EML4-ALK在非小细胞肺癌中的表达及检测

非小细胞肺癌(NSCLC)为当今最常见的恶性肿瘤之一,近年来我国肺癌的发病率和病死率增长迅速,已居癌症相关死亡首位。分子靶向治疗已成为晚期NSCLC治疗的研究热点之一,靶向药物如何针对性地用于患者的治疗是关键。棘皮动物微管结合蛋白4(EML4)与间变淋巴瘤激酶(ALK)形成的融合基因主要表达于NSCLC中,这可能是与NSCLC表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药相关的新靶点。     

慢性阻塞性肺疾病合并非小细胞肺癌与EML4-ALK融合基因的关系

目的 探究慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并非小细胞肺癌（NSCLC）与棘皮动物微管相关蛋白样4-间变淋巴瘤激酶（EML4-ALK）融合基因的关系。方法选取COPD合并NSCLC患者70例为COPD合并NSCLC组,另选取同期收治的单纯COPD患者70例为单纯COPD组,分别采集手术治疗过程中肺癌组织及COPD患者正常肺组织,采用免疫组化法分析EML4-ALK蛋白的表达,采用logistic回归分析影响COPD合并NSCLC患者发生的危险因素。结果单纯COPD组、COPD合并NSCLC组患者性别、年龄、体质指数(BMI)比较,差异无统计学意义（P>005）;与单纯COPD组比较,COPD合并NSCLC组患者吸烟人数比例、PASP水平、EML4-ALK蛋白阳性表达率较高, FEV1、FEV1/FVC水平较低（P＜005）。肺癌组织中EML4-ALK蛋白阳性表达与COPD合并NSCLC患者年龄、性别、肿瘤最大径、分化程度无关（P>005）,与吸烟史、组织学类型、TNM分期及淋巴结转移有关（P<005）。FEV1/FVC指标降低、吸烟、EML4-ALK蛋白阳性表达是影响COPD合并NSCLC患者发生的危险因素（OR=1694,95%CI：1375~2087;OR=2013,95%CI：1682~2409;OR=3249,95%CI：2346~4450;P＜005）。结论肺癌组织中EML4-ALK蛋白阳性表达率较高与COPD合并NSCLC吸烟史、组织学类型、TNM分期及淋巴结转移有关,是影响COPD合并NSCLC发生的独立危险因素。     

慢性阻塞性肺疾病合并非小细胞肺癌患者EGFR和EML4-ALK突变特点分析

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)合并非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、棘皮动物微管相关蛋白-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated protein-like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)融合基因突变特点及其与临床病理特征的关系.方法 收集作者医院2015-07/2019-07月确诊的NSCLC患者150例,其中COPD合并NSCLC患者75例,单纯NSCLC患者75例.采用下一代基因测序技术,检测EGFR、EML4-ALK基因突变情况,同时采用Logistic回归分析评估COPD对NSCLC患者EGFR、EML4-ALK基因突变的影响.结果 COPD合并NSCLC组EGFR突变患者为12例(16.00％),NSCLC组EGFR突变患者28例(37.33％),COPD合并NSCLC组较NSCLC组EGFR突变率明显降低(P=0.003);COPD合并NSCLC组EML4-ALK基因融合基因患者为3例(4.00％),单纯NSCLC组EML4-ALK基因融合基因为9例(12.00％),COPD合并NSCLC组较单纯NSCLC组EML4-ALK基因融合基因突变率明显降低(P=0.01).COPD 是 NSCLC 患者 EGFR(95％CI:0.064～0.600,P=0.004)及 EML4-ALK融合基因(95％CI:0.354～1.031,P=0.021)低表达率的独立危险因素.结论 COPD合并NSCLC患者EGFR及EML4-ALK融合基因突变率更低,导致该结果的机制有待进一步研究.     

甲磺酸阿帕替尼治疗间变性淋巴瘤激酶抑制剂耐药非小细胞肺癌的疗效分析

目的:评估阿帕替尼联合化疗治疗间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)抑制剂耐药非小细胞肺癌的有效性和安全性.方法:选择我院2018年7月至2019年6月确诊的ALK抑制剂耐药的非小细胞肺癌患者,随机数字表法分组后评估阿帕替尼联合化疗治疗的疗效和毒性,并通过Kaplan-Meie...     

EML4-ALK在非小细胞肺癌中的研究进展

EML4-ALK是肺癌诱发基因之一,属于融合基因,2007年由日本学者首次报道。在非小细胞肺癌(non-small-celllung carcinoma,NSCLC)患者中EML4-ALK表达阳性率约为3%～8%。EML4-ALK融合基因存在多种不同结构的变异体,其中3种变异体占大多数,其他变异体相对较少。目前尚无标准的、快速简便的检测EML4-ALK的方法,使其临床应用推广受到限制,有待进一步研究。新近的临床研究发现,EML4-ALK阳性率和患者是否吸烟高度相关,也与年龄、腺癌以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和KRAS基因是否突变等因素相关。其中不吸烟或轻度吸烟的NSCLC患者EML4-ALK阳性率高达9.4%,而在吸烟的患者中其阳性率只有2.9%,两者存在显著性差异。EML4-ALK表达阳性与EGFR、KRAS突变呈负相关。在NSCLC患者中EML4-ALK表达和EGFR、KRAS突变很少同时存在。EML4-ALK的抑制剂TAE684和PF02341066等目前已进入Ⅲ期临床试验,前期研究取得了较好的疗效。EML4-ALK现已成为NSCLC治疗的新靶点,EML4-ALK抑制剂为肺癌的个体化治疗提供了新的可选择方案,也可作为不能耐受化疗的患者的治疗药物。     

254例非小细胞肺癌患者细胞学样本ALK检测结果分析

目的 探讨检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者细胞学样本间变性淋巴瘤激酶(ALK)水平的临床意义.方法 回顾性分析2016年1月至2020年12月在中国科学院大学附属肿瘤医院行ALK检测的NSCLC患者254例,将胸水样本和细针穿刺(FNA)样本分别制成细胞学涂片,后将每例剩余样本制作成细胞蜡块石蜡切片;将小活检组织样本...     

HRM方法检测非小细胞肺癌患者胸水标本癌细胞基因突变的临床意义

[目的]探讨应用HRM方法检测非小细胞肺癌患者胸水标本癌细胞EGFR、KRAS基因突变用于指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂治疗的可行性.[方法]收集36例非小细胞肺癌患者胸水标本,常规提取DNA,HRM方法检测KRAS基因第2外显子、EGFR基因第19和21外显子突变.统计分析胸水标本与前期检测过的非小细胞肺癌组织KRAS、EGFR突变率差异.[结果]胸水标本36例中,2例(5.6％)KRAS突变,10例(27.8％) EGFR突变(其中EGFR第19和21外显子突变各5例).前期检测过的非小细胞肺癌组织KRAS和EGFR突变率分别为5.8％和36.3％.KRAS和EGFR突变率在胸水标本与前期非小细胞肺癌组织中差异均无显著性意义(P＞0.05).[结论]对难以获得肺癌组织标本的非小细胞肺癌患者可应用HRM方法检测胸水标本筛查KRAS、EGFR基因突变,指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂应用.     

常见驱动基因阳性晚期非小细胞肺癌免疫治疗现状

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)在临床中应用,使非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的整体治疗策略发生了很大的改变。尽管ICIs在驱动基因阴性NSCLC患者的治疗中显示出显著的疗效,甚至在一线治疗中也成为一种有效的选择,但是在驱动基因阳性晚期NSCLC中使用ICIs仍有争议。本文介绍了目前在驱动基因阳性NSCLC使用ICIs治疗的临床研究,并讨论了驱动基因阳性晚期NSCLC患者免疫治疗的未来方向。     

间变性淋巴瘤激酶（ALK）重排的非小细胞肺癌及其治疗进展

间变性淋巴瘤激酶（ALK）基因重排的非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌的一种特定的分子亚型.其临床特征为年轻、不吸烟和表皮生长因子受体（EGFR）未突变的腺癌.克唑替尼（Crizotinib）是口服的ALK酪氨酸激酶抑制剂,对ALK重排的NSCLC有良好的治疗效果.     

非小细胞肺癌患者ALK表达与临床病理特征对比分析

目的 研究100例非小细胞肺癌（NSCLC）患者间变性淋巴瘤激酶（ALK）的表达,并与其临床病理特征进行统计学分析。方法 收集安徽医科大学第二附属医院2016年1月至2017年10月收治的NSCLC患者标本100例,采用全自动免疫组化法检测ALK表达情况,统计分析ALK表达与其临床病理特征。结果 100例NSCLC患者中,6例ALK阳性,阳性表达率为6.00%。不同年龄、不同肿块直径、不同病理分型患者的ALK阳性表达率进行比较,差异有统计学意义（P<0.05）。而不同性别、是否吸烟、发生部位以及是否淋巴结转移间患者的ALK阳性表达率进行比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 NSCLC患者ALK的表达情况与患者的年龄、肿块直径和病理分型有关,可为临床相关疾病的诊疗提供了重要参考。     

浙江省非小细胞肺癌患者EGFR基因与EML4-ALK融合基因突变的检测及其临床特征

目的:检测中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因和棘皮动物微管相关蛋白样-4与渐变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因的突变情况,同时分析这两种基因与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床病理特征的关系?方法:采用PCR扩增和基因测序法检测252例NSCLCs EGFR基因外显子19和21的突变情况,real-time PCR法检测EML4-ALK融合基因的突变情况,分析突变与临床特征的关系?结果:252例非小细胞肺癌组织标本EGFR的突变率为38.8%(98例),其中19外显子突变率为15.8%(40例),21外显子突变率为23.0%(58例)?EGFR突变的患者多为女性?无吸烟史和腺癌(P < 0.05),与患者年龄无关(P > 0.05)?252例非小细胞肺癌组织标本中,EML4-ALK融合基因突变率4.7%(12例)?EML4-ALK基因突变患者多为女性和年龄较小者(P < 0.05),与患者吸烟史和病理类型无关(P > 0.05)?没有检测到EGFR和EML4-ALK的突变共存情况?结论:中国人中NSCLCs的EGFR突变率较高,在使用EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗前进行EGFR基因突变检测很有必要?EML4-ALK基因突变代表了NSCLC另一种分子亚型,这为临床NSCLC患者的治疗提供了一种新的选择方案?EML4-ALK融合基因突变与EGFR突变共存是罕见的现象?     

非小细胞肺癌患者eml4-alk基因检测及eml4-alk阳性患者临床特征分析

目的 探讨棘皮动物微管相关蛋白4(eml4)与间变性淋巴瘤激酶(alk)融合基因阳性非小细胞肺癌(NSCLC)患者的检测、临床特征、治疗、预后以及与egfr、kras、braf基因表达情况之间的联系.方法 选取190例NSCLC患者石蜡包埋(FFPE)标本,采用免疫组化(IHC)法进行eml4-alk融合基因阳性NSCLC患者(eml4-alk+NSCLC)筛选,对于IHC阳性的标本使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测验证.收集整理eml4-alk+NSCLC的临床资料,并对其随访;对所有患者标本采用RT-PCR法进行egfr、kras、braf突变检测.结果 190例NSCLC患者中,经IHC筛查及RT-PCR确证,共检出17例eml4-alk+NSCLC,其中手术标本最多,占47.1%(8/17)(X2=25.999,P=0.000),<60岁的占76.5%(13/17)(X2=5.813,P=0.016).未显示eml4-alk融合基因与egfr、kras或braf突变同时出现的患者.在手术患者Ⅰ期未显示eml4-alk阳性肺癌,在Ⅱ~Ⅲa期检出8例eml4-alk阳性肺癌,经术后化疗25%(2/8)复发,2年生存率为100%.9例晚期eml4-alk阳性肺癌患者化疗有效率低(4疗程化疗后仅12.5%缓解),已有5例死亡.一线化疗后病情稳定或缓解的患者维持阶段口服克唑替尼的客观缓解率(ORR)与疾病控制率(DCR)分别达50%、100%.多线治疗后进展患者三线口服克唑替尼2个月ORR与DCR仍可达33.3%、66.7%.结论 通过IHC筛查及随后RT-PCR可在各种病理标本中有效检出eml4-alk+NSCLC,其临床特征为<60岁的患者多见,而与性别、吸烟史等其他特征无明显关联.能够手术的较早期(Ⅱ~Ⅲa期)eml4-alk+NSCLC,接受术后辅助化疗预后较好;晚期患者一线化疗后病情稳定或缓解患者口服克唑替尼疗效较好.经多线治疗后使用克唑替尼仍然可提高其ORR及DCR,但获益有限.     

非小细胞肺癌EMPE来源树突状细胞的分离培养和鉴定

目的:建立非小细胞肺癌(NSCLC)渗出性恶性胸腔积液(EMPE)来源树突状细胞(PEDCs)的分离培养方法,研究PEDCs功能性抗原的表达规律。方法:用密度梯度离心的方法,从非小细胞肺癌EMPE中分离获得富含PEDCs的细胞群;用抗CD3免疫磁珠提纯PEDCs;用IL-4、GM-CSF、TNF-α,分1、2、4、8 d 4个时间段培养PEDCs;用荧光抗体标记、流式细胞仪检测不同培养时间PFDCs功能性抗原的表达。结果:建立了PEDCs的分离培养方法。培养2d PEDCs的功能性抗原HLA-ABC、HLA-DR、CD54、CD80、CD83、CD1a的表达率显著升高。结论:从EMPE中分离的PEDCs,体外培养2d多种功能性抗原的表达率显著升高。     

EML4-ALK融合基因在新疆维吾尔族非小细胞肺癌患者中的表达分析及其对预后的影响

目的:探讨EML4-ALK融合基因在新疆维吾尔族NSCLC患者中的表达及其对预后的影响.方法:应用免疫组化法及FISH法检测新疆维吾尔族和汉族NSCLC患者EML4-ALK融合基因表达情况,并分析新疆维吾尔族NSCLC患者EML4-ALK融合基因表达与临床病理特征的关系及对预后的影响.结果:新疆维吾尔族、汉族NSCLC患者EML4-ALK融合基因表达阳性表达率分别为21.00%、9.00%,经统计学检验发现不同民族NSCLC患者EML4-ALK融合基因阳性表达率存在统计学差异,新疆维吾尔族NSCLC患者EML4-ALK融合基因阳性表达率明显高于汉族;新疆维吾尔族NSCLC患者EML4-ALK融合基因表达与年龄、性别、吸烟、临床分期、病理切片类型有关,年龄≤55岁、女性、不吸烟、临床分期高、病理切片类型为腺癌的新疆维吾尔族NSCLC患者EML4-ALK融合基因阳性表达率较高;EML4-ALK融合基因阳性表达的新疆维吾尔族NSCLC患者中位总生存时间为22个月(95%CI,11个月~26个月),不同EML4-ALK融合基因表达总生存时间没有统计学差异.结论:新疆维吾尔族NSCLC患者EML4-ALK融合基因阳性表达率较高,多见于年龄≤55岁、女性、不吸烟、临床分期高、病理切片类型为腺癌者,但EML4-ALK融合基因还不能作为独立的预后影响因素.     

EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变在肺腺癌中的表达

目的 探讨肺腺癌EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变的发生率及临床病理特征.方法 采用FISH和ARMS方法对安徽省铜陵市人民医院2008～2011年手术切除和经皮肺穿刺活检病理确诊的肺腺癌60例石蜡包埋组织分别进行EML4-ALK融合基因和EGFR基因突变检测,并分析与临床病理特征的相关性.结果 肺腺癌病理组织中EML4-ALK融合基因阳性表达率为8.33％,EGFR基因突变率61.67％,女性患者突变率76.92％(20/26)较男性患者突变率50.0％(17/34)高,P=0.034;吸烟＜400年支突变率74.29％(26/35)较吸烟≥400支突变率44.0％(11/25)高,P=0.017;≥60岁患者突变率42.86％(12/28)较＜60岁患者突变率78.13％(25/32)低,P=0.005,差异均有统计学意义.EML4-ALK和EGFR在肺腺癌患者中表达的相关性分析,显示二者之间呈负相关(R=-0.134,p=0.308),差异无统计学意义.结论 EML4-ALK在肺腺癌中低表达,EGFR基因突变高表达,两者呈负相关.     

TCT 联合免疫组织化学在NSCLC 恶性 胸腔积液诊断中的价值

目的 采用液基薄层细胞学检查（TCT）与免疫组织化学检测甲状腺转录因子1（TTF-1）、细 胞角蛋白7（CK7）、细胞角蛋白5/6（CK5/6）和P63 在恶性胸腔积液中的表达,探讨这2 种检测方法联合 诊断非小细胞肺癌（NSCLC）致恶性胸腔积液及在分型诊断中的临床价值。方法 采用TCT 对703 例胸 腔积液进行细胞学涂片,筛选出疑似肿瘤细胞和肿瘤细胞标本281 例;再利用免疫组织化学染色对确诊为 NSCLC 恶性胸腔积液的137 例患者进行肺腺癌、鳞癌分型诊断;最后采用ROC 曲线计算其曲线下面积,进 一步判断该指标是否具有诊断价值。结果 初筛703 例胸腔积液,137 例为NSCLC 所致的恶性积液,其中肺 腺癌110 例、肺鳞癌25 例、肺腺鳞癌2 例。CK5/6、P63、TTF-1 及CK7 在肺鳞癌和肺腺癌致恶性胸腔积 液标本中的阳性表达率比较,差异有统计学意义（P <0.05）。CK5/6 在肺鳞癌所致恶性胸腔积液中敏感性、 特异性分别为92.86%（95% CI ：0.64,0.99）和89.58%（95% CI ：0.77,0.99）;P63 在肺鳞癌致恶性胸腔积液 中敏感性、特异性分别为91.67%（95% CI ：0.60,0.99）和72.73%（95% CI ：0.54,0.86）。TTF-1 在肺腺癌 致恶性胸腔积液中的敏感性、特异性分别为87.18%（95% CI ：0.77,0.93）和90.63%（95% CI ：0.74,0.98）; CK7 在肺腺癌致恶性胸腔积液中敏感性、特异性分别为94.23%（95% CI ：0.83,0.98）和75.00%（95% CI ： 0.41,0.93）。TTF-1 和CK7 诊断肺腺癌致恶性胸腔积液的ROC 曲线下面积（AUC）分别为0.821 和0.774 ; CK5/6 和P63 诊断肺鳞癌致恶性胸腔积液的（AUC）分别为0.805 和0.755。结论 TTF-1 和CK7、CK5/6 和P63 分别对肺腺癌、鳞癌致恶性胸腔积液有重要的诊断价值,TCT 联合免疫组织化学对良恶性胸腔积液的 鉴别诊断及NSCLC 致恶性胸腔积液的分型诊断具有临床应用价值,值得推广应用。     

TLR4与NF-κB在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的检测TLR4与NF-κB在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和正常肺组织中的表达情况,探讨其临床意义。方法采用免疫组化方法检测TLR4与NF-κB在49例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中的表达,分析TLR4和NF-κB与非小细胞肺癌病理分级、临床分期、淋巴结转移等的相关性以及TLR4和NF-κB之间的相关性。结果TLR4和NF-κB在NSCLC组织中的表达阳性率分别为55.1%和69.4%,均显著高于正常肺组织中的15%和10%(P<0.05)。同时还发现TLR4的表达与肿瘤的分化程度密切相关(P<0.05),NF-κB在腺癌中的表达明显高于鳞癌(P<0.05),TLR4和NF-κB的表达呈正相关(P<0.05)。结论TLR4与NF-κB可能在NSCLC的发生、发展过程中起重要作用。     

EML4-ALK融合基因与非小细胞肺癌中的研究进展

棘皮动物微管结合蛋白4（echinoderm microtubule associated protein-like 4,EML4）与间变淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase,ALK）形成的融合基因,被认为是非小细胞肺癌（NSCLC）新的分子靶点。EML4-ALK融合基因的发生率为3%~11%,该融合基因在年轻、腺癌、不吸烟或轻度吸烟的NSCLC患者中发生率较高,表达阳性者可以受益于ALK抑制剂（如克唑替尼）的治疗。本文重点阐述NSCLC中EML4-ALK融合基因的生物学特性、检测方法、临床特征和治疗方式。     

EML4-ALK融合基因在肺癌转移灶中的表达及临床特点

目的 探讨肺癌患者转移灶中棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)的阳性表达率及其与临床病理特征、血清指标的关系和使用靶向治疗后的效果.方法 使用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)对71例肺癌转移灶中EML4-ALK融合基因进行检测,同时检测患者血清标志物癌胚抗原(CEA)、癌糖原(cA125)及血管内皮生长因子(VEGF)水平,分析EML4-ALK融合基因在转移灶中表达情况及与血清标志物水平的相关性.结果 在淋巴结、脑、骨、体表软组织、肝、结肠和胸膜转移组织中检测到EML4-ALK融合基因阳性表达的组织有淋巴结、脑、骨和胸膜,总阳性表达率为7.04％.转移灶组织中EML4-ALK融合基因表达阳性率与病理类型、性别、年龄、吸烟状态、分化程度和分期因素无明显相关(P＞0.05),但临床上仍以腺癌、不吸烟者人群较多见.血清CEA、CA125、VEGF水平在EML4-ALK融合基因阳性组和阴性组中差异无统计学意义(P＞0.05).接受克唑替尼治疗的肺癌患者6个月疾病控制率为66％.结论 使用FQ-PCR技术检测肺癌转移灶中EML4-ALK融合基因是可行的,可以为腺癌、不吸烟这些优势人群提供靶向治疗策略.