山羊颌骨牵引成骨的组织学特点及bFGF的表达

目的研究山羊牵引成骨的组织学特点和bFGF组织表达特点。方法建立山羊下颌骨牵引成骨动物模型后,分别于牵引完成时、牵引后2、4、6、8周处死2只山羊。处死后,分别拍摄标本的CR-X线片,并将牵张区新生骨组织分成三份,分别进行生物力学分析、HE染色、扫描电镜观察及免疫组化实验。结果CR-X线片显示,牵引完成后,随着固定时间的延长,灰度逐渐增加。生物力学结果显示,新生骨组织的抗压强度随着固定时间的增加而增大。HE组织病理学和扫描电镜表明,牵引完成时牵引间隙充满胶原纤维组织,新生血管丰富,4周后骨小梁相对成熟,观察到成骨和破骨活动,8周时牵引区骨组织趋于成熟。免疫组化显示:bFGF表达在牵引期强于固定期,牵引8周后仍有较弱的表达。结论DO早期阶段新生骨组织骨密度,抗压强度增加迅速,6周后趋于平稳。山羊颌骨牵引成骨表现为骨膜内成骨和软骨化成骨。bFGF在牵引期和固定期对新生骨组织具有很重要的调节作用。     

骨缝牵张成骨的比较组织学研究

目的:比较HE染色和三联染色中不截骨的缝牵张成骨组织学变化情况.方法:不截骨直接三维牵张羊颧骨缝,固定期1、3、5、8周取材,进行三联染色和HE染色,与对侧空白对照标本比较,观察缝区组织变化、新骨质形成情况.结果:骨缝被牵开后1周,成纤维细胞、成骨细胞、毛细血管增生,大量胶原纤维形成、排列有序,3周时以胶原纤维为主,形成较成熟的骨小梁,5周时编织骨形成,8周时未见网状纤维和弹力纤维,结构成熟完整.结论:三联染色显示固定早期大量胶原纤维形成,HE染色显示新骨形成速度快.     

TGF和BMP在兔上颌缝牵张成骨中的表达

目的:观察兔上颌缝牵张成骨时TGF-β和BMP在前颌缝中的表达,探讨上颌骨改建的机制及意义。方法:年轻家兔12只,随机分为7d组6只,14d组6只,戴自制前牵引装置,均持续前牵上颌骨,分别在牵引后7、14d处死动物,切取一侧前颌缝组织块,制作标本,免疫组织化学方法对TGF-β、BMP进行染色,光镜观察、灰度值分析,并进行统计分析。结果:14d较7d2因子高表达(TGF-β、BMP均P<0.05);骨缝外侧带较中央带高表达;成骨活跃者成纤维细胞增多,血管分布增多;骨缝缘无典型的活跃成骨细胞排列。结论:牵张成骨过程中TGF-β和BMP表达升高。     

血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1在下颌骨牵张成骨与骨缺损中的表达和意义

目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1在牵张成骨和骨缺损修复中的表达和意义。方法28只犬随机分为牵引组和直接延长组各12只及正常对照组4只,在牵张第6天,固定2周、固定8周时两组分别处死4只动物,取牵张区新骨组织用免疫组化染色方法观察比较VEGF、IGF-1的表达。结果下颌骨牵张组和直接延长组VEGF、IGF-1均呈高水平表达,牵张6 d和牵张2周时,牵张组VEGF的表达较直接延长组增高(P<0.05),而IGF-1的表达则在牵张固定2周时牵张组较直接延长组增高(P<0.05),两者随着固定时间的延长,表达逐渐下降。结论VEGF、IGF-1可能共同参与促进下颌骨牵张成骨新骨的形成。     

下颌骨牵引成骨与直接延长术的组织学比较

目的：通过对下颌骨牵引成骨与直接延长术组织学变化的对比研究分析，探讨牵引成骨的成骨机制。方法：24只狗随机分为牵引成骨组和直接延长组各12只，用HE染色光镜组织学检查方法分别观察牵引第6天、牵引后固定2、8周不同时期的两组组织学变化。结果：牵引组在牵引后固定第8周，牵引区几乎完全由新生的骨组织连接修复，成骨方式是以膜内成骨为主，伴有少量的软骨内成骨；而直接延长组仅早期在两骨断端附近可见活跃的膜内成骨，两周以后则以软骨内成骨为丰，中间区域仍为大量的纤维结缔组织，8周以后成骨量增加．但中央仍为软骨组织和纤维组织间隔。结论：牵引成骨以膜内成骨为主，达到良好的骨愈合，直接延长成骨效果不稳定，容易导致成骨不良。     

成纤维细胞生长因子对兔下颌牵张成骨的影响

目的 研究局部应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对兔下颌牵引张成骨的影响。方法 成年大耳白兔8只，随机分为A、B两组，每组4只。用自行研制的牵张器延长双侧下颌骨6mm，用bFGF（20ng/ml）注入A组动物的牵张区，不注射bFGF的B组动物作为对照。在牵张结束后4周处死所有动物，取双侧下颌骨标本进行X线和组织学检查。结果 组织学分析结果显示，局部给予bFGF的A组动物下颌牵张后新骨生成速度和数量优于B组动物。结论 外源性导入碱性成纤维细胞生长因了可能有促进下颌牵引张成骨的作用。     

一氧化氮合酶在犬下颌骨牵张成骨过程中的表达和意义

目的研究一氧化氮合酶（NOS）在犬下颌骨牵张成骨及骨创伤修复过程的表达和意义。方法28只犬随机分成牵张组和直接延长组各12只及正常对照组4只,用免疫组化法检测牵张第6天、牵张后固定2周和8周NOS表达水平的变化。结果牵张第6天牵张组可见牵开区组织内炎性细胞浸润,血管周围和间质内较多红细胞漏出。牵张及固定早期,牵张组和直接延长组诱导型NOS（iNOS）与内皮型NOS（eNOS）阳性表达均明显高于正常对照组,直接延长组的iNOS和eNOS阳性表达低于牵张组,差异均有统计学意义（P<0.05）;牵张后固定8周iNOS和eNOS阳性表达3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论NOS在牵张早期表达升高,结合在牵张早期组织内红细胞漏出,提示牵张成骨过程中存在某种程度的微创伤,这种微创伤可能是牵张成骨的重要启动因素之一。     

羊颧骨缝三维牵张成骨的组织学观察

目的探索不截骨的骨缝牵张成骨组织学变化。方法采用10～13个月龄普通山羊为实验对象，每只动物左颧骨行三维牵张成骨，固定1、3、5、8周后取材，和对侧空白对照标本比较，观察缝区组织变化、新骨形成情况。结果骨缝被牵开后1周，成纤维细胞、成骨细胞、毛细血管增生，大量纤维软组织排列有序并连接骨缝两侧，骨缝两侧组织面不整齐，牵张侧成骨活跃，大量类骨质形成；3周时形成较成熟的骨小梁；5周时编织骨形成；8周时结构成熟完整。结论不截骨的骨缝三维牵张成骨，骨缝牵张侧新骨快速形成；     

牵张成骨整复猕猴腭裂模型成骨区骨形态发生蛋白-2的表达

目的观察牵张成骨术整复腭裂新骨形成的骨形态发生蛋白-2（BMP-2）表达分布规律。方法猕猴23只以外科方法建立腭裂动物模型。其中实验组动物21只,以牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损,至骨运送盘移动关闭裂隙后原位固定。分别于固定期第1、2、4、6、8、12及24周取材3只实验动物,标本行免疫组化染色,观察其不同时间的表达分布,并与实验对照组及空白对照组结果对比。结果免疫组化实验表明, BMP-2于新骨形成过程中主要存在于成骨细胞胞浆中,在牵张成骨早期新生骨小梁的周围存在大量成骨细胞,染色为强阳性;4~6周时,成骨细胞进一步增多,BMP-2表达也呈现强阳性,表明成骨过程到达高峰;8周时成骨细胞数量减少,BMP-2表达趋于减弱;至12周时,成骨过程已基本完成,免疫组化染色基本无着色。结论术后固定成骨期内,BMP-2的表达与分布是一个由弱变强,达到成骨高峰后,随着新骨改建成熟又逐渐趋弱的动态变化过程。     

中药灯盏花促进兔上颌缝牵张成骨的实验研究

目的通过兔上颌缝牵张成骨动物实验模型,观察TGF-β和BMP在前颌缝中的表达,探讨灯盏花对上颌骨改建的作用与机理.方法年轻家兔12只,随机分为对照组6只,实验组6只,佩戴自制前牵引装置,均持续前牵上颌骨,每日于对照组两侧前颌缝局部注射单纯生理盐水0.4ml,实验组复方灯盏花素0.4ml,分别在牵引后7、14天处死动物,切取一侧前颌缝组织块,制作标本,免疫组织化学方法对TGF-β、BMP进行染色,光镜观察、灰度值分析,进行统计分析.结果实验组较对照组两因子高表达(P<0.05);TGF-β7天实验组较14天对照组高表达(P<0.05);成骨活跃者成纤维细胞增多,血管分布增多;骨缝缘无典型的活跃成骨细胞排列.结论灯盏花具有促进骨组织形成的作用,血管生成、微循环改善是机理之一;灯盏花可能具有直接成骨的功能;灯盏花促进成骨活动的机制与TGF-β的调节机制有相似之处.     

bFGF基因修饰的BMSCs促进大鼠下颌牵引成骨的研究

目的：探讨碱性成纤维生长因子（bFGF）基因修饰的自体骨髓间充质干细胞（BMSCs）促进大鼠下颌牵引成骨的作用。方法：36只雄性SD大鼠,随机分为实验组和对照组,同时对两组大鼠右下颌骨进行牵引成骨,牵引期最后1 d,实验组大鼠牵引间隙内注射转染重组质粒pcDNA-bFGF的BMSCs,对照组注射转染pcDNA空质粒的BMSCs。分别于固定期第2,4,8周分3批处死,并进行放射学检查、组织学检查及骨密度检测。结果：两组牵引间隙内均有新骨形成。各时间点实验组牵引间隙内新骨的形成和骨质密度均较对照组高（P〈0.05）。结论：bFGF基因修饰的BMSCs可有效促进DO新骨形成,为颌面部骨缺损的重建提供了一个新的修复方法。     

下颌骨牵引延长过程中器械的应用与拆除时机

目的：确定下颌骨骨牵引引延长过程中器械应用与拆除时机,为临床应用提供参数。方法：采用自制的ＭＳ－１型内置式下颌骨骨牵引延长器行犬下颌骨牵引引延长;取新成骨,制成标准骨生物力学测试件,进行轴向压缩及三点弯曲实验;测量新成骨的弯曲强度、抗压强度、弹性模量、泊松比等特征材料参数,并与对照组分别比较。结果：新成骨在牵引引完成后３周时分别达到对照组的３７％～６０％,５周时各参数值分别达到正常对照组的８９％～     

Effect of distraction rates on expression of bone morphogenetic proteins in rabbit mandibular distraction osteogenesis.

BACKGROUND: The expression of bone morphogenetic proteins can be regarded as an indicator for biological interaction in distraction osteogenesis. It was hypothesized that different distraction rates may produce different patterns of BMP expression. MATERIAL AND METHODS: This study compared the expression of BMP-2, -4 and -7 at routine (0.9mm once daily) and rapid (2.7mm once daily) distraction rates using the rabbit mandibular lengthening model. Mandibular samples were harvested at days 1, 7 and 14 of consolidation. RESULTS: The expression of BMP-2 and BMP-4 was found throughout the experiment, their expression intensity and location being essentially similar, whereas BMP-7 had not been expressed. Expression of BMP-2 and -4 was more intense at the routine distraction rate than at the rapid distraction rate. CONCLUSIONS: BMP-7 had no expression during the consolidation period of mandibular distraction. The change in the mechanical environment created by different distraction rates led to different expression of BMP-2 and -4. In the early consolidation stage the biological environment for bone formation created by distraction at a routine rate was superior to that created by the rapid distraction rate.     

腺病毒介导的人骨形成蛋白2基因转染促进下颌牵张成骨的实验研究

目的探讨局部应用腺病毒介导的入骨形成蛋白2（adenovirus vectors containing human bone morphogenetic proteins 2, Ad-hBMP-2）对兔下颌骨牵张成骨的影响。方法24只新西兰大白兔随机分为实验组（12只）和对照组（12只），并建立下颌骨双侧牵张成骨模型。经过5d潜伏期后，以0．5mm／12h的速度牵张7d。固定期第1天，在实验组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的Ad-hBMP2，对照组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白。在固定期第7、14、28天对下颌骨牵张区进行骨密度及新生骨量比较。结果Ad-hBMP-2治疗组牵张区骨密度及新生骨量明显高于对照组。结论腺病毒介导的人骨形成蛋白2具有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

BMP4 localization and PCNA expression during distraction osteogenesis of the porcine mandible

This study characterized sequential molecular and cellular events in the porcine mandibular distraction osteogenesis (DO) wound. Nineteen Yucatan minipigs were divided into three treatment groups: Group A, unilateral mandibular distraction with 0 day latency, 1mm/day rate for 12 days, 24 days fixation (n=16); Group B, acute lengthening 12 mm (n=2); Group C, sham control (n=1). Group A was further divided by death date: mid-DO (n=5), end-DO (n=4), mid-fixation (n=5) and end-fixation (n=2). Groups B and C were killed on postoperative day 36, corresponding to end-fixation. Specimens were stained for proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and bone morphogenetic protein-4 (BMP4). Cellular proliferation (PCNA) was assessed quantitatively and BMP4 staining was assessed on a semi-quantitative scale. Progenitor cell proliferation was greatest during mid-DO and decreased from end-DO through end-fixation. Proliferation in the acute lengthening group was elevated relative to sham control and comparable to end-DO. BMP4 staining intensity (localized to the periosteal cambium layer) was greatest during mid- and end-DO, decreased at mid-fixation and was undetectable at end-fixation. Progenitor cell proliferation and BMP4 expression are greatest during mid-DO and decrease progressively thereafter. At the time of death of the acute lengthening group, only increased cell proliferation was demonstrated.     

骨形态发生蛋白-2基因修饰骨髓间充质干细胞复合对氧化聚乙烯和聚丙烯共聚物移植促进兔下颌骨牵张成骨的实验研究

目的 探讨人骨形态发生蛋白-2（BMP-2）基因修饰骨髓间充质干细胞（BMSCs）复合可注射骨组织工程支架材料对氧化聚乙烯和聚丙烯共聚物（Pluronic F-127）移植对兔下颌骨牵张成骨新骨形成的促进作用。方法 将48只新西兰白兔随机分为4组,每组12只。建立下颌骨牵张成骨动物模型,固定期第2天A组于牵张间隙注射200 μL BMP-2基因修饰BMSCs与Pluronic F-127复合物;B组注射等量BMP-2基因修饰BMSCs液;C组注射等量BMSCs液;D组注射等量生理盐水。分别于固定2、6周时处死半数动物获取标本,通过X线片、组织切片及免疫组化观察骨质愈合改建情况。结果 通过X线片及免疫组化观察并经过统计软件分析,在固定2周和6周时,A组牵张区内骨密度和BMP-2蛋白的表达明显高于B、C、D组（P<0.01）,B组明显高于C组和D组（P<0.01）;C组和D组比较差异无统计学意义（P>0.05）。A、B组间隙内成骨质量好于C、D组,A组好于B组。结论 BMP-2基因修饰BMSCs复合可注射骨组织工程支架材料Pluronic F-127移植能有效促进兔下颌骨牵张成骨新骨形成。     

兔下颌骨牵张成骨中VEGF与NOS的相关性研究

目的:研究VEGF、iNOS和eNOS在兔下颌骨牵张成骨中的表达及其相关关系;探讨NOS和VEGF的相互作用及在促进新骨生成中的作用机制。方法:日本大耳白兔20只,随机分为五组,每组4只。分别处死空白对照组、牵张后1天组、1周组、2周组、4周组动物,取牵张处骨组织做成切片,行X线和组织学观察。结果:X线下示4周后牵张处骨缺损消失,组织学示牵张处骨小梁逐渐成熟;VEGF与NOS在形成新骨中均有高水平表达,VEGF同iNOS成正相关,r=0.844,P<0.01;VEGF同eNOS成正相关,r=0.647,P<0.;01;结论:VEGF、NOS可能共同参与促进牵张成骨新骨的形成,二者可能在上诉过程相互作用,促使成骨。