脑脉通联合骨髓干细胞动员对脑缺血大鼠神经细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL及caspase-3表达的影响

目的：观察脑脉通联合骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC）动员对脑缺血大鼠神经细胞凋亡和凋亡相关蛋白Fas、FasL及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3（caspase-3）表达的影响。 方法：202只SD大鼠分为假手术组、模型组、人重组粒细胞集落刺激因子（recombinant granulocyte colony-stimulating factor, rG-CSF）组、脑脉通组和脑脉通联合rG-CSF组（联合组）。采用改良线栓法阻塞大鼠大脑中动脉制备局灶性脑缺血动物模型。rG-CSF组和联合组大鼠分别于术前3 d和术后2 d皮下注射10 μg/（kg·d） rG-CSF,脑脉通组和联合组灌胃脑脉通。术后早期（2 d和3 d）和后期（7 d和14 d）观察大鼠神经功能变化;腹主动脉取血,流式细胞仪测定外周血CD34阳性细胞数量;原位末端标记法观察神经细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测脑组织CD34、caspase-3、Fas和FasL蛋白表达情况。 结果：模型组大鼠外周血和脑组织CD34阳性细胞增加,分别于3 d和7 d时达到峰值;各治疗组尤其联合组脑组织CD34表达增强明显。各模型组大鼠神经功能评分降低,rG-CSF组7 d和14 d时的神经功能评分增加,联合组较rG-CSF组的变化显著。模型组脑组织2、3和7 d时的Fas、FasL及caspase-3蛋白表达增强;rG-CSF组2 d时FasL,各联合组Fas、FasL及caspase-3表达均减弱;联合组7 d和14 d时的Fas、FasL及caspase-3表达较rG-CSF组减弱;各实验组14 d时Fas、FasL及caspase-3表达较3 d时减弱。 结论：脑脉通和BMSC动员在改善大鼠脑缺血中、后期神经功能和抑制细胞凋亡方面存在交互效应,其作用可能与脑脉通使BMSC动员后早期的Fas和FasL表达下调,以阻抑caspase-3引起的凋亡瀑布反应,进一步抑制促凋亡基因Fas和FasL的表达有关。     

骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法:SD大鼠84只,随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=24)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=24)和MSCs组(n=24).模型组、PBS组和MSCs组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,假手术组除不插尼龙线外,其余步骤相同.PBS组和MSCs组分别于建模成功后24 h分别经颈动脉注入等体积的PBS液和已制备好的同种异体MSCs悬液.每组于脑缺血2 h再灌注2 d、4 d、6 d、8 d时行神经功能缺损评分及脑灌注固定取材,采用免疫组化染色及TUNEL检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白的表达及凋亡细胞数.结果:假手术组在各时间点神经功能评分为0分,无神经功能缺损,未见细胞凋亡,未见Bcl-2和Bax表达.与模型组和PBS组比较,脑缺血2 h再灌注4 d开始,MSCs组神经细胞凋亡数、Bax蛋白表达和神经功能缺损评分较低,Bcl-2蛋白表达较高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:骨髓间充质干细胞移植能改善脑损伤大鼠的功能;上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少神经细胞凋亡,可能是其主要机制之一.     

热休克蛋白70对脑出血大鼠神经细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的 探讨热休克蛋白70(HSP70)对大鼠脑出血神经细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 将60只SD大鼠分为假手术组,脑出血组各30只,每组又分为6h、12h、1d、2d、3d、7d 6个亚组。假手术组向尾状核注射生理盐水2μL,脑出血组向大鼠尾状核注射2μL Ⅳ胶原酶,分别于各时间点处死大鼠取脑组织,采用免疫组织化学染色,检测各组大鼠脑出血周围HSP70、Bax、Bcl-2蛋白的表达并进行统计学处理。结果 HSP70、Bcl-2、Bax含量脑出血组较假手术组均明显增高(P<0．01)。HSP70表达在6h出现,3d达高峰,7d表达减少。Bc-2的表达在6h出现,在1d时达高峰,第2天维持在高表达状态,随后表达逐渐减少。Bax的表达分别在12h和3d达高峰,在1d时表达呈下降趋势,第7天表达逐渐减少。结论 HSP70高表达对出血脑组织具有明显的保护效应,其促进脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白Bax表达,增加Bcl-2／Bax比率,以此抑制脑组织细胞凋亡,从而发挥其对神经细胞的保护作用。     

复方血栓通胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的 :观察复方血栓通胶囊对局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠脑组织Bcl-2和Bax表达的影响。方法:采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,将36只成年SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和复方血栓通胶囊治疗组,每组12只,各组分别于再灌注后24 h处死取出脑脑织,采用免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测各组缺血区脑组织Bcl-2和Bax表达的变化。结果 :与缺血再灌注组相比,复方血栓通胶囊治疗组脑组织中Bcl-2的表达水平明显增高,Bax的表达水平明显下调。结论 :复方血栓通胶囊对脑缺血再灌注大鼠的保护作用,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

大鼠急性脊髓损伤后神经细胞Bcl-2与Bax比值及细胞凋亡的关系

目的:观察大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后不同时间点脊髓神经细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达及神经细胞凋亡的情况. 方法:选取28只SD大鼠,分为对照组(4只)和损伤组(24只),损伤组再分为六个小组,每组4只. 对照组行开椎板术不压迫脊髓,损伤组开椎板压迫脊髓造成大鼠急性损伤模型,损伤组于伤后 4 h, 8 h, 1 d, 3 d, 7 d和14 d 6个时间点取材,做切片备用;免疫组织化学检测Bcl-2, Bax, TUNEL检测细胞凋亡,图像分析各时间段检测结果进行半定量分析;统计学分析各待检数据. 结果:大鼠ASCI后4 h即可见脊髓内TUNEL阳性细胞,8 h表达达高峰,此后表达量逐渐下降,14 d时仍可见少量阳性细胞;大鼠ASCI后凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax出现表达,1 d时达高峰,14 d时仍有表达. Bcl-2/Bax值4和8 h时较低以后逐渐增大到一定值,Bcl-2/Bax值越小凋亡的细胞越多. 结论:大鼠ASCI后脊髓内存在神经细胞凋亡,bcl-2和bax相关基因的表达与细胞凋亡数有相关性.     

金纳多注射液对局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及相关蛋白的动态影响

目的:研究金纳多注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法:建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.60只Wistar雄性大鼠被随机分为假手术组、缺血组和金纳多治疗组.缺血组和金纳多治疗组分别在脑缺血再灌注后6,12,24,48 h处死,应用免疫组化染色及原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达及凋亡细胞数.结果:缺血组和金纳多治疗组凋亡细胞数于脑缺血再灌注后24h达高峰,金纳多治疗组各时点凋亡细胞数均明显少于缺血组(P＜0.01).缺血组和金纳多治疗组Bcl-2表达于脑缺血再灌注后12 h达高峰,金纳多治疗组各时点Bcl-2蛋白表达均明显高于缺血组(P＜0.01).缺血组和金纳多治疗组Bax蛋白表达于脑缺血再灌注后24h达高峰,金纳多治疗组各时点Bax蛋白表达均明显低于缺血组(P＜0.01).结论:金纳多注射液可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑缺血再灌注损伤起保护作用.     

不同剂量促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的:探讨促红细胞生成素(Epo)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的影响.方法:32只雄性SD大鼠随机分成Epo低、中、高剂量组和缺血再灌注组,4组大鼠均采用线栓法阻断一侧大脑中动脉血流2 h再灌注24 h制成局灶性脑缺血再灌注损伤模型.缺血开始时Epo低、中、高剂量组分别腹腔注射Epo 1000 U/kg、3000U/kg、5000U/kg,缺血再灌注组注射等量生理盐水.再灌注24 h后断头取脑,制作石蜡切片,免疫组化染色检测Bcl-2和Bax的表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果:与缺血再灌注组比较,Epo各剂量组凋亡细胞均少,Bcl-2表达较高,Bax表达较少,Bcl-2/Bax比值变大.Epo各剂量组间Bax的表达差异无统计学意义;高剂量Epo组对Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值影响最大;中剂量Epo对细胞凋亡的影响最为显著;低剂量Epo对Bcl-2表达和细胞凋亡的影响最小,对Bcl-2/Bax比值的影响与中剂量相同.结论:不同剂量的Epo对大鼠脑缺血再灌注损伤后皮层神经细胞凋亡的影响不完全相同,3000 U/kg可能最接近最佳应用剂量.     

三七皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：研究三七皂苷（PNS）对脑缺血再灌注后大鼠脑海马和皮质形态学变化、Bcl-2、Bax蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法：采用线栓改良法复制大鼠左侧大脑中动脉闭塞（MCAO）建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血2小时,再灌注24小时。将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、三七皂苷组、尼莫地平组和三七皂苷加尼莫地平组（联合用药组）,每组10只。分别采用HE染色检测大鼠脑组织皮质和海马区病理改变,TUNEL法检测各组脑内皮质和海马区细胞凋亡变化,免疫组化染色观察各组大鼠脑内皮质和海马区Bcl-2、Bax蛋白表达。结果：与模型组相比,三七皂苷组、尼莫地平组、联合用药组大鼠光镜下细胞损伤变性程度轻;细胞凋亡率下降（P均〈0．01）,三七皂苷组与尼莫地平组相比,细胞凋亡率无显著性差异（P〉0．05）,与联合用药组相比,有显著性差异（P〈0．01）;与模型组相比,三七皂苷组、尼莫地平组、联合用药组大鼠缺血区皮质和海马Bcl-2阳性细胞数均明显上升（P均〈0．01）,Bax阳性细胞数的表达在相同时间点减少（P均〈0.01）。结论：三七皂苷可抑制大鼠神经细胞凋亡,对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其机制可能与Bcl-2表达增高,Bax表达降低有关。     

脑复苏后细胞凋亡基因调控机制的实验研究

目的:探讨脑复苏后神经细胞凋亡的相关基因的调控机制.方法:大鼠脑缺血再灌注损伤后,分别应用 TUNEL 染色法和免疫组化法检测海马 CA1 区凋亡的神经细胞和 Bcl-2,Bax,C-fos,Fas,p53,Capases 3蛋白在细胞中的表达.结果:与假手术组相比,缺血再灌注24 h 后,凋亡的神经细胞增加(P＜0.01),Bcl-2 蛋白表达的阳性细胞减少(P＜0.01),Bax,C-fos,Fas,p53,Capases 3蛋白表达的阳性细胞增加(P＜0.01).结论:脑复苏后,多基因参与了神经细胞凋亡的调控,Bcl-2具有抗凋亡作用,Bax,C-fos,Fas,p53,Capases 3蛋白表达增加可促进细胞凋亡.     

人参皂甙Rb1对大鼠脑缺血再灌注时神经元凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1（Ginsenoside Rb1，GRb1）对大鼠脑缺血再灌注时神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响，探讨GRb1的神经保护作用机制。方法阻塞大鼠大脑中动脉2h制备脑缺血再灌注模型，大鼠随机分为缺血再灌注组（I／R组）和GRb1给药组（GRb1组），GRb1组大鼠在再灌注后立即腹腔注射GRb1（40mg／kg）。两组再按不同的再灌注时间（3h、12h、1d、2d、3d、5d和10d，每时间点4只）分为7个亚组。分别用HE染色、TUNEL染色和免疫组化染色观察神经组织病理改变、细胞凋亡、Bcl-2和Bax的表达。结果与I／R组相比，GRb1能减轻缺血侧脑组织的病理改变，减少神经细胞凋亡数（12h、1d、2d和3d时P〈0．05），上调Bcl-2阳性细胞数（12h、1d、3d、5d和10d时P〈0．05）和降低Bax阳性细胞数（3h、12h、1d、2d、3d、5d和10d时P〈0．05）。结论GRb1对脑缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与抑制神经元凋亡、促进Bcl-2表达和抑制Bax表达有关。     

Problems with indexing and citation of articles with group authorship

Context  It is not known whether articles with group authorship (ie, with a research group name listed as the author) are difficult to identify or whether use of group authorship may lead to problems with citation. Methods  To examine ways in which reports of controlled trials with group authorship are indexed and citations counted in bibliographic databases, we conducted a cross-sectional study in January 2000. We identified 47 controlled trials funded by the National Eye Institute and 285 associated articles. Between January and August 2000, we searched PubMed and Science Citation Index (SCI) and recorded the citation practices for these articles. Our main outcome measures were ways in which trial reports were listed in PubMed and SCI and number of citations to each report by type of authorship. Results  Of the 285 published reports identified, 126 (44%) had group authorship, 109 (38%) had modified group authorship (listing individual names plus the name of the research group), and 50 (18%) had named authors only. In PubMed, no group authors were listed in the author field (per MEDLINE rules); in SCI, group-authored reports generally were incorrectly attributed (first name on investigator list [35.3%], first name on writing committee [25.5%], contact name [16.7%], anonymous [16.7%], and other [5.9%]). Using the SCI general search, we identified citations to 16.7% of group-authored reports, compared with citations to 96.9% of reports with modified group authorship and 93.9% of citations to reports with named authors only. Other systematic search methods found that more than 98% of group-authored reports actually had been cited and that group-authored reports were cited more than other reports. Conclusions  Indexing systems are not optimally adapted to group authorship. We recommend that indexing services change their practices to include group authors in the author field to help correct the problem.      

Interaction of verapamil with atracurium and reversal of combined neuromuscular blockade with edrophonium and neostigmine

In this study, we have demonstrated, in rat phrenic nerve hemidiaphragm preparation, that (a) verapamil (2.2–220 μM) potentiated atracurium (0.8–80 μM)-induced neuromuscular blockade, by enhancing atracurium-induced depression of indirect twitch tension, by 35–45%, (b) neostigmine (60 nM) and edrophonium (50 nM) both effectively (by 18±2% and 25±1%, respectively, means ± S.E., n = 6, P< 0.05, P< 0.01) reversed atracurium and atracurium-verapamil blockade, with no significant difference between the reversals of the latter two blockades, and (c) verapamil may act at both pre- and postjunctional sites at the rat neuromuscular junction. It was concluded that verapamil, by acting at both pre- and postjunctional membranes, enhanced atracurium-induced neuromuscular blockade and that the combined atracurium-verapamil blockade can be easily reversed with anti-cholinesterase agents.     

GnRHa联合超声射频对子宫肌瘤患者的影响及作用机制

目的研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)联合超声射频对子宫肌瘤患者的影响及作用机制。方法选取118例子宫肌瘤患者,分层抽样法分为超声射频组(n=57)和联合组(n=61)。超声射频组采用超声射频治疗,联合组在超声射频组基础上联合GnRHa进行治疗。观察两组子宫肌瘤体积、体积缩小率、治疗效果;采用酶联免疫吸附法检测内分泌功能指标孕激素(P)、雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、存活蛋白(Survivin)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)水平;实时荧光定量PCR法检测微小RNA指标水平。结果与超声射频组比较,联合组治疗后肌瘤体积较小,体积缩小率较大(P＜0.05),内分泌功能指标及MCP-1、Survivin、TSGF水平较低(P＜0.05),微小RNA指标、治疗总有效率较高(P＜0.05)。结论GnRHa联合超声射频可有效改善子宫肌瘤体积,纠正患者内分泌紊乱,降低Survivin、TSGF水平,提高治疗效果。     

中西结合治疗小儿肾病综合征伴高凝状态的疗效观察与护理

目的 观察中西结合治疗小儿肾病综合征伴高凝状态的临床效果.方法 选取2013年2月至2016年6月期间我院收治的96例肾病综合征伴高凝状态患儿,按随机数表法分为观察组和对照组,每组48例.对照组予常规西药治疗与预见性护理,观察组在对照组基础上加用中药益气活血汤辨证加减治疗.治疗1个疗程后(14 d)观察相关实验室指标[(24 h尿蛋白定量(U-TP)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血总胆固醇(TC)]和凝血指标水平[血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、部分活化凝血活酶时间(aPTT)、血浆纤维蛋白原(Fbg)、D二聚体(D-D)],并观察和记录治疗期间及治疗后药物不良反应和出血、血栓、血小板减少等相关并发症发生情况.结果 治疗后两组患儿24h U-TP、TP、ALB、TC以及凝血各指标PT、TT、aPTT、Fbg、D-D均与本组治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05);而观察组各指标改善更为明显(P＜0.05).两组不良反应发生率均低于9％,,观察组并发症发生率10.42％低于对照组27.08％ (P ＜0.05).结论 益气活血中药和预见性护理干预可明显改善24 h尿蛋白、血清白蛋白、血胆固醇、凝血指标等,降低出血、血栓、血小板减少等并发症发生风险.     

胎膜早破与难产的关系及处理

目的探讨胎膜早破难产发生率升高的原因。方法分析195例胎膜早破孕妇资料。结果195例孕妇发生难产71例,发生率为36．4％,对照组195例孕妇中难产39例,难产发生率20％。结论应进一步重视胎膜早破,对胎膜早破的孕妇加强临床观察,一旦有难产发生,应及时处理,以减少母儿并发症的发生。     

微创治疗胆囊结石并胆总管结石86例

十二指肠镜、腹腔镜均可用于胆管疾病的治疗,但单一治疗局限性较大,适应证狭窄及重叠,难以最大限度发挥各自的优势,医院自2000年6月至2005年6月将双镜联合用于治疗胆囊结石并胆总管结石,并与开腹手术进行对比,报道如下。1资料与方法1.1一般资料随机分为治疗组与对照组,两组均经     

难治疾病辨治思路

难治疾病是指现代医学诊断较易明确 ,但治疗尚有困难的疾病。这类疾病多为变态反应性疾病 ,遗传缺陷性疾病 ,代谢性疾病 ,内分泌腺疾病和结缔组织疾病等 ,其组织器管变性 ,病损进行性加重 ,病理变化多呈不可逆性 ,目前尚缺乏完全治愈的临床效果。笔者从宏观角度总结辨治思路 ,从八个方面以述管见 ,不望昌其所见 ,但愿抛砖引玉。1.辨病与辨证结合 ,突出中医特色辨病与辨证论治是中医认识疾病与治疗疾病的基本法则。辨病就是确定病位 ,明确诊断 ;辨证论治就是对疾病动态的中医证候信息进行临床思维 ,确定病性 ,制定具体的治疗法药。对难治病的…