血管紧张素Ⅱ可能通过线粒体途径抑制低糖低氧诱导的神经元凋亡

目的：血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是体内重要的生物活性物质，它可以调节机体血压、体液平衡和神经内分泌功能。近年研究表明，AngⅡ在细胞分化及凋亡方面也发挥着极其重要的作用。AngⅡ的生物学效应可以分别被AT1和AT2受体的拮抗刺缬沙坦和PD123319抑制。本试验旨在通过体外培养新生大鼠皮层神经元，用化学损伤的方法建立低糖低氧“缺血再灌注”损伤模型，在细胞及分子水平上观察AngⅡ对神经元的作用并探讨作用机制。方法：无菌条件下进行大鼠皮层神经元原代培养，加入阿糖胞苷抑制非神经元的生长进行纯化。取培养10天的细胞，随机分组为：①正常对照组；②低糖低氧损伤组；③血管紧张素Ⅱ低、中、高浓度组；④缬沙坦组；⑤PD123319组。正常对照组常规换液培养；损伤组弃去原培养液，D—hank＇s液洗2次后，加入含1mmol／1的连二亚硫酸钠的无糖Earle＇s液，置培养箱中37℃、5％CO2、饱和湿度下培养1h后换以完全培养基，制造低糖低氧的损伤模型；药物处理组在损伤过程中和损伤后先后分别加入含不同浓度药物的无糖Earle＇s液及完全培养基。再灌注损伤24h后倒置相差显微镜进行一般形态学观察，MTT法检测各组细胞的存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率，RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax基因表达情况。结果：低糖低氧再灌注损伤组皮层神经元损伤严重，细胞存活率显下降，血管紧张素Ⅱ各浓度组可以明显改善损伤所致神经元形态的变化，且显提高神经元的存活率，并呈浓度依赖性。缬沙坦组也可明显改善细胞状况，提高细胞存活率，而PD123319组改善不明显。流式细胞术检测结果显示，损伤组细胞凋亡率明显升高，     

缺血再灌注心肌细胞凋亡及药物干预

目的：研究葛根素和维拉帕米对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法：对５６只成年Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠建立冠状动脉左前降支（ＬＡＤ）缺血再灌注模型,其中３２只大鼠在缺血胶及再灌注前给予维拉帕米和葛根素进行干预治疗,观察大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的表达情况以及维拉帕米和葛根素对其影响。采用末端标记法（ＴＵＮＥＬ）进行细胞凋亡检测;应用免疫组化的检测Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ的表达。     

丙泊酚通过抑制线粒体途径的细胞凋亡保护心肌缺血再灌注损伤(英文)

目的观察丙泊酚对离体大鼠心肌缺血再灌注(I-R)损伤的影响,并从线粒体过氧化损伤方面探讨其可能的作用机制。方法应用Langendorff离体心脏灌流系统,全心停灌25 min,再灌注30 min建立心肌I-R损伤模型。记录各项心功能指标;测定心肌线粒体呼吸链的完整性、膜肿胀度和丙二醛(MDA)含量;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率及Bcl-2和Bax蛋白的表达,免疫组化法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3,-9和-8的表达。结果与I-R组相比,缺血前10 min开始,并于再灌注期间持续灌流丙泊酚30和60μmol·L~(-1)能明显改善I- R后的心功能;心肌线粒体呼吸链损伤有所恢复,膜肿胀度减轻,MDA生成明显减少,心肌细胞凋亡率明显降低,Bcl-2表达增加,Bax表达减少,caspase-3和caspase-9阳性细胞数明显减少。结论丙泊酚减轻I-R所致的心肌线粒体过氧化损伤,抑制线粒体途径的细胞凋亡,可能是其心肌保护作用机制之     

肾缺血再灌注损伤细胞凋亡的研究进展

临床工作中,在阻断肾脏血液供应的外科手术中（如肾脏部分切除术）和肾脏外伤中肾脏都会受到缺血再灌注（ischemic reperfusionIR）损伤,对术后。肾脏功能的恢复起到不良影响,缺血再灌注性损伤也是缺血性急性肾功能衰竭（ARF）的重要损伤环节,在肾移植中缺血再灌注性损伤也是不可避免的,缺血再灌注损伤不仅会引起单纯的移植肾功能延迟恢复（delayed graft function,DGF）,而且还能通过影响免疫机制促进急性排斥反应（acute reiection AR）的发生日;     

血府逐瘀汤对乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响

目的为探讨血府逐瘀汤对乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响。方法应用培养的乳鼠心肌细胞造成缺血再灌注损伤的动物模型,观察心肌细胞中超氧化物岐化酶(SOD)的水平,推断细胞内活性氧的生成量;观察培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性改变以判断细胞损伤情况;并进行DNA琼脂糖凝胶电泳及末端脱氧核苷酸介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL),以判断细胞死亡类型及程度。结果血府逐瘀汤可显著升高缺血再灌注时SOD的水平,显著降低LDH的水平。DNA电泳图谱表明:血府逐瘀汤可使DNA的拖尾基本消失;TUNEL显示血府逐瘀汤可显著减少缺血再灌注所致的心肌细胞死亡。结论血府逐瘀汤有保护缺血再灌注时心肌细胞免于死亡之功效。     

白藜芦醇预处理对心肌细胞缺血/再灌注损伤的细胞凋亡的影响

目的观察白藜芦醇预处理对心肌细胞缺血再灌注损伤的细胞凋亡的影响。方法培养乳鼠心肌细胞,模拟I/R损伤,随机分为阴性对照组、缺血再灌组及白藜芦醇预处理组,采用TUNEL染色法及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测心肌细胞凋亡;底物酶解法检测caspase-3活性;免疫组织化学法结合计算机图像分析检测心肌细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果Res预处理使得心肌细胞凋亡率由(39.7±5.4)%降至(8.3±0.8)%,caspase-3的相对活性由5.9±0.7降至2.8±0.4,P<0.05。Res预处理可使Bcl-2表达的光密度值由99.5±4.8升至138.9±8.4,Bax表达的光密度值由140.7±8.6降至125.3±5.8,P<0.05。结论白藜芦醇预处理可通过促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、抑制促凋亡蛋白Bax的表达,抑制凋亡过程中关键酶caspase-3的活性,减少I/R引起的心肌细胞凋亡。     

缺血再灌注损伤下微囊泡抑制心肌细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是心肌细胞缺血后再灌注导致心肌细胞损伤的主要形式之一,近年来的研究发现,微囊泡可由缺血再灌注损伤后的细胞释放,并参与包括细胞凋亡在内的多种不同的病理生理过程。在此,我们概括了缺血再灌注过程中心肌细胞所释放的微囊泡的特征,并总结了微囊泡抑制心肌细胞凋亡的可能分子机制,最后我们初步概括微囊泡在缺血再灌注相关心脏疾病...     

美托洛尔对缺血再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的:研究美托洛尔对缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡以及对凋亡相关基因的影响。方法:用末端标记原位细胞凋亡法和免疫组化法检测细胞凋亡程度。结果:缺血再灌注组与假手术组相比,心肌细胞凋亡程度明显增加,Bcl-2蛋白的表达都有明显增高,差异具极显著性(P<0.01);美托洛尔组与缺血再灌注组比较,心肌细胞凋亡程度明显降低,差异具极显著性(P<0.01);Bcl-2蛋白表达略增高,差异无显著性(P>0.05)、Fas-L蛋白表达略降低,差异无显著性(P>0.05)。结论:美托洛尔对缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡有对抗作用。     

缺血后适应对家兔缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的探讨缺血后适应对兔短期缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法32只新西兰大白兔随机分成4组：对照组、假手术组、缺血再灌注组（IR组）、缺血后适应组。IR组左冠状动脉前降支15min阻断和30min再灌注,缺血后适应组在15min缺血后接受连续3次每次再灌注30s,缺血30s的后适应。TUNEL法检测心肌组织的细胞凋亡情况。结果TUNEL检测结果：缺血后适应组心肌细胞凋亡指数为（23.5%）,与IR组（36.2%）相比,显著降低差异有统计学意义（P〈0.01）。结论缺血后适应显著减轻了兔缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡,具有心肌保护作用。     

氯沙坦对在体实验性大鼠心肌缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡及基因表达影响的研究

目的　研究氯沙坦对大鼠在体心肌缺血再灌注后细胞凋亡的影响及bcl 2和bax基因表达。方法　采用末端标记、原位杂交、免疫组织化学 3种方法分别检测细胞凋亡、基因表达产物的mRNA和蛋白质 ,通过图像分析系统测量阳性染色区域的平均吸光度对原位杂交和免疫组织化学检测物质进行量化处理。结果　细胞凋亡数目手术对照组为 (38± 9)个 /HP ,假手术组为 (0～ 1 )个 /HP ,药物治疗组为 (9± 4)个 /HP ,各组间差异有非常显著性 (P <0 0 0 1 ) ;原位杂交bcl 2手术对照组为 0 0 75± 0 0 2 0 ,假手术组为 0 0 60± 0 0 1 0 ,治疗组为 0 0 76±0 0 1 4 ,免疫组织化学bcl 2手术对照组为 0 1 37± 0 0 1 4 ,假手术组为 0 0 85± 0 0 1 9,治疗组为 0 1 2 5± 0 0 2 1 ,对照组、治疗组的升高与假手术组之间差异有显著性 (P <0 0 5) ,治疗组和对照组之间差异无显著性 (P >0 1 ) ;免疫组织化学bax手术对照组为 0 0 97± 0 0 2 2、假手术组为 0 0 62± 0 0 1 4、治疗组为 0 0 62± 0 0 1 4 ,对照组的升高与治疗组、假手术组间差异有非常显著性 (P <0 0 0 1 ) ,治疗组和假手术组之间差异无显著性 (P >0 9) ;bcl 2 /bax比值手术对照组为 1 41 3 ,假手术组为 1 376 ,治疗组为 2 0 1 6。结论　氯?     

TAK-242通过调控JAK2/STAT3通路抑制小鼠心肌缺血再灌注损伤炎症反应

目的：探讨Toll样受体4拮抗剂TAK-242抑制小鼠心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion,I/R）炎症反应的分子机制。方法：选用48只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组（sham）、模型组（I_30min /R_24h）、给药组[I/R+TAK-242（3 mg·kg^-1）]、干预组[I/R+TAK-242+AG490（15 mg·kg^-1）]。再灌注24 h后心脏超声检测小鼠心功能,氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测定心肌梗死面积,HE染色观察心肌病理改变,WB检测心肌JAK2/STAT3磷酸化水平,ELISA检测血清IL-6、TNF-α、IL-10和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）浓度。结果：与sham组比较,I/R组小鼠左心室收缩期直径（LVIDs）延长（P<0.01）,左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短分数（LVFS）显著降低（P<0.001或P<0.01）,心梗面积明显增加并出现心肌炎性浸润,心肌p-JAK2/p-STAT3表达明显升高（P<0.01或P<0.05）,血清IL-6、IL-10、TNF-α和HMGB1水平显著升高（P<0.001或P<0.01）。与I/R组比较,TAK-242给药组小鼠LVIDs缩短（P<0.05）,LVEF和LVFS显著升高（P<0.01或P<0.05）,心梗面积缩小（P<0.01）,心肌炎症浸润减轻,心肌p-JAK2/p-STAT3表达降低（P<0.01或P<0.05）,血清IL-6和TNF-α水平明显下降（P<0.001或P<0.01）,而IL-10和HMGB1浓度进一步升高（P<0.01）。与TAK-242给药组比较,AG490干预可显著加强TAK-242治疗作用,包括心肌收缩功能增强,心梗面积缩小及炎性浸润程度减轻,心肌p-JAK2/p-STAT3表达降低（P<0.05）,血清IL-6、TNF-α浓度下降而IL-10、HMGB1浓度升高（P<0.01或P<0.05）。结论： Toll样受体4拮抗剂TAK-242抑制小鼠I/R炎症反应与JAK2/STAT3信号通路失活有关。     

Janus激酶-信号转导子与转录激活子信号通路在硫化氢后处理离体缺血再灌注大鼠心肌中的作用

目的 探讨Janus激酶-信号转导子与转录激活子(JAK2/STAT3)信号通路在硫化氢后处理(H2S)减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤的作用.方法 应用Langendorff离体心脏灌流装置、通过停灌30 min/复灌60 min的方法建立SD大鼠I/R模型.按照处理及再灌注成分分为持续灌注对照组,I/R组...     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后NF-kB表达和细胞凋亡

目的:研究脑缺血再灌注后大鼠脑组织半暗区核因子(nuclear factor kappa B,NF-kB)基因表达的变化与神经细胞凋亡的关系。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉(M CAO)栓塞/再灌注模型,原位杂交法检测大鼠脑重度缺血(3h)及再灌注损伤不同时间点(2、3d)半暗区NF-kB表达;TUNEL法测定凋亡细胞。结果:脑缺血再灌注后,缺血半暗区NF-kB的表达明显升高(P<0.01)。凋亡细胞数量亦显著增加(P<0.01)。细胞凋亡的时程变化与NF-kB的表达基本一致。结论:局灶性重度脑缺血再灌注后可引起NF-K b表达的增加,参与缺血再灌注神经细胞损伤机制。     

Triptolide inhibits NF-kappaB activation and reduces injury of donor lung induced by ischemia/reperfusion

Aim： To investigate the protective effect of triptolide （TRI） on ischemia/reperfusion- induced injury of transplanted rabbit lungs and to investigate the mechanisms underlying the actions of TRI. Methods： We established the rabbit lung trans- plantation model and studied lung injury induced by ischemia/reperfusion and the inhibitory effect of TRI on NF-KB. The severity of lung injury was determined by a gradual decline in PvO2, the degree of lung edema, the increase in the myeloperoxidase （MPO） activity, and the ultrastructural changes of transplanted lungs. The activation of NF-KB was measured by immunohistochemistry. The increase in intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1）, which is the target gene of NF-KB, was evaluated by ELISA. Results： After reperfusion, there was a gradual decline in the PvO2 level in the control group （group Ⅰ）. The level of PvO2 in the group treated with lipopolysaccharide （group Ⅱ） was significantly decreased, whereas that of the group treated with TRI （group Ⅲ） was markedly improved （P〈0.01）. In group III, the activity of MPO was downregulated, and the pulmonary edema did not become severe and the ultrastructure of the donor lung remained normal. The activity of NF-KB and the expression of ICAM- 1 was significantly increased in the donor lungs. TRI blocked NF-KB activation and ICAM-1 expression. Conclusion： The effects of TRI on reducing injury to donor lungs induced by ischemia/reperfusion may possibly be mediated by inhibiting the activity of NF-KB and the expression of the NF-KB target gene ICAM-1. Thus, TRI could be used in lung transplantations for improving the function of donor lungs.     

Bcl-2 expression alters the mitochondrial tri carboxyl Acid pathway in hepatic ischemic and reperfusion induced necrosis and apoptosis in rat liver

Ischemic and reperfusion injury leads to necrosis and apoptosis. Mitochondrial enzymes and antiapoptotic gene plays an important role in necrosis and apoptosis. The aim of this study was to investigate the role of Bcl-2 expression in alternations in mitochondrial energy regulation during hepatic ischemia and reperfusion and role in necrosis and apoptosis. Total 12 Wistar rats were divided into sham-operated control group (I) and ischemia and reperfusion group (II). Mitochondrial tri carboxylic acid cycles marker enzymes, respiratory marker enzymes, apoptotic cells, necrotic cells and Bcl-2 expression was measured. Number of necrotic and apoptotic cells were increased in ischemic and reperfusion group with reducing tri carboxylic acid cycles marker enzymes, respiratory marker enzymes and decreasing of Bcl-2 expression. On the basis of our findings it may be concluded that suppression of Bcl-2 gene, inhibition of tri carboxylic acid cycles and respiration rate, adenosine tri phosphate production in mitochondria is a pathophysiological consequences which provides a clue for necrosis and apoptosis in hepatic ischemic and reperfusion injury.     

The protective effects of dexmedetomidine against apoptosis in retinal ischemia/reperfusion injury in rats

Objective: Dexmedetomidine is an alpha 2 adrenoceptor agonist and can be used for postoperative sedation, analgesia and anesthesia-sparing properties. Furthermore, the neuroprotective effects against ischemia/reperfusion (I/R) injury in the central nervous system have been shown in experimental studies. This study aimed to investigate the protective effects of dexmedetomidine against apoptosis in retinal I/R injury in the rat.

Materials and methods: Retinal I/R injury was induced by transient elevation of intraocular pressure. Eighteen animals were divided into three groups (n?=?6): sham, I/R and treatment. The I/R injury and protective effects of the dexmedetomidine were evaluated by retinal thickness determined by histological sections, terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotin-deoxyuridine triphosphate nick-end labeling (TUNEL) and immunohistochemistry of caspases 3.

Results: A decrease in the retinal thickness and an increase in the apoptotic cells were found to be statistically significant in I/R and treatment groups when compared with the control group. However, in comparison with the I/R group we realized that the administration of dexmedetomidine reduced the thinning of retinal thickness and also decreased the number of caspases 3 and TUNEL-positive cells.

Conclusion: Dexmedetomidine is protective against apoptosis in retinal I/R injury in rats.     

Zn~(2+)诱导金属硫蛋白表达对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的　探讨Zn2 + 诱导金属硫蛋白表达对离体大鼠缺血再灌注 (I/R)损伤心肌的保护作用及其机制。方法　 32只Sprague Dawley大鼠随机分为 4组 :对照组、I/R组、Zn2 + 预处理组、心肌组织细胞外信号调节的蛋白激酶 (ERK)抑制剂PD980 5 9+Zn2 + 预处理组 (每组各 8只 )。分别检测心肌细胞乳酸脱氢酶 (LDH)及肌酸激酶 (CK)漏出量、心肌组织三磷酸腺苷 (ATP)含量及心功能指标 (LVSP与±dp/dtmax) ,用10 9Cd/血红素饱和法测量心肌组织中金属硫蛋白的含量。结果　与I/R组比较 ,Zn2 + 预处理组金属硫蛋白表达量增高 (P <0 0 1) ,心肌细胞LDH与CK漏出量降低 ,而心肌组织ATP增高 ,心功能指标改善 (P <0 0 1) ;Zn2 + 预处理组与对照组比较 ,两组间的LDH、CK、ATP、LVSP与±dp/dtmax差异无显著性。ERK抑制剂PD980 5 9取消Zn2 + 预处理组的上述心肌保护作用。结论　Zn2 + 诱导金属硫蛋白表达减轻大鼠心肌I/R损伤 ,其机制涉及丝裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)途径     

ERK信号转导通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用

细胞外信号调节激酶(ERK1/2)作为丝裂原活化蛋白激酶家族中一个重要的亚族,在调节细胞的生长、分化、应激以及死亡中起重要作用。大量研究表明,ERK信号通路在体内外心肌缺血/再灌注损伤过程中被激活并发挥了重要作用。激活ERK既可以促进细胞存活,也可以介导细胞损伤,这与细胞种类的不同或缺血/再灌注的程度及时程的不同有关。本文就ERK信号转导通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用及其机制作一综述。     

Apelin-13对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响及机制探讨

目的观察apelin-13对离体大鼠缺血/再灌注损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法Langendorff恒流灌注大鼠心脏,采用停灌/复灌方式复制缺血/再灌注模型;观察缺血/再灌注期间心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+LVdp/dtmax)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-LVdp/dtmax);采用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,Westernblot方法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和ERK1/2的表达。结果apelin-13可以增加缺血/再灌注损伤后心脏±dp/dtmax(P<0·01),降低灌流液中LDH水平,增加心肌组织中SOD活性,上调心肌组织中eNOS表达和下调细胞外调节蛋白激酶1和2(ERK1/2)的表达。结论apelin-13拮抗缺血/再灌注引起的心脏收缩及舒张功能障碍及心肌细胞膜稳定性改变;其作用机制可能与增加心肌清除氧自由基的能力、改变eNOS与ERK1/2表达有关。