺癌细胞分为干扰组、 空载体组及对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting 检测各组细胞FGFR1 mRNA 和蛋白 相对表达量,MTT 比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术和Hoechest 染色检测细胞凋亡情况。结果 ① 3 株 肺癌细胞中,A549 细胞的FGFR1 mRNA 相对表达量高于H3255 和A-427 细胞（P <0.05）。② 3 组A549 细 胞中FGFR1 mRNA 和蛋白的相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;空载体组与对照组比较,差异 无统计学意义（P >0.05）;干扰组低于对照组（P <0.05）。③干扰组、空载体组、对照组0、12、24、48 和 72 h 的A549 细胞增殖情况比较,不同时间点、各组间、随时间变化趋势均有差异（P <0.05）。④ 3 组A549 细胞凋亡率比较,差异有统计学意义（P <0.05）;空载体组与对照组比较,差异无统计学意义（P >0.05）;干 扰组高于对照组（P <0.05）。结论 慢病毒介导FGFR1 沉默抑制A549 肺癌细胞增殖,同时促进肺癌细胞凋亡, 提示FGFR1 可能参与肺癌细胞的发生、发展过程。     

膀胱移行细胞癌细胞凋亡与放疗敏感性关系

目的 研究膀胱移行细胞癌的细胞凋亡与放疗敏感性的关系。方法 光镜观察41例原发性膀胱移行细胞癌放疗前肿瘤组织细胞凋亡指数（AI）、分裂相指数（MI）及放疗后组织坏死程度。结果 膀胱移行细胞癌AI和MI随肿瘤分化程度降低而增高，各组织学分级之间有显著性差异（P＜0．01），放疗后组织坏死程度亦随癌组织分化程度降低而加重，各组织学分级之间差异显著（P＜0．01）。结论 分化越差的膀胱移行细胞癌增殖活性和细胞凋亡数越高，对放疗越敏感，AI可以作为选择放疗的一项指标。     

多西环素对体外人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响及其机制

目的 探讨多西环素对体外人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响及其可能的作用机制.方法 不同浓度的多西环素作用于体外培养的人小细胞肺癌H446细胞24、48、72或96 h,采用CCK-8法检测多西环素对H446细胞增殖的影响;采用Bliss法计算半数抑制浓度(IC50);采用TUNEL法检测多西环素对H446细胞凋亡的影响;采用Western印迹法检测多西环素对Bcl-2、Bax等凋亡相关蛋白表达的影响;采用实时定量-PCR法检测多西环素对Bcl-2、Bax等凋亡相关基因mRNA表达的影响.结果 多西环素可浓度-时间依赖性地抑制人小细胞肺癌H446细胞的体外增殖,作用24、48、72和96 h对应的IC50值分别为24.10、10.98、8.20和8.03 mg/L;多西环素作用后H446细胞的凋亡指数显著增加(P<0.05);Bax的蛋白及mRNA表达水平上调,Bcl-2的蛋白及mRNA表达水平下调,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 多西环素可通过上调促凋亡相关蛋白Bax的表达,下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡,进而抑制人小细胞肺癌H446细胞的体外增殖,是一种有开发前景的小细胞肺癌治疗药物.     

新型姜黄素纳米粒对Lewis肺癌细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨一种新型的姜黄素纳米粒(curcumin nanoparticles,Cur-NPs)对Lewis肺癌细胞LLC增殖与凋亡的影响。方法游离姜黄素(curcumin,Cur)和Cur-NPs分别作用于LLC细胞24 h,MTT检测其对LLC细胞的增殖抑制作用。20μmol/L的药物作用于细胞24 h后,流式细胞术检测Cur-NPs对细胞周期、细胞凋亡、细胞内活性氧、细胞内钙离子浓度、细胞线粒体膜电位的影响,并与Cur进行对照。结果 Cur-NPs可以明显增强Cur对LLC细胞的增殖抑制,IC50从34.91μmol/L降为10.65μmol/L(P<0.05)。Cur-NPs明显提高了Cur诱导LLC细胞凋亡(P<0.05)、抑制细胞周期于S期(P<0.05)、升高细胞内钙离子浓度(P<0.05)、升高细胞活性氧浓度(P<0.05)、降低细胞线粒体膜电位(P<0.05)的能力。结论新型姜黄素纳米粒可明显提高游离姜黄素对LLC细胞的体外增殖抑制作用,可能与其促进细胞凋亡有关。