虎杖多指标成分测定及质量控制方法研究

目的 采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS对虎杖中二苯乙烯类、蒽醌类和黄酮类等化合物进行快速分析,将多指标成分的测定和明晰化指纹图谱共同应用于中药质量控制的研究模式中。方法 采用Agilent SB-C_l8柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,分别采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS两种分析方法对虎杖中化学成分进行分离测定。结果 共从虎杖鉴别出中2个二苯乙烯类、10个蒽醌类和10个黄酮类成分,HPLC-DAD法可以同时测定虎杖药材中的虎杖苷、白藜芦醇和大黄素、大黄素甲醚。结论 采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS对虎杖中二苯乙烯类、蒽醌类和黄酮类成分进行快速分析测定,有效地控制虎杖的质量。     

RP-HPLC法同时测定虎杖提取物中4种组分含量

目的 建立RP-HPLC法测定虎杖提取物中白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚的含量.方法 采用Kromasil C8色谱柱,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱.流速为1 mL/min;检测波长为290nm;进样量为20μL;柱温为30℃.结果 虎杖提取物中白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚分别在10.54...     

UPLC法同时测定金欣口服液中8种指标成分

目的 建立UPLC法同时测定金欣口服液中芥子碱硫氰酸盐、虎杖苷、野黄芩苷、白藜芦醇、黄芩苷、大黄素-8-O-β-葡萄糖苷、黄芩素、汉黄芩素8种指标成分的量。方法 采用UPLC法,Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,体积流量0.4 mL/min,梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温35 ℃;分别对线性关系、精密度、重复性、稳定性及加样回收率进行考察。结果 被测定的8种指标成分分别在选定的范围内线性关系良好,平均加样回收率99%～102%,RSD均小于3.1%。结论 本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于金欣口服液的质量控制。     

虎杖生品及不同炮制品中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素含量

目的：测定虎杖生品与炮制品中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的含量。方法：采用HPLC法进行测定,色谱柱为Diamonsil C18（200mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为306nm。结果：不同炮制品中虎杖苷含量由高到低的顺序：盐制〉醋制〉酒制〉豆汁制,而白藜芦醇和大黄素的含量由高到低的顺序为：豆汁制〉酒制〉醋制〉盐制。结论：此方法简便,准确可靠,虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的同时测定,可为虎杖药材的质量控制提供可靠的参考。不同的炮制方法对虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的含量影响较大,其中豆汁制对3种成分的含量影响最大,其虎杖苷含量明显降低,而白藜芦醇和大黄素则升高显著。     

汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元含量的测定

目的 测定汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元的含量。方法 采用HPLC法直接测定，色谱柱为EclipseXDBC8柱，流动相为乙腈－水，流速为1mL/min，检测波长为303nm。结果 虎杖中白藜芦苷的含量为2．5％，白藜芦醇的含量为0．43％。结论 汉中地区虎杖中白藜芦醇的含量为首次报道，白藜芦醇苷的含量高于文献报道的结果。     

RP-HPLC法同时测定虎杖中虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚的含量

目的 建立同时测定虎杖中虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚含量的分析方法 .方法 采用反相高效液相色谱法,以Diamonsil C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm) 为色谱柱,乙腈和0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,对10个产地虎杖样品中虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚的含量同时进行了测定.检测波长305 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃.结果 虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚分别在8.39～83.85 mg/L、3.36～33.6 mg/L、3.09～30.9 mg/L和2.15～21.5 mg/L浓度范围内符合线性关系,其平均回收率分别为100.8%[相对标准差(relative standard deviation,RSD) 1.3%]、99.3%(RSD 1.6%)、98.1%(RSD 1.5%)和92.2%(RSD 2.7%).不同产地虎杖中的虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚含量有较大的差别.结论 本方法 准确、简便、重现性好,可用于虎杖中虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚含量的同时测定.     

虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤小鼠的保护作用

目的 观察虎杖苷对盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）所致脓毒症诱导的急性肾损伤小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法 建立小鼠CLP诱导的脓毒症致急性肾损伤模型,随后用不同剂量的虎杖苷（50、100、300 mg/kg）干预,观察小鼠一般情况,并于手术24 h后,用试剂盒方法测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平,ELISA法测定血清白细胞介素-6（IL-6）表达量,Western blotting法检测肾脏诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白水平,并取肾脏组织进行病理分析。结果 与模型组相比,虎杖苷明显改善小鼠一般情况,同时降低血清BUN、Cr、IL-6及肾脏中iNOS蛋白水平,缓解肾脏组织损伤,并呈一定的剂量依赖关系。结论 虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抑制血清IL-6及肾脏中iNOS蛋白表达有关。     

虎杖苷抗氧化活性研究进展

虎杖苷是从中药虎杖的干燥根茎中提取的单体化合物,是白藜芦醇的葡糖苷衍生物。现代药理学研究发现,虎杖苷在许多生物过程中发挥重要作用,包括氧化应激、炎症和细胞凋亡等。与白藜芦醇相比,虎杖苷因具有更高的抗氧化活性和生物利用度受到广泛关注。近年来研究发现虎杖苷可以显著改善多种氧化应激相关疾病,如神经退行性疾病、糖尿病、心血管相关疾病等。文章就虎杖苷在多种临床常见疾病中的抗氧化作用进行综述,以期为虎杖苷的后续研究及开发利用提供参考。     

不同采收期虎杖中白藜芦醇苷含量比较

目的 研究不同采收时间虎杖药材中白藜芦醇苷的含量差异,以指导药材最佳采收时间.方法 以C18化学键合硅胶柱为固定相,乙腈-水(30∶70)为流动相,检测波长为305mm,柱温为30℃,流速1 ml/min.结果 白藜芦醇苷在3.52～56.32μg/ml的范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 9,平均回收率为100.0%,RSD%为1.60.结论 不同采收期虎杖中白藜芦醇苷的含量差异较大.含量最高达到3.65%,最低为1.12%.     

虎杖苷在小鼠冠状动脉缺血再灌注损伤中的保护作用及其机制研究

【立论依据】 心脏冠状动脉阻塞,再灌注疗法,极易造成大量自由基产生、钙超载和心肌细胞凋亡等损害。减少心肌细胞再灌注后凋亡仍是治疗冠心病的首要任务。研究表明虎杖苷在缺血再灌注损伤中有增加NO含量,减少自由基损害、提高心功能的保护作用,但其具体机制不明。 RhoA/ROCK通路的激活是缺血再灌注损伤中参与细胞凋亡的机制之一。新近研究表明,生理状态下,血管紧张素受体Ⅱ2型(AT2R)可通过激活RhoA-Pser188抑制ROCK下游通路,达到保护细胞正常生理状态的作用。因此,我们提出,病理状态下,AT2R对ROCK通路的影响是什么?虎杖苷对心肌缺血再灌注(I/R)是否通过该通路起到保护作用?因此,该项目的研究为虎杖苷改善冠脉血流、提高心功能提供实验依据和理论基础。 【设计思路】 实验分为正常对照组,I/R组,单纯虎杖组和虎杖治疗组。通过观察不同时间节点:术后1 h、24 h和7 d,通过心动超声及各种生化检测,研究缺血再灌注机制,并在此基础之上,研究虎杖对缺血再灌注的保护机制。 【实验内容】 (1) 建立小鼠缺血再灌注(I/R)模型。(2) TTC和evans blue染色,并检测凋亡。(3) 留取血清检测cTnT。(4) 留取蛋白检测ROCK激酶活性、RhoA-Pser188、AT2R。(5) 检测血清和组织中NOS、iNOS 活性及 NO 含量。 【材料】 C57小鼠24只,小动物超声仪,小动物心电图测量仪和各种生化检测仪器。 【可行性】 深圳大学机能平台具备所有小动物心功能检测和生化指标检测仪器。 【创新性】 本项目首次提出虎杖苷通过AT2R磷酸化RhoA-Pser188位点,从而抑制ROCK-心肌细胞凋亡通路,深入阐明虎杖苷保护缺血再灌注损伤机制。本项目首次在整体动物模型基础上,研究中药单体虎杖苷对心脏缺血-再灌注的治疗作用,摸索治疗的最佳浓度和作用的时间窗,具有很好的新药开发和临床应用前景。其次,本项目围绕虎杖苷改善冠脉血流,从分子、细胞、组织及整体水平等多个层次对其作用机制展开深入的研究,有较大的基础理论价值。     

干红葡萄酒中儿茶素、表儿茶素、白藜芦醇和原花青素的测定

目的 利用HPLC法与分光光度法对干红葡萄酒中儿茶素、表儿茶素、白藜芦醇和原花青素分别进行测定。方法 儿茶素、表儿茶素和白藜芦醇采用HPLC法测定, Kromasil C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm);流动相采用甲醇-水梯度洗脱;体积流量为1 mL/min;检测波长为290 nm;每次进样10 μL。花青素采用分光光度法测定。结果 干红葡萄酒中白藜芦醇、儿茶素和表儿茶素质量浓度分别为0.036 5~0.893 9 mg/L,0.27~70.14 mg/L,1.04~15.32 mg/L;原花青素为0.309~3.111 mg/mL。结论 干红葡萄酒中儿茶素与表儿茶素的量较高,白藜芦醇的量稍低;原花青素的量平均为2.1219 mg/mL。     

虎杖苷对脑出血性损伤大鼠血清白细胞介素-1β和脑组织Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨虎杖苷对大鼠脑出血性损伤的治疗作用及作用机制。方法 采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,建立脑出血模型,观察虎杖苷对大鼠神经功能症状、脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD) 活力、丙二醛 (MDA) 水平,脑组织 Bcl-2 蛋白表达,及血清中白细胞介素-1β(IL-1β) 水平的影响。结果 与脑出血模型组相比,虎杖苷 (25、50、100 mg/kg)可显著改善脑出血后神经功能缺损,提高脑组织 SOD 活力、降低 MDA 水平,增加 Bcl-2 蛋白表达,降低血清中 IL-1β 水平,其作用与剂量呈正相关。结论 虎杖苷通过对抗自由基损伤,抗凋亡及抗炎等作用,发挥对大鼠脑出血损伤的治疗作用。     

不同采收期虎杖中白藜芦醇苷含量比较

目的 研究不同采收时间虎杖药材中白藜芦醇苷的含量差异，以指导药材最佳采收时间。方法 以C18化学键合硅胶柱为固定相，乙腈-水（30：70）为流动相，检测波长为305nm，柱温为30℃，流速1ml／min。结果 白藜芦醇苷在3．52～56．32μg/ml的范围内呈现良好的线性关系，相关系数r=0．9999，平均回收率为100．0％，RSD％为1．60。结论 不同采收期虎杖中白藜芦醇苷的含量差异较大。含量最高达到3．65％，最低为1．12％。     

宜肝乐颗粒的质量标准研究

目的 建立宜肝乐颗粒的定性、定量鉴别方法。方法 采用薄层色谱法对宜肝乐颗粒中鸡矢藤、功劳木、虎杖进行定性鉴别;高效液相色谱法测定宜肝乐颗粒中大黄素,Zorbax C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(80∶20);检测波长：288 nm;体积流量：1.0 mL/min;柱温： 室温;进样量：10 μL。在此色谱条件下,理论塔板数按大黄素峰计达3 000以上,分离度为2.0。结果 3味药材的薄层色谱鉴别呈阳性;建立的定量测定方法可用于宜肝乐颗粒中大黄素的测定。结论 薄层色谱法和高效液相色谱法简便、准确、灵敏,可作为宜肝乐颗粒质量控制的有效方法。     

HPLC法测定风痛炎颗粒中黄芩苷

目的 建立HPLC法测定风痛炎颗粒中黄芩苷的方法。方法 采用RP-HPLC法测定黄芩苷的量;色谱柱为C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,10 μm）,流动相为甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶1）,体积流量1.0 mL/min,检测波长274 nm,柱温40 ℃。结果 黄芩苷在100.60～2 012.00 μg/mL线性关系良好,平均回收率为100.25%,RSD为0.360%。结论 本方法简单、准确,可用于风痛炎颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定虎杖提取物中白藜芦醇的含量

目的：建立虎杖提取物中白藜芦醇的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定虎杖提取物中白藜芦醇的含量。色谱条件：流动相：乙腈-水（30∶70）;流速：1.0 ml/min;检测波长：306 nm;柱温：室温;进样量：10 μl。结果：白藜芦醇进样量在0.3～9.6 μg/ml范围内,线性关系良好。结论：本法简便实用、灵敏度高、重现性好,可用于虎杖提取物中白藜芦醇的含量测定。     

虎杖苷的药理作用研究进展

虎杖苷是虎杖等中药的有效成分,其是白藜芦醇与葡萄糖结合的产物,因而也称为白藜芦醇苷,其药理作用与白藜芦醇类似,可在体内相互转化,但虎杖苷具有更强的抗氧化作用和稳定性。虎杖苷具有调节离子通道以及蛋白激酶的作用,广泛应用于改善心肌损伤、改善血管内皮功能障、抑制血小板聚集、抗氧化、抗休克、抗肺动脉高压、降血脂以及抗血栓形成等,提示其具有重要的开发和临床应用价值。     

HPLC法测定杜仲雄花和杜仲雄花茶中京尼平苷酸、绿原酸和京尼平苷

目的 建立同时测定杜仲雄花及其制剂杜仲雄花茶中京尼平苷酸、绿原酸和京尼平苷的方法。方法 采用反相高效液相色谱法。色谱条件为迪马公司Diamonsil^TM C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm）,甲醇-水-冰醋酸（15∶85∶1.5)为流动相,体积流量为1 mL/min,柱温为25~27 ℃,检测波长为237 nm,灵敏度为0.100 0 AUFS。结果 京尼平苷酸、绿原酸及京尼平苷进样量与色谱峰面积线性关系良好。结论 该方法简便、准确,可用于杜仲雄花及杜仲雄花茶中京尼平苷酸、绿原酸及京尼平苷的测定。     

虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定

目的:建立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的高效液相色谱法,优化虎杖中有效成分白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取工艺.方法:采用梯度法建立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷的高效液相色谱方法,以白藜芦醇和白藜芦醇苷总量为考察指标,设计以乙醇浓度、溶剂倍数及醇提温度等为影响因素的4因素3水平的正交实验,确定虎杖中上述有效成分的最佳提取工艺.结果:在选定的色谱条件下,虎杖提取物中白藜芦醇和白藜芦醇苷可以达到基线分离. 检测白藜芦醇及其苷的线性回归方程分别为Y=0.0006X-0.183(r=0.9996),Y=0.0011X-0.478(r=0.9993);线性范围分别为0.48～38.4 mg/L和0.47～38.2 mg/L. 日内、日间精密度都小于5%,回收率在90%～105%之间,样品分析时间小于7 min. 虎杖中有效成分白藜芦醇和白藜芦醇苷的最佳提取工艺为乙醇浓度80%,溶剂倍数15,醇提温度70℃,提取时间2 h.结论:建立了准确可靠、分析速度快可同时检测虎杖提取物中白藜芦醇和白藜芦醇苷的分析方法,优化了质量可控的提取工艺.     

虎杖药理作用研究进展

药用的虎杖为蓼科蓼属多年生草本植物虎杖的干燥根茎和根(叶也入药),主要含有蒽醌类化合物、白藜芦醇苷、水溶性多糖和鞣质等成分,性味微寒微苦,归肝、胆、肺经,有祛风利湿、散瘀定痛、止咳化痰之功效。中医临床用于治疗湿热黄疸、肺热咳嗽、疮痈肿毒、关节痹痛、经闭经痛、水火烫伤、跌打损伤等。