类风湿关节炎滑膜细胞凋亡机制的研究进展

类风湿关节炎(RA)是以关节滑膜炎症为主要病理表现的慢性全身性自身免疫性疾病,以慢性、对称性、多关节滑膜炎和关节外病变为主要临床表现,好发于手、腕、足等小关节,反复发作,呈对称分布,其滑膜炎持久反复发作,可导致关节内软骨和骨的破坏,关节功能障碍,甚至致残。RA发病机制至今尚未阐明。滑膜细胞增生,血管翳形成,骨与软骨破坏是其主要的病理特点。滑膜细胞信号转导异常、滑膜细胞增殖及凋亡失衡导致滑膜细胞增生,基因突变、原癌基因活化及细胞因子等与滑膜细胞的凋亡相关。     

类风湿关节炎与滑膜细胞凋亡研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性的炎症性关节病,表现为对称性多关节炎,可侵犯多个大小关节,并伴有晨僵、乏力、体重减轻及全身多系统受累.     

抑制类风湿关节炎滑膜细胞中药的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis)是一个累及周围关节为主的多系统性炎症性的自身免疫性疾病。属中医“痹证”范畴，具有反复发作、致残率高等特点。近年来对类风湿关节炎滑膜细胞有抑制作用的药物研究较多，尤其是中医药显示出了独特的优势，现将近年来对类风湿关节炎及动物模型滑膜细胞起抑制作用的中药及中成药综述如下。     

大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬的影响

目的 基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法 采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MDC法检测MH7A细胞自噬情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cGAS、STING、p-STING、LC3-I、LC3-II、P62和Beclin-1的蛋白表达水平。结果 MDC染色结果提示,大黄素能够增强MH7A细胞自噬;Western blot结果提示,大黄素可降低MH7A细胞自噬相关蛋白cGAS、STING、p-STING和P62的表达,增加LC3-II和Beclin-1的表达。加入自噬抑制剂3-MA后,MH7A细胞P62蛋白表达升高,LC3-II和Beclin-1蛋白表达降低。结论 大黄素可能通过下调cGAS/STING信号通路加速自噬,抑制MH7A细胞增殖。     

长春新碱对类风湿关节炎滑膜细胞作用的研究

目的 :评价长春新碱 (VCR)诱导滑膜细胞凋亡作用在治疗类风湿关节炎 (RA)中的意义。方法 :采用光镜、电镜、流式细胞仪及 DNA凝胶电泳等方法对不同浓度的 VCR诱导 9例体外培养的 RA病人及对照组 5例骨关节炎 (OA)与 4例正常人(NC)关节滑膜细胞凋亡情况进行了研究。结果 :加药前 RA、OA及 NC组凋亡细胞百分率分别为 3.8%± 0 .6 %、0 .8%± 0 .3%及0。加药后均显著升高 ,RA组可高达 6 7.5 %± 15 .1% (P<0 .0 1) ,OA组为 38.4%± 6 .8% (P<0 .0 1) ,NC组为 15 .7%± 1.5 % (P<0 .0 1)。 RA组凋亡细胞百分率显著高于 OA组 (P<0 .0 1)和 NC组 (P<0 .0 1)。结论 :诱导滑膜细胞凋亡可能是 VCR治疗 RA的机制之一 ,同时可为临床选择合理药物及药量提供依据     

甲氨蝶呤对类风湿关节炎滑膜细胞增生及细胞周期的影响

目的研究甲氨蝶呤(MTX)对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增生及细胞周期的影响,揭示MTX治疗RA的机制。方法应用MTS/PMS比色法和流式细胞术分别测定MTX处理和未处理RA患者滑膜细胞的细胞增生水平和细胞周期。结果加入不同浓度MTX(0.2~2.0 μmol/L),RA患者滑膜细胞接种后第4天起增生水平均显著低于未处理的RA患者滑膜细胞(P<0.05);细胞周期分析显示加入不同浓度MTX(0.2~2.0 μmol/L)后第5、8天,RA患者滑膜细胞停留在G1期的比例要比未处理的RA患者滑膜细胞明显增加(P< 0.05),而S、G2期的细胞比例比未处理的RA患者滑膜细胞则明显减少(P<0.05);MTX能以剂量依赖性明显抑制滑膜细胞的增生水平。结论MTX在治疗RA时,主要起到对RA患者滑膜细胞的增生及增生相关病理过程的抑制。     

自噬相关基因在类风湿关节炎滑膜组织的表达及调控机制

目的 研究自噬相关基因(ATG)在类风湿关节炎(RA)中的表达调控和自噬机制。方法 从GSE55235和GSE55457中鉴定出RA的差异表达基因(DEG),结合人类自噬数据库,筛选出差异表达自噬相关基因(DE-ATG)。利用STRING 11.0和GeneMANIA数据库建立蛋白互作网络。此外,NetworkAnalyst和Cytoscape建立转录因子-基因-miRNA共表达网络。最后,受试者工作特征曲线分析和DrugBank鉴定预测生物标志物的效能和靶向药物的性能。GraphPad prism 8.2.1和R 4.0.3用于统计分析和图形制作。结果 485个DEG在T细胞激活、激素调节、破骨细胞分化、RA和趋化因子等信号通路富集。11个DE-ATG通过hsa-mir-155-5p、RUNX1、TP53和SOX2等调控RA滑膜组织的表达,与四氯二苯二氧芑、二氧化硅有较强的环境因子调控关系。受试者工作特征曲线分析确定了具有良好敏感性和特异性的基因,如MYC、MAPK8、CDKN1A和TNFSF10,可用于区分某些表型,这可能是RA的新型生物标志物。结论 DE-ATG在RA中表达下调可能会促进软骨细胞凋亡和分解,新型生物标志物的确立为诊断和治疗RA提供了新思路和方法,转录因子-基因-miRNA网络的建立为解析滑膜炎症和关节软骨破坏提供直接证据。     

中医药对类风湿关节炎滑膜细胞作用机制研究概况

类风湿关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病,滑膜炎是其特征性病理改变,大量新生血管生成进而形成血管翳,逐渐侵袭关节软骨,最终导致关节破坏、功能丧失。因此抑制滑膜细胞增殖、促进滑膜细胞凋亡是治疗RA的关键。本文对近年来中医药诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡、抑制其增殖的相关文献作出综述,为临床研究提供参考。     

小檗碱抑制类风湿关节炎患者的成纤维样滑膜细胞的自噬并促进其凋亡：基于下调ROS/mTOR信号通路

目的 探究小檗碱（BBR）对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLSs）凋亡/自噬失衡的调控作用及机制。方法 CCK-8法检测BBR对RA-FLSs的增殖抑制作用,实验设空白对照组、TNF-α(25 ng/mL)组、TNF-α+BBR(10、20、30、40、50、60、70、80μmol/L)组,Annexin V/PI双染流式法和JC-1免疫荧光染色检测BBR对RA-FLSs凋亡的影响,Western blot检测BBR对RAFLSs自噬和凋亡相关蛋白表达水平的影响。进一步增加自噬诱导剂RAPA和自噬抑制剂氯喹（CQ）作为对照,激光共聚焦检测mCherry-EGFP-LC3B观察自噬流变化;并设置活性氧（ROS）模拟物H2O2和ROS抑制剂NAC观察BBR对ROS、mTOR、p-mTOR水平的影响。结果 CCK-8结果显示BBR可呈时间和浓度依赖性抑制RA-FLSs增殖活力,流式和JC-1染色结果显示BBR(30μmol/L)可显著增加RA-FLSs凋亡率（P<0.01）,降低线粒体膜电位（P<0.05）。Western blot结果显示BBR处理后Bcl-2/Ba...     

姜黄素诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡及其机制研究

目的 观察姜黄素(CUR)对体外培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)凋亡的诱导作用及其机制.方法 用不同浓度CUR处理在体外培养的RA-FLSs细胞后,CCK-8法检测CUR对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测CUR对RA-FLSs细胞凋亡的诱导效应;蛋白质免疫印迹方法(WB)检测细胞凋亡的外源途径中相...     

雷公藤甲素抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞的自噬与存活

目的 探讨雷公藤甲素抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞（rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLSs）的自噬与存活。方法 体外培养人RA-FLSs细胞,使用不同浓度的雷公藤甲素（0、10、20、30、40、50 ng/mL）处理RA-FLSs细胞,处理24、48、72 h后,采用CCK-8试剂盒测定RA-FLSs的增殖能力,确定对细胞增殖能力抑制50%时所需的雷公藤甲素浓度（半数最大抑制浓度,IC₅₀）。基于RA-FLSs增殖能力测定的实验结果,选取最佳雷公藤甲素作用浓度处理RA-FLSs,处理24、48、72 h后,检测RA-FLSs自噬荧光强度;采用Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、Bax和caspase-3蛋白表达水平。结果 雷公藤甲素呈剂量依赖性的抑制RA-FLSs细胞的增殖,雷公藤甲素浓度为40 ng/mL时,细胞增殖活力显著下降（P<0. 001）,24、48、72 h的IC₅₀分别是42.31、40.71、42.71 ng/mL。因此后续的实验选用雷公藤甲素的上药浓度为40 ng/mL。与空白组相比,40 ng/mL雷公藤甲素作用RA-FLSs 24、48、72 h后,均能减弱LC3Ⅱ自噬荧光、显著降低自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1表达水平（P<0. 05）,显著增加凋亡蛋白Bax、caspase-3表达水平（P<0.05）;且在处理48 h时,40 ng/mL雷公藤甲素抑制自噬及促进凋亡的作用较处理24 h及72 h强。结论 雷公藤甲素治疗类风湿性关节炎的作用机制可能与通过抑制RA-FLSs自噬,从而对RA-FLSs产生抑制增殖和促进凋亡作用。这一发现表明雷公藤甲素是一种治疗类风湿性关节炎的潜在药物。     

类风湿性关节炎滑膜细胞凋亡研究进展

类风湿关节炎（RA）是一种主要累及小关节的慢性自身免疫性疾病。研究表明，RA滑膜细胞与疾病的发展存在着某些相关性。RA来源的滑膜细胞主要是指淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞、B细胞和内皮细胞以及成纤维细胞，近来研究发现滑膜细胞的凋亡在RA的发病过程中起着十分重要的作用。     

白藜芦醇体外抑制类风湿关节炎滑膜细胞的增殖及其机制

目的：检测白藜芦醇（Res）体外对类风湿关节炎（RA）滑膜细胞增殖的影响，并探讨其可能机制。方法：用不同浓度Res处理RA滑膜细胞24h后，采用四唑蓝（MTT）法检测滑膜细胞的增殖水平；用缺口末端标记法（TUNEL）和流式细胞仪检测其凋亡百分率；采用Western-blot分析caspase-3酶原的裂解；用比色法测定Res（200μmol／L）处理RA滑膜细胞不同时间及不同浓度的Res处理RA滑膜细胞12h后，caspase-3的相对活性。结果：加入不同浓度Res处理RA滑膜细胞24h后，增殖水平均显著低于对照组（P〈0．01）；对照组与不同浓度Res处理组凋亡细胞百分率比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；用200μmol／LRes分别处理RA滑膜细胞不同时间，caspase-3活性与未处理组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；用不同浓度的Res处理细胞12h，caspase-3活性成浓度依赖性升高：用不同浓度Res处理培养的RA滑膜细胞24h，caspase-3酶原的表达随药物浓度的增加而减少。结论：Res在体外抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖，诱导细胞凋亡，可能与caspase-3的活化有关。     

细胞自噬与肿瘤发生关系研究进展

细胞自噬可通过溶酶体吞噬降解自身结构,分为大自噬、小自噬和分子伴侣介导自噬,具有广泛的生物学作用。细胞自噬在肿瘤的发生、发展过程中起双重调节作用,既可对肿瘤细胞产生抑制作用,又可促进其发生和发展,肿瘤细胞可释放特定的信号分子来诱导间质细胞自噬,而此过程中所产生的营养物质又为肿瘤细胞的生长、繁殖和转移提供了必要的基础和条件。     

类风湿关节炎病人滑膜细胞增生与fas和bcl-2基因的表达

目的探讨类风湿关节炎（ＲＡ）病人滑膜细胞增生是否与细胞凋亡有关。方法通过体外转录合成,并标记ｆａｓ及其配体（ｆａｓＬ）和ｂｃｌ－２ＲＮＡ探针,应用原位杂交方法检测１９例滑膜组织的基因表达。用免疫组织化学方法检测蛋白表达。用ＤＮＡ电泳和流式细胞分析仪检测细胞凋亡。结果７例ＲＡ病人滑膜衬里层细胞明显增生,其中６例有ｆａｓｍＲＮＡ表达,５例表达ｂｃｌ－２,而ｆａｓＬｍＲ－ＮＡ在所有病例均不表达。在ＲＡ滑膜衬里层中,ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ总是伴随ｆａｓ而表达,且ｆａｓ和ｂｃｌ－２的表达率较骨性关节炎（ＯＡ）及正常对照者（ＮＣ）明显增高（Ｐ＜０．０５）。免疫组织化学结果表明,ｆａｓ和ｂｃｌ－２蛋白在滑膜衬里层有表达。从６例ＲＡ、４例ＯＡ病人及３例正常对照者滑膜组织中提取ＤＮＡ,仅１例ＯＡ病人可见典型的ＤＮＡ梯形图形。培养的ＲＡ和ＯＡ病人滑膜细胞经流式细胞分析仪检测,表明自发凋亡的细胞很少（＜５％）。结论ＲＡ病人滑膜细胞内不存在明显的细胞凋亡现象,ｂｃｌ－２过量表达可能抑制了ＲＡ滑膜细胞凋亡,是ＲＡ滑膜细胞增生的原因之一。     

类风湿关节炎滑膜切除手术时机的选择

目的探讨类风湿关节炎（ＲＡ）滑膜切除的最佳时机。方法７年间对６４例ＲＡ患者８６个膝关节行开放性滑膜切除术,双侧滑膜切除２２例,单侧４２例,６４例中Ⅰ期８例,Ⅱ期２６例,Ⅲ期２２例,ＩＶ期８例。术后随访时间２～９２个月,平均３８．２个月。疼痛缓解,肿胀减轻是滑膜切除最明显的疗效指标。结果本组患者Ⅰ期优良率１００．０％,Ⅱ期８７．２％（Ⅰ、Ⅱ期总优良率９０．０％以上）,Ⅲ、Ⅳ期３１．５％。本组共７２．９％的患者自我评价满意。结论ＲＡ患者经严格内科保守治疗半年以上,关节炎仍继续发展,特别是在膝关节,如关节持续肿胀,滑膜肥厚硬韧,而浮髌感并不明显时,应及早行滑膜切除术,Ⅰ、Ⅱ期手术优良率高于Ⅲ、Ⅳ期。     

类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的表观遗传学研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病,其基本病理改变为滑膜炎。滑膜成纤维细胞(FLS)是关节滑膜衬里层的主要构成组分,并具有侵袭性表型的表观遗传印记特征,可促进RA的关节破坏。近年来,表观遗传学对RA FLS功能的影响越来越受到广泛关注,靶向FLS的治疗也为RA提供了新的治疗方向。作者综述表观遗传学在RA FLS中的研究进展,为RA的治疗提供个体化的思路。