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1.
目的 了解我院同时产质粒介导AmpC酶和超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的耐药性及其 β 内酰胺酶的基因型特征。方法  110株临床分离无重复肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌耐药株 ,采用酶提取物三维实验检测AmpC酶 ,美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型筛选和确认实验检测ESBLs ;琼脂二倍稀释法测定抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度 (MICs) ;等电聚焦实验测定 β 内酰胺酶等电点 (pIs) ;质粒接合实验定位耐药基因 ;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型。结果 同时产AmpC酶和ESBLs菌株在肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌中的检出率分别为 7.7% (5 6 5 )、8.9% (4 4 5 )。该类产酶菌株产 2~ 3种pI5 .4~ 9.0 β 内酰胺酶 ,对第三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑和含酶抑制剂复合制剂的敏感性极低 ,但对亚胺培南均敏感。 9株质粒中均检出AmpC酶基因DHA 1亚型 ,其中 1株同时检出ACT 1亚型 ;ESBLs基因亚型分别为CTX M 14、CTX M 3、CTX M 9,各有 4、3、2株 ;有 3株还携带广谱酶TEM 1基因。结论 我院存在同时产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M型ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌流行株 ,药敏检测结果显示对大多数新型广谱 β 内酰胺类抗生  相似文献   

2.
随着同时产ESBL和质粒型AmpC酶(超超广谱β-内酰胺酶,SSBL)的耐药菌株日益增多,导致菌株产生更强的耐药性,给感染控制带来很大困难。为了了解本院住院患儿大肠埃希菌(E.coli)及肺炎克雷伯菌(Kpn)高产质粒AmpC酶和SSBL的分子流行病学特征。  相似文献   

3.
目的 :了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌中CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。方法 :对 2 0 0 1年 1 0月~ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 30株产ESBLs大肠埃希菌采用琼脂平皿对倍稀释法和PCR方法进行耐药表型和 β 内酰胺酶基因型分析 ;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ;用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌同源性。结果 :1 3株菌携带CTX M基因 ,CTX M酶亚型为CTX M 3和CTX M 1 4。产CTX M酶菌株对第三代头孢菌素耐药率高 ,对头孢噻肟…  相似文献   

4.
目的探讨整合子介导的耐药机制在产AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药中的作用.方法5株产AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离自2002年1月-2004年5月间我院呼吸科住院的患者,采用E-test试验条进行药敏试验、电转化试验,筛选、分离耐药质粒.PCR扩增Ⅰ型整合子基因盒插入序列,分子克隆和序列分析.结果所有产酶菌株通过电转化试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌,5个产AmpC酶耐药质粒中,有4个检出整合酶序列,其中3个携带2种抗药性基因盒,包括氨基糖苷乙酰转移酶基因aacA4;氨基糖苷腺苷转移酶基因aadA5;二氢叶酸还原酶基因dfrA17;氯霉素外排蛋白编码基因cmL44.结论整合子介导的抗药性基因盒参与了产质粒AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药的形成,应引起高度重视.  相似文献   

5.
大肠埃希菌是临床常见致病菌,也是院内获得性感染的重要病原菌。其耐药性的变迁和多重耐药的出现,主要与耐药基因编码酶有关,其中以质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和AmpC酶最为重要。我们在最近一项关于大肠埃希菌抗生素耐药相关基因的研究中,发现1株大肠埃希菌(ZY163)同时携带2种新型ESBL和AmpC酶,现报告如下。  相似文献   

6.
产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的分析   总被引:7,自引:0,他引:7  
对我院 2 0 0 1年 10月~ 2 0 0 2年 5月临床分离的 30株非重复的产ESBLs大肠埃希菌进行检测 ,了解CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。采用琼脂平皿对倍稀释法进行耐药表型检测 ,抗菌药物为头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢哌酮 舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星和阿米卡星。采用PCR方法进行 β 内酰胺酶基因型分析 ,对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ,用PFGE分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌的同源性。琼脂糖电泳结果表明 30株产ESBLs大肠埃希菌中有 13株携带CTX M基…  相似文献   

7.
目的对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带的ESBLs耐药基因进行分型,为临床合理应用抗生素提供理论依据。方法收集住院患者标本中分离出的51株大肠埃希菌和32株肺炎克雷伯菌,经PCR对上述菌株所携带的ESBLs耐药基因进行分型。结果产ESBLs大肠埃希菌中耐药质粒编码TEM型、SHV型和非TEM非SHV型超广谱β-内酰胺酶基因的百分率依次为80.4%,7.8%和11.8%;而在肺炎克雷伯菌中的百分率依次为78.1%,71.9%和25.0%。多数产ESBLs肺炎克雷伯菌同时产生一种以上的β-内酰胺酶。结论获得了吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的不同基因型,ESBLs基因型具有地区性差异。  相似文献   

8.
目的 以我院临床分离的肺炎克雷伯菌KP1为研究对象,对其所产生的质粒AmpC酶编码基因的序列进行研究。方法采用聚合酶链反应(PCR),用DHA-1型AmpC酶引物扩增KP1接合子中AmpC酶全编码基因,并克隆到pUC118载体中进行表达,对PCR产物进行测序,分析其基因型别。结果肺炎克雷伯菌KP1菌株的转移接合子所含有的质粒AmpC酶为DHA型,编码基因序列与GenBank中DHA-1编码基因序列的同源性为100%。结论哈尔滨地区临床分离肺炎克雷伯菌有可转移性DHA-1型AmpC酶的存在。  相似文献   

9.
肺炎克雷伯菌的耐药性及PFGE电泳核型   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 探讨肺炎克雷伯菌耐药表型和基因组型之间的关系。方法 以双纸片协同试验 (DDST)筛选出产超广谱β 内酰胺酶肺炎克雷伯菌 (ESBL KP) ;用XbaⅠ酶对各试验菌株进行限制性酶切 ,脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分离酶切片段。结果 PFGE很好地显示出了种内菌株间的多态性 ;ESBL KP之间基因组型多态性较各敏感株之间明显 ,未发现特异性ESBL基因条带。结论 ESBL KP之PFGE核型与各敏感株相比有明显的多态性 ;PFGE不能定位ESBL基因。  相似文献   

10.
目的 研究北京大学第三医院分离的大肠埃希菌(E.coli)和肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae,Kpn)中超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和质粒AmpC型β-内酰胺酶(p-AmpC)的分子流行病学特征.方法 收集2003年6月至2004年7月无重复临床分离E.coli和Kpn共293株,对其中产ESBL和/或p-AmpC的86株进行研究.采用琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度;等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶等电点;接合实验判断β-内酰胺酶基因位置和移动性;PCR及其产物测序确定基因型;ERIC/BOX-PCR判断菌株克隆性(E.coli菌株分型同时结合种系进化群PCR结果).结果 PGR产物测序结果显示:我院E.coli和Kpn中只产生ESBL、只产生p-AmpC、同时产生两种酶菌株的发生率分别是30.8%(60/195)、17.3%(17/98)、0.5%(1/195)和1.0%(1/98)、0.5%(1/195)、6.0%(6/98);E.coli中ESBL以CTX-M-14型酶为主(70.5%),Kpn中则以CTX-M-3(30.4%)、CTX-M-9(30.4%)、CTX-M-14(21.7%)常见,p-AmpC均为DHA-1型;发现blacrx-M-52(GenBank登录号DQ223685),该基因编码的β-内酰胺酶和CTX-M-3相比有两处点突变(A77V和P167S),导致对头孢他啶的水解活性比头孢噻肟高(临床株相应接合子MICCTX=16 μg/ml,MICCAz≥256 μg/ml).产酶株多数呈多重耐药,对美罗培南敏感.E.coli种系进化群D群以一个克隆株为主,而Kpn则以两个克隆株常见.结论 我院存在分别或同时产生ESBL和p-AmpC酶的E.coli和Kpn,相应常见酶型分别是CTX-M型和DHA型,菌株间呈一定程度的同源性.应对产生两类酶的菌株进行持续的表型监测和深入的机制研究.  相似文献   

11.
目的了解临床分离革兰阴性菌对头孢替坦的耐药性。方法收集2012年1月至2013年6月从医院各种临床标本中分离的革兰阴性菌,使用VITEK2-compact微生物全自动分析仪进行鉴定和药敏试验,对结果进行回顾性调查。结果分离出革兰阴性菌1 045株,其中肠杆菌科细菌627株,占60.0%;非发酵菌402株,占38.5%。分离前3位的细菌分别为大肠埃希菌(27.7%)、铜绿假单胞菌(20.2%)、肺炎克雷伯菌(14.5%)。肠杆菌科细菌对头孢替坦耐药率低,53.3%的大肠埃希菌和29.6%的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢替坦耐药率均低于6.0%。非发酵菌中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对头孢替坦的耐药率均高于90.0%。结论头孢替坦可以作为临床治疗产ESBLs细菌感染性疾病的一种经验性治疗方案。  相似文献   

12.
目的 研究碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌临床儿童分离株的耐药特点及分子流行病学特征.方法 收集温州医学院附属第二医院2010年7月-2011年6月从儿童标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌12株,所有菌株为非重复菌株,菌种鉴定采用全自动微生物分析仪.改良的Hodge试验筛选产碳青霉烯酶阳性菌株,采用PCR法检测KPC、IMP、bla(s)、VIM、SPM和整合酶基因,测序确定基因型.对菌株进行质粒结合试验、质粒消除试验检测质粒的转移性.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析耐药菌株的同源性.结果 12株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为8.3%、41.7%、58.3%、8.3%、8.3%、33.3%;12株菌均携带有KPC-2基因,且同时携带有TEM-1和SHV型β-内酰胺酶基因,其中SHV-11-like和SHV-1 2-like各6株;11株携带CTX-M型基因,其中4株为CTX-M-14-like基因,6株CTX-M-15-like基因;2株携带有OXA-10型基因,1株携带有PER-1基因.未检出NDM-1、GIM、SPM、SIM、VIM型碳青霉烯酶基因.12株均为Ⅰ类整合酶基因(int1)阳性.2株通过接合试验把质粒传递给受体菌EC600.所有接合子blaTEM-1基因阳性、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因阳性及对亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素和头孢噻肟耐药,接合子ESBL基因型与供菌一致.2株菌经质粒消除后对亚胺培南的MIC值均有较大程度降低,消除后KPC-2基因扩增为阴性.12株KPC-2基因阳性菌株经PFGE分成5个基因型,主要为B型和C型.结论 KPC-2型碳青霉烯酶基因已经在儿童肺炎克雷伯菌中播散,常伴随携带多种类型的ESBL基因和Ⅰ类整合酶基因,部分耐药基因可通过质粒播散.  相似文献   

13.
目的了解产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因(整合子qacE△1、转座子tnpU)、氨基糖苷类修饰酶编码aac(6′)-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac(6′)-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac(6′)-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac(6′)-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。  相似文献   

14.
目的了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K—B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药。耐药率达80%~100%;对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%~93.5%之间:但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感。产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%-91.7%之间,但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感。ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上。产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高。结论广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出:产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或ESBLs肺炎克雷伯菌感染的经验用药。  相似文献   

15.
目的 研究我院普外科重症监护病房(ICU)出现的对碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌分子流行病学特征和碳青霉烯耐药机制.方法 采用琼脂稀释法检测分离株的抗菌药物敏感性,采用脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)研究碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌分子流行病学机制,采用特异性PCR、DNA测序分析、接合试验、质粒提取和质粒转化试验、外膜蛋白分析等技术研究碳青霉烯耐药的分子机制.结果 我院分离的14株碳青霉烯耐药菌分别属于10个流行克隆型,均表现对包括亚胺培南和美罗培南在内多种抗菌药物耐药,碳青霉烯类耐药基因扩增显示均携带KPC-2型碳青霉烯酶基因,质粒提取与转化试验显示KPC-2定位于约56 kb大小的质粒上,SDS-PAGE分析发现耐药株多出现外膜蛋白的改变.结论 我院出现多个流行克隆型的碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌,质粒型碳青霉烯酶KPC-2是我院泛耐型大肠埃希菌介导对碳青霉烯类耐药的主要原因,外膜孔蛋白改变参与介导大肠埃希菌对碳青霉烯类高度耐药.  相似文献   

16.
分析下呼吸道感染患者气道分泌物或痰液标本分离的产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌耐药基因的特点及亲缘性。方法 2009年1月至2010年8月由本院呼吸病区住院的下呼吸道感染患者气道分泌物或痰液标本分离得到53株肺炎克雷伯菌,采用K-B纸片扩散法测定其对常用抗菌药物的敏感性;三维实验检测AmpC酶;PCR检测ESBL、质粒介导的AmpC酶、喹诺酮类耐药基因、耐消毒剂-磺胺基因qacE△1-sul1、Ⅰ类整合酶基因Int Ⅰ 1的携带情况,并进行聚类分析。结果 53株肺炎克雷伯菌未发现对亚胺培南、美罗培南、厄他培南耐药;对环丙沙星、左旋氧氟沙星耐药率均>80%;对其他抗菌药物也有不同程度的耐药。53株肺炎克雷伯菌中Int Ⅰ 1基因阳性率60.4%(32/53),qnrA基因阳性率54.7% (29/53),qnrS基因阳性率13.2% (7/53),qnrB基因阳性率5.7%(3/53),qacE△1-sul1基因阳性率71.7%(38/53),TEM基因阳性率92.5% (49/53),CTX-M基因阳性率100%(53/53),SHV基因阳性率9.4%(5/53),AmpC基因阳性率92.5%(49/53);其中4株同时携带qnrA、qnrS、intⅠ 1、qacE△1-sul1、AmpC、CTX-M基因。聚类分析显示40、41、10与18号,25与42号,8与35号菌株有亲缘关系。结论 产ESBL肺炎克雷伯菌的多重耐药与整合子相关,且携带多种耐药基因,聚类分析显示存在克隆传播和医院内感染。  相似文献   

17.
背景:生物材料植入人体后,往往会发生感染引起植入物松动、脱落甚至造成菌血症。以往研究未注重植入物相关感染中的细菌耐药性问题。目的:了解与植入物感染相关大肠埃希菌的耐药特征,为预防和更有效治疗该类感染提供策略。方法:以大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923和铜绿假单胞菌ATCC27853为质控菌株,选取17种临床常用抗生素进行药敏试验,计算耐药率,分析耐药特征。用表型确证试验筛选产AmpC酶和产ESBLs菌株,明确产酶率。抽提耐药质粒,以聚合酶链反应扩增检测耐药基因,分析基因型分布情况。结果与结论:17种抗生素中耐药率最低的是亚胺培南,其次为阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟,大部分菌株对其他抗生素均有较高耐药率,且呈多重耐药。筛选出42株(61.8%)产ESBLs菌株和27株(39.7%)产AmpC酶菌株,同时产ESBLs和AmpC酶菌株有23株(33.8%)。产ESBLs菌株中以携带CTX-M型基因最为多见占66.7%,有19株(45.2%)同时携带两种以上基因,产AmpC酶中大多数是产DHA型,有5株(18.5%)同时携带两种基因。提示与植入物感染相关的大肠埃希菌菌株耐药水平高、耐药谱扩大,且多呈多重耐药,耐药基因复杂多样。建议使用敏感药物联合阿米卡星治疗该类感染。  相似文献   

18.
儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的情况及其耐药特点 .方法 对 2 0 2株肺炎克雷伯菌和 134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定 ,纸片扩散法进行常规药敏试验 ,按照NCCLS的标准判读结果 .结果 对 336株儿童患者感染菌株试验 ,共检测出 81株ES BLs菌株 ,ESBLs总产生率为 2 4 .1% ;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为 2 9.7% ,大肠埃希菌产ESBLs率为 15 .7% .产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株 (t=6 .6 0 3,p <0 .0 1) ,对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药 ,对复方新诺明、氨苄西林 /舒巴坦的耐药率也较高 (耐药率高于 6 0 % ) ,且多为多重耐药株 ,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦敏感率较高 (耐药率低于 30 % ) ;所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为 0 .结论 儿童感染细菌ESBLs发生率相当高 ,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌 ,耐药高且多重耐药情况严重 ,治疗较困难 ,需加强ESBLs检测 ,以合理使用抗生素 ,延缓和防止ESBLs的发生和播散  相似文献   

19.
目的 研究启动子和衰减子突变与大肠埃希菌高产AmpC酶的关系。方法 4株大肠埃希菌临床分离株AmpC启动子克隆到报告质粒pCAT3 basic vector氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因上游,用测定氯霉素MIC值的方法反映启动子强度,并对克隆AmpC启动子和衰减子进行基因序列分析。结果 3株高产AmpC酶启动子强度是低产者的8~64倍,基因序列分析它们的启动子和衰减子上都有不同程度的突变,分别发生在-88、-82、-32、-18、-1、+58和+22、+26、+32位碱基。结论大肠埃希菌启动子和衰减子的突变,增加了AmpC的转录,是导致β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制。  相似文献   

20.
目的了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点.方法对202株肺炎克雷伯菌和134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定,纸片扩散法进行常规药敏试验,按照NCCLS的标准判读结果.结果对336株儿童患者感染菌株试验,共检测出81株ESBLs菌株,ESBLs总产生率为24.1%;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为29.7%,大肠埃希菌产ESBLs率为15.7%.产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株(t=6.603,p<0.01),对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药,对复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率也较高(耐药率高于60%),且多为多重耐药株,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高(耐药率低于30%);所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为0.结论儿童感染细菌ESBLs发生率相当高,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌,耐药高且多重耐药情况严重,治疗较困难,需加强ESBLs检测,以合理使用抗生素,延缓和防止ESBLs的发生和播散.  相似文献   

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