红细胞生成素抑制活性氧诱导的红细胞衰亡

目的:观察红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对过氧化氢(H_2O_2)刺激后红细胞衰亡(eryptosis)和红细胞中活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)生成的影响,并探讨其可能机制。方法:将1%健康人红细胞悬液在以下3组不同的体外培养液中孵育:对照组(C组,培养基为PBS液)、H_2O_2组(H组,培养基为H_2O_2终浓度100μmol/L的PBS液)和EPO组(E组,培养基为H_2O_2终浓度100μmol/L、EPO终浓度2×10~4U/L的PBS液)。分别在孵育24 h和60 h时,留取红细胞以备检测。使用流式细胞术检测红细胞的衰亡率、红细胞内ROS和红细胞内钙离子浓度(_i~([Ca2+])),观察各检测指标的变化并分析其相关性。结果:红细胞衰亡率在C组随孵育时间延长而增加,在相同观察时点,H组较C组明显增加(P0.01),E组较H组明显降低(P0.01)。H组红细胞的ROS生成较C组明显增多,_i~([Ca2+])较C组明显升高(P0.01);E组红细胞的ROS生成较H组明显减少,_i~([Ca2+])较H组明显降低(P0.05或P0.01)。结论:H_2O_2诱导健康红细胞加速衰亡,而EPO可以抑制H_2O_2诱导的红细胞衰亡,其机制可能与抗氧化及_i~([Ca2+])的改变有关。     

左卡尼汀联合促红细胞生成素治疗肾性贫血疗效观察

目的 观察左卡尼汀联合促红细胞生成素治疗肾性贫血疗效.方法 将40例血液透析合并肾性贫血患者随机分成两组,一组单独应用促红细胞生成素,另一组在应用促红细胞生成素的基础上联合应用左卡尼汀,治疗12周后比较两组患者贫血纠正情况.结果 单独使用促红细胞生成素对肾性贫血有改善作用,联合应用左卡尼汀效果更显著,差异有统计学意义(P<0.05).结论 左卡尼汀联合促红细胞生成素治疗肾性贫血疗效更显著.     

左卡尼汀对慢性肾功能衰竭血液透析患者红细胞免疫功能及抗氧化功能的影响

目的:观察左卡尼汀对慢性肾功能衰竭血液透析(血透)患者红细胞免疫功能及抗氧化功能的影响。方法:维持性血透患者44例,随机分为治疗组(23例)和对照组(21例)。治疗组静滴左卡尼汀1.0g,3次/周,疗程3个月;对照组静滴等量生理盐水;治疗前后检测红细胞C3b花环率(RBC-C3b)、红细胞免疫复合物花环试验(RBC-IC)及红细胞过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和血脂。结果:治疗组红细胞SOD活性增加,RBC-C3b明显升高(P<0.05),但血浆MDA、RBC-IC和低密度脂蛋白均显著下降(P<0.05)。结论:静滴左卡尼汀可改善慢性肾功能衰竭血透患者的红细胞免疫功能低下及提高抗氧化能力。     

肿瘤坏死因子-α诱导红细胞衰亡的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TN F-α）在红细胞衰亡中的作用.方法 将分离的小鼠红细胞经TNF-α（1 ng/ml）处理6、12、24、48、72 h或在不同质量浓度（0.1、1、10 ng/ml）处理24h后,利用流式细胞仪检测红细胞前向散射（FSC）值的变化、红细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）和神经酰胺的标记率.结果 经TNF-α处理后的小鼠红细胞较对照组于24h后出现FSC减小（（81.5±1.02）％比（87.6±0.55）％,P＜0.05）,膜的PS外露水平和神经酰胺含量增加（（5.5±1.07）％比（2.7±0.17）％,（2.1±0.23）％比（0.7±0.26）％）,差异均有统计学意义（P＜0.01）,且随着时间的推移变化趋势更加明显.结论 TNF-α可诱导红细胞体积缩小,促进红细胞膜PS外露以及神经酰胺的增加,是红细胞衰亡的触发因素.     

左卡尼汀治疗冠心病心力衰竭疗效观察

目的本研究旨在观察左卡尼汀在治疗心力衰竭疗效。方法将冠心病心力衰竭患者87例分为两组，对照组采用常规药品治疗，治疗组在使用常规药品治疗的基础上加用左卡尼汀4g日一次静脉点滴10d。治疗前及治疗后1个月观测其LVEF、6min步行距离、心肌缺血发作次数。结果治疗组心功能改善及心肌缺血改善情况明显优于对照组。结论左卡尼汀治疗冠心病及高血压所致心力衰竭作用明显，使其治疗的一个趋势。     

左卡尼汀抑制过氧化氢介导的NFATc3核转位

 目的:探讨在过氧化氢(H2O2)刺激下,左卡尼汀对心肌细胞内胞浆活化T细胞核因子3（NFATc3）的表达及分布的影响。方法:以200 μmol/L H2O2刺激心肌细胞12 h建立氧化应激模型。在药物处理组,于氧化刺激前30 min加入左卡尼汀及钙调神经磷酸酶（CaN）特异性抑制剂环孢素A(CsA)。待刺激完成后,利用蛋白质免疫印迹法检测细胞内总NFATc3,以及胞浆内和胞核内NFATc3的水平,并以免疫荧光法检测NFATc3在细胞中的分布状况。结果:H2O2刺激不影响心肌细胞NFATc3的表达,但可诱导其由胞浆至胞核的转位。左卡尼汀预处理可以显著抑制NFATc3的核转位。结论: 左卡尼汀可通过抑制NFATc3的核转位发挥其抗氧化应激损伤的作用。     

尿毒症患者急性缺氧状态下血清红细胞生成素浓度的变化

７例尿毒症贫血患者在自发急性缺氧状态下，其血清红细胞生成素（ＥＰＯ）浓度显著提高（平均７倍），且与ＰＯ２呈负相关。缺氧状态纠正后血清ＥＰＯ浓度下降。提示尿毒症贫血患者的ＥＰＯ氧依赖调控系统功能尚存在，但处于不敏感的低调状态。进一步了解其机遇，则可能通过促进内源性ＥＰＯ的生成，有助于悄毒症贫血的治疗。     

左卡尼汀通过内质网应激ATF6通路抑制高糖诱导的HAECs凋亡

目的:探讨左卡尼汀对高糖诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)凋亡的影响及相关分子机制。方法:以高糖培养基培养HAECs并诱导其发生凋亡,同时以不同浓度(50、100和200μmol/L)的左卡尼汀对HAECs进行处理。以MTT法对细胞活力进行检测;Hoechst 33258染色及流式细胞术评估细胞凋亡情况;比色法对HAECs的caspase-3活性进行检测;Western blot法对细胞内质网应激信号通路蛋白及磷酸化水平进行分析。结果:高糖培养诱导HAECs产生凋亡并显著抑制细胞活力。高糖培养的HAECs中产生内质网应激,其蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、肌醇需酶1(IRE1)及活化转录因子6(ATF6)信号通路均被显著激活,能够通过下游caspase-4/3级联瀑布反应诱导细胞凋亡。然而,左卡尼汀能够显著减少高糖诱导的HAECs细胞凋亡,使细胞存活率升高,且呈现出浓度依赖性。左卡尼汀可显著降低高糖培养HAECs诱发的内质网应激,通过下调位点1蛋白酶(S1P)及位点2蛋白酶(S2P)表达降低其对ATF6剪切形成的促凋亡因子ATF6 p50的水平;而左卡尼汀并未对PERK及IRE1信号通路活性表现出抑制作用。结论:左卡尼汀能够抑制高糖对HAECs凋亡的诱导作用,其作用机制可能为抑制内质网应激相关的ATF6信号通路。     

左卡尼汀治疗慢性心力衰竭48例临床观察

目的 讨论在常规治疗基础上给予左卡尼汀治疗慢性心力衰竭的临床观察.方法 2010年2月～2011年2月收住研究院医院慢性心力衰竭患者48例随机分为治疗组和对照组各24例.两组均给予常规利尿剂、扩血管及洋地黄类药物治疗,治疗组加用左卡尼汀3 g加入0.9%N-S 250ml静滴,2周为一疗程.结果 治疗组中显效15例,有效7例,无效2例,总有效率91.7%;对照组中显效10例,有效8例,无效6例,总有效率75%.两组比较差异有显著性(P相似文献   

尿毒症患者红细胞免疫功能等几项指标的观察

<正> 尿毒症时患者机体免疫功能常出现紊乱、防御能力低下,以致极易导致继发性感染发生率上升。其原因除毒素诱发外,有报道患者细胞吞噬功能和血浆中纤维结合蛋白量明显低下,且与患者免疫功能减低有关。本文以尿毒症患者为对象采用多项指标探讨其红细胞和T淋巴细胞活性,同时检测几项体液免疫水平以探讨其相关性。现报道如下。     

尿毒血清对人类肾小管上皮细胞增殖及转分化的影响

目的: 探讨尿毒血清对人近端肾小管上皮细胞株( HK-2)增殖及转分化的影响,以期阐明尿毒症毒素在人肾小管－间质纤维化中的作用。方法: 采用MTT比色法检测尿毒血清对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测尿毒血清对细胞周期、细胞增殖指数(PI)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分率的影响。结果: MTT法示5％-20％浓度尿毒血清组A₄₉₀值均高于正常对照组,流式细胞检测示10％-20％浓度尿毒血清组G₁期细胞均低于正常对照组,PI指数均高于正常对照组,但不同浓度尿毒血清组组间无明显差异;各浓度尿毒血清组α-SMA阳性细胞百分率均高于正常对照组,且随着尿毒血清浓度的增高而增高。结论: 慢性肾衰竭患者体内蓄积的尿毒症毒素可能通过促进肾小管上皮细胞增殖及转分化从而加速肾小管－间质纤维化进程,导致肾功能进行性恶化。     

左卡尼汀经β-catenin信号通路保护环磷酰胺所致大鼠睾丸损伤

目的　探讨左卡尼汀（L-carnitine，LC）对环磷酰胺（cyclophosphamide，CP）所致大鼠睾丸损伤的保护作用及其机制。 方法　将18只雄性大鼠随机分为3组：生理盐水（NS）组，CP组，CP+LC组，腹腔注射给药。观测大鼠体重、精神等一般情况及睾丸重量，采用HE染色检测睾丸损伤情况，免疫组化和Western blot法检测睾丸内β-catenin的表达。 结果　CP组大鼠睾丸重量低于NS组（P<0.05），CP+LC组大鼠睾丸重量比CP组有所恢复（P<0.05）；HE染色显示CP组和CP+LC组比NS组生精细胞层数减少（P<0.05），但CP+LC组较CP组生精细胞层数增多（P<0.05）；免疫组化和Western blot均显示CP组β-catenin的表达量高于NS组（P<0.05），CP+LC组β-catenin表达量低于CP组（P<0.05）。 结论　左卡尼汀可下调β-catenin信号进而对环磷酰胺所致大鼠睾丸损伤起到保护作用，可能对抗瘤药引起的男性生育障碍具有潜在的治疗意义。     

The effect of several uremic parameters on uremic serum inhibition of lymphocyte blastogenesis

Uremic sera are known to inhibit thymidine incorporation of normal lymphocytes. The nature of the factor(s) responsible for this inhibitory effect has not been completely elucidated. In this study a possible correlation was investigated between a number of uremic blood constituents altered with the progression of the disease and the immunoinhibitory effect of the respective sera. No such correlation was found with the values of hematocrit, urea, creatinine, calcium and phosphorus. On the other hand a significant negative correlation emerged between H⁺ and Mg²⁺ ion levels and the inhibition imposed on normal lymphocyte thymidine incorporation. This apparently paradoxical result would indicate that with regard to these two parameters the greater the severity of renal failure the smaller would be the immunoinhibitory effect of the respective serum.The inhibition imposed by uremic serum on immune functions is probably a multifactorial phenomenon, in which H⁺ and Mg²⁺ might play a role antagonistic to inhibitory factors.     

黄芪通过抗氧化抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

目的:研究黄芪对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠氧化/抗氧化水平的影响,探讨黄芪抗纤维化的可能机制。方法:将36只SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(生理盐水气管内雾化)、博莱霉素组(博莱霉素3mg/kg气管内雾化)和黄芪治疗组(博莱霉素3 mg/kg气管内雾化后黄芪注射液1.7 g·kg~(-1)·d~(-1)腹腔内注射),实验第14天收集小鼠肺组织及血清标本,取小鼠肺组织行HE和Masson染色;RT-PCR法测小鼠肺组织超氧化物歧化酶(SOD)1/2/3、过氧化氢酶(CAT)、NADPH氧化酶2/4(NOX2/4)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA水平;Western blot法测α-SMA和NOX2/4蛋白表达水平;比色法检测血清丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)。结果:博莱霉素组小鼠肺组织病理损伤较正常组明显加重,α-SMA mRNA和蛋白表达,MDA/T-AOC,NOX2、NOX4和SOD3 mRNA表达,以及NOX2蛋白表达较正常组显著上升,黄芪治疗组则显著逆转上述改变;博莱霉素组小鼠NOX4蛋白表达较正常组显著下降,而黄芪治疗组较博莱霉素组显著上升;博莱霉素组和黄芪治疗组小鼠SOD1和CAT mRNA表达均较正常组显著下降;SOD2 mRNA在3个组中表达的差异无统计学显著性。结论:黄芪能够减缓博来霉素诱导的肺纤维化形成,其机制可能与调节氧化/抗氧化平衡有关。     

Nifedipine inhibits hypoxia induced transvascular leakage through down regulation of NFkB

We have studied the prophylactic administration of nifedipine and its molecular mechanism involved in reducing the transvascular leakage and inflammation in rats under hypoxia. Rats exposed to an altitude of 7620m for 6h resulted into significant increase in transvascular leakage, oxidative stress with increased NFkB expression in lungs followed by significant increase in pro inflammatory cytokines (IL-1, TNF-α) with up regulation of cell adhesion molecules (ICAM-I, VCAM-I, E-selectin, and P-selectin) in the lungs over control. Prophylactic administration of nifedipine significantly reduced the transvascular leakage, oxidative stress, inhibited the up regulation of NFkB in lungs of rats compared to control. In addition, nifedipine significantly suppressed the levels of proinflammatory cytokines and cell adhesion molecules and stabilized the HIF1-α accumulation in the lungs of rats compared to control. These results indicate that, nifedipine has an inhibitory effect on initial leaking and showed reduction in progression of inflammation through down regulation of NFkB activity in lungs of rats under hypoxia.     

高脂饮食导致大鼠肝脏胰岛素抵抗的作用机制研究

目的: 本研究旨在建立SD大鼠胰岛素抵抗模型,观察高脂饲料喂养的SD大鼠肝脏中氧化应激以及胰岛素抵抗的发生,分析胰岛素抵抗状态下活性氧(ROS)的变化,初步探讨ROS的主要来源。方法: 以高脂饲料喂养6只4周龄雄性SD大鼠12周,建立大鼠胰岛素抵抗模型。用优越血糖仪以电子感应法测定血糖,放射免疫法检测血清胰岛素水平。二氢乙啶(DHE)染色观察肝脏组织中的ROS水平。Western blotting检测NADPH氧化酶3(NOX3)的表达。结果: 以高脂饲料喂养12周后,大鼠空腹血糖水平略有上升,但与对照组的大鼠相比无显著差异,而胰岛素敏感指数降低。蒽酮法的检测结果显示高脂饲料喂养大鼠肝组织糖原含量显著降低,高脂饮食大鼠肝组织中NOX3的表达显著增加,DHE染色显示肝组织ROS水平显著增加,提示ROS在肝胰岛素抵抗发生中起重要作用。结论: 高脂饲料喂养SD大鼠胰岛素敏感指数降低,肝组织中NOX3表达和ROS水平显著增加,糖原含量显著降低。     

Antioxidant response to oxidative stress induced by exhaustive exercise

The aim of this work was to demonstrate the occurrence of oxidative stress during exhaustive exercise and to determine the antioxidant response. Eight voluntary male subjects participated in this study. The exercise was a cycling mountain stage (171 km) and the cyclists took a mean+/-S.E.M. time of 270+/-12 min to complete it. Blood samples were taken before the cycling stage, immediately after the stage, 3 h after finishing the stage and on the morning of the following day. We determined the activities of erythrocyte antioxidant enzymes, blood levels of oxidised glutathione, plasma levels of antioxidant vitamins and carotenoids, and the serum lipid and cholesterol profile. The mountain cycling stage induced significant increases in catalase and glutathione reductase activities. Significant decreases in glutathione peroxidase activity, both determined with hydrogen peroxide and with cumene hydroperoxide as substrates, were observed. Blood oxidised glutathione and serum uric acid rose after the stage. Plasma vitamin E increased after the stage but dropped to below basal values after 3 h of recovery. Triglycerides and VLDL-cholesterol increased significantly after the stage and remained high 3 h after the cycling stage. The mountain cycling stage induced oxidative stress, as was evidenced by the increases in blood GSSG and in serum urate concentrations and by the pattern of change of erythrocyte antioxidant enzyme activities. A specific utilisation of alpha-tocopherol against oxidative stress during recovery was evidenced.