一株具有抗稻瘟霉活性的海洋细菌32-11-2-2的筛选和分离鉴定

目的:从中国东海微生物样品中分离筛选活性细菌菌株,并对活性菌株32-11-2-2进行鉴定.方法:采用无限稀释和平板划线法分离微生物样品,利用稻瘟霉模型进行活性筛选;并对其中的活性菌株32-11-2-2的形态、培养特征以及生理生化特征进行研究,使用16S rDNA序列分析的方法对菌株32-11-2-2进行了分类鉴定.结果:分离得到421株细菌,包括活性菌株54株,其中活性菌株32-11-2-2是一株弱嗜盐菌,具有陆地芽孢杆菌的形态特点,能产生胞外淀粉酶、过氧化氢酶,液化明胶、石蕊牛奶反应阳性,16S rDNA序列分析该菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)同源性达到98%以上.结论:活性菌株32-11-2-2是一株适应了海洋环境的枯草芽孢杆菌.     

复性速率液相分子杂交法测定枯草芽孢杆菌与短小芽孢杆菌DNA杂交度

目的　研究DNA DNA杂交率和 (G C)mol%测定方法 ,并把获得的数据应用于芽孢杆菌细菌分类、鉴定。方法　以枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌为研究材料 ,采用简便、实用又有很好重复性的热变性温度法 (Tm)测定DNA中 (G C)mol% ,以及复性速率液相分子杂交法测定DNA DNA杂交度。结果　热变性温度法 (Tm)测定枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的DNA中 (G C)mol%分别为 42 .7和 40 .2 6 ,采用复性速率液相杂交法测定上述两菌DNA DNA杂交度为 9 6 6 %。结论　显示枯草芽孢杆菌与短小芽孢杆菌为同属中相互关系并不十分密切的两个种。     

酵素菌中乳酸菌的分离鉴定

目的　对分离自酵素菌的 2株乳杆菌 (Lacotbacillus)进行分类鉴定。方法　观察实验菌细胞的形态大小 ,染色特征。葡萄糖氧化试验、氧化酶试验、触酶试验、生长因子试验、硝酸盐还原试验、葡萄糖产气试验。阿拉伯糖、葡萄糖、纤维二糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、松三糖、密二糖、棉子糖、核糖、木糖、鼠李糖、甘油等糖醇类发酵产酸试验。厌氧生长试验。菌株的 15℃生长试验、4 5℃生长试验。乳酸产气试验。营养要求、底物利用、代谢途径及代谢产物检测等 ,进行表型性状的观察分析。结果　 2株乳酸菌 (Lacotbacillus)被鉴定为植物乳杆菌 (Lactobacilluaplantarum)。结论　植物乳杆菌 (Lactobacilluaplantarum)是酵素菌的主要活性菌种。     

地衣芽孢杆菌联合双歧杆菌四联活菌片治疗慢性腹泻的临床效果

目的：探究对慢性腹泻患者行地衣芽孢杆菌+双歧杆菌四联活菌片治疗的效果。方法：选取2021年1月—2022年1月本院诊治的慢性腹泻患者80例作为观察对象，依据随机数字表法分为对照组(40例)与观察组(40例),前者行双歧杆菌四联活菌片治疗，后者行地衣芽孢杆菌+双歧杆菌四联活菌片治疗，比较分析两组患者免疫功能、炎症反应、不良反应发生状况及临床疗效。结果：治疗前，两组患者肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌)检测数量差异不显著(P>0.05);治疗后，相比对照组患者，观察组患者双歧杆菌、乳酸杆菌水平更高，大肠杆菌、粪肠球菌水平更低；免疫相关指标(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、IgA、IgG)水平更高(P<0.05)。观察组、对照组患者不良反应发生率(7.50%VS 5.00%)比较，差异不明显(P>0.05)。观察组治疗总有效率为97.50%,比对照组的80.00%更高(P<0.05)。结论：在慢性腹泻患者治疗中，行地衣芽孢杆菌+双歧杆菌四联活菌片治疗疗效确切，可改善患者免疫功能及肠道菌群，...     

地衣芽孢杆菌对实验性家兔阴道炎金黄色葡萄球菌的消除作用

目的:观察地衣芽孢杆菌对阴道内金黄色葡萄球菌的消除作用。方法:用青霉素和庆大霉素对家兔阴道脱污染,然后用金黄色葡萄球菌(ATCC 25923株)直接阴道感染。在获纯培养并形成明确的阴道炎症后,将地衣芽孢杆菌菌液注入阴道进行生态治疗。结果:地衣芽孢杆菌(CMCC 63519株)对金黄色葡萄球菌(ATCC25923株)有明确的消除作用。结论:可逆转由金黄色葡萄球菌引起的阴道感染性炎症。     

实验棉铃虫携带微生物的检测

目的 通过对本所长期室内人工饲育的不同季节不同龄期的棉铃虫(Heliothis armigera)进行体内外的微生物分离培养和鉴定,掌握棉铃虫体内外微生物携带情况.方法 利用普通培养基和真菌培养基分别对棉铃虫体内外进行微生物分离培养、纯化,通过菌落形态观察、革兰氏染色和显微镜观察进行初步鉴定,然后应用16SrRNA和18SrDNA分析技术对分离的细菌和真菌进行进一步的鉴定.同时,利用PCR技术对棉铃虫的高度致病病毒-核型多角体病毒(HaNPV)进行扩增检测.结果 分离培养得到4株芽孢杆菌(Bacillus):分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis Cohn),地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和芽孢杆菌(Bacillus).4株真菌(fungi):其中2株为酵母菌(Yeasts),1株为青霉菌(Aenicil lium Link),1株为曲霉菌(Aspergillus Micheli).检测核型多角体病毒(HaNPV)为阴性.结论 室内人工饲养的棉铃虫生长状态良好,虫体健康,未携带致病微生物,为科研提供的实验昆虫质量稳定可靠.     

罗红霉素微生物测定检定菌的选择

本文对罗红霉素微生物检定用的试验菌：枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌，做了可靠性测试，结果表明，两种试验菌均可作为罗红霉素含量测定的试验菌，尤以用短小芽孢杆菌作检定菌结果更为满意。     

GFP为外源报告基因在地衣芽孢杆菌20386中表达的研究

目的 探讨外源基因在野生型地衣芽孢杆菌20386中表达的可行性。方法 利用大肠杆菌—枯草芽孢杆菌穿梭表达载体在大肠杆菌DF5α中构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组质粒，通过电转化将重组质粒转入到野生型地衣芽孢杆菌20386中表达，通过检测绿色荧光蛋白的存在，考察该野生型菌株表达外源基因的可能性和表达能力。结果 在紫外光激发下，在固体LB平板上生长的菌落能显示绿色荧光，而在液体LB培养基中培养的菌体和培养上清中未能检测到绿色荧光蛋白的存在。结论 外源基因在野生型地衣芽孢杆菌20386中能够表达，但在液体LB中培养时，可能会被该菌自身分泌的蛋白酶分解；亦可能被稀释而无法测到荧光，还需进一步研究。     

贵州省1起人间疑似炭疽疫情的病原学诊断与分析

目的从病原学角度判定1起人间疑似炭疽疫情,为疫情的处置提供科学依据。方法采用革兰氏染色、串珠试验、噬菌体实验、生化试验对病人水疱液标本和采集的土壤标本进行炭疽芽孢杆菌培养分离和鉴定,应用Real-time PCR检测致病性基因PA和capA。结果从土壤标本中分离到1株疑似炭疽芽孢杆菌,细菌学方法鉴定为炭疽芽孢杆菌,Real-time PCR检测致病性基因PA和capA均为阳性。结论该起疫情为炭疽芽孢杆菌引起,患者感染为接触炭疽杆菌污染的土壤所致。     

重组胰高血糖素样肽-1载体的构建及其在枯草芽孢杆菌中的表达

目的: 构建及鉴定携带His标签的重组胰高血糖素样肽-1（modified glucagon-like peptide-1,mGLP-1）表达载体,实现其在枯草芽孢杆菌WB800N中的分泌表达。方法: 经化学合成得到含有His标签及BamHⅠ/XbaⅠ酶切位点的mGLP-1基因片段,将其酶切后插入含信号肽amyQ序列的大肠埃希菌枯草芽孢杆菌双穿梭载体pHT43中,得到重组载体pHT43-mGLP-1;通过电转化方法将质粒pHT43-mGLP-1转化到枯草芽孢杆菌 WB800N中,构建含有目的基因的重组菌株WB800N/pHT43-mGLP-1,利用聚合酶链式反应（PCR）、碱基测序、甘氨酸聚丙烯酰胺凝胶电泳（Tricine-SDS-PAGE）及蛋白质印迹法鉴定重组的枯草芽孢杆菌。结果： 菌落PCR和测序结果表明,阳性克隆质粒pHT43-mGLP-1成功转化进枯草芽孢杆菌WB800N;Tricine-SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测表明,重组菌株WB800N/mGLP-1培养上清液中有mGLP-1蛋白表达,且1 mmol/L IPTG诱导下蛋白表达量明显增加。结论： 成功构建了携带mGLP-1基因的表达载体并实现了其蛋白在枯草芽孢杆菌中的分泌表达, 为后续动物实验和制备微生态活菌制剂奠定了基础。     

球形芽孢杆菌与苏云金杆菌以色列亚种混用杀灭蚊幼虫的实验室与现场观察

本文报导了球形芽孢杆菌2362株与苏云金杆菌以色列亚种混用杀灭蚊幼虫的效果。混用克服了2362对伊蚊效果差及B.t.i持效短的缺点,且对B.t.i有显著增效作用。表明两菌混用在实验室与现场的灭蚊幼效果均优于单菌应用。     

1533名婴幼儿卡介苗接种质量及其相关影响因素研究

目的:了解婴幼儿卡介苗(BCG)接种质量,分析其相关影响因素,提高预防接种效果。方法:收集常州市结核病防治研究所预防接种门诊已接种BCG的1533例婴幼儿资料,对其进行结核菌素试验(PPD试验),分析PPD试验结果及有关影响因素,对BCG接种质量予以评价。结果:1533例婴幼儿中卡痕率94.59%,PPD试验阳转率96.09%。不同性别、户籍地、出生体质量和不同年龄婴幼儿PPD试验阳转率差异均无统计学意义(P>0.05)。卡痕均径3~5 mm和>5 mm的婴幼儿PPD试验阳转率均明显高于卡痕<3 mm者(P<0.01)。结论:常州市结核病防治研究所BCG接种质量较好,达到国家基础免疫标准。性别、户籍地、出生体质量、PPD试验年龄对BCG阳转率均无明显影响,重视BCG质量和BCG接种技术对提高接种效果作用显著。     

盆腔炎颗粒对小鼠感染模型的体内抗菌作用观察

目的　观察盆腔炎颗粒在体内的抗菌作用。方法　用临床分离的脆弱类杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌分别注入小鼠腹腔 ,观察 2周内各组小鼠的死亡情况。再以同样的方法给小鼠注入不同菌液后 7天 ,给感染小鼠注入不同剂量的盆腔炎颗粒、蒸馏水、复方杏香兔耳风颗粒进行对照。结果　盆腔炎颗粒中、高剂量对小鼠感染脆弱类杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抗感染作用。结论　盆腔炎颗粒中、高剂量对脆弱类杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌感染的小鼠有较好的的抗感染作用 ,且随剂量增加作用加强。     

芽胞杆菌C14菌株鉴定及其碱性纤维素酶性质

从碱性污泥中分离到一株产碱性纤维素酶活力较高的耐碱性芽胞杆菌,所产的酶为单一的羧甲基纤维素酶(CMC ase),其专一性底物为羧甲基纤维素钠(CMC—Na)。酶的最适反应pH为9.0,在pH7.0～10.0范围内较稳定,酶作用的最适温度为55℃,在50℃时较稳定,在60℃处理10、30、60和90分钟后,残余酶活分别为91.5%、72.0%、36.7%和10.3.Co~(2 )、EDTA对酶促反应有明显的促进作用,Hg~(2 )、Ag~ 、Mn~(2 )和Zn~(2 )则有显著的抑制作用。     

丝裂霉素和卡介苗素膀胱内灌注预防膀胱癌术后复发的疗效观察

目的：探讨提高膀胱癌的治疗效果，降低术后复发率的更佳膀胱内灌注方案。方法：将42例行经尿道膀胱肿瘤电切术（TURBt）的浅表性膀胱癌分为两组：A组（21例）膀胱内灌注丝裂霉素加卡介苗素，B组（21例）膀胱内单纯灌注丝裂霉素。两组均在术后1周内开始灌注，每周1次，共6次，然后每月1次，共2年。结果：随访12－28个月，A组复发1例，复发率4．8％，B组复发7例，复发率33．3％，两组复发率的并另有显著性意义（P＜0．05）。结论：丝裂霉素C加卡介苗素膀胱内灌注能明显减少膀胱癌的术后复发。     

减毒活菌卡介苗不同时间和剂量干预对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的探讨以不同时间和不同剂量给予减毒活菌卡介苗(BCG)对哮喘小鼠气道炎症和气道粘液分泌的影响.方法选择C57BL/6小鼠,以卵白蛋白(OVA)致敏激发建立小鼠哮喘模型,阴性对照组以生理盐水致敏激发.BCG干预组分6组,其中4组分别选择第一次抗原致敏前4 d(组1)、后10 d(组2),最后一次抗原激发后1 h(组3),以及第一次抗原致敏前4 d与后10 d两次(组4),以BCG 105CFUs皮内注射干预;另二组在第一次抗原致敏后10 d分别以BCG 106(组5)、104CFUs(组6)皮内注射干预,在最后一次抗原激发后48 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计数其中嗜酸性粒细胞(EOS),肺组织PAS染色鉴定粘液分泌.结果OVA致敏激发组BALF中EOS为(41.16±6.42)×104,阴性对照组BALF中几乎见不到EOS.组1、组2和组3 BALF中EOS分别为(10.69±4.35)×104、(7.92±2.30)×104及(17.46±8.00)×104,组5和组6 BALF中EOS分别为(8.71±3.83)×104及(17.19±4.49)×104,均较OVA致敏激发组明显降低(P＜0.05);致敏前、后BCG两次干预(组4)对BALF中EOS[(0.79±0.36)×104]的抑制更为明显,达98%以上.肺组织见OVA致敏激发组气道上皮杯状细胞增生肥大,有大量粘液分泌;阴性对照组未见气道上皮细胞粘液分泌.BCG干预后,气道上皮细胞内粘液分泌减少.结论BCG 105CFUs多次给药对哮喘小鼠气道EOS的抑制作用明显强于单次较大剂量给药,几乎可完全抑制哮喘小鼠气道炎症和粘液分泌;无论致敏前后或激发后BCG均能抑制哮喘小鼠气道炎症,说明BCG对哮喘小鼠具有预防和治疗作用.     

PCR检测结核分枝杆菌DNA中不同细菌裂解方法结果观察

目的：寻找适合于临床ＰＣＲ检测结核杆菌ＤＮＡ简单、快速、有效、经济的细菌裂解方法。方法：采用１１种细菌裂解剂对相同数量的结核分枝杆菌进行裂解，裂解上清液直接用于ＰＣＲ扩增，结果：１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００，１％ＮＰ４０，１％Ｔｅｗｅｅｎ２０、和１％ＯＰ四种裂解剂的裂解液可直接扩增出结核分枝杆菌ＤＮＡ；ＳＤＳ，ＮａＯＨ，十二烷基肌酸钠等裂解剂的裂解液直接用于ＰＣＲ扩增均为阴性。结论：１％的Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００，ＮＰ４０、Ｔｅｗｅｅｎ２０和乳化剂ＯＰ裂解细菌效果好，又不抑制ＰＣＲ反应，适合于作为临床ＰＣＲ检测结核杆菌的裂解剂。     

炭疽芽孢DNA适配子结构与长度对亲和力的影响

目的 研究炭疽芽孢适配子结构与长度变化对其与芽孢之间亲和力的影响。方法 人工合成f77-1适配子序列，并构建在其7条突变体序列，将这些寡核苷酸序列分别与炭疽芽孢结合，利用TMB显色系统判断读取吸光度A值，确定各序列与芽孢间亲和力大小；同时通过核酸序列分析软件包模拟各序列的二级结构，推断适配子的结构与亲和力之间的关系。结果 适配子f77-1与突变体中的f77-3与芽孢亲和力较好，约是突变体中f77-4亲和力的11倍，二级结构显示：f77-1,f77-3都具有茎环或发卡结构，且3'端都有连续3个G。结论 适配子5'端的茎环结构和发卡结构是这些寡核苷酸序列与芽孢结合的结构基础，3'端的连续3个G可能对提高亲和力起着重要的作用。     

PCR技术在小鼠CAR杆菌检测中的初步应用

目的 建立有效的CAR杆菌（Cilia-associated respiratory bacillus）PCR检测方法,并进行初步应用.方法 针对NCBI公布的CAR杆菌序列,选取大小合适的序列,合成质粒,并设计特异性引物,对实际样品进行检测,扩增出的阳性片段进行测序,验证该方法的可靠性.结果 成功建立了CAR杆菌的PCR检测方法,初步应用验证了该方法的可靠性.结论 该方法的建立为实验动物CAR杆菌的检测奠定基础.     

腺苷产生菌Xn151菌种选育研究

以肌苷产生菌枯草杆菌GMI 741为出发菌株,通过多因子诱变选育出具有黄嘌呤、鸟嘌呤双重营养缺陷型、丧失腺嘌呤脱氨酶的腺苷产生菌Xn151,摇瓶发酵96h产腺苷达16. 3g·L-1。