HPLC法测定生脉注射液和注射用生脉中五味子醇甲

目的 建立生脉注射液和注射用生脉中五味子醇甲的测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法。色谱柱：Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）;流动相：乙腈-水（50∶50）;体积流量：1.0 mL/min;检测波长：218 nm;柱温：25 ℃;进样量：10 μL。结果 五味子醇甲线性范围为2.98～29.8 μg/mL（r=0.999 6）,生脉注射液和注射用生脉中五味子醇甲的平均回收率分别为98.9%、98.2％,RSD分别为0.79%、1.1％(n=9)。结论 本法操作简便、结果准确,适合这两种制剂中五味子醇甲的测定。     

HPLC法测定复方酸枣仁软胶囊中阿魏酸和五味子甲素

目的 研究采用HPLC法测定复方酸枣仁软胶囊中阿魏酸和五味子甲素的方法。方法 阿魏酸定量测定的色谱条件：色谱柱为迪马公司C₁₈柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-1%醋酸水溶液（35∶65）,检测波长为320 nm,体积流量为1 mL/min,柱温为室温,进样量为10 μL;理论塔板数按阿魏酸峰计不低于3 000;五味子甲素定量的色谱条件：色谱柱为迪马公司C₁₈柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-水（77∶33）,检测波长为254 nm,体积流量为1 mL/min,柱温为室温,进样量为10 μL。结果 阿魏酸的线性范围9.8～49.0 μg/mL（r＝0.999 6）;加样回收率试验RSD为1.98%;五味子甲素的线性范围8.8～44.0 μg/mL（r＝0.999 9）;加样回收率试验RSD为0.98%。结论 本方法准确、简便、可靠,可作为复方酸枣仁软胶囊质量控制的方法。     

HPLC法测定参芪五味子分散片中五味子醇甲

目的 建立HPLC法测定参芪五味子分散片中五味子醇甲的方法。方法 色谱柱为Inertex-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-水（65∶35）,检测波长250 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温35 ℃。结果 该方法的线性范围在0.196～3.136 μg（r＝0.999 9）,回收率为99.5%,RSD为0.49%。结论 该方法可行、重现性好,能有效控制参芪五味子分散片的质量。     

高效液相色谱法测定生脉分散片中五味子醇甲

目的 定量分析生脉分散片中的五味子醇甲。方法 采用高效液相色谱法。Kromasil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);以甲醇-水(60∶40)为流动相;体积流量为1 mL/min;检测波长为250 nm;柱温：35 ℃;进样量为20 μL。结果 五味子醇甲在0.260 4～1.302 0 μg呈现良好的线性关系,平均回收率99.7%,RSD 为1.22%(n=9);每片中含五味子醇甲为0.25～0.34 mg。结论 本法操作简便、准确、专属性好,可作为生脉分散片中五味子的质量控制方法。     

HPLC法测定无糖型宁心安神糖浆中五味子醇甲和五味子乙素

目的 建立无糖型宁心安神糖浆中五味子醇甲和五味子乙素的测定方法。方法 采用Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：甲醇–水（73∶27）,检测波长：250 nm,柱温：30 ℃,体积流量：1.0 mL/min,进样体积：10 μL。结果 五味子醇甲、五味子乙素分别在0.16～1.6 μg（r=0.999 9）和0.04～0.40 μg（r=0.999 1）呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.00%、100.04%,RSD分别为0.60%、0.18% （n=6）。结论 该方法简便、准确、重现性好,可作为无糖型宁心安神糖浆质量控制的方法。     

高效液相色谱法测定五味子藤茎浸膏中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量

[目的]建立利用高效液相色谱测定五味子藤茎浸膏中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素含量的方法.[方法]采用高效液相色谱法,采用C18色谱柱(250.0mm×4.6mm,5μm),甲醇-水为流动相梯度洗脱,检测波长为254nm,柱温为30℃.[结果]五味子醇甲在0.44～2.20μg范围内,五味子酯甲在0.30～1.50μg范围内,五味子甲素在0.40～2.00μg范围内,五味子乙素在0.44～2.20μg范围内,峰面积与浓度呈较好的线性关系,平均加样回收率分别为98.85%,101.57%,99.68%,99.29%,RSD分别为0.64%,1.71%,1.29%,1.17%.[结论]高效液相色谱法简便、快速、准确,可作为样品含量的测定方法.     

HPLC测定生脉饮中五味子甲素和五味子乙素的含量

[目的]应用高效液相色谱法测定生脉饮中五味子甲素和五味子乙素的含量。[方法]采用Kromasil C18分析柱（4.6 mm×150 mm,3μm）,流动相为甲醇-水（77∶23）;流速为1 ml/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃。[结果]五味子甲素和五味子乙素在0.004～0.008μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系。回归方程分别为Y=53.64160X＋4.14451×10-3,r=0.99999;Y=43.09819X＋8.347131×10-3,r=0.99998。五味子甲素平均回收率为100.93%,RSD=3.03%（n=3）;五味子乙素平均回收率为101.07%,RSD=2.13%（n=3）。[结论]本法灵敏度高、操作简便、结果准确,适用于五味子甲素和五味子乙素的含量测定。     

HPLC法同时测定复方五仁醇软胶囊中绿原酸、芍药苷、五味子醇甲、五味子乙素

目的建立HPLC双波长法一次进样同时测定复方五仁醇软胶囊中绿原酸、芍药苷、五味子醇甲、五味子乙素4种主要有效成分含量的方法。方法采用Lichrospher C18色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水,梯度洗脱,双波长检测(λ1=230nm、λ2=327nm),柱温35℃,体积流量1.0mL/min。结果绿原酸在316~19.75μg/mL(r=0.999 1)、芍药苷在208~13μg/mL(r=1.000 0)、五味子醇甲在656~41μg/mL(r=0.999 8)、五味子乙素在484~30.25μg/mL(r=1.000 0)范围内均成良好的线性。平均回收率分别为97.14%、98.41%、98.79%、102.16%,RSD分别为2.24%、2.85%、1.51%、0.68%(n=6)。结论本检测方法准确可靠、重复性好。可用于评价复方五仁醇软胶囊的质量。     

HPLC法测定更年安片中五味子甲素和五味子乙素的含量

目的测定更年安中五味子甲素和五味子乙素的含量.方法样品用环己烷超声提取,过滤,蒸干.残渣用乙腈-甲醇(1∶1)溶解后,经HPLC仪测定.色谱柱PhenomenexC18柱(5μm,250mm×4.6mm),柱温22℃,流动相乙腈-甲醇-水(15∶15∶10),检测波长254nm.结果更年安中五味子甲素和五味子乙素与其它成分分离良好,保留时间分别约为14.6和19.1min.五味子甲素对照品线性浓度范围1.0～80μg/mL,r=0.9996,平均回收率为96.5%,RSD为3.28%(n=5).五味子乙素对照品线性浓度范围1.0～80μg/mL,r=0.9998,平均回收率为94.7%,RSD为3.49%(n=5).结论本法灵敏度高、操作简便、结果准确,可用于更年安中五味子甲素和五味子乙素的含量测定.     

五味子乙素对阿霉素在大鼠体内的药代动力学影响

考察五味子乙素和阿霉素联合用药后对SD大鼠体内阿霉素药代动力学行为的影响。建立了LC-MS/MS法测定SD大鼠血浆中阿霉素及其主要代谢产物阿霉素醇,采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5 μm),流动相为0.1%甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱方式,电喷雾离子化正离子扫描模式下,离子对分别为m/z 544.2→397.3(阿霉素)、m/z 546.2→399.2(阿霉素醇)、m/z 528.2→381.2(柔红霉素,内标)。阿霉素在0.500~500 ng/mL,阿霉素醇在0.200~50.0 ng/mL范围内线性关系良好,精密度和准确度均符合要求,各浓度提取回收率和基质效应的变异系数均小于15%。阿霉素在单独给药和联合给药组的AUC_0-t分别为(605.69±145.84)和(564.53±23.99)ng·h/mL,阿霉素醇的AUC_0-t分别为(26.69±13.41)和(29.00±2.78)ng·h/mL。结果表明五味子乙素不影响阿霉素在SD大鼠体内的药代动力学行为。     

五味子乙素对ICR小鼠的抗焦虑作用及其作用机制

目的：探讨五味子乙素（SchB）对ICR小鼠的抗焦虑作用,并阐明其相关机制。方法：ICR小鼠分为空白对照组（灌胃给予双蒸水）、2.5 mg·kg^-1SchB组、5.0 mg·kg^-1SchB组和10.0 mg·kg^-1SchB组（灌胃给予相应剂量SchB）。各组小鼠连续灌胃给药7d后,进行十字迷宫及零迷宫实验;实验结束后,取空白对照组及SchB 10 mg·kg^-1组小鼠外周血及脑组织。采用酶联免疫吸附试验检测小鼠外周血和脑组织中γ氨基丁酸（GABA）及谷氨酸（Glu）水平,计算GABA/Glu比值;采用Western blotting法检测小鼠脑组织中GABAA受体α1亚单位（GABAARα1）与GABAA受体γ2亚单位（GABAARγ2）的表达水平。结果：与空白对照组比较,5.0和10.0 mg·kg^-1SchB组小鼠在高架十字迷宫中进入开臂的次数百分率明显增加（P<0.05或P<0.01）,开臂滞留时间百分率明显增加（P<0.05或P<0.01）,在高架零迷宫中进入开臂次数百分率明显增加（P<0.01）,开臂探头次数百分率明显增加（P<0.01）。与空白对照组比较,10.0 mg·kg^-1SchB组小鼠外周血及脑组织中GABA水平明显增加（P<0.01）,Glu水平明显降低（P<0.01）,GABA/Glu的比值明显升高（P<0.01）,脑组织中GABAA Rα1和GABAA Rγ2表达水平明显升高（P<0.01）。结论：SchB对小鼠具有抗焦虑作用,该作用可能与调节外周血和脑组织中GABA和Glu水平及脑组织中GABAARα1和GABAARγ2表达水平有关。     

五味子乙素对染矽尘大鼠血清唾液酸和铜蓝蛋白的影响

目的 观察五味子乙素(schisandrin B,Sch-B)对染矽尘大鼠血清唾液酸(sialic acid,SA)和铜蓝蛋白(cerulopasmin,CP)的影响. 方法 将48只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B干预组,每组16只.采用暴露式气管内注入法给染矽尘组和Sch-B干预组大鼠一次性染矽尘(50 m...     

五味子乙素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的：观察五味子乙素（SchB）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对HSPA12B/PI3K/Akt信号通路的影响,并探讨其作用机制。方法：将130只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注损伤模型组（模型组）、低剂量五味子乙素组（SchB 3 mg·kg^-1,SchB₁组）、中剂量五味子乙素组（SchB 10 mg·kg^-1,SchB₂组）和高剂量五味子乙素组（SchB 30 mg·kg^-1,SchB₃组）。假手术组大鼠不插栓线;模型组大鼠建立脑缺血2 h再灌注22 h模型;SchB₁、SchB₂和SchB₃组分别用不同剂量的SchB预先给药7 d后再造模。神经功能缺损评分检测大鼠神经功能障碍情况,通过脑组织含水量的测定检测脑组织水肿情况,甲苯胺蓝染色检测脑组织形态学改变,ELISA法检测脑组织匀浆中核因子kappa B（NF-κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测脑组织中热休克蛋白A12B（HSPA12B）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）表达水平。结果：与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分明显升高（P<0.01）,脑组织含水量升高（P<0.01）,脑组织结构疏松,间质出现水肿,NF-κB、TNF-α、IL-1和IL-6水平升高（P<0.01）,HSPA12B和p-Akt蛋白表达水平降低（P<0.01）;与模型组比较,SchB₁、SchB₂和SchB₃组大鼠神经功能评分明显降低（P<0.01）,SchB₂和SchB₃组脑组织含水量减少（P<0.05）,神经细胞水肿减轻,空泡减少,NF-κB、TNF-α、IL-1和IL-6水平降低（P<0.05或P<0.01）,SchB₂和SchB₃组HSPA12B蛋白表达水平升高（P<0.05）,SchB₁、SchB₂和SchB₃组p-Akt蛋白表达水平升高（P<0.01）。结论：SchB对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能与调控HSPA12B/PI3K/Akt信号通路、抑制再灌注时炎症反应对神经细胞的损伤有关。     

五味子乙素通过p38MAPK信号通路对结肠癌SW480细胞凋亡和侵袭的影响

目的: 观察五味子乙素(SchB) 对人结肠癌 SW480 细胞凋亡和侵袭的作用及对p38MAPK信号通路的影响,阐明其作用机制。方法: 将处于对数生长期的SW480细胞分为对照组、SchB低剂量组(20 μmol·L^-1,SchB₁组)、SchB中剂量组(40 μmol·L^-1,SchB₂组)和SchB高剂量组(80 μmol·L^-1,SchB₃组)。用不同剂量SchB处理SW480细胞后,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Transwell法检测SW480细胞的侵袭情况,Western blotting法检测SW480细胞中p-p38、p38、p-p53和p53蛋白表达水平。结果: 与对照组比较,SchB低、中、高剂量组SW480细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高(均P<0.01),SW480细胞的侵袭率及穿膜细胞数明显降低(P<0.01),p-p38和p-p53蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论: SchB可抑制结肠癌SW480细胞的增殖和侵袭,促进细胞的凋亡,p38MAPK信号途径可能参与了SchB对肿瘤细胞的抑制作用。     

五味子乙素对脑胶质瘤SHG-44细胞VEGF表达水平的影响及其细胞生长抑制作用

目的：探讨五味子乙素（Sch B）作用于脑胶质瘤SHG-44细胞后对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及细胞生长抑制作用,阐明其可能机制。方法：培养脑胶质瘤SHG-44细胞,将其分为对照组和Sch B　50、100、200 mg•L^-1组,MTT法检测不同剂量Sch B作用SHG-44细胞后其生长情况;酶联免疫吸附实验和细胞免疫组织化学方法观察Sch B作用后SHG-44细胞VEGF蛋白表达情况。结果：与对照组比较,200 mg•L^-1Sch B作用SHG-44细胞24 h,细胞增殖活性轻度增加（P<0.05）;Sch B （50、100 和200 mg•L^-1）作用48或72 h,细胞增殖活性明显降低（P<0.05或P<0.01）;200 mg•L^-1Sch B作用SHG-44细胞72 h,培养上清中VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.01）。与对照组比较,Sch B作用SHG-44细胞72 h后,Sch B 50、100和200 mg•L^-1组VEGF蛋白阳性表达率均明显降低（P<0.01）。结论：Sch B能明显抑制SHG-44细胞VEGF蛋白表达及细胞生长,提示Sch B可能通过抑制脑胶质瘤血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

五味子丙素体外抗胃癌细胞系AGS的活性

目的：探讨中药五味子中五味子丙素的体外抗胃癌活性。方法：在胃癌细胞AGS中,采用MTT法和集落形成实验测定五味子丙素对细胞的生长抑制活性,采用流式细胞仪测定其诱导细胞凋亡的活性,采用Western blot法测定其对凋亡蛋白表达的影响。并用MTT法测定其对不良反应较大的传统胃癌一线化疗药物5-FU的增敏活性。结果：五味子丙素对胃癌细胞AGS生长抑制的IC50为（35.73±0.28）μmol/L,并能浓度剂量依赖性地抑制细胞集落形成,诱导细胞凋亡,上调凋亡蛋白Cleaved-PARP,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达（P＜0.05）。结论：五味子丙素对胃癌细胞具有较好的抑制生长和诱导凋亡的活性。