人参皂苷对脂代谢的调控作用

人参总皂苷或人参皂苷(GS)单体可通过多种机制改善脂代谢,主要包括:通过下丘脑腹内侧核抑制摄食行为;通过下调胰脂肪酶(PL)活性,抑制肠道含脂食物吸收;抑或通过调控脂肪生成转录因子过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARs)、糖脂代谢调控分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及其靶基因表达等.     

人参皂苷Rg1通过miR-144/Nrf2/ARE通路对糖尿病大鼠肝损伤的影响

目的 探究人参皂苷(G)-Rg1通过微小RNA(miR)-144/核因子E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)通路对糖尿病(DM)大鼠肝损伤的影响。方法 将大鼠随机分成control组、模型(model)组、二甲双胍(MET)组(100 mg/kg MET)组、G-Rg1-L(10 mg/kg G-Rg1)组、G-Rg1-H(30 mg/kg G-Rg1)组、G-Rg1-H+mimics NC组、G-Rg1-H+miR-144 mimics组、G-Rg1-H+miR-144 mimics+Nrf2激活剂(Hesperin组(10 mg/kg Hesperin)各10只;除control组外,其余组通过高脂高糖饲料喂养及链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建DM模型,并灌胃相应剂量MET或G-Rg1,尾静脉注射相应剂量mimics NC、miR-144 mimics慢病毒液,腹腔注射相应剂量Hesperin, control组、model组灌胃、尾静脉及腹腔注射等剂量生理盐水,共为期8 w。血糖测试仪及全自动生化分析仪检测血糖、肝功能指标;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)...     

miR-34a通过调控Sirt1/FoxO1通路影响血管内皮细胞凋亡

目的 探讨microRNA-34a(miR-34a)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人主动脉内皮细胞(HAEC)凋亡的影响及作用机制.方法 ox-LDL处理HAEC,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-34a的表达水平.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪(FCM)和Caspase-3活...     

人参皂苷Rb1介导TLR3/TRIF信号通路对哮喘大鼠的抗炎作用机制

目的 探讨人参皂苷Rb1介导Toll样受体(TLR)3/β 干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)信号通路对哮喘大鼠模型抗炎作用的影响.方法 80只SD大鼠随机分成5组:对照组、模型组、地塞米松组(1 mg/kg)、人参皂苷Rb1低剂量组(100 mg/kg)、人参皂苷Rb1高剂量组(200 mg/kg),每组16只....     

Adiponectin通过FoxO1信号通路减轻阿霉素细胞毒性的作用机制研究

目的 阐明FoxO1在脂联素(Adiponectin,APN)减轻阿霉素(Doxorubicin,DOX)心肌细胞毒性中的作用及机制.方法 将分离的乳鼠心肌原代细胞(Neonatal rat cardiomyocytes,nrCMs)随机分为对照组(CON)、APN处理组(APN)、DOX损伤组(DOX)、APN保护组...     

人参皂苷Rg1对肝脏缺血再灌注损伤大鼠的影响及机制

目的探讨人参皂苷Rg1(G-Rg1)对肝脏缺血再灌注损伤(IRI)大鼠的影响及机制。方法将63只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、G-Rg1组(G组)各21只。术前2 d,G组给予G-Rg1 20mg/(kg·d),I/R组、S组给予等量生理盐水,均分2次经腹腔注射。I/R组、G组经手术构建IRI模型;S组术中分离血管后不夹闭,45 min后关腹。分别于术后1、6、24 h采集各组大鼠血清后将大鼠处死取其肝组织。自动分析仪检测大鼠肝功能指标(ALT、AST),HE染色法观察肝组织病理变化,TUNEL法检测肝组织细胞凋亡指数(AI),定量PCR法检测肝组织中内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP家族同原蛋白(CHOP)mRNA表达,Western blotting法检测肝组织GRP78、CHOP、PERK、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)蛋白表达,计算p-PERK/PERK。结果与S组比较,I/R组血清ALT、AST水平高(P均<0.01),肝组织损伤严重,AI高(P<0.05),GRP78 mRNA与蛋...     

人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞SW480增殖与凋亡的影响。方法体外培养的人结肠癌细胞SW480分别用无血清培养液稀释的终浓度为15、30、60、120和240μg/ml的人参皂苷Rh3作用24、48及72h,应用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖;采用终浓度为15μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h,应用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,采用终浓度为15、20μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h;应用丫啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法计算细胞凋亡率和坏死率。结果 15μg/ml人参皂苷Rh3作用48h即可明显抑制SW480细胞增殖,其作用随剂量增加和作用时间延长而增强,30μg/ml人参皂苷Rh3作用72h抑制率超过80%;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h部分细胞凋亡,胞浆呈棕色,作用72h凋亡细胞增多;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为25.5%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为31%,未见细胞坏死,15μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为55%、坏死率为7%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为67.5%、坏死率为7%。结论人参皂苷Rh3能抑制人结肠癌细胞SW480增殖,诱导其凋亡,作用呈剂量依赖性和时间依赖性。     

红景天苷通过调控PI3K/AKT/Nrf2通路对高糖诱导的心肌细胞的保护作用及机制研究

目的 探究红景天苷（SAL）对高糖诱导的心肌细胞的保护作用并进一步研究其可能的机制。方法 体外培养H9c2细胞,分为空白组、高糖组、高糖+SAL组、高糖+SAL+LY294002（特异性PI3K抑制剂）组。空白组细胞用含有5.5 mmoL/L葡萄糖的培养液常规培养;其余三组细胞用含有33.3mmoL/L葡萄糖的培养液培养;另外高糖+SAL组在更换为高糖培养液前2 h加入29.6 mmol/L SAL预处理,而高糖+SAL+LY294002组则在加入SAL前加入10μmol/L LY294002预处理2 h。CCK-8实验和TUNEL实验检测细胞增殖和凋亡情况。细胞内丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的含量用相应的酶联免疫试剂盒检测,活性氧簇（ROS）水平通过荧光法检测。蛋白免疫印迹法（western blot）检测细胞中蛋白激酶b(AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、核因子促红细胞生成素2相关因子2(Nrf2)蛋白表达和磷酸化水平。结果 与空白组相比,高糖组H9c2细胞的存活率降低,而细胞凋亡率、细胞内ROS合成量和MDA含量增加,...     

人参皂苷单体Rh2诱导小鼠前胃癌细胞系凋亡的分子机制

目的:观察人参皂苷Rh2(G-Rh2)诱导小鼠前胃癌MFC细胞的凋亡,探讨Ca2 在G-Rh2诱导细胞凋亡中的作用,揭示G-Rh2诱导MFC细胞凋亡的分子机制.方法:分别对无血清培养24h后的MFC正常细胞组、G-Rh2(3、10、30mg/L)给药组、Ca2 螯合剂BAPTA(20μmol) G-Rh2(10mg/L)给药组及BAPTA(20μmol)组,荧光显微镜(Hoechst33258)观察细胞形态学改变;流式细胞仪Annexin V-FITC双染法检测细胞早期凋亡率;琼脂糖凝胶电泳法观察细胞晚期凋亡;共聚焦显微镜分析G-Rh2给药后细胞内钙和细胞线粒体膜电位,Western blot分析caspase3的表达.结果:10mg/L的G-Rh2能显著抑制无血清培养的MFC细胞增殖和诱导MFC细胞凋亡,可剂量和时间依赖性的提高细胞内钙浓度,降低细胞线粒体膜电位,增加caspase3的表达,但这些作用均可被BAPTA(20μmol)抑制.结论:G-Rh2可激活细胞内Ca2 信号转导途径,从而最终通过线粒体凋亡途径诱导胃癌细胞凋亡.     

人参皂苷Rb3通过Neuregulin-1/ErbB信号通路对心肌梗死大鼠VE-cadherin,NRG-1,ErbB2,ErbB4表达的影响

目的观察人参皂苷Rb3通过Neuregulin-1/ErbB信号通路对心肌梗死大鼠VE-cadherin,NRG-1,Erb B2,Erb B4表达的影响。方法 60只大鼠随机分为Sham组、Model组、G-Rb3-L组(10 mg/kg)、G-Rb3-M组(20 mg/kg)、G-Rb3-H组(40 mg/kg)及阳性药物组(地尔硫卓20 mg/kg),每组各10只。造模后,G-Rb3-L组、G-Rb3-M组、G-Rb3-H组及阳性药物组给予相对的药物,Model组和Sham组大鼠给予等体积的生理盐水。HE、Masson染色分别观察心肌组织的病理变化与心肌纤维化程度;ELISA法检测血浆中的VE-cadherin的水平;Western blotting法检测心肌组织NRG-1、ErbB2和ErbB4蛋白的表达。结果与Sham组比较,Model组大鼠的心肌细胞炎症浸润及心肌纤维化程度严重,心肌梗死面积、VE-cadherin水平上升(P0.05),NRG-1,Erb B2和Erb B4蛋白表达减少(P0.05);与Model组比较,人参皂苷Rb3干预的大鼠的心肌细胞炎症浸润及心肌纤维化程度减轻,心肌梗死面积、VE-cadherin表达水平降低(P0.05),NRG-1,Erb B2和Erb B4蛋白表达增加(P0.05)。结论人参皂苷Rb3可通过调控Neuregulin-1/ErbB信号通路降低心肌梗死大鼠的心肌细胞的炎症及心肌纤维化程度,减少心肌梗死面积,减轻心肌损伤。     

人参皂苷Rb1通过抑制PI3K/AKT信号通路保护脂多糖诱导的心肌细胞炎症反应

目的探究人参皂苷Rb1在脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞炎症反应中的作用及分子机制。方法建立LPS诱导的H9C2心肌细胞炎症反应模型。在用1μg/ml的LPS诱导H9C2心肌细胞炎症反应前,使用100μM人参皂苷Rb1或1μM PI3K抑制剂Wortmannin预处理1 h,2 h后收集细胞样本。利用q PCR检测白介素-6(IL-6),白介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的m RNA表达水平;用ELISA试剂盒检测细胞上清IL-6,IL-1β,TNF-α的蛋白表达;用WB实验检测p-AKT和AKT的表达水平。结果人参皂苷Rb1显著抑制LPS诱导的IL-6,IL-1β,TNF-α的m RNA(P0.001)和蛋白(P0.001)表达水平;人参皂苷Rb1显著抑制LPS诱导的PI3K/AKT信号通路的激活(P0.001);PI3K抑制剂Wortmannin也能显著抑制LPS诱导的p-AKT表达水平以及IL-6,IL-1β,TNF-α的m RNA(P0.001)和蛋白(P0.001)表达水平。结论人参皂苷Rb1通过抑制PI3K/AKT信号通路阻止LPS诱导的心肌细胞炎症反应。     

人参皂苷Rb1对过敏性哮喘大鼠炎症反应、免疫功能及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 探讨人参皂苷Rb1对过敏性哮喘大鼠炎症反应、免疫功能、Janus激酶(JAK)2/信号转导和转录激活因子(STAT)3信号通路的影响。方法 卵清蛋白致敏建立过敏性哮喘大鼠模型,造模成功的SD大鼠随机分成模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)、人参皂苷Rb1低剂量组(25 mg/kg)、人参皂苷Rb1高剂量组(50 mg/kg),每组14只。取14只健康大鼠设为对照组,各组腹腔注射相应药物处理14 d。酶联免疫吸附试验检测大鼠血清白细胞介素(IL)-4、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、免疫球蛋白(Ig)E水平,苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化并进行肺损伤评分,分别采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和Western印迹法测定大鼠肺组织JAK2、STAT3 mRNA和蛋白表达水平。结果 对照组肺组织结构正常,未观察到病理学改变;模型组肺组织出现肺泡壁充血和炎性细胞浸润的明显病理变化;地塞米松组、人参皂苷Rb1高剂量组肺组织损伤的严重程度明显减轻,炎性细胞浸润明显被抑制;人参皂苷Rb1低剂量组肺组织仍可见炎症反应,但较模型组程度轻。与对照组比较,模型组血清IL-4...     

二陈汤对肥胖小鼠肝脏脂代谢及AMPK/ACC/SREBP1信号通路作用机制研究

目的:观察二陈汤对肥胖小鼠肝组织AMPK/ACC/SREBP1信号通路的作用,并探讨其改善肝脏脂质代谢及炎性病变的作用机制。方法:将小鼠随机分为空白(Control)组、模型(Model)组、奥利司他(Orlistat)组和二陈汤(ECD)组。除Control组外,其他各组小鼠通过高脂饲料建立肥胖模型。Orlistat组和ECD组小鼠分别给予奥利司他胶囊和二陈汤,Control组和Model组小鼠给予等体积的生理盐水。计算小鼠体重、肝脏湿重和肝体比值;检测小鼠血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;HE染色和油红O染色分别用于观察肝组织病理形态及肝组织脂滴的变化;ELISA检测肝组织中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平;Western bolt检测肝组织中AMPK、ACC、SREBP1及其磷酸化的蛋白表达水平。结果:与Model组比较,Orlistat组和ECD组小鼠体重、肝脏湿重及肝体比值都有所降低(P<0.01,P<0.05),且肝组织病理结构和脂滴沉积得到明显改善。与Control组比较,Model组小鼠血清ALT、AST、TC、TG、...     

特发性肺纤维化中Smurf2对TGF-β1/Smad通路调控机制

特发性肺纤维化是肺间质纤维化的主要原因,为最常见的间质性肺疾病.其主要病理特点为大量成纤维细胞、肌成纤维细胞集聚、增殖.近年来研究表明转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在肺纤维化的形成与发展中起关键性作用.Smad蛋白是参与TGF-β1信号细胞内传导的一类信号蛋白,是TGF-β1信号传导重要通路.近年来发现Smad泛素调节因子2(Smad ubiquitination regulatory factor 2,Smurf2)可选择性作用于Smad蛋白,进而调控TGF-β信号传导.本文就特发性肺纤维化中Smurf2对TGF-β1/Smad通路的调控机制作一综述.     

20(s)-原人参二醇、人参皂苷Rh_2及人参皂苷Rg_3抗肿瘤作用的对比

目的对比20(s)-原人参二醇(Ppd)与人参皂苷Rh2(Rh2)及人参皂苷Rg3(Rg3)的抗肿瘤作用。方法建立小鼠肝癌H22、Lewis肺癌及黑色素瘤B16三种移植瘤动物模型,将小鼠随机分成11组,对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠,阳性药组给予环磷酰胺(CTX)30 mg/kg,Ppd、Rh2及Rg3三个剂量组均给予相应受试药25、50、100 mg/kg。阳性药组隔日腹腔注射给药1次,其余各组均每日灌胃给药1次,给药容积为20 ml/kg,连续10 d。每天记录小鼠体重,末次药后称取小鼠体重及肿瘤重量并计算肿瘤抑瘤率。结果 Ppd、Rh2及Rg3在25、50、100 mg/kg剂量下,对肝癌H22、Lewis肺癌及黑色素瘤B16均有一定的抑瘤作用,仅Ppd在50、100 mg/kg剂量下对肝癌H22、Lewis肺癌及黑色素瘤B16抑制效果明显,其抑瘤率超过40%,Rh2与Rg3的抑瘤率无明显差别。结论 Ppd、Rh2及Rg3对小鼠三种移植瘤均具有抗肿瘤活性,以Ppd的抗肿瘤作用最明显,Rh2与Rg3之间无明显差别。     

人参皂苷Rg1对大鼠缺血性/再灌注心律失常的作用

目的:探讨人参皂苷Rg1对大鼠缺血性/再灌注心律失常的作用及其初步机制。方法:构建大鼠缺血性/再灌注心律失常模型,Wistar大鼠分为5组:缺血/再灌注组(I/R组)与假手术组(SO组)不给予药物,人参皂苷Rg1低剂量组(Rg1-L组)术前腹腔注射20mg·kg~(-1)·d~(-1)人参皂苷Rg1,人参皂苷Rg1高剂量组(Rg1-H组)术前腹腔注射40mg·kg~(-1)·d~(-1)人参皂苷Rg1,阳性对照组(MS组)腹腔注射20mg·kg~(-1)·d~(-1)琥珀酸美托洛尔,共两周。观察大鼠心电图变化,运用心律失常评分分析心律失常的严重程度,采用TTC染色法测定缺血/再灌注后心肌梗死面积;qRT-PCR法检测心肌细胞中Bax与Bcl-2的mRNA表达变化;Western blot检测心肌细胞中凋亡相关蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-caspase-9与Cleaved-caspase-3的蛋白表达水平。结果:SO组、Rg1-L组、Rg1-H组与MS组可见偶发室性期前收缩(PVC)与室性心动过速(VT);I/R组可见频发PVC、VT与心室颤动(VF)。SO组、I/R组、Rg1-L组、Rg1-H组及MS组心律失常评分分别为0.37、4.2、1.9、0.46及0.42。TTC染色结果显示,I/R组梗死区与缺血区面积比值显著大于SO组,而Rg1-L组、Rg1-H组、MS组显著小于I/R组(均P0.05)。与I/R组比较,Rg1-L组和Rg1-H组心肌细胞Bcl-2mRNA表达水平升高,Bax mRNA与Cleaved-PARP、Cleaved-caspase-9与Cleaved-caspase-3蛋白表达水平降低,且在Rg1-H组中表现更加明显。结论:人参皂苷Rg1可明显减少大鼠缺血性/再灌注心律失常的发生率,并减少心肌梗死面积,其机制可能为通过调控内源性线粒体凋亡途径而发挥作用。     

蓝莓联合益生菌通过IL-22调控的JAK1/STAT3/BAX通路改善非酒精性脂肪性肝病的作用机制

目的研究蓝莓联合益生菌通过对IL-22调控的JAK1/STAT3/BAX信号通路的影响,进一步探明其改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法清洁级SD大鼠40只分为正常对照组(CG)、IL-22siRNA阴性对照组(IL-22SI-NC)、IL-22siRNA组(IL-22SI)、IL-22siRNA阴性对照+蓝莓益生菌组(IL-22SI-NC+BPG)、IL-22siRNA+蓝莓益生菌组(IL-22SI+BPG)。正常对照组予100%普通饮食,其余大鼠均采用复合高脂饲料制备脂肪肝模型,同时予IL-22siRNA阴性对照慢病毒及IL-22siRNA慢病毒腹部肝区注射(盲穿),隔日1次,共12周,取肝脏确认造模及siRNA封闭效果后予蓝莓益生菌原液灌胃,同时按上述分组后给予正常饮食,予蓝莓益生菌原液灌胃,共观察8周。多组间比较采用单因素方差分析,进一步比较方差齐时采用SNK法(q检验),方差不齐时用Tamhane法(q'检验)。结果 IL-22SI组与IL-22SI-NC组比较,ALT、AST、TC、TG、LDL均显著升高(P值均0.01),HDL显著降低(P0.01),IL-22、JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达均明显减弱(P值均0.01)、BAX的表达明显升高(P0.01);与IL-22SI-NC相比,IL-22SI-NC+BPG的ALT、AST、TC、TG、LDL均明显降低(P值均0.01),HDL明显升高(P0.01),IL-22、JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达均显著升高(P值均0.01),BAX的表达显著下降(P0.01);IL-22SI+BPG较IL-22SI组ALT、AST、TC、TG、LDL均略有降低(P值均0.05),HDL略有升高(P0.05),IL-22、JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达均有所增加(P值均0.05),BAX的表达略有减少(P0.05)。结论蓝莓联合益生菌能一定程度拮抗IL-22siRNA所加剧的肝细胞脂肪变性,并可以增强IL-22的表达,提示IL-22可能为蓝莓联合益生菌影响NAFLD的关键作用因子。推测蓝莓联合益生菌能增强IL-22表达,激活JAK1/STAT3信号通路,抑制其下游凋亡因子BAX的表达,减少肝细胞凋亡,增强胆固醇代谢,减少脂质沉积,达到改善NAFLD的目的,是NAFLD的一个辅助治疗方案。     

非小细胞肺癌中PI3K/Akt信号通路通过Cdh1调控Skp2表达的机制研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中Cdc20同源蛋白1（Cdh1）参与磷脂酰肌醇三羟基激酶（PI3K）/Akt信号通路对S期激酶相关蛋白2（Skp2）表达调控的机制。方法体外培养NSCLC细胞系A549、LK2和H460,LY294002特异性阻断PI3K/Akt信号通路后,Western blot检测Skp2、Cdh1及p-Akt蛋白表达的变化,免疫荧光（IF）检测Cdh1在NSCLC中的定位变化。结果 LY294002处理后,与对照组相比3种细胞中Skp2蛋白表达和Akt磷酸化水平均降低（P〈0.01）,Cdh1在3种细胞的核内表达均增多。结论 NSCLC中PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002使Skp2蛋白表达下调与Cdh1由细胞质向细胞核转位有关。