珍珠菜化学成分的研究

目的 对珍珠菜Lysimachia clethroides的化学成分进行研究。方法 采用溶剂法和色谱法提取分离,波谱法鉴定化合物结构。结果 从珍珠菜中分离得到了13个化合物,分别鉴定为正十六烷酸(Ⅰ)、对羟基苯甲酸(Ⅱ)、东莨菪亭(Ⅲ)、原儿茶酸(Ⅳ)、木犀草素(Ⅴ)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(Ⅵ)、槲皮素-3-O-(6″-O-反式香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)、柚皮素(Ⅷ)、山柰酚-7-O-葡萄糖苷(Ⅸ)、异鼠李素-3-O-芸香糖苷(Ⅹ)、蒙花苷(Ⅺ)、3β,16α-二羟基-13,28-环氧-齐墩果烷-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-［β-D-葡萄糖-(1→2)］-α-L-阿拉伯糖苷(ⅩⅡ)、3β,16α,29-三羟基-13,28-环氧-齐墩果烷-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-［-β-D-葡萄糖-(1→2)］-α-L-阿拉伯糖苷(红毛紫钟苷E,ardisimamiloside E,ⅩⅢ)。结论 化合物Ⅰ～Ⅵ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅶ～ⅩⅢ为首次从该属植物中分离得到。     

珍珠菜总黄酮渗透泵控释片的制备研究

目的 制备珍珠菜总黄酮提取物渗透泵控释片。方法 以芦丁和柚皮素-7-O-葡萄糖苷为指标,通过体外释放度试验对衣膜处方及孔变量进行单因素考察,并通过均匀设计对衣膜处方进行优化。结果 衣膜增重、衣膜中PEG400及邻苯二甲酸二丁酯的用量是影响药物释放的主要因素,二者用量分别为醋酸纤维素的45%及8.5%,所制得的渗透泵控释片呈现良好的零级释药特征。结论 该处方工艺简便可行,所制得渗透泵控释片释药行为稳定,重现性好。     

263中国珍珠菜属植物药用种类和研究概况

本文对珍珠菜属植物的传统和民间疗效进行了分析和统计，发现大多数在具活血化瘀的功效，有些种类还有止咳平喘、利尿排石、清热解毒等多方面疗效。但迄今为止，现代化学和药理研究却很少，已经研究过的１５种植物所含化学成分的结构和分布很有特点，潜在的药用价值应引起足够的重视。     

无花果浆液对肝癌细胞增殖抑制作用研究

目的探讨无花果浆液（Fig fruit latex,FFL）对肝癌细胞SMMC7721及正常肝细胞L-02增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法采用MTT法、克隆形成试验、Brdu掺入试验,Hoechst33342染色、流式细胞术检测FFL作用后,SMMC7721、L-02细胞增殖、凋亡和细胞周期分布的变化,并通过RT-PCR观察其诱导凋亡的机制。结果用FFL处理后,肝癌细胞增殖活性降低（P〈0.05）,克隆形成下降（P〈0.05）,Brdu标记指数降低（P〈0.05）,Hoechst33342染色凋亡细胞增多（P〈0.05）;细胞周期分布改变,凋亡指数升高（P〈0.01）,G0/G1期细胞数增加（P〈0.01）,S期细胞数减少（P〈0.01）,在一定剂量内对正常细胞无明显影响。RT-PCR检测ADPRTL基因表达增强。结论与正常肝细胞比较,FFL通过上调ADPRTL基因诱导肝癌凋亡,促进肝癌细胞周期阻滞,抑制肝癌细胞DNA合成等作用,抑制肝癌细胞增殖。     

中国珍珠菜属植物药用种类和研究概况

本文对珍珠菜属植物的传统和民间疗效进行了分析和统计,发现大多数种类具活血化瘀的功效,有些种类还有止咳平喘、利尿排石、清热解毒等多方面疗效。但迄今为止,现代化学和药理研究却很少,已经研究过的15种植物所含化学成分的结构和分布很有特点,潜在的药用价值应引起足够的重视。     

大孔吸附树脂纯化珍珠菜总皂苷的研究

目的探讨大孔吸附树脂优选珍珠菜总皂苷的纯化工艺。方法以齐墩果酸为对照品,采用紫外分光光度法测定总皂苷含量,在单因素试验的基础上,用L9（34）正交设计优化大孔吸附树脂对珍珠菜总皂苷的纯化工艺。结果最优树脂纯化工艺为：样品液pH为5.0,样品液总皂苷浓度26.75mg/ml,洗脱剂为50%的乙醇。结论优化了的大孔吸附树脂纯化工艺简便易行,稳定可靠。     

珍珠菜总黄酮苷诱导HL-60细胞凋亡作用的研究

目曲：对珍珠菜总黄酮苷㈣诱导人白血病HL-60细胞凋亡作用进行研究。方法：HL-60细胞经ZTF作用后,通过光镜和透射电镜观察细胞的形态学变化,采用流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳观察ZTF对HL-60细胞周期的影响。结摹：HL-60细胞经ZTF作用后,形态学和琼脂糖凝胶电泳试验均可观察到明显的细胞凋亡形态;流式细胞仪测定结果表明作用24h,可使HL-60细胞凋亡,作用48h后,可使HL-60细胞阻滞于C2／M期。结论：ZTF可能直接损伤肿瘤细胞DNA及干扰细胞某些蛋白的合成。     

珍珠菜抗肿瘤有效部位化学成分研究

目的 研究珍珠菜Lysimachia clethroides抗肿瘤有效部位的化学成分。方法 采用各种色谱法进行分离、纯化,通过理化性质及波谱法鉴定化合物的结构。结果 分离并鉴定了14个化合物,分别为山柰酚（1）、槲皮素（2）、江户樱花苷（3）、异槲皮苷（4）、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷（6）、芦丁（7）、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷（8）、二氢山柰酚（9）、柚皮素（10）、(?)-表儿茶素（11）、圣草素（12）、槲皮素-3-O-(2,6-二鼠李糖基葡萄糖苷)（13）、山柰酚-3-O-(2,6-二鼠李糖基葡萄糖苷)（14）。结论 化合物9、12、13首次从本属植物中分离得到。     

"肝癌一号"对裸鼠人肝癌移植瘤生长的抑制作用及机制研究

目的 观察抗癌复方"肝癌一号"对裸鼠肝移植瘤生长的影响并分析其机制. 方法 24只5周龄Balb/C 裸鼠,皮下注射HepG2肝癌细胞1.0×106个,待肿瘤长大至8～10mm时,随机分成实验组和对照组(各12 只).分别给予"肝癌一号"提取液2ml(1 600mg)/d或生理盐水2ml/d灌胃.21d后,处死裸鼠,记录皮下肿瘤大小并称重;TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况;Western-blot和免疫组化方法检测肿瘤组织bcl-2和bax蛋白表达水平. 结果 "肝癌一号"治疗21d后,虽然肿瘤体积较治疗前有所增大(t=5.76,P＜0.01),但明显小于对照组(t=12.35,P＜0.01),抑癌率为31%;肿瘤组织凋亡指数分别为(45.7±6.6)%和(11.7±4.8)%;"肝癌一号"的bcl-2蛋白表达量明显低于对照组(t=8.64,P＜0.01),而bax蛋白表达量明显高于对照组(t=9.23,P＜0.01).结论 诱导肿瘤组织bax基因表达同时抑制bcl-2基因表达,促使肿瘤细胞的凋亡是抗癌复方"肝癌一号"抑制裸鼠皮下肝癌移植瘤生长的原因之一.     

大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究

目的研究大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖抑制、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法用不同浓度的大蒜素作用于体外培养的HepG2细胞,采用MTT法检测大蒜素对HepG2细胞增殖抑制能力,荧光显微镜观察HepG2细胞的形态学变化,流式细胞术检测大蒜素对HepG2细胞周期和凋亡率的影响。结果大蒜素可抑制人肝癌HepG2细胞增殖,且具有明显剂量和时间依赖性,24h、48h和72h大蒜素抑制HepG2细胞的IC50分别为(48.26±1.66)μg/mL、(31.89±1.51)μg/mL和(23.79±1.32)μg/mL。32μg/mL大蒜素作用HepG2细胞48h,可诱导其产生明显的细胞凋亡特征。流式细胞术检测表明大蒜素作用HepG2细胞后,可将细胞阻滞在G2/M期。结论大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖具有抑制作用,可能与诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期有关。     

正交试验法优选珍珠菜中4种黄酮的提取工艺

目的 优选珍珠菜中芦丁、异槲皮苷、山柰酚3-0-β-D-半乳糖苷及紫云英苷的最佳提取工艺.方法 通过正交试验设计考察甲醇浓度、提取时间、提取温度、料液比对珍珠菜中4种黄酮含量的影响.结果 最佳提取工艺条件为70％甲醇,提取时间45 min,提取温度45℃,料液比(g/mL) 1∶100.结论 该工艺稳定、有效,简单易行.     

HPLC法同时测定珍珠菜提取物中5种黄酮

目的 建立同时测定珍珠菜提取物中芦丁、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、江户樱花苷、槲皮素、山柰酚的HPLC方法。方法 采用Chromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0 μm）,柱温35 ℃,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,双波长检测（λ₁＝283 nm,λ₂＝370 nm）,体积流量1.0 mL/min。结果 5个成分均能达到基线分离,线性回归方程分别为芦丁Y＝14 958 X＋179.22（r＝0.999 3）,异鼠李素-3-O-芸香糖苷Y＝12 126 X＋3.14（r＝0.999 4）,江户樱花苷Y＝23 821 X＋76.81（r＝0.999 4）,槲皮素Y＝35 761 X－20.30（r＝0.999 5）,山柰酚Y＝39 078 X＋1.81（r＝0.999 1）,芦丁、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、江户樱花苷、槲皮素、山柰酚进样量分别在228.60～1 143.00、99.60～498.00、232.20～1 161.00、22.08～110.40、15.12～75.60 ng与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为97.8%、98.9%、102.4%、98.4%、92.2%。结论 本检测方法简便、准确,为珍珠菜提取物中黄酮类成分的质量控制提供了依据。     

大孔吸附树脂分离纯化珍珠菜总黄酮的研究

珍珠菜系报春花科植物虎尾珍珠菜LysimachiaclethroideDuby的根或全草,味苦、辛,性平,具有清热利湿、活血散瘀、解毒消痈之功效。国外学者从20世纪70年代开始相继从中分离得到槲皮素苷、山柰酚等黄酮类化合物[1,2],国内学者近年来对其化学成分也有所研究[3,4]。本实验室对珍珠菜提取物进行药理学研究发现,珍珠菜全草总黄酮具有良好的抗肿瘤作用[5]。因此本实验采用大孔吸附树脂对珍珠菜总黄酮的分离纯化工艺进行了研究。1仪器与试剂UV—2401PC紫外-可见分光光度计(日本岛津公司),电子分析天平(Starorious),DZ—900回转振荡器(太仓市实验…     

半枝莲提取物抗人肝癌Hep-G2细胞增殖及其机制研究

目的探讨半枝莲提取物（ESB）对人肝癌Hep-G2细胞体外增殖的影响及其作用机制。方法以MTT法检测ESB对Hep-G2细胞增殖的影响；光镜、电镜观察ESB作用后Hep-G2细胞形态的变化；流式细胞仪检测ESB作用后Hep-G2凋亡细胞、细胞周期的变化及凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax，Fas表达。结果ESB能明显抑制Hep-G2细胞的增殖，荒有剂量效应及时间效应关系。ESB作用Hep-G2细胞72h后，呈现凋亡早期的形态学改变；凋亡细胞增多；S期细胞减少，G0／G1期细胞增多；Fas表达增强，Bcl-2及Bax表达变化不明显。结论ESB可抑制Hep-G2细胞增殖，阻滞细胞周期，促进细胞凋亡，可能与激活FNFR超家族有关。     

Livin反义寡核苷酸对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 利用Livin反义寡核苷酸在裸鼠体内抑制Livin基因表达,探讨Livin反义核苷酸对肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 设计靶向Livin基因的反义寡核苷酸,以Lipofectamine2000作为载体导入裸鼠皮下移植瘤,观察肿瘤生长情况.采用RT-PCR方法检测实验组和对照组Livin基因表达,TUNEL法检测凋亡指数.结果 ASODN组裸鼠皮下移植瘤后14 d,肿瘤体积明显变小.Livin rnRNA表达明显降低.结论 Livin反义寡核苷酸可以明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的增殖.     

云贵腺药珍珠菜化学成分研究

目的 对云贵腺药珍珠菜Lysimachia stenosepala var. flavescens的化学成分进行研究。方法 运用硅胶柱、凝胶柱、中压柱、聚酰胺柱等色谱技术进行分离纯化,根据波谱数据进行结构鉴定。结果 从云贵腺药珍珠菜乙醇提取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为山柰酚（1）、槲皮素（2）、鼠李柠檬素（3）、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（4）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（6）、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷-(1→6)-β-D-葡萄糖苷（7）、槲皮素-3-O-β-D-木糖苷-(1→2)-O-β-D-葡萄糖苷（8）、山柰酚-3-O-(2-O-α-L-鼠李糖苷-6-O-β-D-木糖苷)-β-D-葡萄糖苷（9）、β-谷甾醇（10）、原报春花素A（11）、β-胡萝卜苷（12）。结论 化合物1～12为首次从该植物中分离得到,其中化合物8、9为首次从珍珠菜属中分离得到。     

珠子参对小鼠H22肝癌抑制作用及机制研究

目的：观察珠子参对小鼠移植性肝癌（H22）的增殖抑制作用及其作用机制.方法：建立H22小鼠肝癌实体瘤模型,观察珠子参对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用,放免法（RIA）检测血清中TNF-α含量,光镜（HE染色）观察肿瘤细胞生长增殖状态,并在透射电镜下观察肿瘤细胞超微结构形态,流式细胞仪技术（FCM）检测细胞凋亡并进行周期分析.结果：珠子参抑瘤率达44.89%;血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度珠子参组高于正常对照组,而比模型对照组低（P〈0.05）;光镜观察到珠子参组小鼠肿瘤组织周围有大量的吞噬细胞和淋巴细胞浸润,电镜下可见珠子参组癌细胞胞质浓染,核固缩,线粒体明显减少;FCM分析显示,珠子参各组G0-G1期和S期细胞（%）减少,而G2-M期细胞和凋亡细胞（%）增加.结论：珠子参对H22肝癌小鼠具有良好的抑瘤作用,其作用机制可能与珠子参阻止G2-M期细胞转换而影响癌细胞在细胞周期中的进程,干扰S期DNA合成以及诱导小鼠肝癌细胞凋亡有关;此外珠子参能明显抑制荷瘤小鼠TNF-α水平的异常增高,使其维持在一定水平而发挥抗肿瘤、调节机体免疫力等作用.     

尾叶香茶菜二萜类化合物抑制肝癌细胞增殖作用的初步研究

目的：观察尾叶香茶菜中提取的六种二萜类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用。方法：通过体外细胞培养并应用MTF法分析二萜类化合物对细胞存活率的影响。结果：二萜类化合物B、C、F可明显抑制SMMC-7721细胞增殖，且呈时间剂量依赖性。结论：本研究证明尾叶香茶菜来源的二萜类化合物具有抗肿瘤活性，为尾叶香茶菜的开发利用提供了翔实的实验依据。     

鳄嘴花正丁醇提取物对小鼠Heps肝癌的抑制作用

目的: 研究鳄嘴花正丁醇提取物[Clinacanthus nutans (Burm.f.) Lindau n-butanol extracts,CN-N\]对荷瘤小鼠的体内抑瘤作用及延长生存时间作用。方法: 肝癌细胞接种至ICR小鼠右侧腋下,建立Heps小鼠肝癌模型,随机分成4组,对照组、环磷酰胺组、CN-N低剂量组(3 mg·kg-1·d-1)、CN-N高剂量组(10 mg·kg-1·d-1),每组10只,观察CN-N对荷瘤小鼠的抑瘤率、体质量、脾脏及胸腺指数、生存时间的影响。蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果： 与对照组比较,CN-N低剂量组和高剂量组肿瘤质量明显降低(t分别为2.261,3.140,P均＜0.05),荷瘤小鼠脾脏指数、胸腺指数差异无统计学意义(P均＞0.05),PCNA表达均明显减少;CN-N高剂量组生命延长率为54.8%,较对照组明显延长荷瘤小鼠生存期(t=3.416,P=0.003 1)。结论： 鳄嘴花正丁醇提取物具有良好的抗肿瘤作用,高剂量CN-N能提高荷瘤小鼠的生存期。     

青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721选择性抑制作用的实验研究

目的研究青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721的选择性抑制作用。方法将人肝癌细胞株SMMC-7721接种于小鼠腰部皮下,制成小鼠荷瘤动物模型,分别用青蒿素、琥珀酸亚铁、青蒿素＋琥珀酸亚铁、生理盐水（对照组）对荷瘤小鼠进行干预,观察小鼠肿瘤体积的变化;TUNEL法检查肿瘤细胞的凋亡,计算抑瘤率和凋亡指数。结果青蒿素和青蒿素＋琥珀酸亚铁与生理盐水相比,明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长（P〈0.05）,其抑瘤率分别为33.21%和55.04%,2组间存在明显差异（P〈0.05）。青蒿素联合琥珀酸亚铁表现出明显的促凋亡作用,凋亡指数为31.35%,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721均有肿瘤抑制作用和促进肿瘤细胞凋亡的作用,但是联合用药作用更强。