γ—干扰素诱导角质形成细胞凋亡及其Fas抗原表达研究

目的：探讨γ－干扰素在银屑病发病中的作用。方法 通过流式细胞仪测定角持形成细胞中亚二倍体细胞含量、片段化DNA分析及AnnexinV法检测经γ－干扰素诱导的角质形成细胞凋亡;采用组织化学、流式细胞仪测定经γ－干扰素作用后的角质形成细胞Fas抗原表达。结果 γ－干扰素上调角质形成细胞Fas抗原表达（P＜0．01）,诱导角质形成细胞凋亡（P＜0．01）。结论 γ－干扰素可能通过上调角质形成细胞Fas抗原表达,进而诱导角质形成细胞凋亡而参与银屑病发病。     

γ—干扰素诱导角质形成细胞凋亡及其Fas抗原表达研究

目的：探讨γ－干扰素在银屑病发病中的作用。方法：流式细胞仪测定亚二倍体含量、片段化DNA分析、Annexin V凋亡检测法、免疫组织化学、间接免疫荧光流式细胞仪测定Fas抗原表达。结果：γ－干扰素上调角质形成细胞Fas抗原表达（P＜0．01）,诱导角质形成细胞凋亡（P＜0．01）,结论：γ－干扰素可能通过上调角质形成细胞Fas抗原表达,进而诱导角质形成细胞凋亡而参与银屑病发病。     

药物实验湿疹离体模型的初步应用

目的利用干扰素-γ(IFN-γ)与抗Fas单克隆抗体(AntiFasmab)诱导角质形成细胞凋亡,模拟湿疹样皮炎的部分发病机制作为离体实验模型,研究中药单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ的可能治疗作用.方法将IFN-γ、AntiFasmab作用于体外培养角质形成细胞colo-16,用流式细胞仪、倒置显微镜、荧光显微镜观察colo-16细胞凋亡情况及单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ对colo-16凋亡的抑制作用.结果①流式细胞仪检测IFN-γ对colo-16细胞Fas抗原的表达有明显的上调作用.②colo-16表面Fas抗原的表达与其凋亡呈正相关.③IFN-γ、AntiFasmab二者联合作用于colo-16可诱导细胞凋亡,镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征.④单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ对colo-16的凋亡有部分阻断作用.结论①IFN-γ对角质形成细胞Fas抗原的表达有上调作用.②IFN-γ、AntiFasmab共同作用可诱导角质形成细胞凋亡.③单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ可抑制角质形成细胞凋亡.     

皮肤科学基础

20131668 PML基因诱导角质形成细胞凋亡及其Fas,Fasl和Bcl-2表达/王琼玉(西安交大医学院二附院皮肤科),马慧群,王世捷…//中国皮肤性病学杂志.-2013,27(6).-550~596通过流式细胞仪及AnnexinV法检测经PML基因转染的角质形成细胞凋亡;采用免疫组织化学、基因探针杂交测定经PML基因作用后的角质形成细胞Fas,Fasl和Bcl-2表达。结果:PML基因上调角质形成细胞Fas及Fasl表达(P<0.01),抑制Bcl-2基因表达,诱导     

β-溶血型链球菌诱发银屑病发病机理探讨

探讨β-溶血性链球菌诱发银屑病的机制。采用3H-TdR掺入法测定细胞增殖反应,AnnexinV法测定细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达。结果显示β-溶血性链球菌(SP)刺激淋巴细胞活化增殖,经SP活化的淋巴细胞培养上清液作用于角质形成细胞48h,可促进角质形成细胞增殖,诱导角质形成细胞表达HLA-DR和Fas抗原;再次加入上清液继续作用48h,则诱导角质形成细胞凋亡。SP作为超抗原首先活化T细胞,使之释放细胞因子,后者使角质形成细胞活化增殖,表达和抗原,继而诱导细胞凋亡,此过程可能是银屑病的主要发病机制之一。     

金黄色葡萄球菌性超抗原诱发银屑病发病机理探讨

目的探讨金黄色葡萄球菌性超抗原诱发银屑病的机制。方法3H-TdR掺入法测定细胞增殖反应,亚二倍体细胞含量测定,片段化DNA分析,膜联蛋白V(AnnexinV)法测定细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达。结果金黄色葡萄球菌肠毒素B活化的淋巴细胞培养上清液作用于角质形成细胞48h,可促进角质形成细胞增殖,诱导角质形成细胞表达HLA-DR和Fas抗原;再次加入上清液继续作用48h,则诱导角质形成细胞凋亡（P<0.01）。结论金黄色葡萄球菌肠毒素B作为超抗原活化T细胞,使之释放细胞因子,后者使角质形成细胞首先活化增殖,继而凋亡。     

皮肤科学基础

20 0 10 0 0 1　影响新生鼠角质形成细胞及成纤维细胞Fas及其配体表达的因子 /贺为东 (中国医大一院皮肤科 )…∥中华医学杂志 (英文版 ) .- 2 0 0 0 ,113(9) .- 833～ 835以 RNase防护法及流式细胞分析法检测角质形成细胞和成纤维细胞 Fas及 Fas配体 (Fas L)的表达 ,并观察了维甲酸 (RA)及地塞米松 (Dex)对其表达的影响。结果发现 Fas m RNA被新生鼠角质形成细胞表达 ,全反式维甲酸上调而 Dex下调。RA和 Dex同时也增加角质形成细胞 Fas蛋白的表达。新生鼠角质形成细胞表达 Fas L m RNA,RA和 Dex对其都有上调作用。新生鼠成纤维…     

红斑、丘疹及鳞屑性皮肤病

20 0 0 3147　银屑病患者皮损中细胞凋亡情况的评价 /茅晓红 (浙江大学医学院附二院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 0 ,33( 2 ) .- 77～ 79为探讨细胞凋亡与银屑病表皮过度增殖及免疫——炎症失调之间的关系 ,对银屑病患者皮肤中 Bax、Fas及其配体 ( Fas- L )的表达和细胞凋亡情况进行了检测。采用免疫组化 SP法 ,并用 TUNEL技术。结果银屑病皮损中各层的 Fas的表达均明显上调 ,且多数部位 Fas- L明显增高 ,Bax轻度增高。角质形成细胞凋亡增多。认为银屑病中当大量 Fas阳性淋巴样细胞与Fas- L阳性淋巴样细胞甚至角质形成细胞…     

葡萄球菌性超抗原对银屑病患者外周血淋巴细胞产生白介素-2、γ-干扰素的影响

银屑病患者外周血淋巴细胞对葡萄球菌性超抗原（葡萄球菌肠毒素B，SEB)和链球菌超抗原刺激反应增强，且经SEB刺激的银屑病患者外周血淋巴细胞(PBLC)培养上清液可促进角质形成细胞增殖，表达HLA-DR和Fas抗原，继而诱导细胞凋亡。为了进一步探讨培养上清液对角质形成细胞的作用机制，笔者检测了SEB刺激前后的银屑病患者淋巴细胞培养上清液中白介素(IL）-2、γ-干扰素（IFN-γ)的水平变化，现将结果报告如下。     

皮肤科学基础

20 0 4 0 0 0 1　角质形成细胞对 MHC- I限制的自身抗原呈递作用的体外研究 /高兴华 (中国医大一院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 3,36 (6 ) .- 316～ 317利用已建立的转染细胞系 PAM- OK及对照细胞系 ,刺激幼稚或已被预激活的卵白蛋白特异的 CD8 T细胞 (H - 2 Kb)作为反应细胞 ,以3 H-胸腺嘧啶掺入法检测 T细胞的增殖反应。结果 :经 γ-干扰素刺激表达足够的抗原后 ,PAM- OK可刺激预激活的特异 T细胞发生增殖反应 ,而不能刺激幼稚的 T细胞发生反应。认为角质形成细胞可使经预激活的抗原特异的 T细胞发生增殖的潜能 ,可能…     

皮肤肿瘤

20 0 4 1132　Fas基因转染瘢痕疙瘩成纤维细胞并诱导其凋亡的实验研究/罗勇(一军大)…∥第一军医大学学报.- 2 0 0 3,2 8(10 ) .- 10 15～10 17,10 2 4用分子克隆技术将人Fas c DNA插入真核表达载体PC DN A3.1多克隆位点之间,以脂质体介导法将目的基因导入瘢痕疙瘩成纤维细胞,Fas m Ab诱导凋亡;通过琼脂糖凝胶电泳、HE染色和流式细胞仪检测瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的情况。从形态学上观察,转基因的瘢痕疙瘩成纤维细胞经Fas m A b作用后,出现典型的细胞核固缩、碎裂;琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带;流式细胞仪检测凋亡率明显增…     

真菌病

20 0 11516　糠秕孢子菌诱导培养角质形成细胞凋亡的研究 /罗东辉 (上海医大华山医院 )…∥临床皮肤科杂志 .- 2 0 0 0 ,2 9( 6) .- 336～ 338将传代培养角质形成细胞与糠秕孢子菌一起分别培养 6h、12 h及 2 4 h。流式细胞仪检测结果显示 :12 h、2 4 h试验组凋亡细胞百分数明显高于对照组 ( P<0 .0 0 1) ,类似的结果用 TUNEL标记原位染色法亦得到证实。试验组凋亡细胞百分数与时间成正相关 ( r=0 .93)。Bcl- 2免疫组化检测结果显示 :试验组角质形成细胞表达 Bcl- 2蛋白染色阳性的细胞百分数比较对照组下降 ( P均 <0 .0 0 1) ,Bcl- 2蛋白…     

中波紫外线诱导皮肤角质形成细胞凋亡机制的研究进展

紫外线照射表皮后引起DNA损伤的表皮细胞通过日晒伤细胞(凋亡的角质形成细胞)的形成来清除。p53、Fas、Trp53等基因的表达促进角质形成细胞凋亡,而survivin的表达则抑制角质形成细胞凋亡。紫外线照射后皮肤可产生环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物,这两种光产物可以作为UVB诱导凋亡的起始信号。凋亡在清除DNA损伤的皮肤起着重要作用。在皮肤中通过凋亡清除DNA损伤的细胞,防止日光诱导癌变,而不是依赖于DNA损伤的校正修复。silibinin对中波紫外线引起人HaCaT永生化角质形成细胞凋亡具有双向调控作用。对UVB引起角质形成细胞凋亡的调控药物,值得进一步研究。     

尖锐湿疣角质形成细胞Fas表达与凋亡

目的：探讨尖锐湿疣(CA)角质形成细胞Fas表达与凋亡的关系。方法：对51例CA和18例正常上皮分别采用免疫组化ABC法检测Fas抗原、末端脱氧核苷酸转移酶介导的cUTP缺口末端标记技术检测细胞凋亡。结果：CA皮损Fas指数显著高于正常上皮(P=0．004)，CA皮损与正常上皮捌亡指数无明显差异(P=0．664)，CA皮损Fas指数与凋亡指数无明显相开关性(P=0．647)。结论：CA皮损存在Fas的过表达，CA皮损Fas的过表达并未引起细胞凋亡的相应增多。     

靶向角蛋白17基因的小干涉RNA对角质形成细胞增生与凋亡的影响

目的利用RNA干涉技术诱导角蛋白17(K17)基因沉默,观察其对角质形成细胞(KC)增生和凋亡等生物学活性的影响。方法合成两条含有针对人K17mRNA序列的正义和反义寡核苷酸,退火后与表达载体psilencer3.1-H1neo相连接,经鉴定后转染人角质形成细胞系HaCaT,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(W est-ern b lot)检测转染细胞K17 mRNA与蛋白水平的改变,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及凋亡情况,并通过透射电镜观察细胞的凋亡。结果成功构建了靶向人K17基因的siRNA表达载体psilencer3.1/K17,检测到瞬时转染的HaCaT细胞中K17的蛋白水平及mRNA水平均明显下降。流式细胞仪检测表明转染细胞的细胞周期发生了明显的G1期阻滞并证实凋亡的存在,电镜下观察到凋亡小体。结论对于增生活跃的角质形成细胞,K17的表达对其增生、分化和凋亡等生物学活性具有重要影响。靶向K17的siRNA能够抑制角质形成细胞增生,诱导其凋亡。     

皮肤科学基础

20 0 0 3545　环孢菌素 A对皮肤角朊细胞株增殖抑制及凋亡的试验研究 /张倩 (北京医大三院皮肤科 )…∥中国临床药理学杂志 .- 2 0 0 0 ,16( 2 ) .- 135～ 138用 MTT法检测细胞增殖 ,二苯胺法及流式细胞仪检测细胞凋亡 ,RT- PCR法测环孢菌素 A( CSA)作用后角朊细胞 bcl- 2 m RNA表达。结果 :CSA浓度大于10 -4 g· L-1后 ,随浓度增加 ,抑制细胞增殖能力增加。CSA浓度大于 10 -3g· L-1后 ,随浓度增加 ,片段化DNA含量增加明显 ,CSA诱导细胞凋亡的能力增加 ,亚二倍体细胞含量增加。CSA加药 2 4 h,bcl- 2 m RNA表达最强。结论 :C…     

消银解毒饮及拆方对角质形成细胞COLO-16凋亡的调控作用

本研究以角质形成细胞株COLO-16为研究对象,用流式细胞仪分析了消银解毒饮及其拆方后的凉血、解毒和祛风除湿等三组主要成份含药血清对其凋亡的诱导作用.结果表明消银解毒饮能诱导COLO-16细胞的凋亡,诱导角质形成细胞的凋亡可能是其治疗银屑病的机制之一.     

尖锐湿疣细胞凋亡与Fas、bcl—2的表达

为探讨尖锐湿疣（CA）细胞凋亡与Fas、bcl-2表达的意义,对28例CA用TUNEL法原位检测角质形成细胞凋亡;用免疫组化法,观察Fas及bcl-2的阳性表达。24例（85.7%）有凋亡细胞,28例（100%）Fas阳性,bcl-2仅8例（28.6%）有中低度的表达。其凋亡指数（AI）、Fas及bcl-2阳性细胞指数与病情严重无显著性差异（P＞0.05)。AI与Fas呈显著正相关（r=0.8491,P＜0.001),与bcl-2呈显著负相关r=-0.4304,P＜0.01)。结果提示CA中角质形成细胞的凋亡可能在限制病毒的繁殖上起重要作用,Fas对凋亡具有调作用,bcl-2有抑制作用。     

β-溶血型链球菌与角质形成细胞增殖和凋亡研究

目的 探讨β－溶血型链球菌诱发银屑病的机制。方法 ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法、流式细胞仪测定亚二倍体含量、片段化ＮＤＡ分析、ＡｎｎｅｘｉｎＶ凋亡检测法。结果 链球菌悬液活化的外周血细胞培养上清液作用于角质形成细胞４８ｈ，可促进角质形成细胞增殖，再次加入上清液继续作用４８ｈ，则诱则细胞凋亡（Ｐ〈０．０１）；而链球菌本身对角质形成细胞增殖或凋亡无明显影响。结论 链球菌作为超抗原活化Ｔ细胞，使之释放细胞因子而     

干扰素γ/Fas介导的HaCaT细胞凋亡及8种人参皂甙的作用

目的体外诱导角质形成细胞凋亡并研究人参皂甙对细胞凋亡的影响。方法将IFN-γ,Anti Fas Ab作用于体外培养角质形成细胞HaCaT诱导细胞凋亡,并检测人参皂甙对细胞凋亡的影响。结果50 ng/mL IFN-γ和25 ng/mL Anti Fas Ab共同作用可以诱导21.5%角质形成细胞HaCaT凋亡。8种人参皂甙中,Mx,CK和Re可逆转Anti Fas Ab诱导的HaCaT细胞凋亡,逆转率分别为18.4%,14.5%和9.6%。结论IFN-γ和Anti Fas Ab共同作用可诱导HaCaT细胞凋亡。人参皂甙Mx,CK和Re对Anti Fas Ab诱导的HaCaT细胞凋亡有一定的抑制作用。