目的 制备一种具有诱导血管再生活性的新型复合骨组织工程材料,并评价其生物相容性。方法 将血管内皮生长因子-165（VEGF-165）/血管生成素-1（ANG-1）双基因共转染的血管内皮祖细胞（EPCs）复合多孔生物活性玻璃,制成复合人工骨材料。采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测已转染EPCs中VEGF-165及ANG-1的表达。噻唑蓝（MTT）细胞毒性试验、骨植入试验及扫描电镜观察细胞在材料表面黏附情况等综合评价材料的生物相容性;CD31免疫组织化学法染色观察材料中血管再生的情况。结果 Western blot检测、RT-PCR反应显示,实验组VEGF-165、ANG-1的表达较对照组升高。MTT细胞毒性试验、骨植入试验均显示,材料无毒性反应。扫描电镜显示,材料表面有较多血管内皮祖细胞黏附,并有较多伪足伸出。苏木精-伊红染色法（HE）染色显示,材料周围组织生长良好,未见明显的炎症细胞浸润,材料与周围组织交界处有大量的新骨生成。CD31免疫组织化学法染色显示,材料中有较多新生的毛细血管。结论 VEGF- 165/ANG-1双基因共转染EPCs复合多孔生物活性玻璃的骨组织工程材料生物相容性良好,具备一定的诱导血管再生活性。
相似文献目的 研究SD大鼠脂肪干细胞与不同脱细胞膀胱基质（BAMG）的体外生物相容性，为进一步把细胞支架复合物回植动物体内提供有利的实验基础。方法 取SD大鼠双侧腹股沟处脂肪组织经过相应处理后得到原代脂肪组织，进行成骨、成脂诱导染色及流式细胞术检测CD29、CD34、CD44及CD45，对脂肪干细胞进行鉴定，同时制备鼠及新西兰兔BAMG，采用2次沉淀法将脂肪干细胞静态接种于不同BAMG表面，观察细胞在材料表面的生长状况，并绘制细胞生长曲线。结果 细胞材料体外复合培养5 d后行HE染色后观察可见SD大鼠脂肪干细胞在SD大鼠BAMG表面生长状态较其在新西兰兔BAMG表面生长状态好，且细胞形态舒展成长梭形，细胞生长曲线与SD大鼠原代脂肪干细胞基本一致。结论 SD大鼠脂肪干细胞接种于SD大鼠BAMG复合物表面生长状况相比于其接种于新西兰兔BAMG复合物表面更加良好，具有更好的生物相容性。为进一步把细胞支架复合物回植动物体内提供有利的实验基础。
相似文献摘要：目的 观察环磷酸腺苷（cAMP）信号在大鼠矽肺纤维化发生、发展过程中的变化及其对矽肺纤维化形成的影响。方法 采用HOPE-MED8050动式染尘控制系统复制大鼠矽肺模型，雄性Wistar大鼠随机分为6组，每组10只，分别染尘0、2、4、8、12和16周。采用Masson三色染色观察肺组织形态，采用免疫组织化学法染色和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ）、纤连蛋白（Fn）、激动型G蛋白α（Gαs）、抑制型G蛋白α（Gαi2、Gαi3）及cAMP的表达。结果 Masson三色染色显示，矽肺模型4周组细胞性结节区域可见蓝紫色胶原沉积，并随模型制备时间的延长纤维化病变区域胶原沉积逐渐增加。免疫组织化学法染色显示，对照组α-SMA阳性表达部位在气管及血管平滑肌；在矽肺模型16周组，α-SMA表达于结节周边及间质纤维化病变区域。α-SMA、Collagen Ⅰ、Fn及Gαi2、Gαi3蛋白表达在矽肺模型4、8、12和16周较对照组逐渐增多。在矽肺模型8周组Gαs蛋白表达及cAMP含量较对照组下降，至染尘16周达最低。结论 cAMP的表达在矽肺发生、发展过程中呈下降趋势，cAMP信号参与大鼠矽肺纤维化过程。
相似文献目的 将经过鉴定的人牙周膜干细胞（hPDLSC）膜片分别与支架材料预处理牙本质片（TDM）和羟基磷灰石/磷酸三钙（HA-TCP）进行体外共培养,评价不同支架对干细胞分化的影响。方法 将单层牙周膜干细胞膜片与2种不同支架材料TDM和HA-TCP分别共培养1周,植入裸鼠皮下,通过扫描电镜和组织学动态观察复合体显微结构变化。结果 细胞膜片与TDM边界处结合更为紧密;边界大量矿物沉积和纤维样组织生成;而在HA-TCP组只有单一的走形相对规则的纤维组织生成,未有明显矿化沉积生成。结论 复合的hPDLSC/TDM组更适合具有生物学特点的干细胞发挥其特性,在合适的微环境下使hPDLSC向成牙周组织方向定向分化。
相似文献摘要：目的 观察脾酪氨酸激酶（Syk）抑制剂PRT060318（PRT318）在体外对人血小板聚集率及Syk磷酸化的影响。方法 采用比浊法测定PRT318对胶原、二磷酸腺苷（ADP）及花生四烯酸（AA）诱导的人血小板聚集率的影响;运用Western blot检测Syk525/6磷酸化水平。结果 Syk特异性抑制剂PRT318可抑制胶原诱导的人血小板聚集率,但对ADP或AA诱导的人血小板聚集率无影响。在蛋白水平上PRT318可促进人血小板在胶原诱导下Syk525/6磷酸化水平升高。酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2可抑制胶原诱导的人血小板聚集,降低人血小板在胶原诱导下Syk525/6磷酸化水平,并可阻断胶原诱导下PRT318促Syk525/6磷酸化作用。结论 PRT 318对胶原诱导的血小板聚集具有抑制作用,并能促进胶原诱导的血小板膜受体糖蛋白VI信号通路上Syk525/6磷酸化,提示PRT318可能通过作用于Syk525/6磷酸化而抑制血小板聚集。
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目的 探讨S100A11-RAGE通过P38MAPK信号转导通路对小鼠骨关节炎软骨细胞肥大和细胞外基质代谢的调控。方法 不同浓度的外源性S100A11（0、1.25、2.50、5.00及10.00μg/ml）与小鼠软骨细胞孵育48 h，检测基质金属蛋白酶13（MMP-13）、ADAMTS-5以及Ⅱ型、Ⅹ型胶原蛋白表达，以筛选作用最显著的S100A11浓度。加入不同浓度Anti-P38（0、1.25、2.50、5.00及10.00μg/ml）与小鼠软骨细胞预孵育12 h后，再加入作用最强的外源性S100A11孵育（10μg/ml）48 h，检测MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅱ型、Ⅹ型胶原蛋白表达。结果 小鼠软骨细胞MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅹ型胶原蛋白表达随外源性S100A11浓度的增加而增加，且明显高于对照组；而Ⅱ型胶原蛋白表达随外源性S100A11浓度的增加而减少，且明显低于对照组。加入Anti-P38预处理后，MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅹ型胶原蛋白表达均明显低于S100A11单独处理组，而Ⅱ型胶原蛋白表达明显高于S100A11单独处理组。结论 外源性S100A11通过与RAGE结合，并经P38MARK信号转导通路诱导软骨细胞肥大和细胞外基质的降解，其机制可能与通过P38MAPK信号转导通路诱导MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅹ型胶原蛋白表达，并降低Ⅱ型胶原蛋白表达。
相似文献目的 采用改良分次酶消化法体外分离培养家兔肌腱干细胞,观察其生物学特性,并进行诱导分化及鉴定。方法 无菌条件下取出家兔髌腱组织,分别运用改良的分次酶消化法和酶消化后低密度稀释接种法进行分离、培养、传代,用倒置相差显微镜观察细胞形态特征并绘制两种方法的生长曲线,通过流式细胞鉴定仪检测肌腱干细胞表面抗原标志物的表达,取P3-P4代肌腱干细胞向成骨细胞、成软骨细胞诱导分化并鉴定。结果 改良的分次酶消化法较酶消化后低密度稀释接种法细胞增殖速度加快,形态均一,杂质细胞少。分离出的肌腱干细胞表面抗原标志CD90、CD44呈阳性,而CD34、CD14呈阴性,证实之前分离的细胞为肌腱干细胞。鉴定出肌腱干细胞具有向成骨细胞和成软骨细胞分化能力。结论 采用改良的分次酶消化法分离培养兔肌腱干细胞简单易行,肌腱干细胞生长及传代速度可观,活性良好,纯度较高。另外,肌腱干细胞的成功分离培养,也为肌腱相关疾病的研究开辟了一条新途径。
相似文献目的 探讨葡萄籽原花青素（GSP）对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉重构的改善作用。方法 8周龄雄性SHR 24 只随机分为4组，每组6只：SHR组、GSP低剂量（50 mg/kg）、高剂量组（200 mg/kg）以及卡托普利组（30 mg/kg）。6只同龄雄性Wistar-Kyoto大鼠设为对照组。每周测定尾动脉收缩压（SBP）；治疗6周后HE染色下测定胸主动脉中膜横截面积（MCSA）、管腔面积（LA）及MCSA/LA；Masson三色法测量胸主动脉胶原容积分数（CVF）；ELISA法测定胸主动脉中Ⅰ型胶原（ColⅠ）含量；生化法检测大鼠胸主动脉中过氧化氢酶（CAT）活力及丙二醛（MDA）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胸主动脉中ERK1/2蛋白表达。结果 GSP能显著降低SHR SBP（P <0.01），改善血管重构参数，减少胸主动脉MDA含量以及ERK1/2蛋白的表达，提高CAT活力。结论 GSP能够改善SHR胸主动脉重构，其作用可能是通过降压、对抗氧化应激和抑制ERK1/2蛋白表达实现的。
相似文献目的 探讨用博来霉素（BLM）制作硬皮病动物模型的最适浓度。方法 将24只BALB/C小鼠随机平均分为3个实验组和1个对照组，各实验组小鼠分别皮下注射200、700和1 000μg/ml浓度的BLM，对照组小鼠皮下注射等量的磷酸盐缓冲液（PBS），注射4周后处死小鼠，取注射部位皮肤行苏木精-伊红染色法（HE）染色、Masson染色、真皮羟脯氨酸含量检测及真皮厚度检测。结果 700和1 000μg/ml浓度的BLM成功建模，但1 000μg/ml的浓度可导致小鼠皮肤浅表溃疡。结论 硬皮病动物模型成功与否与BLM药物浓度高低关系密切，700μg/ml博莱霉素浓度具有较好的建模效果，且不会出现皮肤溃疡的副作用。
相似文献目的 评价钛合金表面纳米氧化锌薄膜对细胞毒性的作用。方法 观察小鼠胚胎成纤维L-929细胞在含纳米氧化锌薄膜的钛合金析出液中的生长情况,采用噻唑蓝比色法测定各组细胞的吸光度值,并计算出相对的细胞增殖率,进行细胞毒性评价。结果 各组细胞生长状况良好,细胞形态无异常,增值率>80%,细胞毒性等级为1级。结论 钛合金表面纳米氧化锌薄膜对细胞生长无毒害作用。
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