EZH2对人喉鳞状细胞癌HEP-2增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨Zeste基因增强子同源物2(EZH2)在人喉鳞状细胞癌组织和HEP-2、SCC10A细胞中的表达及其对人喉鳞状细胞癌细胞HEP-2增殖、迁移和侵袭的影响。方法：收集宣城中心医院30例喉鳞状细胞癌和10例癌旁正常喉黏膜组织标本,qRT-PCR检测喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织以及喉鳞状细胞癌细胞HEP-2、SCC10A中EZH2的表达。采用Lipofectamine2000将EZH2 shRNA质粒转染至HEP-2细胞中,通过qRT-PCR和Western blot检测EZH2 shRNA的转染效率,并通过Western blot检测EZH2下游相关信号分子的表达水平。CCK8实验检测HEP-2细胞的增殖,划痕实验和 Transwell侵袭实验检测细胞的迁移、侵袭能力。运用裸鼠体内成瘤实验检测EZH2对HEP-2细胞体内成瘤能力的影响。结果：EZH2在喉鳞状细胞癌组织及细胞中显著高表达(P＜0.01)。EZH2 shRNA质粒转染后可抑制细胞的增殖能力,细胞的迁移和侵袭也均受到明显抑制。裸鼠体内成瘤实验结果显示,EZH2 shRNA组的HEP-2细胞肿瘤形成能力明显减弱。结论：EZH2在喉鳞状细胞癌组织和细胞中高表达;EZH2 shRNA能够在体外抑制喉鳞状细胞癌细胞HEP-2的增殖、迁移和侵袭,并抑制RAF1-ERK信号通路的活化;EZH2能够在体内抑制喉鳞状细胞癌细胞HEP-2的成瘤能力。     

五味子乙素通过Wnt/β-catenin信号通路抑制膀胱癌增殖、迁移和侵袭

目的：探讨五味子乙素（schisandra B,SchB）对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法：采用不同浓度的五味子乙素溶液（0、20、40、80μmol/L）处理膀胱癌细胞，CCK-8法检测五味子乙素对膀胱癌细胞增殖的影响；Transwell迁移实验和细胞划痕实验检测五味子乙素对膀胱癌细胞迁移的影响；Transwell侵袭实验检测五味子乙素对膀胱癌细胞侵袭能力的影响；Western blot检测细胞内β-catenin、c-myc蛋白表达水平的变化。结果：五味子乙素呈时间和剂量依赖性抑制T24和UM-UC-3细胞的增殖能力（P<0.05）。细胞划痕愈合率、迁移和侵袭细胞数随着五味子乙素浓度增加而降低（P<0.05）。五味子乙素能够下调膀胱癌细胞内β-catenin和c-myc蛋白的表达（P<0.05）。结论：五味子乙素可抑制人膀胱癌T24和UM-UC-3细胞的增殖、迁移和侵袭，抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活可能是其发挥抑癌作用的主要机制。     

七氟烷抑制宣威肺癌XWLC-05细胞生物学行为

  目的   了解七氟烷对宣威肺癌细胞XWLC-05增殖、迁移、侵袭及恶性行为的影响，并进一步探讨其潜在机制。  方法   七氟烷对XWLC-05细胞进行处理，体外实验检测XWLC-05细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭变化；体内实验检测XWLC-05细胞致瘤性，蛋白印迹法分析增殖关键分子PI3K/AKT、细胞侵袭蛋白MMP-2/MMP-9的表达。  结果  对照组的克隆形成数（287.5±23.1）个，高于实验组（174.1±16.3）个，（P < 0.05）；对照组的凋亡率（1.60±0.38）%，低于实验组（31.48±5.81）%，（P < 0.01）；对照组迁移细胞数（87.8±10.2）%，高于实验组（35.2±4.4）%，（P < 0.05）；对照组侵袭细胞数（93.6±7.3）个，高于实验组（30.7±3.2）个，（P < 0.01）。七氟烷处理下调增殖蛋白分子PI3K、p-AKT和侵袭蛋白分子MMP-2、MMP-9的表达水平（P < 0.05）。  结论   七氟烷通过抑制PI3K/AKT信号通路降低宣威肺癌细胞XWLC-05的增殖能力，诱导细胞凋亡，减弱XWLC-05细胞的迁移、侵袭和成瘤能力。七氟烷可能成为宣威肺癌治疗的一种新方法。     

Twist调控骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨增强或降低Twist表达对不同恶性程度的骨肉瘤细胞体外增殖、迁移、侵袭及体内成瘤的作用。方法Real-time PCR 及Western blot检测Twist在143B、MG63及TE85三种不同骨肉瘤中的基础表达。采用Ad-Twist及Ad-siTwist腺病毒感染 细胞,细胞生长曲线检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞的平行迁移能力,Transwell实验检测细胞的垂直迁移及侵袭能力。 Ad-Twist及Ad-siTwist感染Luc标记的143B细胞,制备胫骨近端骨肉瘤模型,活体成像动态观察细胞在体内的生长。结果在 骨肉瘤细胞中Twist 的基础表达显著高于C3H10 细胞（P<0.05）,其中在143B细胞表达最高,MG63 细胞次之,TE85 细胞中最 低,Twist的表达水平与骨肉瘤细胞的恶性程度呈正相关。Ad-Twist及Ad-siTwist感染细胞分别能显著提高或降低骨肉瘤细胞 中Twist的mRNA及蛋白水平的表达（P<0.05）。生长曲线结果显示Twist过表达能显著促进骨肉瘤细胞的增殖,而抑制Twist的 表达后,骨肉瘤细胞的增殖能力降低（P<0.05）。Transwell实验发现Twist过表达后,3种骨肉瘤细胞迁移或侵袭至小室的细胞 数明显增多,而抑制Twist的表达可降低骨肉瘤细胞的迁移侵袭能力（P<0.05）。143B细胞具有良好的体内成瘤能力,Twist过表 达促进143B细胞在裸鼠体内生长,活体成像动态观察荧光信号显著高于对照组,抑制Twist表达可显著抑制细胞在裸鼠体内生 长,信号明显弱于对照组。结论Twist可增强骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及体内成瘤能力。     

hsa_circ_100395对胃癌细胞HGC-27、MGC-803增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究hsa_circ_100395对胃癌细胞HGC-27、MGC-803增殖、侵袭和迁移的影响。 方法收集72例胃癌患者胃癌组织及其癌旁组织样本,采用qRT-PCR检测hsa_circ_100395在胃癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。将胃癌细胞系HGC-27和MGC-803分成过表达组(转染hsa_circ_100395过表达质粒)、沉默组(转染hsa_circ_100395沉默质粒)和对照组(转染空质粒)。采用CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell法、裸鼠成瘤实验检测胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。 结果hsa_circ_100395在胃癌组织中表达明显下调。hsa_circ_100395低表达与高表达在组织分化程度、浸润深度及TNM分期上差异有显著性(P＜0.05)。与对照组比较,hsa_circ_100395过表达显著抑制HGC-27和MGC-803细胞增殖、迁移、侵袭及体内肿瘤的生长;hsa_circ_100395沉默显著促进了HGC-27和MGC-803细胞增殖、迁移、侵袭及体内肿瘤的生长。 结论hsa_circ_100395在胃癌组织中低表达,且过表达hsa_circ_100395可抑制胃癌细胞HGC-27、MGC-803增殖、侵袭和迁移。     

莱菔硫烷对人肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)对人肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,并将其分为4组：空白对照组、SFN低浓度组(5μmol/L)、SFN中浓度组(10μmol/L)、SFN高浓度组(20μmol/L),用CCK-8检测肾癌细胞786-O增殖活化的情况；分别用细胞划痕、Transwell迁移实验观察SFN对肾癌细胞786-O迁移能力的影响；用Transwell侵袭实验观察SFN对肾癌细胞786-O侵袭能力的影响；运用Western blot和qRT-PCR方法检测SFN对上皮间质转化(EMT)相关蛋白和mRNA表达的影响；用Western blot检测SFN对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果 SFN处理24、48、72 h后，肾癌细胞786-O的增殖活性随着SFN浓度的升高而下降；与对照组相比，SFN处理组的肾癌细胞迁移和侵袭能力均显著降低；此外，随着SFN浓度的升高，肾癌细胞786-O中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平逐渐升高，而N-cadherin、Vimentin的mRNA及蛋白表达水平随之降低；NF-κB信号通路相...     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot检测20例口腔鳞癌组织、口腔鳞癌细胞系Tca-8113、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中CCR7的表达。用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Sec-ondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用。结果①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达。②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系。结论 CCR7/SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点。     

胶质瘤干细胞来源的外泌体促进胶质瘤恶性进展

目的：探讨胶质瘤干细胞（glioblastoma stem cell,GSC）来源的外泌体（extracellular vesicle,EV）对胶质瘤细胞的增殖、侵袭和替莫唑胺（temozolomide,TMZ）耐药能力的体内外影响。方法：选用原代GSC,通过分化实验获得相对应的分化肿瘤细胞（differentiated glioma cell,DGC）。通过超速离心法分别获得GSC和DGC细胞培养基上清液中的EV。利用CCK8和克隆形成实验、transwell侵袭实验检测GSC来源的EV对胶质瘤U87细胞增殖、TMZ耐药和侵袭能力的影响。小鼠颅内原位成瘤实验分析GSC来源的EV对U87细胞体内增殖、TMZ耐药的影响。结果：通过对原代GSC进行分化,获得了与之相对应的DGC,并且成功获得GSC和DGC来源EV。与DGC来源的EV相比,GSC来源的EV可显著增强U87细胞增殖、侵袭和替莫唑胺耐药能力。体内实验进一步证实,GSC来源的EV能显著促进肿瘤体内生长,明显降低小鼠存活期。结论：GSC来源的EV增强胶质瘤细胞的增殖、侵袭和替莫唑胺耐药能力。     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞(癌细胞增殖和迁移的影响

目的 检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot 检测 20例口腔鳞癌组织 、口腔鳞癌细胞系Tca-8113 、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中 CCR7的表达.用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Secondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用.结果 ①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达.②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖.③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系.结论 CCR7/ SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点.     

长链非编码RNA linc00152促进人口腔鳞状细胞癌的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA-linc00152对口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响.方法采用RT-qPCR方法检测linc00152在口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织以及口腔鳞癌细胞系中的表达.CAL27和SCC9细胞转染linc00152-siRNA后,采用CCK8、划痕以及Transwell实验检测CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭转移情况.结果Linc00152在口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在人口腔鳞状细胞癌细胞系TSCCA、SCCl5、CAL27和SCC9中的表达显著高于人正常黏膜HOK细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);经相关性分析,Linc00152的高表达与淋巴结转移有关(P<0.05);CAL27和SCC9细胞系敲低Linc00152后,CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭和转移明显受到抑制(P<0.05).结论linc00152在口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞系中呈高表达,下调linc00152表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和转移,linc00152可成为口腔鳞癌潜在治疗靶点.     

LncRNA PCBP1-AS1对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA PCBP1-AS1（LncRNA PCBP1-AS1）对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及其可能机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测OSCC细胞中PCBP1-AS1的表达水平;采用Lipofectamine 2000将pcDNA-PCBP1-AS1及pcDNA-control转染入口腔鳞癌CAL-27细胞;甲基噻唑基四唑实验检测CAL-27细胞的增殖能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;蛋白免疫印迹法检测细胞周期依赖蛋白激酶1（CDK1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）、Janus激酶2（JAK2）/信号转导与转录激活因子3（STAT3）信号通路相关蛋白表达。结果与正常口腔上皮细胞比较,OSCC细胞CAL-27、Tca8113、KB中PCBP1-AS1的表达水平显著降低（P < 0.01）;PCBP1-AS1过表达可显著抑制CAL-27细胞的增殖、侵袭（P < 0.01）,促进细胞凋亡（P < 0.01）;PCBP1-AS1过表达可显著抑制CDK1、MMP-2、Bcl2、p-JAK2、p-STAT3的蛋白表达（P < 0.01）,而促进Bax的蛋白表达（P < 0.01）。结论PCBP1-AS1过表达可抑制OSCC细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡,其作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。     

靶向沉默热休克蛋白27对口腔鳞状细胞癌CAL27细胞侵袭和迁移的作用及其机制

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞侵袭和迁移的影响,并阐明其作用机制.方法:CAL27细胞分为对照组[转染阴性对照小干扰RNA(NC-siRNA)]和实验组[转染HSP27小干扰RNA(HSP27-siRNA)],实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blo...     

奥沙利铂对人舌鳞癌CAL27细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的：探讨奥沙利铂（Oxaliplatin）对人舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）CAL27细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其潜在作用机制。方法：采用不同浓度（0、10、20、40和80 mg·L^-1）Oxaliplatin处理CAL27细胞,分别作为对照组和10、20、40及80 mg·L^-1 Oxaliplatin组,采用结晶紫染色法观察各组CAL27细胞形态表现,CCK-8法检测各组CAL27细胞增殖率,流式细胞术检测不同细胞周期CAL27细胞百分比和凋亡率,实时荧光定量PCR法检测各组CAL27细胞中周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）和细胞周期蛋白E（cyclin E）mRNA表达水平,Western blotting法检测各组CAL27细胞中抗凋亡蛋白survivin和促凋亡蛋白Bax的表达水平。结果：与对照组比较,40 mg·L^-1 Oxaliplatin组CAL27细胞出现一定程度的皱缩,80 mg·L^-1 Oxaliplatin组CAL27细胞明显失去原有形态,细胞间连接丧失。与对照组比较,10、20、40和80 mg·L^-1 Oxaliplatin组CAL27细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较,40 mg·L^-1 Oxaliplatin组G₀/G₁期CAL27细胞百分比明显升高（P<0.01）,CDK2和cyclin E mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,40与80 mg·L^-1 Oxaliplatin组CAL27细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。与对照组比较,40和80 mg·L^-1 Oxaliplatin组CAL27细胞中survivin蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bax蛋白表达水平则明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：Oxaliplatin能够抑制CAL27细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与细胞发生G₀/G₁期阻滞以及survivin蛋白表达水平降低和Bax蛋白表达水平升高有关。     

PSMA7在胃癌中的表达及对胃癌增殖、侵袭迁移及成瘤能力的影响

目的研究PSMA7在胃癌中的表达及其对胃癌增殖、侵袭迁移及裸鼠皮下成瘤能力的影响。方法收集60例胃癌患者的 癌组织及配对的癌旁组织,应用免疫组化法检测胃癌和配对癌旁组织中PSMA7的表达水平;应用慢病毒转染技术在胃癌细胞 株SGC7901中干扰PSMA7;应用Cell Counting Kit-8（CCK-8）和细胞克隆形成实验检测胃癌细胞增殖能力的变化,Transwell实 验检测胃癌细胞侵袭迁移能力的变化;稳转细胞株构建裸鼠皮下移植瘤模型,研究干扰PSMA7对皮下移植瘤的影响。结果 免疫组化结果显示PSMA7在胃癌组织中的表达水平显著高于其配对的癌旁组织（P<0.05）;在人胃癌细胞株SGC7901中下调 PSMA7表达能够显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移能力（P<0.05）;在BALB/c小鼠皮下移植瘤模型中干扰PSMA7的表达能 够明显抑制皮下移植瘤的生长（P<0.05）。结论PSMA7在胃癌组织中高表达,干扰PSMA7抑制胃癌细胞增殖、侵袭迁移及裸 鼠皮下成瘤的能力。     

薏苡仁提取物经PDGFB/PDGFRβ信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 观察薏苡仁提取物(ESC)经血小板源性生长因子B(PDGFB)/血小板源性生长因子受体β(PDGFRβ)信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 2020年6—8月于甘肃省人民医院实验室进行实验.体外培养人口腔鳞癌CAL27细胞,设对照组(不予处理)、ESC低剂量组(10μmol/L)、ESC高剂量组(...     

沉默MSH3表达增强舌癌细胞对顺铂的敏感性

目的设计靶向DNA错配修复基因MSH3的siRNA干扰片段,观察MSH3有效沉默对舌癌细胞顺铂耐药性的影响。方 法针对MSH3基因CDS区序列,设计3条siRNA片段,体外化学合成小干扰RNA（siRNA）片段,通过脂质体介导转染人舌癌细 胞CAL27。Real-time PCR及Western 检测干扰后MSH3 的表达。MTS,凋亡双染法及细胞免疫荧光检测顺铂处理后细胞存 活、凋亡及DNA双链断裂的情况。结果3 条siRNA 片段转染细胞后,与对照组相比,3 号siRNA 片段转染后能显著降低 MSH3 mRNA及蛋白质表达水平,该片段被选为后续实验。MSH3表达下调后,顺铂的半数抑制浓度（IC50值）分别由21.32降 至13.95 μmol/L（P<0.05）,凋亡指数分别由4.23±1.27升至11.32±1.82（P<0.05）,舌癌细胞中γ-H2AX焦簇（Foci）的数量显著增 加。结论MSH3表达下调可以明显增加舌癌细胞对顺铂的敏感性,减少DNA双链断裂修复是其主要机制之一。     

Reappraisal of the anticancer efficacy of quercetin in oral cancer cells

BackgroundDespite increased experience in therapy, the overall outcome of oral squamous cell carcinoma (OSCC) has not improved because of the relative resistance to chemotherapeutic drugs in addition to local invasion and frequent regional lymph node metastases. Quercetin (Qu) is a principal flavonoid compound and an excellent free-radical-scavenging antioxidant that promotes apoptosis. Limited reports regarding the molecular or cellular role of Qu in anticancer properties on OSCC have been presented. This study was conducted to clarify the efficacy of Qu on OSCC in vitro and further to evaluate the possible mechanism(s).MethodsCultured OSCC cells (SCC-25) and human gingival fibroblasts (HGFs) were treated with different concentrations of Qu. Cell viability and cell colony-forming potential were detected with the MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) and colony growth assays. Cell-cycle analysis and apoptosis were measured by flow cytometry. Cell migration and invasion were tested using the micropore chamber assay.ResultsCell viability and colony-forming potential were decreased in a dose-dependent manner following Qu treatment. Qu also dose-dependently inhibited the proliferation of SCC-25 cells via both G1 phase cell cycle arrest and mitochondria-mediated apoptosis. In addition, Qu also decreased the abilities of migration and invasion of SCC-25 cells in a dose-dependent manner.ConclusionQu effectively inhibits cell growth and invasion/migration of SCC-25 cells in vitro. The cellular and molecular mechanisms are via cell cycle arrest accompanied by mitochondria-mediated apoptosis. Our findings suggest that Qu may have potential as a new chemopreventive agent or serve as a therapeutic adjuvant for OSCC.