结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平的变化及意义

目的:探讨结直肠癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平的变化和意义.方法:采用双抗体夹心法检测72例结直肠癌患者(术前、术后3个月、术后1年)、30例结直肠腺瘤患者和30例健康体检者血清VEGF和MMP-2的水平.结果:结直肠癌组患者术前血清VEGF和MMP-2水平明显高于结直肠腺瘤组和正常对照组(P＜0.05);术后3个月,72例结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平明显低于术前(P＜0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平与年龄、性别、组织类型、大体分型、肿瘤部位无关(P＞0.05);与Dukes分期、分化程度、淋巴结转移、浸润深度、肿瘤大小有关(P ＜0.05).术后随访1年时,复发者血清VEGF和MMP-2水平明显高于未复发者(P＜0.05).结论:血清VEGF和MMP-2水平可能在结直肠癌的早期诊断、病情评估及预后评价中具有重要作用.     

抑制肝癌SMMC-7721细胞TWIST基因表达对细胞侵袭能力的影响

目的:探讨抑制肝癌SMMC-7721细胞中TWIST基因表达对其侵袭能力的影响。方法:将靶向TWIST基因的siRNA序列和阴性对照siRNA序列转染入人肝癌SMMC-7721细胞,同时以未转染细胞作空白对照。于转染后48h,采用半定量RT-PCR和Western blot法检测各组细胞TWIST、E-cadherin mRNA和蛋白的表达,Boyden侵袭小室检测细胞体外侵袭能力的变化。结果:3组TWIST、E-cadherin mRNA和蛋白表达,以及穿膜细胞数差异有统计学意义(F=32.023、38.732和24.034、49.083、44.387,P<0.001);TWIST siRNA组TWIST mRNA和蛋白的表达低于空白和阴性对照组,E-cadherin mRNA和蛋白的表达高于空白和阴性对照组,TWIST siRNA组穿膜细胞数较空白对照组和阴性对照组下降(P<0.05)。结论:抑制肝癌SMMC-7721细胞TWIST基因表达可以抑制肝癌细胞上皮间质转化的发生,同时可有效降低肝癌细胞的侵袭转移能力。     

人参二苓汤对小鼠移植瘤腹水的治疗作用研究

目的：研究人参二苓汤对H22荷瘤小鼠恶性腹水的抑制作用及相关机制.方法：建立H22荷瘤小鼠恶性腹水模型,随机分为模型对照组,阳性对照组,人参二苓汤有效部位低、中、高剂量组,观察各组小鼠毛色、食欲、活动状况和精神状态等一般的生活状况;测定小鼠体重和腹围的变化;观察腹腔内情况,计数腹膜瘤结节数量,称重计算抑瘤率;利用Elisa法检测腹水中VEGF、MMP-2、MMP-9的表达量.结果：人参二苓汤有效部位能够延缓H22荷瘤小鼠体重和腹围的增长,对H22荷瘤小鼠腹水的生长有一定的抑制作用,且存在剂量依耐性.与模型组比较,人参二苓汤有效部位高剂量组小鼠腹水中VEGF的含量显著降低（P ＜0.01）,MMP-2和MMP-9的含量有差异（P＜0.05）;中剂量组小鼠腹水中VEGF的含量有差异（P＜0.05）,MMP-2和MMP-9的含量无差异（P＞0.05）;低剂量组小鼠腹水中VEGF、MMP-2和MMP-9的含量均无差异（P＞0.05）.人参二苓汤有效部位各剂量组与模型对照组比较均无差异.结论：人参二苓汤能够提高H22腹水型小鼠的生活质量,抑制恶性腹水的生长,抑制腹水中VEGF、MMP-2和MMP-9的表达,而对H22荷瘤小鼠恶性腹水的发展起抑制作用.     

南蛇藤提取物含药血清对人肝癌SMMC 7721细胞增殖、迁移和黏附作用的影响

目的?制备南蛇藤（Celastrus Orbiculatus）乙酸乙酯提取物兔含药血清,研究其对人肝癌SMMC 7721细胞株的增殖、迁移和黏附的影响。方法?取新西兰白兔,以20mg/kg·d南蛇藤提取物灌胃,按血清药理学方法制备含药血清。设低、中、高剂量组（分别含有10%,20%,30%的南蛇藤提取物含药血清）,作用人肝癌SMMC 7721细胞,同时设溶媒对照组及5氟尿嘧啶（5Fu）阳性对照组。MTT法检测含药血清对细胞增殖的影响,Borden小室体外迁移实验及细胞黏附实验分别检测含药血清对细胞迁移和黏附能力的影响。结果?MTT结果显示各剂量组含药血清均能抑制肝癌SMMC 7721细胞的增殖,且呈剂量依赖性。迁移实验结果表明,中、高剂量组含药血清能显著抑制细胞的迁移能力（P＜0.05）;黏附实验结果显示在作用1h和2h 时各剂量组均能显著促进细胞的同质黏附;在作用2h 时,中、高剂量组能抑制细胞与基底膜成分Matrigel 的黏附,低、中、高各剂量组均能抑制细胞与人脐静脉内皮细胞的异质黏附,与对照组相比差异显著（P＜0.05或P＜0.01）,并具一定的量效关系。结论?南蛇藤提取物含药血清能有效抑制人肝癌SMMC 7721细胞的增殖和迁移能力,并能促进细胞的同质黏附能力,抑制细胞与基底膜及与人脐静脉内皮细胞的异质黏附能力。      

MMP-9 过表达对骨肉瘤143B 细胞 侵袭与迁移能力的影响

目的 研究MMP-9 过表达对成骨肉瘤143B 细胞侵袭与迁移能力的影响。方法 通过慢病毒介导 MMP-9 过表达载体转染骨肉瘤143B 细胞,实验分为3 组：实验组（转染pLV-Puro MMP-9 过表达序列）、 对照组（转染pLV-Puro MMP-9-NC 序列）、空白组（PBS）;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检 测MMP-9 和VEGF mRNA 的表达;Western blot 法检测MMP-9 和VEGF 蛋白的表达;Transwell 小室侵袭 实验检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 实验组MMP-9 和VEGF 的mRNA 和蛋 白表达量较对照组和空白组上调（P < 0.05）;实验组穿过人工基底膜细胞数高于对照组和空白组（P < 0.05）; 实验组划痕愈合率高于对照组和空白组（P <0.05）。结论 慢病毒介导MMP-9 过表达通过作用于VEGF 靶 基因,抑制成骨肉瘤143B 细胞侵袭及迁移能力。     

南蛇藤提取物对ERK/MAPK通路介导的人胃癌MKN45细胞侵袭转移的研究

目的:探索南蛇藤乙酸乙醋提取物(celastrus orbiculatus extract,COE)对人胃癌MKN45细胞增殖、侵袭与转移的影响及其可能的分子机制.方法:采用MTT法检测COE对人胃癌MKN45细胞生长增殖的影响;细胞划痕实验及体外侵袭实验检测COE对MKN45细胞侵袭和转移能力的影响;Western ...     

肝癌的VEGF及其受体的研究进展

研究肝癌的血管生成与转移的关系，对控制肿瘤的生物学行为至关重要。本文简要综述了血管内皮生长因子（VEGF）和血管内皮生长因子受体（VEGFR）的研究进展，重点综述了VEGF和VEGFR与肝癌转移和术后复发关系的研究进展。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂与肝癌侵袭转移的关系

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制剂-2（TIMP-2）在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其与HCC侵袭转移的关系。方法应用组织芯片技术和免疫组化方法（SP法）检测93例HCC组织、66例癌旁组织和36例正常肝组织中MMP-9和TIMP-2的表达情况。结果MMP-9在HCC癌组织中的表达阳性率（62．4％）和癌旁组织（57．6％）高于正常肝组织（11．1％，P〈0．001）；MMP-9的表达随癌的转移而升高（P〈0．01）。TIMP-2在HCC中表达阳性率（51．6％）低于癌旁组织（83．3％，P〈0．001）和正常肝组织（86．1％，P〈0．001）；TIMP-2表达随癌的转移而降低（P〈0．05）。MMP-9和TIMP-2与患者合并硬化、组织分化、AFP水平和HBsAg状态无关（P〉0．05）。结论MMP-9和TIMP-2表达与HCC的侵袭转移密切相关，MMP-9和TIMP-2可以作为临床判断HCC侵袭转移有价值的参考指标。     

强力霉素对人胃癌细胞体外增殖的影响

目的研究强力霉素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响及其机制。方法用MTT法和免疫组织化学法分别检测SGC-7901细胞的增殖及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)蛋白表达水平。结果强力霉素作用于SGC-7901的抑制效应呈浓度和时间依赖性,SGC-7901经强力霉素处理后MMP-2的表达,不同浓度间有显著性差异(P<0．01)。结论强力霉素对胃癌细胞SGC-7901有抑制增殖的作用,其机制可能与下调MMP-2蛋白表达有关。     

非小细胞肺癌中VEGF和MMP-2的表达及其与肿瘤侵袭转移关系的研究

目的探讨非小细胞肺癌中血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达水平以及与非小细胞肺癌侵袭转移恶性表型形成的关系。方法对60例随访6-64个月的原发性非小细胞肺癌术后肺癌组织石蜡切片,同时取癌旁正常肺组织,采用免疫组织化学SP法进行VEGF和MMP-2表达水平的检测。结果VEGF、MMP-2阳性表达率分别为68.3%和65.0%,与癌旁正常肺组织比较差异有统计学意义（P〈0.01）。与肿瘤大小、临床分期呈正相关,差异有统计学意义（P〈0.05）。有淋巴结转移、复发转移患者两者的表达强度显著高于淋巴结无转移、无复发转移患者,差异有统计学意义（P〈0.05）。两者在肺癌组织中的表达与病人年龄、性别、有无吸烟习惯、组织病理类型均无关（P〉0.05）。结论VEGF和MMP-2在非小细胞肺癌组织中的表达均与肿瘤大小、临床分期、有无淋巴结转移、有无复发转移有关。两者在肺癌组织中的表达具有相似性并显著正相关,可作为判断NSCLC中肿瘤细胞侵袭转移力的预见性指标,对判断其恶性程度其有参考价值。     

三氧化二砷对人肝癌细胞生长及其侵袭转移能力的影响

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)对人肝癌SMMC-7721细胞生长及其侵袭转移能力的影响。方法 MTT法检测不同浓度As_2O_3对人肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,之后检测经As_2O_3作用前后对基底膜黏附能力的影响;Transwell膜侵袭系统观察As_2O_3作用前后SMMC-7721细胞游走与穿透基底膜能力的改变。结果 As_2O_3能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的生长以及对Matrigel的黏附能力,相同浓度不同作用时间比较及相同作用时间不同浓度比较,差异均有统计学意义(P<0.01);As_2O_3能抑制细胞游走与穿透基底膜的作用,与对照组比较,游走穿膜细胞数及侵袭穿膜细胞数均减少(P<0.05)。结论 As_2O_3具有抑制人肝癌细胞生长增殖以及侵袭转移的能力。     

基质金属蛋白酶的表达与肝癌侵袭转移的关系

目的　揭示基质金属蛋白酶 -2 (MMP -2 )、基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)在肝细胞癌的表达及其与侵袭转移过程中的表达关系 ,进一步了解肝细胞癌侵袭转移的发生机制。方法　通过免疫组化SABC法 ,检测 3 2只大鼠的肝细胞癌模型标本肝癌及癌旁肝组织MMP -2及MMP -9的表达 ,应用图像分析法进行定量分析MMP -2及MM -9的变化。门静脉癌栓形成作为肝细胞癌侵袭转移标志。结果　免疫组化显示 ,癌及其癌旁肝组织均有MMP -2及MMP -9表达 ,MMP -2及MMP -9在肝癌组织的表达显著高于癌旁肝组织 (P <0 0 1) ;MMP -2及MMP -9在有侵袭转移肝癌组织的表达显著高于无侵袭转移肝癌组织 (P <0 0 1)。MMP -2及MMP -9在无侵袭转移肝癌、癌旁肝组织及有侵袭转移癌旁肝组织的表达差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;肝癌组织中MMP -2及MMP -9含量高于相对应癌旁肝组织时 ,发生癌栓的机会至少为 42 9% ,当癌组织中MMP -2及MMP -9含量低于癌旁肝组织时癌栓发生率为 0。结论　肝细胞癌在有侵袭转移情况下MMP -2及MMP -9在癌组织表达明显增高。预示可通过检测癌组织MMP -2及MMP -9表达水平帮助判断肝癌复发、转移风险。因此 ,提示其极有可能成为防治肝细胞癌的生物学标志物     

VEGF、MMP-2在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）,基质金属蛋白酶－2（MMP－2）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法：用免疫组化（S－P法）,染色技术对95例NSCLC石蜡组织标本的VEGF、MMP－2及肿瘤微血管密度（MVD）进行检测和分析。结果：VEGF、MMP－2在肿瘤细胞阳性表达率明显高于癌旁的正常肺组织（P＜0．01）。VEGF及MMP－2阳性表达癌组织中的MVD显著高于阴性表达癌组织中的MVD。VEGF表达与TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0．05）,和肿瘤病理分级增高无显著相关（P＞0．05）。MMP－2表达与肿瘤病理分级及淋巴结转移有关（P＜0．05）。结论：VEGF和MMP－2可能参与了NSCLC的新血管生成,故VEGF、MMP－2的检测可作为判断NSCLC转移及预后的指标。     

MMP-9及其抑制剂TIMP-2在非小细胞肺癌中的表达与病理特征的相关性

目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在人非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肺癌分期、分化程度和淋巴结转移等病理特征的相关性。方法通过免疫组织化学方法检测非小细胞肺癌组织和癌周组织中MMP-9和TIMP-2的蛋白表达,进行统计学处理。结果 MMP-9和TIMP-2在肺癌组织中的表达强于癌周肺组织,在腺癌中的表达强于鳞癌,在合并淋巴结转移的肺癌组织中表达较高。结论 MMP-9或TIMP-2表达失衡是NSCLC发生发展的关键。     

环巴胺对胃癌MKN45细胞株恶性生物学行为及VEGF、MMP基因表达的影响

目的:研究环巴胺对胃癌MKN45细胞株恶性生物学行为及血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)基因表达的影响.方法:培养胃癌MKN45细胞株,分为环巴胺组(环巴胺处理)和空白对照组(无血清的培养基处理),采用MTT法检测细胞活力,流式细胞法检测细胞周期,real-time PCR检测VEGF和MMP的mRNA含量,酶联免疫吸附法检测VEGF和MMP的蛋白含量.结果:(1)恶性生物学行为:环巴胺组的MTT值以及G0/G1期、S期比例和(A0-A24)/Ao相对值均低于对照,G2/M期比例高于对照组(P＜0.05);(2)VEGF、MMP表达:环巴胺组细胞中VEGFA、VEGFB、VEGFC、MMP2、MMP9的mRNA含量以及细胞上清液中VEGFA、VEGFB、VEGFC、MMP2、MMP9的蛋白含量均低于对照组(P＜0.05).结论:环巴胺处理能够抑制胃癌细胞株MKN45增殖和迁移的恶性生物学行为,同时减少VEGF、MMP的表达.     

硫普罗宁对原发性肝癌患者血清MMP-9、VEGF及肝功能的影响

目的探讨硫普罗宁对原发性肝癌血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）水平和肝功能的影响。方法选取90 例原发性肝癌患者作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组各45 例。所有患者均给予化疗栓塞（TACE）治疗。TACE治疗后,对照组患者给予常规治疗,观察组在对照组基础上给予硫普罗宁治疗。比较两组患者近期疗效、肝功能指标和血清MMP-9、VEGF水平。结果治疗后,观察组和对照组患者的近期治疗有效率分别为71.1%和60.0%,组间比较,差异无统计学意义（p >0.05）。观察组患者治疗后谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、MMP-9 及VEGF 与对照组比较,差异有统计学意义（p <0.05）,观察组ALT、AST、TBIL、MMP-9、VEGF比对照组低。结论硫普罗宁可提高原发性肝癌TACE治疗近期有效率,并降低血清MMP-9、VEGF 水平,能够改善患者肝功能,临床上值得进一步研究。     

基质金属蛋白酶与肝癌侵袭转移的研究进展

肿瘤细胞的侵袭转移是一个多步骤的极其复杂的过程,细胞外基质(extracelluar matix,ECM)的降解是一个十分重要的步骤.基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是ECM降解过程中必不可少的酶类,几乎能降解ECM的所有成分.因而研究MMPs的表达及含量与肝癌侵袭转移具有极其重要的意义.     

甘草提取物(Gc34)对HepG-2细胞侵袭、增殖能力的影响

目的 通过体外实验研究甘草提取物(Gc34)对人肝癌细胞HepG-2侵袭、增殖生物学行为的影响及其可能的分子机制。 方法 将人HepG-2细胞分为对照组、Gc34组。常规培养细胞。对照组用酒精干预,使其终浓度为0.5%;Gc34组用Gc34干预,使其终浓度为12.5、25.0、50.0 mg/L。细胞侵袭实验测定HepG-2细胞侵袭力。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HepG-2细胞的增殖活性。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞培养上清基质金属蛋白酶(MMP)2、9的含量。比色法测定细胞培养上清还原性谷胱甘肽/谷胱甘肽(GSH/GSSG)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。 结果 HE染色光学显微镜下HepG-2细胞核浆比例增大,核深染、大小、形态和染色不一,核分裂像增多并可见病理性核分裂像:巨核、双核、多核。24 h及以上的同时间,Gc34 25.0、50.0 mg/L组HepG-2细胞增殖活性显著低于对照组(P均＜0.01)。Gc34组HepG-2细胞侵袭数、MMP-2、MMP-9、GSH/GSSG、SOD分别为45±7、(40.3±6.2) mg/L、(42.7±5.6) mg/L、4.2±0.8、(67.2±7.9) U/(mg·L),均显著低于对照组(P均＜0.01)。Gc34组HepG-2细胞培养上清MDA含量为(45.4±8.5) mmol/g,显著高于对照组(P＜0.01)。HepG-2细胞侵袭力与MMP-2、MMP-9正相关(r分别为0.65、0.72,P均＜0.01)。HepG-2细胞增殖活性与GSH/GSSG、SOD正相关(r分别为0.55、0.64,P均＜0.01),与MDA负相关(r=-0.58,P＜0.01)。 结论 甘草提取物(Gc34)下调MMP-2、MMP-9表达,抑制HepG-2细胞侵袭能力;下调GSH/GSSG、SOD表达,上调MDA表达,抑制HepG-2细胞增殖活性。      

奥曲肽抑制胃癌侵袭和转移的实验研究

目的　通过体外及体内实验 ,研究生长抑素类似物奥曲肽对胃癌侵袭和转移的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法　选用改良的BoydenChamber膜侵袭系统 ,观察奥曲肽对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 ;建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型 ,给予奥曲肽皮下注射治疗 8周后 ,观察胃癌转移情况 ;免疫细胞化学染色检测奥曲肽对胃癌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响 ;用明胶酶法及RT PCR法了解奥曲肽是否下调胃癌细胞MMP 2表达及MMP 2mRNA的表达。结果　经奥曲肽作用后 ,体外培养的胃癌细胞的趋化细胞数 (5 0± 4 )或侵袭细胞数 (30± 3)均明显低于对照组 (10 7± 11,5 6± 5 ,均P <0 0 1)。奥曲肽明显降低裸鼠人胃癌移植瘤的转移 ,其肿瘤血管的形成数亦明显低于对照组。此外 ,奥曲肽降低胃癌细胞VEGF的表达 ,明显下调MMP 2mRNA的表达 ,导致MMP 2的合成减少。结论　奥曲肽能有效抑制胃癌侵袭和转移。其作用机制可能与降低胃癌细胞运动能力、抑制MMP 2表达及肿瘤血管形成有关