睡眠剥夺对大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的：探讨睡眠剥夺对大鼠脑组织一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）影响。方法：采用小平台水环境法（Flower Pot)制作大鼠睡眠剥夺模型，采用化学法和酶法观察不同时间睡眠剥夺后大鼠额叶、海马、中脑和下丘脑NO含量及NOS活性变化。结果：与正常对照组及大平台组比较，大鼠在SD后额叶和海马的NO含量及NOS活性增高，有显著性差异（P＜0．01－0．05），其余脑区无显著性差异（P＞0．05）。随着剥夺时间的延长，额叶和海马NO含量及NOS活性增高更加明显。结论：睡眠剥夺可致NO及NOS升高，可能与其学习障碍有关，NO可能参与大鼠的睡眠调节。     

神经系统中的一氧化氮和一氧化氮合酶

<正> 80年代初Funchgott等发现许多血管扩张剂(如ACh)的扩张血管作用是由于血管内皮受到刺激释放血管舒张因子,此因子引起血管平滑肌松弛,从而引起血管扩张;而并非由于激动其受体而直接产生者。后来的研究表明,血管舒张因子就是一氧化氮(NO)。近年来,业已从多种组织中提取了一氧化氮合酶(NOS)。在脑组织,已证实NOS就是依赖还原型辅酶Ⅱ的硫辛酸脱氢酶(NADPH Diaphorase,ND)。本文对NOS和NO的一些基本问题做一综述。     

吸烟大鼠一氧化氮合酶和一氧化氮的变化

目的:观察吸烟对大鼠肺组织iNOS、eNOSmRNA和蛋白表达以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中NO的影响, 探讨不同类型的NOS在吸烟所致慢性气道炎症中的作用。方法:选用Wistar大鼠80只随机分为对照组, 被动吸烟组, iNOS抑制剂L-NIL干预组及NOS抑制剂L-NAME干预组。用免疫组化法检测iNOS及eNOS的蛋白表达, 用RT-PCR检测iNOS及eNOSmRNA的表达, 用Griess法测定BALF中的NO^-₂/NO^-₃含量。结果:吸烟大鼠肺组织中iNOSmRNA及其蛋白表达增加, eNOSmRNA及蛋白表达下降, BALF中细胞总数及NO^-₂/NO^-₃显著增加(P＜0.05)。在体实验发现, L-NIL使BALF中细胞总数及NO^-₂/NO^-₃下降(P＜0.05);L-NAME对BALF中细胞总数及NO^-₂/NO^-₃无显著影响(P＞0.05)。结论:吸烟大鼠肺组织iNOSmRNA和蛋白表达增加, eNOSmRNA和蛋白表达减少。活化的iNOS产生大量NO促进炎症发展。     

一氧化氮、一氧化氮合酶与视网膜病变

1980年Furchgott和Zzwadzki^[1]发现血管内皮细胞能产生并释放内皮衍生舒张因子（endothelium-derived relaxing factor,EDRF),又证实其中含有一氧化氮（nitric oxide,NO).Palmaer^[2]等进一步证实EDRF细胞学本质即为NO,Bredt(1991年）[3]首次成功地克隆了一氧化氮合酶（nitric oxide,NOS),从而将NO的研究推进到细胞分子水平,有关NO及其在医学各领域的应用及研究迅速展开,目前研究已表明,NO是一种内源性血管扩张剂,炎症介质,血小板聚焦抑制因子和神经递质^[4],本文就NO与眼部疾病的关系作一综述。     

姜黄素对急性肺损伤大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨姜黄素对内毒素(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:雄性SD大鼠采用随机数字表法分为对照组、急性肺损伤模型组及姜黄素治疗组。采用一次性气管内滴注内毒素4 mg/kg制备急性肺损伤模型大鼠,治疗组于造模前15 min腹腔注射姜黄素200 mg/kg,于造模后3、6、12 h及24 h取肺组织,观察并比较各组肺组织形态学改变,并检测肺湿/干重比、肺含水量和肺组织中NO的含量,real-time PCR及免疫印迹法检测iNOS和eNOS的mRNA和蛋白表达。结果:模型组大鼠肺湿/干重比、肺组织含水量及NO含量均较对照组明显升高,iNOS的mRNA和蛋白表达量较对照组显著上调,而eNOS的mRNA和蛋白表达量较对照组显著下调。与模型组相比,姜黄素治疗组肺湿/干重比、肺含水量、NO含量均明显降低,iNOS的mRNA和蛋白表达量明显下调,eNOS的mRNA和蛋白表达量明显上调。结论:姜黄素可下调内毒素致急性肺损伤模型大鼠肺组织iNOS表达,并匕调eNOS表达。     

运动对大鼠额叶和纹状体一氧化氮合酶阳性细胞的影响

目的　研究运动对运动中枢神经型一氧化氮合酶阳性细胞的影响。方法　将大鼠分为对照组和运动组 ,运动组大鼠游泳 5d ,用免疫组织化学方法检测额叶、纹状体一氧化氮合酶阳性细胞的变化。结果　运动组额叶、纹状体一氧化氮合酶阳性细胞的染色比对照组深 ,运动组额叶阳性细胞数量平均每张切片为 (7.2± 1.9)个 ,比对照组 (2 .4± 0 .6 )个明显增加 (P <0 .0 5 ) ,运动组纹状体阳性细胞数量平均每张切片为 (35 .0± 7.2 )个 ,也比对照组 (8.2± 1.3)个增加显著 (P <0 .0 1)。结论　运动增加了运动中枢一氧化氮合酶阳性细胞的表达     

一氧化氮、一氧化氮合酶和心脏功能

一氧化氮合酶(nitric　oxide synthase,NOS)催化L-精氨酸的氧化反应生成L-胍氨酸和一氧化氮(nitric oxide,NO)。其产物NO可通过依赖cGMP(环磷酸鸟苷)途径与非依赖cGMP途径发挥其复杂的生理学功能,如在心血管系统具有维持血管张力、调节血压,抑制血管平滑肌细胞迁移、增生,抑制血小板聚集与白细胞对血管壁的粘附以及调节影响心肌收缩与舒张功能的作用,并参与心率变异调节功能。本文就3种NOS同工酶的基因及其基因表达调节及影响因素进行简要综述。着重介绍nNOS1的心脏自主神经调节机制,iNOS对心脏收缩抑制以及心脏保护与损伤的双重作用,并对eNOS参与心功能调节的机制及其它生理、病理学等方面研究进展进行综述。     

一氧化氮及其合酶

对生物体内ＮＯ的研究，已成为当今医学界最为活跃的研究领域。目前已知有三类ＮＯ合酶，分别由内皮细胞、神经细胞及巨噬细胞产生。但新的研究结果显示这三种酶并非仅仅局限于这些部位。在其它部位亦可存在。如骨骼肌中的神经性ＮＯ合酶，它产生的ＮＯ以两种不同方式分别调节骨骼肌的收缩和舒张。     

哮喘模型大鼠肺组织一氧化氮合酶的分布

研究一氧化氮 (NO)在哮喘大鼠肺组织中的作用。采用组化法观察一氧化氮合酶 (NOS)在大鼠哮喘模型肺组织中的分布 ,应用免疫组化法观察大鼠哮喘模型气道mIL 2R+ 细胞变化。结果显示 ,哮喘大鼠肺NADPH染色呈强阳性 ,并波及肺泡膈。肺组织中NOS含量明显高于对照组 [哮喘组 (37 44± 0 77)pmol/mg,对照组 (8 73± 0 79)pmol/mg],气道炎性细胞增多 ,特别是mIL 2R+ 细胞 [哮喘组mIL 2R+ 细胞为 (2 3 8± 7 9)个 ,对照组为 0个 ],而NOS抑制剂DMA组气道炎性细胞少 ,NADPH呈阴性。提示NO是哮喘大鼠的炎性效应分子。     

葛根素对糖尿病肾病大鼠肾组织中一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶水平的影响

目的：探讨葛根素（Pur）对糖尿病（DM）大鼠肾组织中一氧化氮（NO）含量、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法:一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）复制糖尿病大鼠模型。每日腹腔注射Pur注射液,共16周,收集24 h尿液测定尿蛋白（Upro）;腹主动脉取血分离血清测定血糖（Glu）和血尿素氮（BUN）。光镜下观察肾组织病理形态学改变;采用免疫组织化学技术观察肾组织中的iNOS定位与分布。制备组织匀浆,以检测肾组织中的NO活性。结果:与对照组相比,DM组出现肾功能下降、肾小球及肾小管肥大等异常表现,同时,iNOS表达及NO含量明显增加;应用Pur后肾功能及肾组织病理变化有明显改善,且iNOS表达及NO含量显著降低。结论:Pur可降低肾组织iNOS表达及NO含量从而减轻肾组织损伤,这可能是其减轻DM所致大鼠肾脏功能及结构异常的作用机制之一。     

一氧化氮/诱导型一氧化氮合酶在动脉粥样硬化过程中的作用

 目的：探讨一氧化氮（NO）/诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）过程中的动态变化,分析其对动脉粥样硬化形成过程的影响。方法：将60只SD大鼠随机分成2组：对照组及AS组,每组30只。AS组采用维生素D3腹腔注射联合高脂饲料饲养的方法构建动脉粥样硬化模型。用相关生化方法检测血清各项生化指标：总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖和钙离子,比色法检测血清NO浓度,并对主动脉行HE染色,免疫组化技术检测iNOS蛋白表达,将所得数据进行统计分析,用简单线性相关分析NO与钙离子及动脉粥样硬化指数的相关性。结果：90 d后成功构建了主动脉中膜钙化型动脉粥样硬化模型。血清NO浓度在动脉粥样硬化过程中逐步下降,各组间差异均有统计学意义（均P<0.05）。动脉粥样硬化过程中动脉粥样硬化指数与钙离子呈正相关,与NO呈负相关。在90 d的AS组粥样斑块区免疫组化技术检测到iNOS蛋白表达。结论:在动脉粥样硬化形成过程中,主动脉粥样斑块区iNOS蛋白高表达,但血清NO浓度逐渐降低,NO抗动脉粥样硬化作用减弱。     

Effect of focal cerebral ischemia on nitric oxide synthase expression in rats

Time- and cell-type-dependent immunohistochemical activity of nitric oxide synthase (NOS) was investigated in rat cerebral cortex following focal ischemia and the local concentration of nitric oxide (NO) was measured. NO concentration increased 2 min after the ischemia. Brain NOS-immunoreactive neurons increased in number 5 min after the ischemia. Endothelial cell NOS immunoreactivity was first detected in vascular endothelial cells and astrocytes 5 min after the ischemia, and it increased again during 60 min to 4 days after the ischemia in reactive astrocytes. Inducible NOS immunoreactivity was detected in astrocytes, vascular endothelium, and microglia/macrophages at the periphery of the ischemic core during 2–4 days after the ischemia.This study was presented at the 28th Annual Meeting of the Clinical Electron Microscopy Society of Japan, Osaka, October 17–19, 1996.     

脑挫伤后一氧化氮合酶阳性细胞及一氧化氮含量的变化

目的　探讨脑挫伤后一氧化氮合酶 (NOS)阳性细胞和一氧化氮 (NO)的变化和意义。方法　采用自由落体法致Wistar大鼠顶叶皮质挫裂伤动物模型。伤后 2 4h、72h和 7d取脑 ,制作冰冻切片 ,采用NADPH组织化学染色 ,显示脑挫伤区NOS阳性细胞。用硝酸还原酶法测定血液和脑组织中NO含量。结果　脑挫伤后 72h ,NOS阳性细胞数密度 (Nv)和面密度(Sv)明显增高 (P <0 0 5 ) ,而且 7d时仍无明显下降。血液和脑中NO含量也增高 ,并与NOS细胞呈平行关系。结论　脑挫伤后不同时间NOS细胞数目和NO含量有明显改变 ,提示NOS和NO参与了脑挫伤的病理过程     

The expression and activity of renal nitric oxide synthase and circulating nitric oxide in polycystic kidney disease rats

Nitric oxide (NO) influences tubular fluid and electrolyte transport, and hence possibly also fluid accumulation in renal cysts. The expression and activity of intrarenal constitutive NO synthase (cNOS) [neuronal NOS, nNOS and endothelial NOS, eNOS] and inducible NOS (iNOS) and plasma nitrite/nitrate (PNOx) concentration were assessed in homozygous Han:SPRD polycystic kidney disease (PKD) rats (cy/cy), heterozygous Han:SPRD PKD rats (cy/+), homozygous normal Han:SPRD littermates (+/+) and Sprague Dawley rats (sd). The results showed: 1) nNOS expression was decreased in proximal tubules and thick ascending limbs of the loop of Henle in cy/cy and cy/+ rats compared to +/+ and sd rats (p<0.05). nNOS was weakly expressed in the epithelium of small cysts and unexpressed in epithelium of large cysts. 2) iNOS expression was increased in proximal tubular epithelial cells in cy/+ rats compared to +/+ rats and sd rats (p<0.01). iNOS expression in cyst epithelium was decreased in cy/+ rats (p<0.05) and absent in cy/cy rats. 3) eNOS expression was similar in the endothelium of intrarenal arteries in all groups. 4) The activity of renal cNOS was decreased in cy/cy and cy/+ rats; the activity of iNOS was decreased only in cy/cy rats, with no significant difference among the other three groups. 5) PNOx concentration was higher in cy/cy rats than in the other three groups, and correlated positively with plasma creatinine and urea. In conclusion, NOS expression and activity decreased as cysts developed, suggesting that NO downregulation is involved in the pathogenesis of PKD.     

雌激素对去卵巢大鼠基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的影响

目的 观察雌激素替代对去卵巢大鼠基底前脑一氧化氮合酶(NOS)及巢蛋白(Nestin)阳性神经元的影响。方法 将28只健康成年雄性SD大鼠随机分为4个处理组:去势24 h雌激素替代组、去势2周雌激素替代组、去势植物油替代组及假手术组。用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)及水平支(hDB)的NOS和Nestin阳性神经元数的变化。结果 去势行植物油替代可使MS、vDB的NOS阳性神经元数明显下降(P<0.01);去势24 h或2周行雌激素替代均可使以上亚区的NOS阳性神经元数明显升高至正常水平(P<0.01)。去势行植物油替代或雌激素替代对hDB的:Nestin阳性神经元数的影响趋势与NOS阳性神经元的相似(P<0.01),但对MS及vDB的Nestin阳性神经元数影响不大(P>0.05)。结论 去卵巢行雌激素替代可选择性地使基底前脑不同亚区NOS、Nestin阳性神经元数升高,这可能与雌激素高调了NOS和Nestin的表达有关。     

葛根素对糖尿病大鼠白内障过程中晶状体诱导型一氧化氮合酶的影响

目的: 观察大鼠糖尿病性白内障(DC)晶状体诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达变化及葛根素对DC的治疗作用。方法: 经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制大鼠DC模型。实验分为STZ组(STZ,45 mg/kg bw,ip)、葛根素组(STZ+葛根素,140 mg/kg bw ip)和对照组(等量生理盐水,ip),分别于实验第20、40、60 d摘取大鼠晶状体,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blot)和生化方法检测晶状体iNOS mRNA和蛋白表达及一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性变化,观察晶状体损伤的宏观和微观病理变化。 结果:对照组大鼠晶状体透明,iNOS mRNA未见明显表达,蛋白呈微弱表达,NOS活性较低,NO含量较少。在DC形成过程中,晶状体出现混浊、晶状体上皮细胞(LEC)有明显病变,并随病程延长而加重;晶状体iNOS mRNA和蛋白表达明显上调,NOS活性增强、NO生成增加,并呈现时间依赖性。用药40-60 d时葛根素组前述晶状体病理变化轻于STZ组,iNOS mRNA和蛋白表达明显低于STZ组,NOS活性及NO 生成低于STZ组。结论: 在大鼠DC形成过程中晶状体iNOS 基因表达上调、NO含量增加;葛根素可减轻晶状体损伤,机制可能与抑制iNOS 基因表达、减少NO生成有关。     

阿司匹林对炎症条件下人血管内皮细胞一氧化氮的产生及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的:探讨炎症时阿司匹林(AS)对内皮细胞一氧化氮(NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达的抑制作用。方法:Griess法测上清液NO^-₂/NO^-₃水平、黄递酶法测NOS活性、常规生化法测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)浓度,染料排除法测细胞活力,RT-PCR技术分析iNOSmRNA水平。结果:白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、γ-干扰素(INF)联用脂多糖(LPS)诱导后上清液中NO^-₂/NO^-₃由(4.27±0.75)μmol/L增加到(9.35±1.25)μmol/L,对内皮细胞造成明显的损伤。但3mmol/LAS组NO生成及NOS活性明显降低,LDH释放率及MDA浓度下降,细胞存活率上升,与NO诱导组相比差异显著。并随AS剂量的增加对NO的抑制及对细胞的保护作用更加明显,但AS对生理水平的NO没有抑制作用。同时发现10mmol/L浓度以下AS对iNOSmRNA表达水平没有影响;但10-20mmol/L的AS则可在转录水平上抑制iNOSmRNA的表达。并观察到水杨酸钠及消炎痛不具有抑制NO产生的作用。结论:AS具有明显抑制IL-1β、TNF-α、γ-INF及LPS诱导NO生成的作用,从而保护血管内皮细胞避免炎症时高浓度NO的损伤。     

一氧化氮合酶(NOS)与子宫内膜关系的研究进展

女性子宫内膜在女性生殖生理功能方面担负着月经形成、胚胎着床、妊娠维持、激素分泌等重要作用。自从1995年Telfer首次发现人子宫内膜中NOS(N itric Oxide Synthase)mRNA和其蛋白的存在后,近年来越来越多的研究表明NO(N itric Oxide)在女性生殖过程中扮演着重要的角色。本文将就NOS在子宫内膜的活性表达,及其与子宫内膜关系的研究作一综述。     

一氧化氮合酶抑制剂对大鼠结肠炎损伤的影响

目的：了解一氧化氮合酶抑制剂L－精氨酸甲酯（L-NAME）对大鼠结肠炎损伤的影响。方法：将实验大鼠随机分为对照组、损伤组、NAME1、NAME2、NAME3（即N1、N2、N3）干预组。采用三硝基苯磺酸（TNB）30 mg+50%乙醇0.25 mL给大鼠灌肠复制结肠炎模型，并检测各组的溃疡指数（UI）、一氧化氮（NO）、MDA含量及GSH活性。结果：N1、N2、N3组的NO、UI、MDA值低于损伤组，GHS值高于损伤组，对照组的损伤不明显。相关分析表明，NO含量与MDA含量呈正相关，与GSH活性呈负相关。结论：在结肠炎症反应中，NO过量生成具有损伤作用，L－NAME通过抑制NOS活性，减少NO及自由基的生成，具一定的抗损伤作用。     

肝细胞癌一氧化氮合酶的表达及其临床意义

目的：研究肝细胞癌（HCC）组织中一氧化氮合酶（NOS）的表达及其临床意义。方法：通过免疫组化的方法检测51例HCC组织和46例癌旁肝组织（LTBC）中NOS1、NOS2、NOS3的表达,探讨3指标与HCC单发还是多发、肿瘤大小、有否合并肝硬化、肿瘤坏死、组织分化程度、门静脉癌栓形成、肝外转移和预后等的关系。结果：NOS1、NOS2、NOS3在46例LTBC的阳性率均明显高于51例HCC组织的阳性率（P<0.01）;NOS1两年内复发组的阳性率明显高于无复发组（P<0.01）;NOS2在无癌栓形成组的阳性率明显高于伴有癌栓形成组（P<0.05）;NOS3在复发组的阳性率明显高于无复发组（P<0.01）。结论：NOS的表达与HCC的组织分化程度、门静脉癌栓形成和预后等生物学行为有密切关系